数字PCR在转基因植物检测中的应用

随着转基因植物种植规模不断扩大，对其中转基因成分检测也提出了新的要求。近年来，数字PCR作为一种新兴的分子生物学技术在其检测方面得到了广泛应用。本文主要介绍了数字PCR的原理及数字PCR在转基因检测中的应用优势，并对转基因植物检测中的转基因成分定量检测、标准物质制备与定值及外源基因拷贝数鉴定等应用进行了总结。     

植物检疫检测技术应用现状及发展趋势

植物检疫是一种生物安全措施,通过立法手段防止植物及其产品在流通过程中传播有害生物。检测鉴定是植物检疫措施实施的核心。该文概述植物检疫的作用及其面临的挑战、植物检疫检测技术的应用现状及发展趋势,并对多组学时代下植物检疫检测技术进行展望。     

进出境转基因产品管理和检验技术的进展

转基因产品的出现 ,是一件划时代的事件 ,也预示着一个新产业的出现。加强对转基因产品研制、生产和进出口的检验、监督和管理是全世界的共识。目前我国转基因产品管理的法规已趋完善 ,转基因产品检测技术的开发已取得可喜的成果 ,在检验检疫系统已基本上形成了转基因检测体系 ,但随着国内外生物技术发展 ,转基因检测检验技术和管理还需进一步深化。1　转基因产品管理的法规已趋完善为了加强对转基因生物的管理 ,国务院公布了《农业转基因生物安全管理条例》 ,自公布之日起施行。这是我国政府颁布的第 1个关于转基因生物安全管理的法规 (在…     

微流控芯片检测技术及其在植物检疫领域的应用前景展望

微流控芯片（Microfluidic chip）技术是一种可精确操控微小通道中纳升至微升级尺度液滴进入反应区,开展高通量检测的现代生物技术。本文简要介绍了微流控芯片材料和加工技术的发展及优势,重点阐述了该技术与重组酶聚合酶扩增（RPA）、环介导等温扩增（LAMP）、实时荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）等技术的融合,及其在微生物及转基因高通量检测中的原理及应用案例,探讨了该技术在植物检疫领域针对危险性有害生物开展检测鉴定的应用前景。综合分析认为,微流控芯片技术具有试剂消耗少、检测速度快、检测通量高、操作简便等优势,针对某类危险性有害生物以及某种植物或植物产品上的所有危险性有害生物开展高通量检测,均有十分广阔的发展空间和应用前景。     

水果转基因及检测技术进展

本文综述了近几年来转基因技术在水果作物上的应用，包括使水果延缓成熟的转基因工程，抗病毒转基因工程，抗真菌和细菌病害转基因工程及抗虫转基因工程等。同时也阐述了近几年发展起来的转基因产品检测方法。     

多重PCR-DHPLC法检测转基因棉花品系

根据3种转基因棉花品系的边界序列设计品系检测引物,建立了一种特异性检测转基因棉花品系MON531、MON1445和MON15985的多重PCR-DHPLC方法。以20种不同的转基因及非转基因作物DNA验证该方法的特异性,结果只有MON531、MON15985和MON1445有特异的品系扩增片段峰,而其他转基因和非转基因作物无品系扩增片段峰,表明该方法特异性强。灵敏度实验结果表明3种转基因棉花的检测下限均为1 ng,灵敏度高。建立的方法可用于转基因棉花MON531、MON1445和MON15985品系及含有其成分产品的筛查或定性检测。     

转基因检测标准物质研制关键环节质量控制研究

在转基因产品检测方法开发、身份鉴定和产品成分定性、定量检测过程中,标准物质是不可缺少的物质基础。本研究对标标准物质申报要求,着重对比了基体标准物质、基因组DNA标准物质、质粒标准物质三种类型转基因检测标准物质的研制过程,提出关键环节的质量控制要求,为促进转基因检测标准物质研制过程标准化、提升研制报告编制质量、提高申报通过率提供技术支撑。     

植物害虫检疫中的近红外光谱检测技术

植物产品内危害的检疫性害虫其隐蔽性强,检测困难,费时费力,且易随植物产品传播为害。本文主要综述了近红外光谱分析技术的原理及其在隐蔽性害虫检测中的应用研究,该技术能够有效检测粮粒中的害虫及其龄期;介绍了近红外光谱分析技术在隐蔽性害虫检测中的优缺点,阐明了它的应用前景。     

饲科及饲料添加剂转基因成分检测及对策分析

饲料及饲料添加剂转基因检测是转基因检测难点之一.该文就深圳出入境检验检疫局对饲料及饲料添加剂的检测情况进行了总结和分析,并对该类样品转基因检测存在的问题及其相应的对策进行了探讨,对今后饲料及饲料添加剂的转基因检测工作有参考和借鉴作用.     

饲料及饲料添加剂转基因成分检测及对策分析

饲料及饲料添加剂转基因检测是转基因检测难点之一。该文就深圳出入境检验检疫局对饲料及饲料添加剂的检测情况进行了总结和分析，并对该类样品转基因检测存在的问题及其相应的对策进行了探讨，对今后饲料及饲料添加剂的转基因检测工作有参考和借鉴作用。     

杜松烯合成酶作为转基因棉花PCR检测的内参照基因

根据棉属植物中棉酚合成的关键酶之一杜松烯合成酶[（＋）-d-cadinene syhnthase]基因序列，设计合成了该酶的实时荧光PCR的引物和TaqMan探针，经研究发现，此套引物探针能特异性检测海岛棉和陆地棉，有较高的检测灵敏度。同马铃薯、大椒、茄子、烟草、番茄、玉米、大豆、小麦、水稻和其它转基因作物无非特异性反应，可以作为转基因棉花检测的内参照。     

转基因植物重组DNA和表达蛋白的环境分子行为

转基因植物的安全性已经在全球范围内引起了普遍关注。本文从分子水平上就转基因植物的重组DNA在环境中的降解动态、转基因植物重组DNA在生物体内的传递、转基因植物杀虫蛋白在环境中的降解及在食物链间的传递等有关研究进展作一简要介绍。     

非洲菊疫霉根腐病的快速分子诊断

 隐地疫霉引起的根腐病是非洲菊生产上的主要病害,为发展该病的快速诊断技术,本文比较了卵菌核糖体基因ITS的序列,在此基础上设计了2条针对隐地疫霉的特异性PCR引物PC1和PC2。供试的23种不同真菌和疫霉菌的46个菌株中,利用这对引物能从隐地疫霉基因组DNA中扩增出一条分子量为620bp的特异性条带,该引物的检测灵敏度可达10pg。采用快速组织碱裂解法提取发病植物组织的DNA,结合PCR检测技术,4h内可从发病的非洲菊根部组织中特异性地检测到隐地疫霉菌。结果表明,建立的非洲菊疫霉根腐病菌分子检测方法可用于该病害的快速分子诊断。     

Maximum vs minimum harmonization: what to expect from the institutional and legal battles in the EU on gene editing technologies

New plant‐breeding technologies (NPBTs), including gene editing, are widely used and drive the development of new crops. However, these new technologies are disputed, creating uncertainty in how their application for agricultural and food uses will be regulated. While in North America regulatory systems respond with a differentiated approach to NPBTs, the Court of Justice of the European Union (EU) has in effect made most if not all NPBT subject to the same regulatory regime as genetically modified organisms (GMOs). This paper discusses from a law and economics point of view different options that are available for the EU's multi‐level legal order. Using an ex‐ante regulation versus ex‐post liability framework allows the economic implications of different options to be addressed. The results show that under current conditions, some options are more expensive than others. The least costly option encompasses regulating new crops derived from NPBTs similar to those used in ‘conventional’ breeding. The current regulatory situation in the EU, namely making the use of NPBTs subject to the same conditions as GMOs, is the most costly option. © 2019 The Authors. Pest Management Science published by John Wiley & Sons Ltd on behalf of Society of Chemical Industry.     

加强果树规范化采样和病毒检测,降低潜隐和危险性病毒对我国苹果产业的危害风险

苹果病毒病在世界各苹果产区广泛发生,危害严重,目前没有有效的防治药剂。苹果病毒具有潜隐危害、主要以嫁接方式传播的特点。危险性高的类病毒侵染导致苹果果实几乎失去经济价值。苹果病毒的检测是防止其传播和危害,繁育无病毒苗木和苹果树无毒化管理的一项关键技术。由于对病毒在苹果树体中的组织分布和浓度认知不到位,苹果病毒检测中存在样品采集和检测方法的误区。本文根据课题组十年来开展苹果病毒检测和研究工作的数据,简要概述了我国苹果病毒的发生危害特点,苹果病毒检测方法,详细给出了规范的样品采集、处理、总RNA提取、RT-PCR参数、检测引物、对照设置及检测结果判别的技术方法。     

梨火疫病的分布,传播及检测技术研究进展

本文介绍了梨火疫病的危害,传播及目前世界分布;讨论了各种植物材料和包装物传病的危害性,评价了包括传统的和分子生物学方法在内的梨火疫病菌的各种检测方法及该病对我国的潜在威胁,为对该病的检疫检测提供理论依据。     

进境百合种球病毒不同检测方法初析

我国大量进口的百合种球易携带多种检疫性病毒及限定性有害生物,进境口岸实验室对百合种球病毒的检测尤为重要。以百合无症病毒(Lily symptomless virus,LSV)为对象,分别采用双抗体夹心酶联免疫吸附(DAS-ELISA)及反转录PCR(RT-PCR)方法进行检测,根据过程与结果,初步分析不同检测方法的特点,为口岸实验室的植物病毒检测提供方法参考。     

大豆猝死综合症病菌检测技术研究

 大豆猝死综合症是美国等几个大豆主产国的一种较新的、危害性很大的大豆真菌病害,它分别由两种镰刀菌Fusarium virguliforme和Fusanum tucumaniae引致。本研究确立了从土壤中筛选、分离大豆猝死综合症病菌的选择性培养基PCNB;明确了中国具有对该病菌敏感的大豆品种;利用Southern杂交技术,将致病菌和近似菌的基因组DNA分别用EcoRI酶切,与mtDNA探2u18和4u40杂交的RFLP图谱可成功的鉴定F.virguliforme,F.tucumaniae和近似菌F.phaseoli。由此建立了,通过选择性培养基分离进口大豆中的土壤,进而以Southern杂交技术鉴定大豆猝死综合症病菌的检测方法。     

环介导等温扩增技术快速检测麦根腐平脐蠕孢

 为建立麦根腐平脐蠕孢简单快速的分子检测方法,基于环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP)技术,以核糖体DNA的ITS为靶标序列,设计和筛选出一组麦根腐平脐蠕孢的特异性引物,成功开发可快速准确检测麦根腐平脐蠕孢的LAMP方法。甜菜碱作用测试显示LAMP体系中是否添加甜菜碱对扩增结果无明显影响;特异性测试显示该LAMP方法能够从14种植物病原菌中特异地检测出麦根腐平脐蠕孢;灵敏度测试显示该LAMP方法的检测极限为10^-3 ng·μL^-1,是常规PCR检测方法灵敏度的100倍;通用性测试显示该LAMP方法能够准确检测洛阳、安阳、开封和邯郸等不同地理来源的麦根腐平脐蠕孢菌株;发病组织检测显示该LAMP方法能够准确地从人工接种的小麦发病组织中检测出麦根腐平脐蠕孢,检出时间为侵染12 h及以上。这些研究结果表明所建立的麦根腐平脐蠕孢LAMP检测方法特异性好、灵敏度高、适用性强,可用于小麦根腐病的早期快速诊断。