鲈α-珠蛋白基因的克隆和序列分析

从鲈头肾cDNA文库中随机挑取噬菌斑,作为模板,以λZAPExpress载体两端含有的T3和T7启动子序列设计引物,用PCR方法扩增插入片断,从中克隆到血红蛋白α亚基的cDNA (Genebank登录号为EU588586).该cDNA包含435 bp的开放阅读框,编码144个氨基酸.计算其可能的分子量为15864.51,PI为8.83.序列比较分析结果表明,在近端与血红素结合的组氨酸高度保守,与大菱鲆α类珠蛋白同源性最高,达83.3%,与金鲈和大西洋鳕的同源性分别为72.7%和67.8%,与非洲爪蟾α-珠蛋白同源性最低,为2339.4%.通过构建系统进化树,对鲈α-珠蛋白的系统演化进行了分析,并对其二级和三维结构进行了预测.     

鱼类粘液细胞研究进展

鱼类粘液细胞(ｍｕｃｏｕｓｃｅｌｌｓ)是普遍存在于鱼类上皮中的一种腺体细胞,主要分布在鱼的皮肤、鳃及消化道的上皮中,能分泌大量粘液。粘液中含有多种活性物质,如粘多糖、糖蛋白、免疫球蛋白及各种水解性酶类等,对鱼的许多生理功能有重要影响。对粘液细胞进行深入研究,不仅有助于对鱼类生长、发育以及自我保护等方面的一些基本理论问题的理解,而且在鱼类的养殖和病害防治中也具有重要的实践意义。有关鱼类粘液细胞的研究,国外开展得较早,也较广泛,已对多种鱼类的粘液细胞进行了研究。但是,国内有关这方面的研究却很少。本文结合本实验室…     

中国荷斯坦牛κ-酪蛋白基因第4和第5外显子多态性与泌乳性状的关联分析

 【目的】研究中国荷斯坦牛κ-酪蛋白基因第4和第5外显子多态性与泌乳性状的关联性,为培育高乳蛋白及高乳脂率奶牛提供参考依据。【方法】采用DNA测序、PCR-RFLP和CRS-PCR技术,对544头中国荷斯坦牛κ-酪蛋白基因的外显子4和5序列进行研究,通过SHEsis 软件和PHASE软件进行配对连锁不平衡分析和单倍型分析。【结果】发现6个新的SNPs,包括外显子5上A12907G、G12950A、C12989T、A13028G、T12980C共5个SNP位点,证实前4个位点紧密连锁;外显子4上A10996T共1个SNP位点。单位点基因型与泌乳性状关联分析表明,A10996T突变位点的TT和AT基因型个体乳脂率显著高于AA基因型个体(P＜0.05);T12980C突变位点的TC和CC基因型个体乳脂率、乳蛋白率分别极显著(P＜0.01)、显著(P＜0.05)高于TT基因型个体;紧密连锁的4个突变位点的DE基因型个体乳脂率极显著高于DD基因型个体(P＜0.01)。与泌乳性状的关联分析表明,共构建出7种单倍型,发现16种单倍型组合;其中H6H6单倍型组合个体乳脂率最高,H1H4次之;H1H4单倍型组合个体乳蛋白率最高;H5H6单倍型组合个体乳蛋白率及乳脂率最低。【结论】H1H4单倍型组合在乳蛋白率和乳脂率方面为有利单倍型组合,可作为选择高乳蛋白高乳脂率牛群的分子标记。     

黄鳝血清、肠黏液免疫球蛋白的分离纯化及部分特性分析

采用硫酸铵盐析、SephadexG-200凝胶层析等方法从黄鳝血清和肠道黏液中分离纯化出黄鳝血清和黄鳝肠黏液免疫球蛋白。SDS—PAGE分析表明，二者的理化性质相同；经β-巯基乙醇处理后解离形成重链和轻链两个亚单位，分子量分别为74kD和29kD。试验结果表明，黄鳝血清和肠黏液中存在免疫球蛋白，二者具有相同的层析和SDS-PAGE电泳特性。     

大豆中GmRAD与GmDIV基因的in silico鉴定及表达分析

RAD与DIV属于MYB转录因子家族成员,在金鱼草研究中发现它们对花对称性的形成起着重要作用。本研究利用全基因组信息鉴定了大豆中的GmRAD与GmDIV基因,分析了其蛋白的理化性质、二级结构,基因结构与其在染色体上的分布,并对其系统发生和表达方式进行了研究。研究表明:大豆中存在5个GmRAD基因和5个GmDIV基因,它们分别属于MYB家族的R1和R2R3类,分布在大豆的9条染色体上;进化分析显示GmRAD和GmDIV基因具有不同的进化历程,GmDIV比GmRAD基因更趋于单元发生;表达分析证明,GmDIV和GmRAD成员具有不同的表达模式,其中GmRAD3和GmRAD5以及GmDIV1、GmDIV3、GmDIV4和GmDIV5在花组织中有较高的表达。     

百宜杀药敏及最低抑菌浓度试验

百宜杀（Benesept）,化学名：聚烯烃基卡巴嘧啶（单胍类）,为阳离子型表面活性剂,对环境及水体中的多种细菌、真菌、病毒具有较强的杀灭作用,且该药无毒、无刺激、无腐蚀性、可自然降解,药效持久。本试验以药物检测标准质控菌株和药敏检验标准质控菌株为质控参照,以致病性嗜水气单胞菌、河弧菌和柱状黄杆菌G_4为试验菌株,采用纸片扩散法进行药物敏感性试验并与同等条件下的戊二醛、聚维酮碘、新洁尔灭对照;采用倍比稀释法进行最低抑菌浓度（MIC）试验,探索该药对水产致病菌的抑杀效果,以期早日推向水产病害防治领域。     

中国荷斯坦牛κ-酪蛋白基因两SNP位点基因型组合对产奶性状的影响

研究κ-酪蛋白基因单核苷酸多态性及其组合与中国荷斯坦牛泌乳性状的关联性,为进一步加快高乳蛋白及高乳脂率奶牛育种进程提供参考依据。采用PCR-RFLP、CRS-PCR和DNA测序技术,对435头中国荷斯坦牛的κ-酪蛋白基因的外显子4和5上两个SNP位点进行了研究,计算其基因频率和基因型频率,确定其基因型组合,并对其基因型和基因型组合与泌乳性状进行了关联分析。结果发现,在435头试验牛群中,共有8种基因型组合。单个SNP位点关联分析表明：T10996A突变位点3种基因型间TA基因型个体乳脂率极显著高于AA基因型个体(P＜0.01), TA基因型个体乳蛋白率显著高于AA基因型个体(P＜0.05)。T12980C突变位点的3种基因型间TC基因型个体乳脂率极显著高于TT基因型个体(P＜0.01),TC和CC基因型个体乳蛋白率显著高于TT基因型个体(P＜0.05)。T10996A/T12980C两种基因型组合分析中,在乳脂率上,TTCC基因型组合个体最高,TATC基因型组合个体位居第三位;在乳蛋白率上,TATC基因型组合个体显著高于AATT基因型组合个体(P＜0.05)。【结论】κ-酪蛋白基因不同基因型和基因型组合与中国荷斯坦牛乳脂率和乳蛋白率存在相关性,但与产奶量和脂蛋白比不相关。     

荷斯坦牛酪蛋白基因两SNPs位点基因型组合对产奶性状的影响

采用PCR-RFLP、CRS-PCR和DNA测序技术,对435头荷斯坦牛的酪蛋白基因的外显子4和5上2个单核苷酸多态性(SNP)位点进行了研究.结果发现,在435头牛群中,共有8种基因型组合.单个SNP位点关联分析表明:T10996A突变位点3种基因型间TA基因型个体乳脂率极显著高于AA基因型个体(P<0.01),TA基因型个体乳蛋白率显著高于AA基因型个体(P<0.05).T12980C突变位点的3种基因型间TC基因型个体乳脂率极显著高于TT基因型个体(P<0.01),TC和CC基因型个体乳蛋白率显著高于TT基因型个体(P<0.05).T10996A/T12980C两种基因型组合分析中,在乳脂率上,TTCC基因型组合个体最高,TATC基因型组合个体位居第三位;在乳蛋白率上,TATC基因型组合个体显著高于AATT基因型组合个体(P<0.05).酪蛋白基因不同基因型和基因型组合与荷斯坦牛乳脂率和乳蛋白率存在相关性,但与产奶量和脂蛋白比不相关.     

鱼类免疫球蛋白多样性产生机制的研究进展

免疫球蛋白（immunoglobulin）,在B淋巴细胞中合成,具有高特异性和高亲和性的特点.哺乳动物中,不同免疫球蛋白基因片段被连接在一起形成了编码重链和轻链的成熟基因,经过一系列复杂事件,最终产生抗体的组织特异性表达,使每一个B细胞克隆都具有特定的专一性.鱼类是低等的脊椎动物，其抗体的特异性和亲和性与哺乳动物相比都是有限的。     

鲤肠粘液与血清中免疫球蛋白的比较研究

鱼类肠道中存在大量粘液，而其中所含的免疫球蛋白无疑对体内以血清ＩｇＭ为中心的免疫系统是一个补充，在鱼类免疫中起着重要的作用。目前人们已从多种鱼类的肠粘液中分离提取了免疫球蛋白［１，２］，但至今未见对鲤肠粘液中免疫球蛋白研究的报道。由于鲤是我国的主要淡水养殖鱼类之一，对其肠粘液与血清中免疫球蛋白进行比较研究，不仅有助于全面了解鱼类的特异性体液免疫机制，而且将会对鱼类病害口服疫苗的免疫防治提供重要理论依据。收稿日期：１９９８－０７－２７１　材料与方法１．１　实验材料鲤２０尾，每尾重约０．５ｋｇ，取自…