禽源致病性沙门氏菌四环素耐药性基因tetC的PCR扩增及序列分析

通过对临床分离并经生化试验和血清学试验鉴定的20株禽源沙门氏菌和1株标准株C79-13进行药敏试验,结果证明:有19株有高耐药性,另外2株有低耐药性,耐药率达100%;对其四环素耐药基因tetC进行了PCR扩增,结果获得以质粒为模板的特异性产物,与药敏试验符合率为100%;利用PCR检测四环素耐药基因tetC具有很高的敏感性和特异性,从而为禽类致病性沙门氏菌的耐药性检测提供了高效敏感的手段.     

禽源致病性沙门氏菌四环素耐药性基因tetC的PCR扩增及序列分析

通过对临床分离并经生化试验和血清学试验鉴定的20株禽源沙门氏菌和1株标准株C79—13进行药敏试验．结果证明：有19株有高耐药性．另外2株有低耐药性，耐药率达100％；对其四环素耐药基因tetC进行了PCR扩增，结果获得以质粒为模板的特异性产物，与药敏试验符合率为100％；利用PCR检测四环素，耐药基因tetC具有很高的敏感性和特异性．从而为禽类致病性沙门氏菌的耐药性检测提供了高效敏感的手段。     

鸡源致病性大肠杆菌的分离培养和药敏试验

为探究鸡源致病性大肠杆菌的特点和耐药性,试验通过对疑似病鸡进行病理剖解、病料采集,病原菌分离培养、形态染色鉴定、生化鉴定、致病力试验和药敏试验等方法。从12份病料中分离得到3株革兰氏阴性杆菌,3株菌均具备与大肠杆菌相符的生化特性和不同程度的致病力。药敏试验发现,3株致病性大肠杆菌中对29种药物的敏感性均不高,DGCP3只对6种药物高敏,DGCG1只对3种药物高敏,DZMG对9种药物高敏。可见,经过试验分离得到的3株鸡致病性大肠杆菌的耐药性较为严重。     

10株禽源大肠杆菌的分离鉴定和耐药性分析

为临床用药提供参考,减少用药成本,降低大肠杆菌的危害,从河南省部分地区鸡场有大肠杆菌病典型症状的病例(鸡)采集病料,经分离培养、形态染色镜检,共分离禽源大肠杆菌10株,并检测了其对17种抗生素的耐药性,结果表明17种药物中有15种药物的耐药性 70%,其中强力霉素、头孢哌酮、利福平、阿奇霉素、青霉素、万古霉素、阿莫西林、氨苄西林8种药物耐药性达90%,硫酸新霉素、克林霉素2种药物的耐药性达100%。结果提示,河南地区禽源大肠杆菌的耐药性普遍存在,而且多重耐药严重,应引起重视。     

2012年我国部分地区猪源大肠杆菌耐药性分析

近年来大肠杆菌病日益成为制约养猪业发展的重要细菌性疾病,但由于大肠杆菌复杂的血清型以及全国各地区存在的大肠杆菌耐药性的差异导致其防治越来越困难。鉴于此,文章对2010—2011年发表的猪源大肠杆菌药敏试验结果进行了总结,对我国部分地区大肠杆菌耐药率进行了统计分析,为临床药品的合理选用、猪大肠杆菌病的防治提供科学的理论依据,并给出了相应的防治措施。     

泰州地区禽源性大肠杆菌的分离与鉴定

为摸清泰州地区禽大肠杆菌的流行情况及其耐药性,我们于2005年初至4月间,从泰州地区的鸡场、鸭场具有典型大肠杆菌病病变的病死鸡、鸭体内分离到14株大肠杆菌,进行药物敏感性试验,结果显示14个菌株对壮观霉素、阿米卡星高度敏感。血清型鉴定结果显示其O血清型包括O 1、O 2、O 78、O 107。这些菌株均为高致病力毒株。     

祁县地区奶牛乳房炎病原菌的分离与鉴定

为了了解祁县地区奶牛乳房炎的主要致病菌及其耐药情况,对部分奶牛场采样进行致病菌的分离鉴定和药物敏感试验。结果表明,金黄色葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌为该地区奶牛乳房炎的主要致病菌,且大肠杆菌对大多数药物不敏感,已产生了较强的耐药性;而金黄色葡萄球菌和链球菌对大多数药物敏感。     

猪源大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

对湖北省部分规模化猪场进行了耐药性调查,重点监测了大肠杆菌对氟喹诺酮类药物的耐药状况。分离鉴定了117株大肠杆菌,用12种常用药物对上述菌株进行药敏试验,结果表明均表现出多重耐药性,并对四环素、卡那霉素、氨苄青霉素和氟喹诺酮类药物等常用药物呈普遍耐受。大部分株对氟喹诺酮类药物表现不同程度的抗性,其中对单诺沙星和诺氟沙星的抗性率达到了64.1%和56.4%,对恩诺沙星抗性率为38.5%;沙拉沙星的抗性率相对较低,但中介菌株的比例达到了23.9%,环丙沙星的中介菌株的比例达到了29.1%。     

胶东地区肉鸡大肠杆菌药敏试验

用阿米卡星等23种药物对所分离的130株肉鸡大肠杆菌进行耐药性检测,结果显示:分离菌株呈现出不同程度的耐药性,其中庆大霉素抑菌作用最强,高敏菌株比例为72.3%,阿米卡星为69.2%,林可霉素、泰妙菌素、硫酸金霉素、泰乐菌素、氨苄西林、阿莫西林耐药率均为100%。多重耐药情况严重,最多达16种,最少为3种。     

异育银鲫源嗜水气单胞菌对磺胺类耐药性分析

为了解异育银鲫源嗜水气单胞菌对磺胺类药物的敏感性和磺胺类耐药基因的携带情况。采用纸片扩散法和微量肉汤稀释法测定了36株受试菌株对常见4种磺胺类药物的敏感性;应用PCR法检测菌株染色体DNA和质粒DNA磺胺类Sul1、Sul2和Sul3耐药基因。试验结果表明,试验菌株对磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺异噁唑、磺胺甲噁唑的耐药率分别为83.34%、72.22%、66.66%、69.45%;36株嗜水气单胞菌的染色体和质粒中均检测到Sul1和Sul2基因,Sul1基因在染色体和质粒中的检出率分别为30.56%和25.64%,Sul2基因在染色体和质粒中的检出率分别为83.33%和91.67%,Sul3基因在染色体和质粒中均未检出。异育银鲫源嗜水气单胞菌对磺胺类药物的耐药性不容乐观,其耐药性与Sul2和Sul1基因有较大相关性。     

鱼源嗜水气单胞菌质粒的指纹图谱及其与耐药性的关系

为了解国内各地嗜水气单胞菌的耐药性、质粒指纹图谱及质粒大小与其耐药性之间的关系,分离、收集了40株不同时期来源于国内各地的鱼源嗜水气单胞菌,通过KB纸片法检测对29种抗生素的耐药性,碱裂解法小量提取质粒后,采用限制性内切酶EcoRⅠ及HindⅢ对质粒DNA进行酶切并对质粒菌株采用溴化乙锭消除处理,通过琼脂糖凝胶电泳获得质粒指纹图谱,研究质粒与耐药性的关系。试验结果显示,嗜水气单胞菌耐药情况严重,且多重耐药普遍;40株嗜水气单胞菌的质粒检出率为37.5%;质粒指纹图谱与耐药相关性分析表明,嗜水气单胞菌的耐药性与所携带质粒的数量和大小无直接关系,来源相同、耐药类型相似的菌株质粒图谱及酶切质粒图谱相似;质粒消除试验发现质粒消除率为100%,但都只能消除部分质粒;其中12株菌部分耐药表型消失,提示质粒和染色体分别编码耐药基因,2.01 kb的质粒与该菌对萘啶酸、万古霉素的耐药性有关。     

恩诺沙星诱导溶藻弧菌耐药和交叉耐药的研究

自收集于海南海水养殖区域内的溶藻弧菌中筛选恩诺沙星敏感株,在含亚抑菌质量浓度恩诺沙星的培养基上进行质量浓度递增法体外诱导,探究耐药性的发生状况,比较诱导耐药前后诱导菌对诱导药物和6种非诱导药物的最小抑菌质量浓度,并在不含药物的培养基上连续传代考察诱导后的耐药株遗传稳定性.试验结果表明,30株养殖源溶藻弧菌中筛选出24株...     

上海地区9株鱼源病原菌耐药性监测与分析

为了解上海地区鱼源病原菌对主要抗菌药物的耐药现状,合理、规范地使用抗菌药物治疗鱼类细菌性疾病,运用K-B纸片法研究了上海地区的9株鱼源病原菌对28种抗菌药物的耐药性,并用PCR法分析了病原菌携带喹诺酮类gyrA、qnrA、qnrS耐药基因情况。结果显示,9株病原菌对青霉素类、磺胺类、红霉素及链霉素高度耐药;对氯霉素、头孢他啶、庆大霉素、妥布霉素的敏感率为100.0%;对氟苯尼考、头孢氨苄、卡那霉素、阿米卡星、阿奇霉素、四环素类、环丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星、呋喃妥因的敏感率为88.9%;对新霉素、恩诺沙星、诺氟沙星的敏感率为77.8%。根据渔药使用标准,可将庆大霉素、氟苯尼考、多西环素、新霉素、诺氟沙星等作为治疗首选药物。9株病原菌中,gyrA基因检出率为66.7%,qnrS基因检出率为22.2%,未检测到qnrA基因,显示上海地区鱼源病原菌对喹诺酮类药物已在基因水平呈现出一定程度的耐药性。     

耐喹诺酮类药物嗜水气单胞菌的分离鉴定及电镜观察

本研究对吉林省内12个水域采集和送检的66尾病鱼进行细菌分离鉴定,共检出46株嗜水气单胞菌疑似株,通过生化试验和PCR扩增气溶素基因aer鉴定法,确定其中22株为嗜水气单胞菌。进一步采用纸片扩散法和双倍稀释法测定嗜水气单胞菌分离株对多种抗生素的耐药性,其中部分菌株存在不同程度的耐药性,22株嗜水气单胞菌中有4株对喹诺酮类药物耐药,并且为交叉耐药。其对喹诺酮类药物的抑菌圈均小于19mm。嗜水气单胞菌耐喹诺酮类药物的检出率为18 2%。将病料中分离的8株嗜水气单胞菌在电镜下观察发现,2株耐药菌表面发现均匀分布的球形结构,而6株敏感菌表面未见此结构。     

乐山地区部分规模化蛋鸡养殖场大肠杆菌耐药性调查

由从乐山地区部分规模化蛋鸡养殖场采集的粪便,进行大肠杆菌的分离、鉴定和耐药性试验。在分离出的18株大肠杆菌中,采取纸片法分别用16种抗菌药物进行药敏性检测,结果表明,除头孢曲松、痢特灵无耐药性以外,其他药物均有不同程度的耐药性,复方新诺明耐药性最高,其次是氟苯尼考、氟哌酸;此外,受试大肠杆菌的多重耐药性现象已比较严重,最少可耐6种药物,最多可耐14种,耐10、11种比例较高。结果说明,乐山地区部分规模化蛋鸡养殖场大肠杆菌耐药性较严重。     

大肠杆菌耐药性试验

本试验通过对大肠杆菌标准株O2和地方株分离株O2进行药敏试验。选择有庆大霉素、环丙沙星、卡那霉素、利福平、呋喃唑酮、菌必治、头孢胺苄、头孢噻呋7种药物。比较几种药物对标准株与分离株的抑菌效果试验结果发现分离株对庆大霉素为敏感,对卡那霉素、头孢噻呋、环丙沙星、为低敏感,菌必治、头孢氨苄、利福平耐药。     

猪源大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

对湖北省部分规模化猪场进行了耐药性调查，重点监测了大肠杆菌对氟喹诺酮类药物的耐药状况。分离鉴定了117株大肠杆菌，用12种常用药物对上述菌株进行药敏试验，结果表明均表现出多重耐药性，并对四环素、卡那霉素、氨苄青霉素和氟喹诺酮类药物等常用药物呈普遍耐受。大部分株对氟喹诺酮类药物表现不同程度的抗性。其中对单诺沙星和诺氟沙星的抗性率达到了64．1％和56．4％．时恩诺沙星抗性率为38．5％；沙拉沙星的抗性率相对较低，但中介菌株的比例达到了23．9％，环丙沙星的中介菌株的比例达到了29．1％。     

类志贺邻单胞菌耐药基因检测与耐药性关系的研究

为研究类志贺邻单胞菌的耐药表型和耐药基因之间的关系,采用K-B纸片扩散法对55株类志贺邻单胞菌进行耐药性鉴定,同时采用PCR方法对相关耐药基因进行检测。药敏试验结果显示,55株类志贺邻单胞菌对30种抗生素药物产生不同程度的耐药性,其中对克林霉素(98.2%)、万古霉素(98.2%)、氨苄西林(90.9%)、麦迪霉素(89.1%)、羧苄西林(89.1%)、苯唑西林(87.3%)的耐药性较高。TEM、gyrB和tetR基因PCR检出率分别为18.2%、67.3%和36.4%,其中39株致病菌至少含有1个耐药基因。试验结果表明,分离所得的全部类志贺邻单胞菌均多重耐药,耐药基因和耐药表型之间呈现一定的相关性,但非一一对应。     

海南无乳链球菌的毒力基因与耐药特性分析

无乳链球菌可感染人与其他动物,是一种重要的致病菌。为探明海南地区无乳链球菌的毒力基因携带率及耐药情况,以2017年间实验室所采集鉴定的18株无乳链球菌(人源4株,鱼源14株)为样本,利用PCR技术和抗菌药物药敏纸片进行毒力基因、耐药基因的扩增和药物敏感性的检测,结果发现,常见毒力基因阳性检出率较高,其中有11种毒力基因均100%携带,另外3种基因阳性率也超过66.7%;耐药基因扩增结果显示,除四环素类和氨基糖苷类耐药基因均呈阴性以外,其余耐药基因阳性检出率较高(44.4%~100%);而药敏检测显示,无乳链球菌对β-内酰胺类、大环内酯类、林可胺类抗生素耐药性高,而对于氨基糖苷类、喹诺酮类、四环素类抗生素敏感性高。总体上,药敏情况和耐药基因的检测结果一致。研究结果发现,分离得到的不同来源的无乳链球菌中毒力基因检出频率高,耐药性强,需要引起高度重视,试验结果将为无乳链球菌的防治提供重要的参考。     

养殖龟鳖源气单胞菌耐药性与质粒介导喹诺酮类耐药基因分析

为了解养殖龟鳖源气单胞菌的耐药情况及质粒介导的喹诺酮类耐药(PMQR)、喹诺酮类耐药决定区(QRDR)与耐药表型之间的关系;实验采用K-B纸片法测定了1996—2013年从广东地区患病龟鳖分离的67株气单胞菌对23种常见抗菌药物的耐药性,并检测5种PMQR基因qnrA、qnrB、qnrS、qepA和aac(6')-Ib-cr,同时分析PMQR基因阳性菌株染色体上gyrA、parC基因QRDR的突变情况。结果显示,67株气单胞菌对氨苄西林、头孢噻吩和磺胺复合物的耐药率分别高达100%、92.54%和83.58%,对喹诺酮类药物呈现中等耐药,耐药率介于19.40%~64.18%,而对亚胺培南、呋喃妥因、阿米卡星、头孢噻肟敏感性较高,耐药率低于10%;79.10%(53/67)的菌株对3类或以上抗菌药物具有耐药性。19.40%(13/67)的菌株携带PMQR基因,其中,8.96%(6/67)携带qnrS1基因、5.97%(4/67)携带qnrS2基因、7.46%(5/67)携带aac(6')-Ib-cr基因[其中2株同时携带qnrS2和aac(6')-Ib-cr基因]。13株PMQR基因阳性菌株均分别携带1~4个质粒,大小介于0.8~15 kb;其中6株在gyrA基因及parC基因上均发生变异,3株仅在gyrA基因上发生变异,另外4株未发现QRDR的基因突变。研究表明,广东地区龟鳖源气单胞菌对多种抗菌药物耐药并存在多重耐药现象;而且PMQR机制的存在预示着喹诺酮类耐药性很可能会在水产临床上更加快速而广泛地传播,应引起重视。