绿鳍马面鲀胚胎和仔鱼早期发育的初步观测

利用显微数码摄像系统观测绿鳍马面纯受精卵的胚胎发育和初孵仔鱼的形态特征,结果表明:绿鳍马面纯的卵为球形沉性的粘性卵,卵径平均为644 μm,未受精卵及早期胚胎有油球多个;在18.7～19.2 ℃水温条件下孵化,受精后约40～50 min胚盘形成,1 h 10 min进入卵裂期,6 h 10 min进入高囊胚期,9 h 20 min进入低囊胚期,10 h后进入原肠胚,21 h 40 min后听囊形成,23 h 40 min后形成柯氏囊,41 h30 min后耳石形成,多数胚胎油球溶合为1个,50 h后胚体环绕卵黄达1.3周以上,73.5 h陆续孵出,孵化积温为1375～1411 ℃·h.初孵仔鱼呈前位抱卵方式,油球位于卵黄囊的前端,85 h后开口摄食,5～6 d卵黄囊和油球吸收完,8 d第1背鳍棘突出背鳍膜,18 d发育到稚鱼期.     

圆斑星鲽胚胎及仔鱼发育的观察

对圆斑星鲽(VeraspervariegatusTemmincketSchlegel)胚胎及胚后发育进行观察,描述了各发育时期的形态特征和发育速度。在水温为(11±0.5)℃时,受精卵历时153h脱膜孵出,孵化后仔鱼在水温为(15±0.5)℃时经过6d开口摄食,50d完成变态而成幼鱼。圆斑星鲽的卵子为半浮性卵,其卵黄量很多。卵裂后期,卵裂球的大小和卵裂速度均出现差异。眼泡在体节形成之前出现。刚孵化仔鱼消化道细而直,孵化5d肛门打通,6d开口。随着卵黄囊的消失,消化道开始弯曲。色素细胞首先出现在86h的胚体中,至140h在卵黄囊上零星分布,且随着胚体发育,色素细胞增多,至变态完成后全身密布黑色色斑。胚体色素细胞的形状由孵化前的雪花状逐渐变为圆形,但卵黄囊上的色素细胞始终为雪花状。     

孵化池密度的高低和基质的有无对大马哈鱼卵和带卵黄囊鲑苗生长发育的影响

先按孵化密度的高低将四大家系的大马哈鱼(Oncorhynchus keta)鱼卵放在没有砂砾基质的孵化池内孵化，等孵出带卵黄囊鲑苗后，再按基质的有无将它们移入高低密度不同的孵化池内分别孵化，直到鲑苟发育成仔鱼为止。四大家系的胚胎存活率有着显著的差异，然而与孵化密度的高低却没有因果联系。低密度有基质孵化池内的鲑苗成活率高于低密度无基质孵化池，而且其质量也比高密度有基质或无基质孵化池的好。在低密度有基质孵化池内，鲑苗和仔鱼的卵黄囊畸形和卵黄体凝结现象最少，低密度孵化池内的鲑苗，其组织重量超过高密度孵化池。在低密度有基质孵化池内孵化出来的仔鱼比其它任何孵化池内的仔鱼长和重。通过对标准孵化池内的大马哈鱼鱼卵和带卵黄囊鲑苗密度的控制，能提高大马哈鱼仔鱼的存活率和质量。     

鲈鱼冷冻精子诱导半滑舌鳎胚胎发育

半滑舌鳎是分布在我国黄、渤海的特有鱼类,雌鱼明显具有较雄鱼生长快的特点,利用雌核发育方法诱导产生半滑舌鳎超雌鱼,通过与正常雄鱼交配,最终可培育生长速度快、个体大的全雌性后代,对于提高养殖效益具有重要的意义。为此利用冷冻保存的异源鲈鱼精子诱导半滑舌鳎卵产生雌核发育二倍体、单倍体、杂交胚胎,利用同源精子受精产生普通二倍体,在Olympus显微镜下对它们的胚胎发育进行了观察比较。冷冻解冻的鲈鱼精子,在1000μj/cm2紫外线下照射0·2~1min,诱导半滑舌鳎卵受精,在受精后2~5min将卵置于2~5℃的水浴冷休克20min,获得了雌核发育的胚胎和鱼苗,在21·7~23·6℃水温中,雌核发育胚胎经过2781min孵化出膜。普通胚胎在21·7~23·6℃水温下,经2621min孵化出膜。经紫外线灭活处理的鲈鱼精子诱导半滑舌鳎卵,但不经过冷休克获得的单倍体胚胎,具有明显的单倍体综合症,发育至1949min陆续死亡。鲈鱼精子与半滑舌鳎卵杂交受精,胚胎不能正常发育,相当于胚孔封闭期后全部死亡。实验证明,鲈鱼冷冻精子可刺激半滑舌鳎卵雌核发育。     

半滑舌鳎胚胎发育及稚鱼变态过程观察

利用显微镜对半滑舌鳎胚胎发育及稚鱼变态过程进行连续观察，对各个时期的发育时间进行了记录，并对不同时期的特征用进行了拍摄。结果表明：半滑舌鳎成熟卵子呈球形，为多油球浮性卵。受精卵培养在水温21．6—22．8℃，pH值7．0～8．2。盐度30的海水中，历时39h仔鱼孵出。与其他硬骨鱼类基本相似，半滑舌鳎胚胎发育属于盘状卵裂，发育过程可分为：受精卵、卵裂期、囊胚期、原肠期、神经胚期、器官分化期、出膜期和初孵仔鱼。仔鱼孵化出膜进入胚后发育阶段，之后进入变态期，向成鱼转化。与牙鲆、大菱鲆等鲆鲽鱼类不同，半滑舌鳎稚鱼变态初期是在头顶两眼前上方形成一个横裂，右眼由此横列穿过，最终到达身体左侧，此后横裂逐渐愈合，变态完成，该过程历时3-4d，其形成机制有待进一步深入研究。     

黄鳝的胚胎及胚后发育

将黄鳝的受精卵静水控温孵化后,经活体解剖和透明处理,记录黄鳝孵化时序,显微观察并拍摄黄鳝胚胎发育及胚后发育过程的形态特征。黄鳝卵圆球型,橙黄或淡黄色,沉性,卵粒重25～38mg,卵径1.7～3.1mm。受精吸水3～5min膨胀后,卵径增大至3.0～3.7mm。黄鳝出膜时全长15～21mm,卵黄吸收完成时,全长25～35mm。黄鳝胚胎发育过程中出现具有丰富的微血管分布的胸鳍。胸鳍在胚体出膜后卵黄囊完全消失前退化。在温度26℃时,胚胎发育所需时间为168h,所需积温“度·时”值为4368;在温度32℃时,胚胎发育所需时间为144h,所需积温“度·时”值为4608。在温度32℃时,胚后发育所需时间(从出膜至卵黄全部吸收)为216h,所需积温“度·时”值为6912。26～30℃是黄鳝卵适宜的胚胎发育温度。     

波纹唇鱼(Cheilinus undulatus)的胚胎发育及初孵仔鱼的形态观察

波纹唇鱼(Cheilinus undulatus)是世界著名的濒危礁栖鱼类,具有特殊的生物学特性和较高的经济价值。本研究对波纹唇鱼的胚胎发育及初孵仔鱼的形态进行了观察,将其全过程划分为胚盘形成、卵裂、囊胚、原肠?神经胚、器官发生和孵化6个阶段,共26个发育时期。波纹唇鱼的受精卵为无色透明的浮性卵,圆球形,卵径为(635.6±50.0)μm,具油球1个,其卵径显著小于多数海水鱼类。在水温27.7–29.0℃、盐度30的条件下,受精卵历时15 h 30 min孵出仔鱼。初孵仔鱼全长为(1305.5±50.0)μm,卵黄囊前部长于仔鱼头部,且油球位于卵黄囊的最前端。结果显示,波纹唇鱼卵子较小,胚胎发育较快,其较快的胚胎发育与较小的初孵仔鱼可能是导致胚后发育阶段死亡率较高的重要原因。     

江鳕胚后形态发育特征

在直径2m的圆形玻璃钢槽内,水深0.3m,弱光,水温6～16℃下,详细观察了江鳕(Lota lota Linnaeus)胚后发育过程.结果表明,依形态发育,将出膜后的江鳕发育分为两个阶段(仔鱼期和稚鱼期)11个发育期.仔鱼期分为卵黄囊期仔鱼和后期仔鱼,历时62d;卵黄囊期仔鱼由单独依靠内源营养至混合营养过程,包括孵出期...     

半滑舌鳎骨形态发生蛋白4基因的克隆和表达分析

本研究克隆了半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)骨形态发生蛋白4(BMP4)基因的c DNA序列,并分析其在半滑舌鳎成鱼的组织表达分布及其在早期发育阶段的定位和表达变化趋势。结果表明,半滑舌鳎BMP4基因c DNA全长为1680 bp,包括了419 bp的5′非翻译区(5′UTR)、编码403个氨基酸的1212 bp的开放阅读框(ORF)以及49 bp的3′非翻译区(3′UTR)。同源性分析和分子进化聚类分析结果显示,半滑舌鳎与已报道慈鲷科(Cichlidae)各鱼种的同源性最高,并与之共同聚为鱼类BMP4分支。BMP4 m RNA在半滑舌鳎成鱼的13个组织中具有广泛的分布,并在鳃组织中表达量最高,其次在背鳍、软骨等组织具有中等水平的表达。此外,BMP4基因在早期胚胎发育阶段(卵裂期和原肠期)具有极高水平的表达,此后其表达水平逐渐降低;但在后期仔鱼期(孵化后3日龄和4日龄),其表达水平再次升高。整体原位杂交检测结果表明,BMP4 m RNA在早期仔鱼期主要在头部及躯干前部表达;后期仔鱼BMP4基因主要在冠状幼鳍、上下颌及胸鳍处表达;进入稚鱼期后在鳃盖骨及各鳍均有表达。上述研究结果揭示了BMP4在半滑舌鳎早期骨骼发育中的重要作用,为揭示海水硬骨鱼类骨骼发生、发育的调控机制奠定了理论基础。     

温度极限对银大麻哈鱼胚胎及仔鱼死亡率和发育率的影响

本文查明了水温极限对两个种群的银大麻哈鱼Oncorhynchus kisutch胚胎及仔鱼发育率的影响，以及孵化温度的上限和下限。在稳定的孵化温度下，胚胎能经受1．3～12．4℃的温度范围，在14℃以上或1．3℃以下几乎100％死亡。最大的死亡率发生在胚胎发育早朝，尤其是在胚孔封闭前。除了在最高孵化温度(10．2℃)下，一时性的温度突然变化时间持续8小时，变幅从增加8．4℃到减少6．2℃(包括下降到0．1℃)其胚胎死亡率很少增加甚至不增加。温度对发育时间的影响不是呈直线相关的，有时温度微小的变动会导致发育率明显的变化，尤其在孵化温度的上限和下限时。文中列出的一组公式表明温度与达到50％孵化率和完成100％卵黄吸收所需积温的相关关系；男一组公式则表明温度与达到50％孵化率和100％卵黄吸收的天数之问的相关关系。     

Pectin purified from pomelo (Citrus maxima) peel as a natural hatching agent for fish embryos

Pectin is a biodegradable polysaccharide, and it has been recently applied as a gene delivery, drug delivery, wound healing and tissue engineering agent. In this study, pectin was extracted from pomelo (Citrus maxima) peel and characterized. The extraction recovery of pectin form pomelo peel was 14.5%, and it had 72.56% degree of esterification, 1,245.56 equivalent weight, 7.82% methoxyl and 68.27% anhydrouronic acid contents. Use of pomelo pectin as a hatching enhancing agent for fish embryos and its effect on hatching enzyme 1 (ZHE1) was investigated. The pectin‐exposed zebrafish embryos (100 µg/ml) showed significantly (p < .05) higher hatching rate (96.6%) compared with untreated (control) embryos (66.6%) at 60 hpf. The mRNA expression of ZHE1 was also significantly (p < .05) elevated up to 55.6‐fold in pectin‐exposed embryos at 24 hpf. In situ hybridization results revealed remarkably strong expression of ZHE1 in pectin‐exposed embryos compared with the control group. In addition, considerably larger size of the hatching gland was observed in pectin‐exposed larvae than that of the unexposed larvae group. These results clearly indicate that pectin isolated from pomelo peel has an ability to enhance the hatching process of zebrafish embryos via upregulation of ZHE1.     

种蛋保存条件对孵化效果的影响

在平均温度16.5℃,相对湿度75%的条件下,根据种蛋的保存时间(1～3d、4～6d、7～9d,10～12d)、放置方式(锐端向上、锐端向下)、翻蛋与否,将入孵蛋分为16个处理组,与大批量的种蛋同机孵化。实验结果表明:保存条件对种蛋孵化率起决定性影响,保存期1周内孵化率最佳,超过1周则孵化率明显下降。翻不翻蛋对种蛋孵化率的影响显著,但显著影响早期和中后期胚胎死亡率。放置方式对保存期在10d以内的种蛋受精率、受精蛋孵化率、胚胎早期死亡率、胚胎中后期死亡率没有影响;种蛋保存期超过10d时,锐端向下存放可提高孵化率。     

莱氏拟乌贼输卵管腺超显微结构

为了解莱氏拟乌贼(Sepioteuthis lessoniana)输卵管腺的结构和功能，通过解剖学、组织切片和透射电镜技术对腺体进行解剖学及超显微结构观察。解剖结果显示，莱氏拟乌贼具有1个输卵管腺，由圆饼状近端输卵管腺和圆柱状远端输卵管腺构成，整体呈白色，靠近内壳侧具有棕黄色的色素沉着，透明瓣膜位于腺体末端。显微结果显示，输卵管腺由腺壁组织包裹，由外向内分别是外膜层和结缔组织。外膜层由柱状上皮细胞构成，结缔组织中分布少量肌肉组织和血管；腺体的外膜层和透明瓣膜的外表层中分布少量杯状细胞，瓣膜主要由肌肉组织构成。腺体内部是分泌叶瓣，在腺体中呈层状分布，叶瓣依附于腺壁组织。电镜结果显示，分泌细胞个体较大，细胞核呈圆形或椭圆形，包含大量内质网、线粒体和高尔基体等细胞器，此外，胞内分布大量黏液颗粒，细胞外连续着生纤毛。透明瓣膜主要由肌细胞构成，可见横切和纵切的肌丝以及大量的胶原纤维。研究表明，输卵管腺具备分泌功能，其分泌物形成受精卵的内层卵鞘，在受精卵孵化过程中具有重要作用。本研究首次对莱氏拟乌贼的输卵管腺进行超显微结构观察，描述了输卵管腺的外部形态构造和内部结构特征，分析并总结了该腺体的结构和...     

黄颡鱼头肾的组织发生与组织结构研究

为深入了解黄颡鱼的免疫机能,采用组织学方法,对孵化后1～48 d的黄颡鱼鱼苗头.肾的组织发生进行了观察;对5月龄幼鱼和成鱼头肾的组织结构进行了观察.结果表明,出膜后1 d,头肾仅由肾小管组成;出膜后2d,头肾小管间出现未分化的细胞团;出膜后7 d,头肾小管间出现淋巴细胞团;此后淋巴细胞及造血细胞的数量逐渐增多;出膜后26～43 d,肾小管逐渐萎缩直至完全消失,头肾完成由排泄器官向淋巴器官的转变.黄颡鱼头肾含丰富的静脉血管、血窦以及处于不同发育时期的各类免疫细胞.肾上腺组织细胞分布于头肾门静脉以及头肾组织中静脉管周边.其幼鱼头肾所含酸性颗粒细胞较成鱼头肾丰富,而成鱼头肾则具有较多的黑色素巨噬细胞,且常常在血管附近聚集形成黑色素巨噬细胞中心.     

斑节对虾杆状病毒在感染对虾中肠腺中的分布

利用组织切片法研究了斑节对虾杆状病毒（MBV）在养殖早期班节对虾及养成期斑节对虾中肠腺各部位的分布特点。斑节对虾的中肠腺可分为头部、亚头部、中部、亚尾部和尾部等5个部分，其上皮细胞包括E细胞、F细胞、B细胞和R细胞等4种类型。头部和尾部均以E细胞为主、亚头部、中部和亚尾部均以R细胞为主。在感染度较轻的样本中，MBV一般只感染F细胞、R细胞和B细胞。感染度较重时，E细胞也同时受累。在养殖早期虾和养成期虾中，MBV相对感染度在中肠腺各部分的分布均以中部最高，而且以中部的中间最高，离中部越远，相对感染度越低。     

皱纹盘鲍幼虫流水孵化培育技术的研究

采用紫外线海水培育、充气海水培育、流水孵化培育、流水孵化培育中试4种不同方法进行皱纹盘鲍（Haliotis discus hannai）幼虫孵化培育，并与常规孵化技术对照，结果表明：紫外线海水孵化培育组幼虫48h面盘与壳分离死亡；充气流水培育组幼虫发育畸形；48h下沉死亡；流水培育组幼早孵化率为69.7%，流水培育中试组幼虫孵化率达75.8%。而对照组孵化率仅为23.5%。流水孵化培育不仅提高了孵化率，而且稳定性较高，同时节省大量劳动力。     

孵化至12月龄大黄鱼免疫器官的发育变化

研究孵化至12月龄大黄鱼的淋巴器官如头肾、胸腺、脾的生长发育和免疫细胞数量的变化,首先应用显微与超微技术研究大黄鱼初孵仔鱼至12月龄免疫器官——头肾、胸腺与脾脏的发育。3日龄仔鱼出现头肾原基,原始造血干细胞最早被发现于头肾,很快分化成不同类型的细胞。4日龄仔鱼出现脾脏原基和胸腺原基。脾脏靠近内脏,含大量窦状隙,有丰富的毛细血管、血细胞与血小板。胸腺是最迟出现的淋巴器官,但发育较快。胸腺位于鳃腔背上角,主要由胸腺细胞(淋巴细胞)和上皮细胞组成,分为外区和内区,二者虽没有明显界限,但容易区分。研究结果还表明,随着年龄和鱼体重量的增长,胸腺、头肾和脾脏的重量均有增长的趋势,脾脏重量与体重的关系要比与年龄的关系更为密切,头肾、胸腺重量与年龄的关系要比与体重的关系更为密切。胸腺、头肾和脾脏的白细胞总数随着年龄的增长不断增加。但每毫克胸腺、头肾和脾脏内白细胞数量与年龄间线性关系不明显。头肾比脾脏淋巴化程度高。在研究中发现,血液内各细胞组成与大黄鱼月龄及季节的变化没有明显的改变。     

疣吻沙蚕胚胎发育观察及盐度对其孵化的影响

采用显微镜观察了疣吻沙蚕(Tylorrhynchus heterochaeta)胚胎发育不同时期特征,并依据疣吻沙蚕人工孵化经验设置6个盐度梯度组(A:0,B:5,C:10,D:13,E:15,F:20),每组3个平行,研究了盐度对疣吻沙蚕受精率和孵化率的影响。结果表明,疣吻沙蚕胚胎发育可分为受精卵、卵裂期、囊胚期、原肠期、前担轮幼虫期、后担轮幼虫期、膜内三刚节疣足幼虫期和三刚节疣足幼虫期8个时期;盐度对疣吻沙蚕孵化影响显著(P0.05),C组受精率和孵化率最高,与其他组存在显著差异(P0.05)。适宜受精的盐度范围为10~13,最适孵化的盐度为10。     

Is batch variability in hatching time related to size heterogeneity and cannibalism in pikeperch (Sander lucioperca)?

Larval size heterogeneity is known to induce cannibalism, and procedures to avoid larval size differences are consequently implemented already during egg incubation and hatching. We investigated the relation between larval development variability, size heterogeneity and cannibalism in pikeperch. Larvae were sorted into five groups according to the time of hatching during a 65‐h period. The larvae with different times of hatch were then reared separately or together during an 18‐day period. Late hatched larvae were longer (P=0.003) and had less yolk remaining (P<0.001) than early hatched individuals at the time of hatching. However, on 11 days post fertilization, the late‐hatching larvae tended to have larger yolk reserves than earlier hatched individuals (P=0.07). Furthermore, the next day, a lower proportion in the late fraction had switched to exogenous feeding (P=0.024). That larvae with a late hatching time developed slower suggests a positive relationship between the hatching time and the embryonic developmental rate. However, differences in the length and available yolk reserves at hatching between larval fractions with different hatching times suggest that hatching is not strictly associated with a specific developmental stage, and that factors other than the development rate of the embryo are involved in the timing of hatching.     

Pituitary gland morphogenesis and ontogeny of adenohypophyseal cells of Salminus brasiliensis (Teleostei,Characiformes)

In this study, we describe for the first time the details of the pituitary gland morphogenesis and the ontogeny of adenohypophyseal cells of a South American Characiform species with great importance for Brazilian Aquaculture, Salminus brasiliensis (Characiformes, Characidae), from hatching to 25 days after hatching (dah), by histochemical and immunocytochemical methods. The pituitary placode was first detected at hatching (0 dah), and the pituitary anlage became more defined at 0.5 dah. The neurohypophysis (NH) development started at 3 dah, and the early formation of its stalk at 12.5 dah. An increase in adenohypophyseal and NH tissues was also observed, and in juveniles at 25 dah, the pituitary displayed similar morphology to that found in adults of this species, displaying the main features of the teleost pituitary. PRL cells were detected at 0.5 dah, together with ACTH and α-MSH cells, followed by GH and SL cells at 1.5 dah. β-FSH cells were detected at 25 dah, while β-LH cells at 5 dah. The pituitary development in this species comprises a dynamic process similar to other teleosts. Our findings in S. brasiliensis corroborate the heterogeneity in the ontogeny of adenohypophyseal cells in teleosts and suggest a role for adenohypophyseal hormones in the early development of this species.