黄芪多糖对仿刺参体腔细胞中溶菌酶基因表达量的影响

为研究黄芪多糖诱导仿刺参体腔细胞中溶菌酶基因表达的影响,从体质量(10±1.22) g的仿刺参体腔细胞中克隆出长度为395 bp的β-actin基因部分片段作为内参,利用半定量PCR法考察体内注射不同剂量黄芪多糖(APS)后仿刺参体腔细胞中i 型溶菌酶mRNA表达量变化.研究发现,5、10 mg/kg剂量的APS可提高体细胞中溶菌酶mRNA表达量,其中5 mg/kg剂量组达显著水平,剂量为20 mg/kg时基本无效.     

不同剂型的黄芪多糖在刺参养殖中的应用研究

以初始体质量为(30.0±2.0)g的刺参为研究对象,进行为期6周的投喂试验,探讨不同剂型的黄芪多糖对其生长、非特异性免疫及抗病力的影响。试验期间水温为16～20℃,溶解氧5mg/L,分别向基础饲料(占刺参体质量的2%～4%)中添加3%的黄芪粉(100～160目)、黄芪多糖微胶囊(包封率约85%)、黄芪多糖制剂(黄芪多糖含量约63%),配制成3种试验饲料,对照组分别为基础饲料组(基础对照组)和3%海藻酸钠空白微胶囊添加组(空白对照组)。试验结束后进行刺参体腔液中相关免疫学指标的测定及致病菌感染试验。结果显示,添加3%黄芪粉、黄芪多糖制剂时,特定生长率均高于基础对照组(P0.05),而添加3%黄芪多糖微胶囊时,特定生长率显著高于基础对照组和空白对照组(P0.05)。添加3%黄芪粉时,刺参体腔液中各免疫指标(溶菌酶、超氧化物歧化酶、碱性磷酸酶)活性均显著高于基础对照组(P0.05);添加3%黄芪多糖制剂时,溶菌酶、超氧化物歧化酶活性与基础对照组之间差异显著(P0.05),碱性磷酸酶活性与基础对照组之间差异不显著(P0.05);添加3%黄芪多糖微胶囊时,刺参体腔液中免疫指标活性较高,与基础对照组、空白对照组及其他试验组差异性均显著(P0.05)。109cfu/mL致病菌灿烂弧菌攻毒试验结果表明,3种试验饲料均不同程度地降低试验刺参的累积死亡率,具免疫保护作用,黄芪多糖微胶囊试验组差异最显著(P0.05)。因此,选择适宜的方式在基础饲料中添加适量的黄芪多糖可显著提高刺参特定生长率、非特异性免疫力及抗病力。     

蒙脱石对仿刺参幼参生长、主要消化酶和免疫酶活性的影响

水温15.8～21.0℃下，将初始体质量(1.37±0.07) g的幼参于100 L的塑钢水箱中饲养75 d,每个水箱45头，投喂添加0%、0.20%、0.40%、0.60%和0.80%的蒙脱石饲料，测定幼参肠道蛋白酶和淀粉酶活性及体腔液的超氧化物歧化酶、溶菌酶和碱性磷酸酶的活性，探究蒙脱石对仿刺参生长、消化酶和免疫酶活性的影响。试验结果表明：蒙脱石对仿刺参存活率无明显影响，但显著提高了仿刺参特定生长率和饲料干物质的表观消化率(P<0.05);蒙脱石添加量为0.40%时，仿刺参特定生长率最高，显著高于对照组(P<0.05);添加0.20%～0.60%的蒙脱石显著提高了仿刺参肠道蛋白酶和淀粉酶活性(P<0.05),添加0.40%的蒙脱石组活性最高，分别为(73.27±3.73) U/mg和(70.63±1.96) U/mg;不同添加量的蒙脱石对仿刺参体腔液超氧化物歧化酶、溶菌酶和碱性磷酸酶活性均有不同程度的影响，对体腔液中溶菌酶活性的影响最大，0.60%组仿刺参溶菌酶活性最高，较对照组提高50%。在本试验条件下，饲料中添加约0.40%的蒙脱石，仿刺参可以获得最佳的消化性...     

十二烷基苯磺酸钠对黄颡鱼免疫相关酶活性的影响

为评估十二烷基苯磺酸钠（SDBS）对黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）的毒性效应,在水温（24.5±0.3）℃下,将体质量（101.4±16.5）g的黄颡鱼饲养在流水充气的水泥池中,暴露于0.0 mg/L、0.2 mg/L、0.4 mg/L、0.6 mg/L和0.8 mg/L质量浓度的SDBS中10 d后,测定血清溶菌酶（LZM）、碱性磷酸酶（AKP）、肝胰脏超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性及丙二醛（MDA）、免疫球蛋白M(Ig M)和补体C3含量、总抗氧化能力（T-AOC）等,并用荧光定量PCR仪检测脾脏补体C3和CAT基因相对表达量。结果表明：SDBS暴露后黄颡鱼血清中的溶菌酶和碱性磷酸酶活性、补体C3和免疫球蛋白含量降低,肝胰脏的超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性及总抗氧化能力降低,而丙二醛含量升高。SDBS暴露后黄颡鱼脾脏中补体C3、CAT基因m RNA转录水平下调,在高浓度暴露组（0.8 mg/L）中补体C3基因m RNA转录水平显著下调（P<0.05）,在0.4～0.8 mg/L浓度暴露组中CAT基因m RNA转录水平显著下调（P&...     

半滑舌鳎鳃黏液免疫相关酶活性对黄芪多糖的免疫应答

在水温25℃下,给体质量(5.8±1.5)g的半滑舌鳎投喂在基础饲料中添加0、300、600、900、1200、1500mg/kg和1800mg/kg黄芪多糖的饲料后,每隔18d检测半滑舌鳎鳃黏液溶菌酶、过氧化物酶、碱性磷酸酶和酸性磷酸酶的活性,以检测半滑舌鳎鳃黏液对黄芪多糖的免疫应答及较佳剂量。90d的免疫结果显示,半滑舌鳎鳃黏液溶菌酶、过氧化物酶和碱性磷酸酶活性先增强后降低;半滑舌鳎鳃黏液酸性磷酸酶活性对低剂量(300~600mg/kg)和中高剂量(1200~1800mg/kg)黄芪多糖的免疫应答,随试验时间延长,分别呈增强及先增强后减弱的变化趋势。试验结束时,中低剂量(600~900mg/kg)黄芪多糖组半滑舌鳎鳃黏液溶菌酶、过氧化物酶、碱性磷酸酶和酸性磷酸酶活性均极显著高于对照组(P0.01)。从成本、高非特异免疫活性的角度看,半滑舌鳎配合饵料中黄芪多糖较佳添加剂量为600mg/kg。     

微胶囊剂型黄芪多糖对刺参生长性能、免疫力及抗病力的影响

在基础饲料中添加不同剂量(1%、3%、5%)的微胶囊剂型黄芪多糖(Astragalus polysac-charudes,APS)(载药量为17%),制成3种配合饲料,连续投喂初始体重为22.0±1.0g的刺参Apostichopus japonicus35d,探讨微胶囊剂型黄芪多糖(以下简称"微胶囊")对刺参生长性能、非特异性免疫及抗病力的影响。结果显示,35d后刺参最高特定生长率(Specific growth rate,SGR)为0.51%/d(5%添加组)(P<0.05);微胶囊添加量为3%时免疫效果最佳,刺参体腔液中酸性磷酸酶ACP、超氧化物歧化酶SOD、髓过氧化物酶MPO活性显著高于对照组(P<0.05)。试验期间每隔7d测定刺参体腔液样品,其中ACP活性在第28天最高,为11.2U/100ml(P<0.05);SOD活性在第21天最高,为63.3U/ml(P<0.05);MPO活性在第21天最高,为40MPO单位/ml(P>0.05);免疫试验结束后对刺参进行灿烂弧菌Vibrio splendidus攻毒实验,14d内观察得出,3%微胶囊添加组累积死亡率明显低于对照组(P<0.05)。由此可得,微胶囊剂型黄芪多糖对仿刺参生长性能、免疫力及抗病力方面均具有显著的增强效果,以3%添加量效果最佳,且添加量、作用时间、免疫效果之间存在相关性。     

大蒜素、枸杞多糖对草鱼血清非特异性免疫指标的影响

在草鱼幼鱼的基础饲料中分别添加不同剂量的大蒜素(0、0.4%、0.8%)、枸杞多糖(0、0.066%、0.132%),未添加组为对照组,探讨大蒜素、枸杞多糖对草鱼幼鱼血清溶菌酶(LSZ)、血清碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、补体C3含量和白细胞吞噬率的的影响.试验结果表明,在第28 d...     

三种免疫添加剂对草鱼非特异性免疫功能的影响

在饲料中添加不同剂量的Vc、酵母多糖和壳聚糖,连续投喂42d,并在试验的第14、28、35和42天取样检测,研究其对草鱼血清溶菌酶活性、血清超氧化物歧化酶活性（SOD）活性、血清碱性磷酸酶（AKP）活性、补体C3、含量丙二醛（MDA）含量和血液白细胞吞噬活性共6种指标的影响。结果显示：实验组与对照组相比,饲料中添加Vc可以提高血清溶菌酶活性、SOD活性、AKP活性、补体C3含量和血液白细胞吞噬活性高,并降低MDA含量。添加酵母多糖可以提高血清溶菌酶活性、AKP活性、补体C3含量和血液白细胞吞噬活性,并降低MDA含量,但不能提高SOD活性。添加壳聚糖可以提高血清溶菌酶活性、SOD活性、AKP活性、补体C3含量和血液白细胞吞噬活性,但不能降低MDA含量。饲料中添加Vc、酵母多糖和壳聚糖均对草鱼的非特异性免疫功能具有一定的促进作用。     

高温胁迫对仿刺参抗氧化酶等指标的影响

在15、18、21、24、27、30℃水温下,分别制备仿刺参福建连江群体和辽宁大连群体的体腔和内脏团提取液,测定超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶活力及丙二醛含量。试验结果显示,仿刺参连江群体内脏团提取液超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶和乳酸脱氢酶活力最大时的水温比大连群体分别提高了3~9℃;高温(24、27、30℃)胁迫下,连江群体体腔和内脏团提取液超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、乳酸脱氢酶活力均极显著高于大连群体(P0.01),其内脏团提取液谷胱甘肽过氧化物酶活力亦极显著高于大连群体(P0.01),其体腔液谷胱甘肽过氧化物酶活力在24℃和30℃时极显著高于大连群体(P0.01);仿刺参连江群体和大连群体体腔液碱性磷酸酶活性均在15℃时最大,内脏团提取液的碱性磷酸酶活性则均在18℃时最大;连江群体仿刺参体腔和内脏团提取液丙二醛含量在18~30℃下均显著低于大连群体(P0.05,P0.01)。研究表明,福建连江夏季高温驯化的仿刺参子二代群体,在高温胁迫试验中,其体腔和内脏团提取液中超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶活力显著高于大连群体,丙二醛含量则显著低于大连群体,这些酶耐热性的提高,有利于仿刺参机体清除因高温胁迫产生多余的自由基,减少机体因高温胁迫造成的损害。     

芽孢杆菌与光合细菌协同作用对养殖刺参的影响

为研究芽孢杆菌和光合细菌协同作用对刺参养殖水质及其生长、消化和免疫的影响,测定了水体化学需氧量(COD)、氨氮(NH4+-N)和亚硝酸盐氮(NO2--N)24 h的变化量、肠道蛋白酶和淀粉酶的活性以及体腔液超氧化物歧化酶(SOD)、碱性磷酸酶(AKP)和溶菌酶(LSZ)的活力。结果显示,混合菌投喂组优于单一菌投喂组。在芽孢杆菌和光合细菌投喂浓度以1.86×105和1.75×104CFU/mL搭配时,该实验组协同作用效果最优,水体COD、NH4+-N和NO2--N含量均显著低于对照组(P<0.05);刺参特定生长率最大(0.76%/d),较对照组提高56.8%,成活率亦最高(97.8%);蛋白酶和淀粉酶活性最高(96.72和98.72 U/mg prot),较对照组显著提高149%和44.82%;体腔液SOD活力最高(65.16 U/mL)。而两种菌对刺参AKP和LSZ活力的影响较小。研究表明,芽孢杆菌和光合细菌搭配合理效果更佳,能够有效改善养殖环境,提高刺参消化酶活性和免疫力,促进刺参生长。