壳聚糖固定化胰蛋白酶制备魁蚶肽的研究

以壳聚糖为载体、戊二醛为交联剂固定化胰蛋白酶,制备魁蚶肽.以肽得率为指标,研究了固定化胰蛋白酶量、时间、pH、温度和底物浓度等单因子对固定化胰蛋白酶酶解魁蚶蛋白质的影响.结果表明,酶解魁蚶蛋白的最佳工艺条件:固定化胰蛋白酶6 mg,水解反应时间4 h,温度50 ℃,pH 8.0,底物质量浓度98 μg/ml.在此条件下,魁蚶肽得率为23.93%.     

复合酶提取牡蛎抗氧化肽的工艺研究

以牡蛎为原料,首先从木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶中筛选出胰蛋白酶为内切酶,以水解度为指标,得到最佳的酶解工艺条件:时间4h,温度50℃,pH8.0,料水比1∶2,加酶量3％(7 500 U/g),水解度为49.50％;同时以水解度为指标,得到外切酶风味蛋白酶的最佳酶解工艺:时间5h,温度50℃,pH8.0,料水比1∶2,加酶量3％ (450 U/g),实际水解度50.95％.最后,以清除羟自由基能力和水解度为指标,探讨内切酶(胰蛋白酶)和外切酶(风味蛋白酶)不同复合酶解方式的抗氧化能力.最终确定,复合酶解制备牡蛎抗氧化肽效果最好,其酶解条件为胰蛋白酶为3％(7 500 U/g)、风味蛋白酶加酶量为3％ (450 U/g),pH8.0,时间5h,料水比1∶2,温度50℃时,水解度高达53.94％,体外清除·OH的EC50为0.56 mg/mL.     

紫菜活性肽复合酶法制备与清除羟自由基作用

以条斑紫菜为原料,利用胰蛋白酶和木瓜蛋白酶组成的复合酶水解紫菜蛋白制备生物活性肽并研究清除羟自由基作用。采用单因素试验考察胰蛋白酶与木瓜蛋白酶的比例、底物质量浓度、酶用量、水解温度、水解时间、pH对羟自由基清除率及水解度的影响,响应面法优化酶解条件,SephadexG-15凝胶层析法测定活性肽的分子质量分布。试验结果表明,复合酶最佳酶解工艺条件为胰蛋白酶与木瓜蛋白酶复合酶比例1.67,底物质量浓度20mg/mL,酶用量1.67%,pH 7.0,温度55℃,酶解4h,紫菜活性肽对羟自由基的清除率为80.6%,清除率为50%时的质量浓度为0.744mg/mL,分子质量大多分布于500～1500ku。     

缢蛏蛋白肽制备工艺优化及其清除羟自由基作用

以缢蛏为试验材料,采用羟自由基清除率为评价指标,从胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶5种蛋白酶中筛选最适水解用酶,在单因素试验基础上使用响应面法优化酶解工艺条件,考察缢蛏蛋白肽的羟自由基清除能力并通过Sephadex G-15凝胶层析测定其分子质量分布。结果表明,碱性蛋白酶酶解制备的缢蛏蛋白肽清除羟自由基能力明显强于其他蛋白酶,优化后的碱性蛋白酶水解缢蛏蛋白工艺条件为底物浓度6mg/ml、加酶量3%、pH8.0、温度55℃、酶解时间4h,蛋白肽的羟自由基清除率为76.60%,IC50值为1.89mg/ml,蛋白肽中80%以上是分子质量小于1500Da的小分子肽。     

Optimization of the preparation of bioactive peptides from Sinonovacula constricta and its hydroxyl free radical scavenging activity

以缢蛏为试验材料,采用羟自由基清除率为评价指标,从胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶5种蛋白酶中筛选最适水解用酶,在单因素试验基础上使用响应面法优化酶解工艺条件,考察缢蛏蛋白肽的羟自由基清除能力并通过SephadexG-15凝胶层析测定其分子质量分布.结果表明,碱性蛋白酶酶解制备的缢蛏蛋白肽清除羟自由基能力明显强于其他蛋白酶,优化后的碱性蛋白酶水解缢蛏蛋白工艺条件为底物浓度6 mg/ml、加酶量3％、pH8.0、温度55℃、酶解时间4h,蛋白肽的羟自由基清除率为76.60％,IC50值为1.89 mg/ml,蛋白肽中80％以上是分子质量小于1500 Da的小分子肽.     

近江牡蛎的超声波辅助自溶及酶解条件研究

超声波和蛋白酶可以破坏蛋白质结构,提高短肽的得率。本试验以近江牡蛎为原料,在适度水解、控制挥发性盐基氮在合理范围的前提下,以短肽含量为主要目标,首先通过研究超声波功率、时间对牡蛎自溶酶解的影响,优化超声波辅助酶解工艺,然后采用单因素试验研究碱性蛋白酶对超声波—自溶酶解液酶解效果的影响。结果显示,440 W超声波处理牡蛎10min后自溶酶解,短肽含量为(88.75±1.16)mg/mL,是对照组的2.12倍;水解度为(30.38±0.05)%;挥发性盐基氮为(79±2)μg/g。采用碱性蛋白酶对超声波-自溶酶解液进行进一步酶解,优化的酶解条件是:加酶量5kU/g,酶解温度55℃,酶解时间4h,此时短肽含量达到100mg/mL以上,水解度为(35.95±0.05)%;挥发性盐基氮为(178±6)μg/g,处在可接受范围。试验结果表明,超声波预处理后自溶,再进行外源蛋白酶酶解可显著提高酶解效率。     

牡蛎酶解工艺条件的研究

比较选择了牡蛎酶解的有效蛋白酶，研究了牡蛎酶解的工艺中各主要因素对提取率的影响。结果表明，A．SI，398枯草芽跑杆菌中性蛋白酶和胰蛋白酶对牡蛎有较好的酶解效果。酶解温度、加酶量、底物浓度对酶解提取率影响较大。确定了牡蛎酶解的最佳工艺条件为：酶解温度50℃；加酶量0．5％；底物浓度6％；酶解时间2h。     

响应面优化酶法提取牡蛎糖原工艺条件研究

为研究制备牡蛎(Crassostrea angulata)糖原的最佳工艺条件,通过比较分析了碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶等5种不同蛋白酶对牡蛎进行酶解提取糖原的效果,以碱性蛋白酶为最优酶制剂。在对碱性蛋白酶酶解工艺条件进行单因素实验的基础上,应用Box-Bhenken中心组合设计3因素3水平试验方案,通过响应面分析,建立数学模型优化牡蛎糖原的提取条件,以p H、酶解温度和加酶量为自变量,牡蛎糖原提取率为指标,获得碱性蛋白酶水解牡蛎提取糖原的最佳工艺条件,即加酶量4%、p H9、水解温度50℃,此时牡蛎糖原的提取率可达(48.55±0.01)%。试验结果表明,响应面法对牡蛎糖原提取条件的优化方案合理可行,该研究为牡蛎糖原的开发利用提供了理论依据。     

木瓜蛋白酶在制取斑鰶鱼蛋白中的应用

为确定木瓜蛋白酶酶解斑鰶鱼的条件。研究了酶解温度、酶浓度、酶解时间、加水量、pH值对斑鰶鱼氨基氮含量和总氮得率的影响。结果表明：温度小于55℃。随着酶解温度的提高、酶浓度的增加、酶解时间的延长斑鰶鱼酶解液氨基氮含量和总氮得率均增加；pH值对水解效果及氮回收率影响不大。综合考虑，最佳水解条件为：温度55℃。加酶量6．0‰。酶解时间1．5h．原料：水=1：2．5，pH值6．8。此时。氨基氮生成率达26．7％。总氮得率2．28％。     

扇贝裙边酶解制备抗氧化肽的实验研究

以扇贝(Chlamys farreri)裙边为研究对象.通过海洋碱性蛋白酶水解获得抗氧化肽.研究酶解温度、pH值、固液比、加酶量、酶解时间对酶解效果的影响.在单因素实验的基础上选取实验因素和水平.采用L16(45)正交试验.根据Box-Behnken设计原理采用三因素三水平的响应面分析法.对酶解条件进行优化研究.结果表明.最佳酶解条件为:固液比1:3.26(m/V).加酶量0.44 %(W/V),温度31.20 ℃,pH值为9.0,酶解时间为1h,M自由基清除率为83.78%.与预测值的相对误差为0.29%.理论值与预测值基本一致.预测模型能较好地反映实际情况.本研究旨在为今后扇贝裙边蛋白的开发利用提供理论依据.