阳离子对黄瓜苗期猝倒病菌果胶酶活性的影响

 本文首次从寄主-寄生物相互关系角度系统研究了阳离子对黄瓜苗期猝倒病菌Pythium aphanidermatum产生的果胶酶活性的影响,胚轴胞壁Ca²⁺含量很大,而且随苗龄增加,其含量也有规律的增加。细胞壁Ca³⁺含量变化与胚轴抗病菌果胶酶能力密切相关。不同阳离子对病菌在寄主体内、外产生的PG活性有明显影响,并随反应时间而变化。病菌在寄主体内和体外合成的PG对阳离子敏感程度不同。低浓度Ca²⁺有激活PG的作用,高浓度Ca²⁺则抑制PG活性。Na⁺超过一定浓度时有抑制PG活性的作用。PGTE比PMTE对Ca³⁺抑制作用敏感。     

H2O2、NO和Ca2+参与疫病菌激发子PB90诱导烟草气孔的关闭

 本文研究了过氧化氢(H₂O₂)、一氧化氮(NO)和Ca²⁺在棉疫病菌激发子PB90诱导烟草气孔运动中的作用。1 nmol/L激发子PB90可诱导野生型烟草Bel-W3气孔关闭,且在相同条件下该激发子诱导反义抑制抗坏血酸过氧化物酶anti-APX烟草气孔关闭的孔径比野生型的更小;进一步药理学证明,抗氧化剂DTT和NADPH氧化酶抑制剂DPI(diphenylene iodonium)、一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NAME、Ca²⁺螯合剂EGTA和Ca²⁺信号途径中CaMPK Ⅱ的竞争抑制剂KN93与磷脂酶C抑制剂U73122都能抵消PB90诱导气孔关闭的效应。推测该激发子PB90通过NADPH氧化酶途径形成H₂O₂、NOS途径形成NO和Ca²⁺信号途径进而诱导气孔关闭。表明H₂O₂、NO、Ca²⁺在激发子PB90诱导气孔关闭信号传递中作为第二信使起着重要的作用。     

塔里木河流域水化学组成分布特征

于2010年6月对塔里木河干流及主要支流地表水进行水化学采样,共设25个点采集50个样品。分析表明：塔里木河干流水体中阳离子Na⁺+K⁺＞Ca²⁺＞Mg²⁺,与南北侧支流Na⁺+K⁺＞Mg²⁺＞Ca²⁺存在显著差异,但均以Na⁺+K⁺为主,阳离子浓度分别占干流、南北侧支流的68.6%、62.6%和62.5%。与1965年对应采样点同月份水化学成分相比,塔里木河流域主要可溶性离子浓度增幅较大,整体平均增加8.0倍,尤其是Cl^-达21.7倍,这可能是近年来塔里木河流域气温上升降水增加等自然因素,间接促进降水过程中水化学侵蚀地表可溶性物质所致。同时,流域内工农业快速发展,生活污水、工农业废水大量排放到塔里木河,这可能是影响塔里木河水质变化的重要因素之一。     

西藏易贡湖流域地表水水化学特征及其控制因素

为探究易贡湖流域地表水水化学特征及其控制因素,以藏东南易贡湖流域为研究对象,采集了26组地表水样,绘制了水样点主要离子线性变化趋势图、Gibbs图及Piper三线图等,运用相关分析、线性趋势分析、数理统计和离子比等方法。分析了研究区地表水主要离子特征及其控制因素,揭示了研究区地表水水中的主要物质来源。结果显示：易贡湖流域地表水阳离子主要为Ca²⁺、Mg²⁺,K⁺和Na⁺含量较低,4种阳离子的含量关系为：Ca²⁺>Mg²⁺>Na⁺>K⁺,阴离子主要为HCO₃^-、SO₄^2-和Cl^-,NO₃^-和F^-含量较低,阴离子含量关系为：HCO₃^->SO₄^2-...     

乌鲁木齐大气总悬浮颗粒物（TSP）离子化学组分及影响因素

利用2009年乌鲁木齐4个大气总悬浮颗粒物（TSP）观测站点资料,采用离子色谱仪分析了TSP中水溶性离子成分。结果表明：① 2009年乌鲁木齐市区3站总离子浓度为151.28 μg/m³,白杨沟为40.83 μg/m³。4站NO₃^-/SO4^2-比值较小,表明乌鲁木齐大气污染主要来自于固定污染源。② 2009年乌鲁木齐4站TSP中SO₄^2-、Ca²⁺、NO₃^-和NH₄⁺的浓度高于其他各离子,各站离子浓度有明显的季节变化特征,采暖期各离子浓度明显增加,SO₄^2-、NO₃^-增幅最大。③ 对各主要离子进行相关性分析,得到NH₄⁺与SO₄^2-的相关系数为0.828,与NO₃^-的相关系数为0.659,说明铵盐化合物主要以硫酸铵和硝酸铵的形式存在;SO₄^2-与NO₃^-的相关性很大,相关系数为0.973,表明二者主要来自二氧化硫和氮氧化物,排放方式与在大气中的传输途径较一致;地壳元素Ca²⁺和Mg²⁺有很好的相关性,相关系数是0.914,表明二者来源相似,可能主要来自风沙土壤尘、道路尘和建筑尘。     

软腐欧氏杆菌在离体条件下产生胞外酶的比较研究

 3种软腐细菌在21,26和31℃下及6种培养液中的生长量和产生胞外酶的能力各不相同。Ecc在26℃生长最好,Eca为21℃,Ech在三种温度下的生长量差别不大。与其它2种细菌比较,Ech的生长及产生果胶裂解酶(PL)的能力总是最强的。随着温度的升高,各种细菌的PL活性都下降。果胶水解酶(PG)变化不大,但Ech在高温下产PG有减少趋势,且总没有另二种细菌的活性强。Eca以26℃时产PG最适宜。Ech在较高温度下蛋白酶活性大大下降,而Ecc,变化不大,Eca的蛋白酶活性则随温度升高而加强。培养液的无细胞滤液对马铃薯块茎组织的浸离力与其中PL的活性有密切关系,但没有或只有很低果胶酶活性,而蛋白酶活性正常的这种滤液也能使小薯碟浸离。Eca在31℃培养后果胶酶活性很低,蛋白酶活性很高,其无细胞滤液对马铃薯组织也表现较强浸离力。     

淡紫拟青霉几丁质酶的纯化和活性影响因子

 淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)是一种重要的植物线虫卵寄生真菌。采用DEAE-22离子交换层析和SephcrylS-300凝胶过滤层析分离纯化到一种淡紫拟青霉胞外几丁质酶,经7.5%聚丙烯酰胺凝胶电脉检测为单一条酶带,Rf值等于0.43。淡紫拟青霉几丁质酶的最适温度为45℃。热稳定性测定表明它在40℃下放置10min可保持原有活力,60℃下10min,完全失活。该酶的最适pH值为5。其pH值稳定性与温度和反应时间有关。20℃、20min,在pH3~9范围内稳定;37℃、1h,则只在pH5~7范围内较稳定。金属离子如Mg²⁺、Ca²⁺、Zn²⁺、Li⁺和Fe²⁺对酶有一定的激活作用,其中Mg²⁺的激活作用最强。相反,Cu²⁺对酶有强烈抑制作用。     

拮抗链霉菌R15β-葡萄糖苷酶的纯化及特性研究

 从山东泰安郊区大白菜植株根际土壤中分离筛选获得一株拮抗链霉菌(Streptomyces spp. )R₁₅菌株。采用固体发酵、粗酶液 (NH₄)₂SO₄分级沉淀、DEAE-52阴离子交换柱层析和Sephadex G75凝胶柱层析等步骤从链霉菌(Streptomyce spp.)R₁₅中分离纯化获得β-葡萄糖苷酶。结果表明, 纯化倍数16.28, 回收率为14.59％, SDS-PAGE电泳测得相对分子量为63.89 kDa。经TLC分析酶解产物, β-葡萄糖苷酶与水杨苷反应生成D-葡萄糖和水杨醇。以水杨苷为底物时, 该酶的Km值为10.644 mmol/L, Vmax为0.525 μmol·L^-1·min^-1。该酶的最适温度为65℃, 70℃以下相对稳定;最适pH为5, pH 3~7之间相对酶活在75％以上。Cu²⁺、Hg²⁺和Fe²⁺对酶有抑制作用, 其中Hg²⁺和Cu²⁺的抑制作用最强, 酶活力完全丧失;而Ca²⁺, Mn²⁺对酶均有激活作用, 相对酶活分别高达137.18%和119.52%。     

生防芽孢杆菌T2胞外蛋白酶的纯化及其抗真菌作用

 从小麦根际土壤中分离到一株高产蛋白酶并对棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporum f sp.vasinfectum)具有拮抗作用的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)T2。采用硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow、SP Sepharose Fast Flow离子交换层析、Sephadex G-75凝胶过滤层析,从T2发酵液中分离纯化出一种分子量约为29.0kD的蛋白酶。该酶作用的最适温度为65℃,最适pH为8.0,在低于50℃、pH5.0-7.5范围内较稳定。Na⁺、K⁺Pb²⁺、EDTA对酶有激活作用,Ca²⁺、Ba²⁺、Al³⁺、Zn²⁺、Mn²⁺、Hg²⁺、SDS对酶有部分抑制作用,而PMSF可完全抑制酶活,推测该酶是一种丝氨酸蛋白酶。抗菌活性显示,该酶对棉花枯萎病菌的孢子萌发、菌丝生长有明显抑制作用。     

沙漠腹地达理雅博依绿洲浅层地下水水化学特征分析

为了评价塔克拉玛干沙漠腹地达理雅博依绿洲地下水水化学特征与演化规律及对当地生态环境的影响。在研究区的生态井位观测点采集了19组地下水样品进行检测。综合运用数理统计、相关性分析、Piper三线图、Gibbs模型、Schoeller图和离子比等方法,分析地下水水化学特征和克里雅河尾闾绿洲的水化学演化规律。研究表明:研究区地下水阳离子以Na⁺、Mg⁺离子为主,阴离子以Cl^-、SO₄^2-,为主,Mg⁺、Cl^-、SO₄^2-表现为强变异性,K⁺、Ca⁺、Na⁺、HCO-3表现为中等变异;TDS介于1000mg/L-18620mg/L范围内,平均值为4366.408mg/L,矿化度较高;水化学类型以Cl^--Na⁺为主;地下水样品主要分布于Gibbs图的右上部分,表明研究区地下水主要受蒸发浓缩作用控制,岩石风化和大气降水影响较小;主要离子比表明碳酸盐、蒸发岩和硅酸盐是离子的主要来源,且处于沙漠腹地的独特地理因素,地下水中的离子交换作用较弱。     

软腐欧氏杆菌的蛋白酶与致病作用的关系

 胡罗卜软腐欧氏杆菌(Erwinia carotovora var.carotovora Dyc)在合成培养基MS中产生两种蛋白酶,但在无细胞滤液中测不到果胶裂解酶和果胶水解酶的活性。用等电聚焦电泳测得这两种蛋白酶都是碱性蛋白酶,等电点分别为8.3和8.9。变性温度为49-50℃,对酸或碱具有较高的稳定性。纯化的蛋白酶单独作用马铃薯块、能使其变软,切片观察表明细胞壁被明显降解。通过滤膜结合法,将供体菌1830/pJB4J1::Tn5的转座子转入到野生型StEcc-12中,从2000个接合子中获得了11个缺少产蛋白酶能力的突变体。这些突变体的分泌性蛋白质等电聚焦图谱与野生型菌株明显不同,其中一个变突体蛋白酶带完全缺失,另外一个则出现8条新的蛋白带,其他5个属部分缺失。这些突变体对马铃薯块组织离析、腐烂的能力都有不同程度的减弱。研究结果认为在由胡罗卜软腐欧氏杆菌引起的软腐病程中蛋白酶和果胶酶是协同作用的,果胶酶降解植物细胞间和胞壁中的果胶质,而蛋白酶则降解植物细胞壁和膜中的蛋白质。     

Cell wall-degrading enzymes of Didymella bryoniae in relation to fungal growth and virulence in cantaloupe fruit

Didymella bryoniae is an important pathogen of cucurbits worldwide. Virulence factors of D. bryoniae were investigated in regard to fungal growth and the production of the cell wall-degrading enzymes, polygalacturonase (PG), pectate lyase (PL), pectin lyase (PNL), β-galactosidase (β-Gal) and cellulase (Cx). Virulence levels of five D. bryoniae isolates were determined by the severity of inoculated cantaloupe fruit decay. The highly virulent isolates had more mycelial growth than the moderately virulent isolates in different media. PG activities produced by the highly virulent isolates in shake cultures and in decayed fruit were greater than those of the moderately virulent isolates. PNL, but not PL, in decayed fruit was higher with the highly virulent isolates compared to the moderately virulent ones. The highly virulent isolates showed higher Cx activity than the moderately virulent ones in decayed fruit and in fruit tissue shake culture. β-Gal activities of the highly virulent isolates in pectin shake culture and in decayed fruit were greater than those of the two moderately virulent isolates although fruit also produced β-Gal. Protein analysis showed two fungal β-Gal isozymes in decayed fruit compared to those of healthy fruit. Correlation analysis indicated that the activities of PG, PNL, β-Gal and Cx in cultures and in decayed fruit positively correlated with fungal growth and fruit decay severity. The results of this study suggest that PG, PNL, β-Gal, and Cx appear to be virulence factors of D. bryoniae in cantaloupe decay with PG and β-Gal as the most predominant fruit decay enzymes.     

Bacterial induction of the accumulation of phaseollin,pisatin and rishitin and their antibacterial activity

Bean hypocotyls, pea pods and tomato fruits were tested for phaseollin, pisatin and rishitin production when challenged with the phytopathogenic bacteriaErwinia carotovora, Pseudomonas phaseolicola, P. pisi andP. solanacearum, and their isolated extracellular polysaccharides. All bacteria induced phytoalexin accumulation, whereas only phaseollin and pisatin, but not rishitin, were elicited by EPS. The inhibitory effect of these three phytoalexins on bacterial growth was studied in liquid medium; whereas phaseollin and pisatin strongly inhibited growth, only a slight inhibitory effect resulted from the presence of rishitin in the medium.Samenvatting Bonehypocotylen, erwtepeulen en tomatevruchten werden onderzocht op hun vermogen tot vorming van respectievelijk faseolline, pisatine en rishitine, na inoculatie met de fytopathogene bacteriënErwinia carotovora, Pseudomonas phaseolicola, P. pisi enP. solanacearum en na behandeling met oplossingen van hun extracellulaire polysacchariden (EPS). Alle bacteriesoorten induceerden fytoalexinevorming, terwijl hun EPS wel faseolline- en pisatine-, maar geen rishitinevorming induceerden. Faseolline en pisatine remden de groei van de bacteriën in vloeibaar medium sterk; rishitine daarentegen had slechts een geringe groeiremming tengevolge.     

中生菌素的抗生作用

 本文研究了中生菌素对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、丝状真菌的抗生作用。结果表明,中生菌素是一种抗菌谱比较广的农用抗生素。其对菌体细胞膜无明显的影响。100 ppm时引起部分菌体原生质凝聚。同位素标记前体物掺入实验表明,中生菌素15.6 ppm对白菜软腐病菌DNA、RNA的合成影响很小,但强烈抑制菌体蛋白质的合成。用化学测定法分析了中生菌素对枯草杆菌细胞内大分子物质含量的影响,得到了和前体物掺入法相似的结果。说明了中生菌素的作用机制是抑制菌体蛋白质的合成。     

群体感应调控因子ComA对枯草芽胞杆菌NCD-2抑菌物质产生和生物膜形成的影响

为明确群体感应系统在枯草芽胞杆菌NCD-2菌株抑菌活性和生物膜形成中的作用,通过同源重组技术对群体感应系统中的comA基因进行定位缺失突变,分别比较了NCD-2菌株和comA基因突变子在胞外酶合成、抑菌活性、脂肽抗生素(丰产素)产生以及生物膜形成上的差异,并进一步利用实时荧光定量RT-PCR技术比较了二者生物膜基质编码基因epsA和tasA的表达情况。结果表明,通过同源重组技术获得了comA基因突变子MA-4,同菌株NCD-2相比,其在胞外蛋白酶和纤维素酶的合成能力、对番茄灰霉菌Botrytis cinerea的抑菌活性、丰产素的合成量和生物膜的形成能力上均明显下降;生物膜基质编码基因tasA的表达量下降了70%,而epsA的表达量变化不明显。表明ComA是NCD-2菌株脂肽抗生素和生物膜形成中的重要调控因子。     

噻枯唑对水稻白叶枯病菌作用机制研究初报

 透射电镜观察,噻枯唑在离体条件下能使水稻白叶枯病菌菌体内形成许多颗粒状物质,并出现大的空泡结构。噻枯唑在浓度较低时能刺激菌体的呼吸作用,对菌体胞外多糖的产生有抑制作用,但对菌体胞外水解酶的活性没有影响。噻枯唑能和金属Cu⁺⁺形成螯合物,但这种螯合作用没有改变噻枯唑的抑菌活性。     

Analysis of protease activity in <Emphasis Type="Italic">Aspergillus flavus</Emphasis> and <Emphasis Type="Italic">A. parasiticus</Emphasis> on peanut seed infection and aflatoxin contamination

Aspergillus flavus and A. parasiticus are aflatoxin-producing fungi that can infect peanut seeds in field crops. An association between A. parasiticus proteolytic enzyme activities and peanut fungal infection was examined. For this study, a model of inductive and non-inductive culture media to produce A. parasiticus extracellular protease before infection was used. These A. parasiticus cultures were used to infect peanut seeds of cultivars resistant and susceptible to aflatoxin contamination. Peanut seeds of both cultivars exposed to fungi grown on casein medium (inductive medium) showed higher internal and external infection and a higher fungal protease content than those observed on potato dextrose agar (PDA) and sucrose medium (non-inductive media). A further study showed higher fungal colonisation and aflatoxin contamination in seeds of the resistant cultivar pre-incubated with Aspergillus extracellular proteases than in those incubated without proteases. Moreover, protease activities affected the viability of non-infected resistant cultivar seeds, inhibiting germination and radicle elongation and enhancing seed tissue injury. The results strongly suggest that protease production by A. parasiticus is involved in peanut seed infection and aflatoxin contamination resulting in seed tissue damage, affecting seed viability and facilitating the access of fungi through the testa. The analysis of fungal extracellular proteases formed on peanut seed during infection showed that A. flavus and A. parasiticus produced metallo and serine proteases; however, there were differences in the molecular masses of the enzymes between both species. The greatest activity in both species was by serine protease, that could be classified as subtilase.     

甘薯抗瘟病品种的研究

甘薯品种对甘薯瘟病的抗性研究,自1977～1981年作者先后从国内外引进500多个品种分别在几个重病区进行试验,从鉴定材料的分析表明,供试甘薯品种没有一个对甘薯瘟病是免疫的,但不同品种之间的抗性有明显差异,其中高抗(发病率0.1～10％,病指1～5)的品种有17个,中抗(发病率11～39％,病指6～20)的品种有88个。近年来,作者在病区多点调查和试验中还发现不同品种在同一病田连续栽植2～3年后,其抗性的衰退有差异。因此,采用异地换种和连续不断地选用高抗品种为抗源,培育新的抗瘟品种,对预防或控制甘薯瘟病具有重要意义。     

细菌凝集素与菌体脂多糖在大白菜与软腐欧氏杆菌接触识别中的作用

 用3种试验方法测定了大白菜细菌凝集素(Agin-SD60)和软腐欧氏杆菌脂多精(LPS),在双方接触识别中的作用。在吸附抑制试验中,来自大白菜和马铃曾的Agin-SD60显示约98%的吸附抑制效应,另3种植物的Agin-SD60及大白菜外源凝集素(lectin)和细咆壁蛋白质(CWP)无明显作用;同时用不同种类的7个菌侏的LPS作测定,只有病菌的LPS吸附抑制作用明显(93.37%),其胞外多糖(EPS)也无作用。在菌体凝集试验中,也只有大白菜和马铃薯的Agin-SD60表现50%~100%的凝集活性。在琼脂双扩散试验中,寄主Agin-SD60可与病菌菌体及其LPS发生免疫沉淀。这些结果说明,Agin-SD60和菌体LPS在大白菜与软幅欧氏杆菌接触识别中分别作为植物识别子(cognor)和细菌识别子(cognon)起作用。