嗜水气单胞菌胁迫对黄鳝肝脏等四种组织器官抗菌活性的影响

为研究黄鳝机体对细菌的免疫应答规律及其抗病机理,用不同浓度的嗜水气单胞菌感染健康黄鳝,采用抑菌圈法,检测不同处理时间黄鳝肝脏、肾脏、肠和皮肤等4种组织器官中抗菌肽粗提物对嗜水气单胞菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抗菌活性。结果显示:胁迫后,黄鳝4种组织器官的乙酸提取物对嗜水气单胞菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等3种菌均具不同程度的抗菌活性,但对枯草芽孢杆菌均无明显抑制作用。各组织器官的抗菌活性规律大体表现为:对金黄色葡萄球菌的抑制作用对大肠杆菌的抑制作用对嗜水气单胞菌的抑制作用。对嗜水气单胞菌的抑制作用表现为:随着感染时间的延长,肾脏提取物的抗菌活性有所增强,皮肤提取物的抗菌活性有所减弱。对大肠杆菌的抑制作用表现为:皮肤提取物最强,肠提取物最弱,随着感染时间的延长,皮肤的抗菌活性变弱。对金黄色葡萄球菌的抑制作用表现为:肾脏和肝脏提取物较强,肠和皮肤提取物较弱。     

中华绒螯蟹血淋巴抗菌活性的初步研究

主要研究了中华绒螯蟹血清和血细胞破碎上清液(HLS)对大肠杆菌、嗜水气单胞菌、蜡状芽胞杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌活性、不同浓度HLS对抗菌活性的影响以及血清中抗菌活性的诱导作用。结果显示,只有HLS对大肠杆菌、嗜水气单胞菌表现出显著的抗菌活性,而血清对4种菌、HLS对蜡状芽胞杆菌和金黄色葡萄球菌均未表现出抗菌活性;随着HLS浓度的降低,大肠杆菌的细菌存活指数(SI)迅速上升,抗菌活性迅速下降,HLS浓度高低直接影响抗菌活性的强弱;通过注射灭活大肠杆菌,血清在1~24h内表现出抗菌活性的诱导作用,在6h时抗菌活性最强。     

酵母免疫多糖对受免斑点叉尾鲴免疫应答的增强作用

在饲料中添加定量的酵母免疫多糖，投喂注射接种了福尔马林灭活的嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）菌苗的斑点叉尾鲴（Ictalurus punctatus），28d后通过测定供试鱼的增重量、血清中凝集抗体效价、溶菌酶活性、谷丙转氨酶活性（SGPT）、血清总蛋白含量、白细胞吞噬活性以及活菌攻毒后的免疫保护率（RPS），探讨了酵母免疫多糖对受免斑点又尾鲴免疫应答的增强作用。结果表明，用添加200．0mg／（kg·d）酵母免疫多糖的饲料投喂受免斑点叉尾鲴，不仅可以使受免斑点叉尾鲴对灭活嗜水气单胞菌的免疫应答水平提高，增强抵抗嗜水气单胞菌人工感染的能力，而且还具有一定的促进生长和改善肝功能的作用。     

人工感染嗜水气单胞菌对日本鳗鲡血清酶活力的影响

为了解日本鳗鲡(Anguilla japonica)受嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)感染后血清酶活力的变化规律,将日本鳗鲡分为感染组和对照组,每组30尾,腹腔分别注射0.1 mL浓度为3×106CFU/mL的菌液和等量灭菌生理盐水。在注射后0、1、5、9、13、17、21、25、29、33 d从两组各取3尾日本鳗鲡,尾静脉取血,测定其酸性磷酸酶(ACP)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)活力的变化规律。结果显示:注射嗜水气单胞菌一段时间后,实验组鳗鲡的ACP和SOD的活力都显著高于对照组,且都在21 d时达到最高值,随后逐渐下降。结果表明:嗜水气单胞菌感染后,日本鳗鲡能够通过提高血清中ACP和SOD活力来提高机体对嗜水气单胞菌的免疫力,而对一氧化氮合酶的活力没有显著影响。     

酵母免疫多糖对受免斑点叉尾(鮰)免疫应答的增强作用

在饲料中添加定量的酵母免疫多糖,投喂注射接种了福尔马林灭活的嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)菌苗的斑点叉尾(鮰)(Ictalurus punctatus),28 d后通过测定供试鱼的增重量、血清中凝集抗体效价、溶菌酶活性、谷丙转氨酶活性(SGPT)、血清总蛋白含量、白细胞吞噬活性以及活菌攻毒后的免疫保护率(RPS),探讨了酵母免疫多糖对受免斑点叉尾(鮰) 免疫应答的增强作用.结果表明,用添加200.0 mg/(kg·d)酵母免疫多糖的饲料投喂受免斑点叉尾(鮰),不仅可以使受免斑点叉尾(鮰) 对灭活嗜水气单胞菌的免疫应答水平提高,增强抵抗嗜水气单胞菌人工感染的能力,而且还具有一定的促进生长和改善肝功能的作用.     

酵母免疫多糖对受免斑点叉尾免疫应答的增强作用

在饲料中添加定量的酵母免疫多糖,投喂注射接种了福尔马林灭活的嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)菌苗的斑点叉尾(Ictalurus punctatus),28 d后通过测定供试鱼的增重量、血清中凝集抗体效价、溶菌酶活性、谷丙转氨酶活性(SGPT)、血清总蛋白含量、白细胞吞噬活性以及活菌攻毒后的免疫保护率(RPS),探讨了酵母免疫多糖对受免斑点叉尾免疫应答的增强作用。结果表明,用添加200.0 mg/(kg.d)酵母免疫多糖的饲料投喂受免斑点叉尾,不仅可以使受免斑点叉尾对灭活嗜水气单胞菌的免疫应答水平提高,增强抵抗嗜水气单胞菌人工感染的能力,而且还具有一定的促进生长和改善肝功能的作用。     

影响枯草芽孢杆菌B115抗茵物质产生的条件

产生抗菌物质的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B115能较强地抑制鲫细菌性败血症病原嗜水气单胞菌(BSK-10)及其它水生动物的致病菌，对金黄色葡萄球菌也有抑制作用．测定了不同培养基(NYDA、BPY、LB)、通气量、pH、接种浓度、营养物质及氯化钠对B115的生长及抗菌物质产生的影响和抗菌物质的稳定性，结果显示：B115培养于BPY培养基抗菌物质抑制BSK—10的作用最强；250mL三角瓶加80mL培养液。最适抗菌物质的产生；0．5％～1％的接种量，抗菌物质产生最佳；培养基初始pH7时，抑菌效价最高为18mm；葡萄糖能诱导抗菌物质的产生，镁离子、氨离子及柠檬酸钠对抗菌物质的产生没有影响，而磷酸钾和氯化钠抑制抗菌物质的产生。抗菌物质对热不稳定，其抗菌活性随着煮沸时间的延长而减弱，高压灭菌后，抗菌活性完全消失：在4℃冰箱放置15d后．活性完全消失：搞菌物后对PH不敏感．但酸性环境能使它沉淀析出。     

牛蛙腹水病病原研究

从患腹水病的牛蛙腹水中分离到二株细菌，人工感染可使牛蛙、青蛙、银鲫和ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠致死，生理生化及Ｇ＋Ｃ含量测定属于气单胞菌属的嗜水气单胞菌。该菌与本地分离的出血性败血症菌株间的交叉凝集反应小于１：４０。     

背角无齿蚌血清的抑菌活性

对２０种细菌生长的影响试验结果表明，背角无齿蚌血清对嗜水气单胞菌、副溶血性弧菌、类志贺邻单胞菌、枯草杆菌、蜡样芽孢杆菌等１２种细菌的生长具不同程度的抑制作用；而对大肠杆菌、苏云金芽孢杆菌、灵菌、金黄色葡萄球菌等８种细菌无生长抑制作用。背角无齿蚌血清对嗜水气单胞菌生长的抑制作用强弱具有个体差异，抑制强度与血清的加入量直接相关，而偏高的温度会使血清的抗菌能力下降。     

投喂阿维拉霉素对鲤免疫应答的影响

将阿维拉霉素按照一定的浓度添加到饲料中,投喂经注射接种福尔马林灭活的嗜水气单胞菌(Aerom onashydrophila)菌苗的鲤,于免疫后的第7 d、14 d、21 d、28 d和35 d检测供试鲤血液中的白细胞吞噬活性、血清中溶菌酶活性、抗体效价、补体C3含量及免疫保护率(RPS),探讨了阿维拉霉素对受免鲤免疫应答的影响。结果表明,饲料中添加阿维拉霉素(4 mg/kg和8 mg/kg),投喂较长时间(≥28 d)会降低受免鲤的血液白细胞吞噬活性、血清中的溶菌酶活性和抗体效价,减少受免鲤血清中补体C3的含量,减弱鲤抵抗嗜水气单胞菌人工感染的能力,每公斤饲料中添加8 mg的阿维拉霉素其免疫抑制作用更强。     

黄连素对3种水产动物致病菌的抑制作用研究

文章研究了黄连素对副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）、溶藻弧菌（V.alginolyticus）和嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）等3种致病菌的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）,检测了黄连素对病原菌菌体形态和生长曲线的影响,并以此解析黄连素对这3种致病菌的抑制特点和抑菌机制.结果显示,黄连素对副溶血弧菌、溶藻弧菌、嗜水气单胞菌的MIC和MBC分别为0.391 mg·mL^-1和0.391 mg·mL^-1、0.391 mg·mL^-1和0.781 mg·mL^-1、0.781 mg·mL^-1和1.563 mg·mL^-1,说明黄连素对3种致病菌均有明显的抑制作用,其中对副溶血弧菌的抑制效果最佳.同步结果显示,1.00 mg·mL^-1黄连素不仅会严重破坏致病菌的菌体形态,而且使致病菌的迟缓期延长2～7h,这暗示黄连素可能通过影响致病菌的细胞结构和生长繁殖来达到抑菌的效果.由此可见,黄连素在防治水产类细菌性疾病上有很好的应用潜力.     

牙鲆不同组织抗菌肽的提取及部分性质检测

以新鲜的牙鲆为试验材料,用100%丙酮和90%甲醇配制的提取液,从牙鲆的鳃、皮肤、肝、肾组织中提取抗菌肽,并对牙鲆抗菌肽粗提物进行部分性质检测。抑菌试验证明,牙鲆各组织提取物对大肠杆菌、鳗弧菌有较强的抑制作用,并且不同组织的抑制作用有所差别,而对金黄色葡萄球菌的抑制效果不明显。提取物经过加热处理后,抑菌圈略有变小。相反,经过胰蛋白酶处理后,抑菌圈略有变大。牙鲆的多种组织中含有对细菌有抑制作用的抗菌肽。     

pH和色谱柱对日本鳗鲡肝脏抗菌肽分离纯化效果的影响及抗菌活性检测

为了能够快捷地分离纯化出单一的抗菌肽,实验采用不同pH值(离子交换流动相pH3.0、4.0、5.0;反相液相层析流动相pH 2.0、4.5、7.0)缓冲液,不同色谱柱(离子交换和凝胶过滤层析柱分别与反相液相层析柱)联用对日本鳗鲡肝脏抗菌肽分离纯化效果进行了比较,并分析了琼脂板扩散法和微孔液体培养法检测抗菌活性的优缺点.结果显示:pH 4.0缓冲液为最佳离子交换流动相,蛋白提取率为16.43％,得到2个洗脱峰;反相液相层析3种pH缓冲液分离效果均不理想,凝胶过滤层析柱与反相液相层析柱联用能明显改善日本鳗鲡肝脏抗菌肽分离纯化效果,洗脱峰数量较多,峰形单一且尖锐狭窄,基线平而低.琼脂板扩散法检测抗菌活性操作简单,实验结果直观,但所需蛋白量较多,可用于蛋白粗提物抗菌活性的检测;微孔液体培养法检测抗菌活性灵敏,所需蛋白较少,可用于后期色谱分离纯化蛋白抗菌活性的检测.     

Antibacterial activity of sponge extracts against fish pathogens

The antibacterial properties of organic extracts of 15 species of sponges collected from a depth of 30 m in the coastal waters off Gopalpur (Bay of Bengal) were tested against six virulent fish pathogens. The extracts of 11 sponges showed species‐specific antibacterial activity. Four extracts exhibited broad antibacterial activity against three or more species. Epipolasis topsenti was active against all the six pathogens and showed the lowest minimum inhibitory concentration (MIC) value of 12.5 μg against three pathogens. Chromatographic fractionation of extracts yielded enriched fractions with increased activity and lower MIC values.     

乳酸杆菌L1对致病弧菌的抑制作用

以致病弧菌T1、T2为检测菌,采用平板抑菌圈检测法,研究乳酸杆菌L1及其代谢产物的抑菌能力。结果表明:L1发酵上清液对两种弧菌的抑制效果和发酵液对弧菌的抑菌作用相似,即对弧菌T1的抑制作用强于T2;L1 发酵液对弧菌T1、T2的抑制能力强于上清液,表明乳酸杆菌及其代谢物质对弧菌具有协同抑制作用;L1的发酵液经3倍稀释仍对弧菌T1有抑制作用;乳酸杆菌L1生长不同时期的代谢产物对弧菌的抑菌活性不同,代谢产物的抑菌能力在衰退期>稳定期>生长期;L1的发酵液经沸水浴处理15 min其抑菌活性不变,表明抑菌代谢物质具有较好的耐热性。     

健康养殖南美白对虾肠道细菌的抗菌活性

用双层琼脂扩散法检测从健康养殖南美白对虾肠道内分离出的111株菌对8株病原菌的抗菌活性。结果表明:111株菌对白假丝酵母菌,非01群霍乱弧菌,嗜水气单胞菌指示菌无抗菌活性,48.6%的菌株对余下的5株指示菌有抗菌活性,其中气单胞菌属和发光杆菌属对荧光假单胞菌与金黄色葡萄球菌的抑制性最强。各菌属中以气单胞菌属,发光杆菌属的抗菌谱最广,弧菌属、肠杆菌科、黄单胞菌属、芽孢杆菌属、小球菌属次之。土壤杆菌属、棒状杆菌属、黄杆菌属、产碱杆菌属、假单胞菌属和色杆菌属则没有抗菌活性。     

Evaluating bioencapsulation of florfenicol in rotifers (Brachionus plicatilis)

The rotifer Brachionus plicatilis is one of the most important live‐feed organisms used in the larval culture of marine fish. Bioencapsulation of florfenicol in rotifers was investigated by delivering it directly to the organisms as particles and the doses ranged from 50 to 1000 mg L^?1. Analysis of the florfenicol concentrations in rotifers was performed using high‐performance liquid chromatography. The uptake increased with the dose and the enrichment time, and the highest concentration achieved in this study, 1.25 ng rotifer^?1, was obtained using a dose of 1000 mg L^?1 and 150 min of enrichment. The optimal time for satisfactory enrichment of rotifers with florfenicol was found to be dose dependent and ranged from 30 to 120 min for doses between 400 and 800 mg L^?1. The parameters affecting the concentrations achieved in rotifers were the size of the florfenicol particles, enrichment time and dose.     

Effect of Chitosan and Garlic Essential Oil on Microbiological and Biochemical Changes that Affect Quality in Grass Carp (Ctenopharyngodon idellus) Fillets During Storage at 4°C

Solutions of chitosan (2%, w/v), garlic essential oil (5%, v/v), and their combination (2%, w/v chitosan +5%, v/v garlic essential oil) were applied to the surface of grass carp fillets. Subsequently, sensory, microbiological analyses (total viable count (TVC), Pseudomonas spp., Aeromonas spp., and H₂S-producing bacteria), and physicochemical changes (total volatile basic nitrogen (TVB-N), thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), and centrifugation loss) of grass carp fillets were evaluated over a 16-day storage at 4 ± 1°C. The treated samples resulted in significantly (p < 0.05) higher overall acceptance scores than the control from day 8. The TVC of grass carp fillets was reduced from the initial level (4.0 log CFU/g) to 2–3 log CFU/g when the fillets were treated with either garlic essential oil or chitosan solution. After 4 days of storage, the Pseudomonas spp. counts in the chitosan-treated samples were significantly lower (p < 0.05) than the counts in control and samples treated with garlic essential oil. A lag phase of 6 days for the counts of H₂S-producing bacteria of fish fillets that were treated with chitosan or the combination solution was observed. The combination of chitosan with garlic essential oil did not show synergistic effects, although it displayed a higher degree of antimicrobial efficacy with respect to the spoiled bacteria. However, the combination of chitosan with garlic essential oil was the most effective at inhibiting the formation of TVB-N. Samples that were treated with garlic essential oil displayed the highest TBARS levels on days 4 and 6 (p < 0.05).     

喹烯酮在水产养殖中的有效性及安全性研究进展

喹烯酮是我国自行研制的一类新兽药,具有高效、安全、低毒的特点,被广泛地使用在畜禽中。它对水产动物也具有抗菌促生长的作用,因此在水产动物中的研究也渐渐深入。本文对喹烯酮的作用机理、毒理学研究、药代动力学、检测方法以及在水产动物中的研究展望作一综述。     

47种中草药体外抑杀嗜水气单胞菌的药效研究

用琼脂扩散法(打孔法)测定了石榴皮等47种中草药对嗜水气单胞菌的抑制作用,并用二倍稀释法测定28种有抑菌作用的中草药对嗜水气单胞菌的最小抑菌质量浓度和最小杀菌质量浓度。结果显示石榴皮的抑菌和杀菌效果最好,其抑菌圈直径超过20mm,最小抑菌质量浓度和最小杀菌质量浓度均为7.81mg/mL;赤芍次之。虎杖等26种中草药有一定的抑菌和杀菌效果;陈皮等19种中草药无抑菌作用。石榴皮对嗜水气单胞菌的体外抑制效果最好。