体外诱导日本蟳精子顶体反应的形态变化与诱导条件研究

用光镜和透射电镜观察了日本蟳精子顶体反应过程的形态变化,采用正交实验法分析了体外诱导精子顶体反应的最佳诱导条件,并对比了离子载体A23187与卵水的诱导效果以及取自雄蟹贮精囊的精子顶体反应诱导情况。日本蟳精子的顶体反应过程可分为4个阶段:第Ⅰ阶段为头帽隆起;第Ⅱ阶段为头帽破裂,顶体囊外翻,辐射臂收缩;第Ⅲ阶段为穿孔器前伸,顶体颗粒聚集于顶体管后段;第Ⅳ阶段为穿孔器断裂,顶体囊外层脱落,顶体丝形成,顶体颗粒向外释放,核体积缩小。取自雌蟹纳精囊的精子,在pH为8.0、CaCl2浓度为0.30%的人工海水中,用离子载体A23187(60μg/mL)诱导50min,可以得到最大的精子顶体反应率(80.41%),而经卵水诱导得到的顶体反应率为73.87%。用所得出的最佳诱导条件对取自雄蟹贮精囊的精子进行处理,可得到64.37%的顶体反应率。     

三疣梭子蟹精子活力评价方法的研究

采用染色法和钙离子载体A23187诱导精子顶体反应法,对三疣梭子蟹精子的活力进行评价研究.结果表明,采用台盼蓝染色无法清晰辨别死、活精子.采用曙红B染色,精子分别呈现不同的染色特征:活精子无色,细胞边界清晰可辨,在光学显微镜下观察可见顶体中央突起的圆锥状结构和辐射臂;死精子细胞边界有稍许模糊,核杯和顶体均着色.最适的曙红B浓度和染色时间分别为2%和2 min.钙离子载体.A23187诱导精子顶体反应的结果显示:在诱导时间和A23187浓度分别为50 min和30μg·mL-1时,校正顶体反应率达到(92.73±2.43)%.对这两种活力检测方法的比较分析显示,曙红B染色法和钙离子载体A23187诱导精子顶体反应法的活力检测值与样品理论值呈显著正相关(P<0.01),他们二者之间亦呈显著正相关(P<0.01),说明这两种方法均可用于精子活力检测,其结果具有可比性.     

低温及胰酶加Ca2+对中华绒螯蟹精子顶体反应的诱导

研究了不同温度及不同Ca2 浓度提取缓冲液加0.1%胰酶(w/v)对中华绒螯蟹Eriocheirsinensis精子顶体反应发生的诱导效果。结果表明,-20、-80和-196℃处理精子不同时间和加0.1%胰酶的含Ca2 的人工海水作精子提取缓冲液提取精子均可有效诱导精子发生顶体反应;甚至在不含Ca2 的精子悬液中,冷冻精子也能大量发生顶体反应;而未处理的对照组和4℃处理的精子无此现象,不同的Ca2 浓度梯度对精子顶体反应率的影响没有明显的差异性;不含Ca2 的人工海水中的胰酶不能诱导顶体反应。     

河南华溪蟹生殖调控分子VASA的原核表达、抗体制备及免疫鉴定

为了研究生殖调控分子VASA在河南华溪蟹性腺发育过程中的表达模式和功能,本研究制备了VASA蛋白特异的多克隆抗体。选取河南华溪蟹vasa基因813 bp的特异区段,克隆到p ET32a载体,构建了原核表达载体p ET32a-Shvasa,转化至大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达和SDS-PAGE检测。结果显示,47 ku的VASA融合蛋白在菌液上清液中大量存在。VASA融合蛋白经Ni-NTA His-Bind亲和层析柱分离纯化后,免疫新西兰大白兔,制备了河南华溪蟹VASA蛋白的多克隆抗体。ELISA检测显示,VASA蛋白多克隆抗体的效价高达1.0×105。进一步通过免疫吸附实验和Western blot方法鉴定抗体特异性,研究表明,获得的多克隆抗体不仅能识别VASA融合蛋白,而且能特异识别河南华溪蟹卵巢中的天然VASA蛋白。研究为鉴定河南华溪蟹及其他蟹类生殖细胞提供了有效手段,为进一步解析十足目动物VASA蛋白的功能提供了分子基础。     

摘除眼柄对河南华溪蟹蜕皮激素与几丁质酶含量和β-NAGase活性的影响

为探索摘除眼柄对河南华溪蟹蜕皮机制的影响,采用灼伤挤压法摘除眼柄后,运用ELISA技术检测了河南华溪蟹血淋巴中蜕皮激素的含量和表皮组织中几丁质酶的含量,同时用比色法测定了表皮中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(β-NAGase)的活性。结果显示,摘除眼柄后河南华溪蟹血淋巴中蜕皮激素的含量出现先升高后下降的总趋势,在摘除眼柄96 h时,血淋巴中蜕皮激素含量上升到最大值[♂:(23.25±4.56)ng/L;♀:(35.75±7.15)ng/L]。表皮中几丁质酶的含量在摘除眼柄后亦出现先升高后下降的变化趋势,在摘除眼柄48 h达到最大[♂:(16.29±3.91)ng/L;♀:(30.49±5.28)ng/L],到120 h仍显著高于对照组。表皮中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(β-NAGase)的活性在摘除眼柄后持续升高,在144 h时达到最大[♂:(400.44±21.00)U/g;♀:(216.94±23.97)U/g],后逐渐下降,但依旧高于对照组。研究推测,摘除眼柄通过增加蜕皮激素含量、几丁质酶的含量和β-NAGase的活性来促进河南华溪蟹蜕皮。实验将为进一步研究甲壳动物蜕皮生长的调控机制提供新的理论基础。     

湖泊和池塘养殖环境对中华绒螯蟹组织中乳酸和活性氧含量的影响

比较了湖泊和池塘养殖环境对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)组织中乳酸和活性氧含量的影响。结果显示:性腺、肝脏和肌肉组织中的乳酸含量,阳澄湖、太湖养殖蟹显著低于同水系池塘养殖蟹、特级蟹显著低于个体小的等外品蟹、雄蟹低于雌蟹、性腺和肝脏低于肌肉。9—11月份,湖养蟹组织中的乳酸含量较塘养蟹更早、更加快速地降低。肌肉组织中活性氧(ROS)含量测定显示,特级蟹稳定地低于等外品雌蟹,雄蟹低于相同养殖环境中同规格雌蟹。结果表明,乳酸和ROS含量或机体抗氧化能力的指标对于阳澄湖大闸蟹的品质和呈味特色是一个值得关注和深入研究的指标。     

长江、黄河和辽河种群中华绒螯蟹雄体成蟹可食组织营养组成的比较

采用养殖实验和生化分析方法,在相似的池塘条件下将辽河、黄河和长江种群中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)扣蟹养殖至成蟹,比较了三群体雄体成蟹的性腺指数、肝胰腺指数、出肉率、总可食率和肥满度,进一步测定和比较了可食组织中的常规生化成分、脂肪酸及氨基酸,旨在评价三种群雄体成蟹的营养品质和可食率。研究结果显示:(1)黄河种群中华绒螯蟹的性腺指数略高于其他两种群蟹,长江种群中华绒螯蟹的肝胰腺指数、出肉率、总可食率和肥满度最高,但均无显著差异(P0.05)。(2)辽河种群性腺中蛋白质含量显著高于其他两种群(P0.05),三群体性腺中水分、脂肪和灰分含量差异不显著(P0.05);长江种群肝胰腺的水分含量最低,但其蛋白质、脂肪和灰分含量高于其他两种群;黄河种群肌肉中脂肪含量显著低于辽河种群的含量,而其灰分含量显著高于黄河种群(P0.05),水分和蛋白质含量无显著差异(P0.05)。(3)三种群性腺中主要多不饱和脂肪酸(PUFA)含量相近,长江种群性腺中∑PUFA、∑n6PUFA和总高度不饱和脂肪酸(∑HUFA)含量最高;三种群肝胰腺中各PUFA、∑PUFA和∑HUFA含量无显著差异(P0.05);三种群肌肉中C_(18:3n3)(LNA)和C_(20:5n3)(EPA)的含量存在显著差异,且黄河种群的这两种脂肪酸含量都显著高于辽河种群(P0.05)。(4)辽河种群性腺中的蛋氨酸和半胱氨酸含量显著高于其他两种群(P0.05),且辽河种群的总必需氨基酸(EAA)、总非必需氨基酸(NEAA)和总氨基酸(TAA)含量高于黄河和长江种群;长江种群雄体肌肉中的EAA、总EAA、总NEAA、TAA含量最高。(5)辽河种群性腺中存在3种限制性氨基酸(赖氨酸、缬氨酸和色氨酸),且其平均必需氨基酸分(EAAS)最低;三种群肌肉中均无限制性氨基酸,辽河水系EAAS仍然最低。综上,不同种群中华绒螯蟹性腺发育和营养成分具有一定的差异,这可能与其发育阶段和遗传因素有关。     

中国北方野生雄绒螯蟹成蟹可食率和生化成分分析

比较了2017年10月由我国绥芬河、图们江和辽河采集的质量为80~160 g的野生雄绒螯蟹成蟹的组织系数、总可食率、可食组织中一般化学组成及脂肪酸组成。试验结果显示:(1)3个种群雄体性腺指数、肝胰腺指数和出肉率差异显著,但3个种群总可食率无显著差异(P>0.05)。(2)就性腺而言,图们江种群水分含量最高,绥芬河种群脂肪含量最高,辽河种群蛋白质和灰分含量最高(P<0.05);辽河种群肝胰腺水分含量显著高于其他2个种群,但灰分含量显著低于其他2个种群,绥芬河种群肝胰腺中的脂肪含量最高(P<0.05);绥芬河种群肌肉的水分最低,蛋白质、脂肪和灰分含量最高,图们江种群肌肉中的脂肪含量最低,辽河种群肌肉的蛋白质和灰分含量最低。(3)绥芬河种群雄体性腺总长链多不饱和脂肪酸含量最高,图们江种群绒螯蟹肝胰腺和肌肉中总长链多不饱和脂肪酸含量最低(P<0.05);辽河种群的可食组织中n-3/n-6的值最低,图们江种群可食组织n-3/n-6的值最高。综上,绥芬河、图们江和辽河3个种群绒螯蟹野生雄体的总可食率无显著差异,但是可食部位的常规生化和脂肪酸含量存在显著差异。     

饲料蛋白质水平对拟穴青蟹幼蟹生长性能、体成分和消化酶活性的影响

用蛋白质水平分别为31.45%,36.37%,41.55%,46.13%,51.72%和56.86%的6种等能饲料,对初始体重为(11.86?0.11)mg的拟穴青蟹(Scylla paramamosain)幼蟹进行为期3周的养殖实验,考察饲料蛋白质水平对拟穴青蟹幼蟹生长性能、体成分以及消化酶活性的影响,以期获得拟穴青蟹幼蟹饲料蛋白质的适宜添加量。结果表明,饲料蛋白质水平对拟穴青蟹幼蟹的成活率影响不显著(P0.05);幼蟹的增重率和特定生长率随饲料蛋白质水平的提高先显著升高(P0.05)后稍有下降,最大值出现在蛋白质水平为51.72%的实验组;随着饲料蛋白质水平的提高,幼蟹粗蛋白质含量显著升高(P0.05)后趋于稳定,粗脂肪含量显著降低(P0.05),灰分含量先显著升高(P0.05)后显著降低(P0.05),水分含量则没有显著变化(P0.05);随着饲料蛋白质水平的提高,幼蟹蛋白酶活性显著升高(P0.05),淀粉酶活性显著降低(P0.05),各组脂肪酶活性也有显著差异(P0.05),但没有明显的变化规律。本研究条件下,饲料蛋白质水平在41.55%~56.86%,拟穴青蟹幼蟹均表现出较好的生长率,增重率和蛋白质水平的回归分析表明,幼蟹饲料蛋白质适宜水平为49.03%。     

[05]早熟和正常中华绒螯蟹精子形态、顶体酶活力和抗氧化能力的比较研究

与正常雄性中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)进行了比较,结果表明,早熟雄性蟹生精小管的细胞构成明显不同.早熟雄性蟹精巢生精小管主要管型为精母细胞型,而正常雄蟹管型以精原细胞加精母细胞型为主;早熟雄蟹性腺发育速度明显快于正常雄蟹;正常雄蟹的牛精小管和精荚横截面积分别为(0.041±0.007)mm2和(0.080±0.010)mm2,而早熟雄蟹则分别下降为(0.026±0.005)mm2和(0.044±0.005)mm2,两组间存在极显著差异(P<0.01);其次,早熟雄蟹与正常雄蟹各期精细胞大小差异较大,表现为正常蟹精原细胞、精母细胞和精子均大于早熟蟹;早熟蟹的精子成活率仅为(73.6±3.5)%,而正常蟹则为(84.7±2.1)%;两组蟹精子顶体酶活力差异显著(P<0.05),早熟蟹精于顶体酶活力仅为(62.8±5.50)μIU/106,约是正常蟹的70%,正常蟹高达(79.6±9.80)μIU/106;早熟蟹精巢内超氧化物歧化酶、总抗氧化能力数值均显著低于正常蟹(P<0.05),而两组蟹精巢内丙二醛(MDA)含量无显著差异(P>0.05).虽然早熟蟹性腺发育速度快于正常蟹,但其各期精子形态、精子密度与成活率、顶体酶活力和抗氧化能力等指标均远不及正常蟹.     

Greenlip abalone (Haliotis laevigata Donovan, 1808) sperm cryopreservation using a programmable freezing technique and testing the addition of amino acid and vitamin

This study investigated factors key to the development of sperm cryopreservation in the greenlip abalone Haliotis laevigata using a programmable freezing technique, including (1) permeable cryoprotectant agent (CPA) selection; (2) cooling rate; (3) endpoint temperature; (4) thawing temperature; (5) sperm to egg ratio and (6) sugar, vitamin and amino acid supplementation, using sperm motility, fertilization rate, plasma membrane integrity, mitochondrial membrane potential or acrosome integrity as quality assessment indicators. Results showed that among the permeable CPAs evaluated, 10% dimethyl sulfoxide was the most suitable for greenlip abalone sperm cryopreservation. The highest post‐thaw sperm motility was achieved with the sperm being frozen at a cooling rate of ?5°C min^?1 to ?30°C from 0°C and thawed and recovered in 40°C and 18°C seawater baths respectively. The addition of sugars in 10% dimethyl sulfoxide did not significantly improve the post‐thaw sperm motility and fertilization rate. The addition of 0.6% glycine, 0.2% taurine or 0.02% L‐ascorbic acid, on the other hand, significantly improved the post‐thaw sperm motility. However, only the addition of 0.6% glycine improved the post‐thaw sperm fertilization rate, which was further confirmed by the improvement of the post‐thaw sperm mitochondrial membrane potential and acrosome integrity through flow cytometry analysis.     

Cryopreservation of strip spawned sperm using non‐programmable freezing technique in the blue mussel Mytilus galloprovincialis

In this study, a non‐programmable freezing technique has been developed with the strip spawned blue mussel (Mytilus galloprovincialis) sperm. The key parameters optimized including (1) cryoprotectant agents (CPAs); (2) cooling temperature; (3) thawing temperature; (4) sugar and amino acid supplementation and (5) sperm to egg ratio. The fertilization rate and/or integrity of plasma membrane and acrosome were used as sperm quality assessment indicators. The highest post‐thaw sperm fertilization rate of 95% was achieved, when sperm were cryopreservated in 8% dimethyl sulfoxide at 7.8 cm above the liquid nitrogen surface and thawed in a 60°C seawater bath. The addition of glucose, sucrose or trehalose in dimethyl sulfoxide did not, whereas 0.8% glycine did significantly improve the post‐thaw sperm fertilization rates. The fluorescent evaluation has demonstrated that the addition of glycine significantly improved the post‐thaw sperm acrosome integrity, revealing a positive role of glycine in the improvement of post‐thaw sperm quality in blue mussels.     

急性胁迫对团头鲂铁稳态及其相关基因表达的影响

为研究急性应激反应对鱼体铁含量及铁稳态相关基因的影响,以团头鲂为研究对象,通过腹腔注射皮质醇来模拟急性应激,在注射后不同时间点对团头鲂的血液、肠和肝脏进行取样,采用分光光度法测定血清和肝脏中的铁含量,采用实时荧光定量PCR对铁稳态相关基因的表达量进行检测。结果显示,皮质醇注射后血浆皮质醇显著升高,血浆中铁含量在4、8、10和12 h显著高于对照组,而肝脏中的铁含量在4、8、10和12 h时显著低于对照组。团头鲂肝脏中铁调素(hep)基因表达量显著增加,并分别在8和10 h达最大值,随后有所下降。肠道和肝脏中转铁蛋白基因(Tf)的表达量均呈先升高后下降的趋势。研究表明,急性应激下机体细胞内储存铁大量释放到体液中,造成病原感染和体内增殖风险增加;hep及Tf上调表达降低细胞内铁释放和促进体液铁向胞内蓄积,在鱼体内铁稳态的调控和固有免疫反应中发挥着重要的作用。     

肌醇对嗜水气单胞菌致生长期草鱼头肾和脾脏氧化损伤的保护作用

本实验探索了肌醇对嗜水气单胞菌致生长期草鱼头肾和脾脏氧化损伤的保护作用。实验选取平均体质量（221.83±0.84） g的草鱼540尾，随机分为6组，每组3个重复，分别饲喂含不同水平肌醇[27.0（基础饲料组，未添加肌醇）、137.9、286.8、438.6、587.7和737.3 mg/kg]的饲料10周。随后经腹腔注射嗜水气单胞菌进行14 d攻毒实验。结果显示，嗜水气单胞菌注射后，与基础饲料（未添加肌醇）组相比，饲料中适宜水平肌醇组生长期草鱼头肾和脾脏活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）和蛋白质羰基（PC）含量显著降低，而超氧化物歧化酶（SOD/CuZn-SOD和MnSOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx/GPx1a、GPx1b、GPx4a和GPx4b）、谷胱甘肽S-转移酶（GST/GSTP1、GSTP2、GSTO1和GSTO2）和谷胱甘肽还原酶（GR）活性及mRNA水平，谷胱甘肽（GSH）含量显著提高。此外，饲料中适宜水平肌醇上调了嗜水气单胞菌注射后生长期草鱼头肾和脾脏核因子E2相关因子2（Nrf2）mRNA和蛋白水平，下调了Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（Keap1）a和b mRNA水平。研究表明，饲料中适宜水平肌醇可激活鱼类头肾和脾脏Nrf2信号途径，提高其抗氧化能力，增强抵抗嗜水气单胞菌致头肾和脾脏氧化损伤的能力。此外，以嗜水气单胞菌注射后生长期草鱼头肾和脾脏ROS含量为标识，生长期草鱼肌醇需要量分别为452.1和449.0 mg/kg。     

Protease in sturgeon sperm and the effects of protease inhibitors on sperm motility and velocity

In mammals, proteases are present in sperm acrosome and play key role in fertilization. Sturgeon sperm has an acrosome, but its physiology, biochemistry, and potential role in fertilization are unknown. In the present study, we have observed high protease activity in acidic extract of intact sperm compared to that of seminal plasma in sterlet (Acipenser ruthenus). The protease activity was decreased and increased in acidic extract of motility-activated sperm and in the activation medium, respectively. Molecular analysis revealed total protease and serine (acrosin) protease activities in sperm acidic extract which was accumulated in a protein band with relative molecular mass of 35 kDa. Immunoelectron microscopy using an affinity-purified polyclonal antibody for boar acrosin localized the protease at the acrosome region. Moreover, initiation of sperm motility was inhibited after activation in the presence of inhibitors for both trypsin-like and chymotrypsin-like proteases, while the effects of protease inhibitors on sperm velocity were uncertain. Our results indicate similarities in physiology and biochemistry of acrosome between sturgeon and mammals and suggest potential role of protease in the initiation of sperm motility in sturgeon.     

锯缘青蟹精子入卵过程的扫描电镜观察

利用扫描电镜详细观察了锯缘青蟹精子入卵的过程。精子以其核突起附着在卵膜上，并迅速发生顶体反应。顶体反应时，顶体囊外翻，顶体管前伸，精子核辐射臂收缩，并拖至顶体囊的后部。顶体管迅速穿过卵黄膜，携带核物质一同进入卵子。锯缘青蟹为多精着卵，数精入卵。本文同时探讨了精子顶体反应机制以及受精过程卵子的作用。     

Effects of Broodstock Age and Sperm Collection Time over a Natural Spawning Period on Sperm Cryopreservation in Farmed Greenlip Abalone,Haliotis laevigata

This study investigated the effects of broodstock age (2‐ and 3‐yr‐old), and sperm collection time at the beginning, middle, and end of a natural spawning period, on the ability of sperm to tolerate cryopreservation in farmed greenlip abalone, Haliotis laevigata. The quality of sperm was assessed by motility, fertilization rate, plasma membrane integrity, mitochondrial membrane potential (MMP), and acrosome integrity (AI). The sperm collected at the middle of a natural spawning period had significantly higher quality than those collected at the beginning and the end of the spawning period in terms of plasma membrane integrity, MMP, and AI of fresh and post‐thaw sperm, post‐thaw sperm motility, and fertilization rate. No significant difference was found between 2‐ and 3‐yr‐old animals in most quality parameters evaluated. The results suggested that sperm collected during the middle of the spawning season should be used for cryopreservation. The efficiency of genetic improvement programs can be further enhanced by using sperm collected from 2‐yr‐old abalone which has a similar ability to tolerate cryopreservation as 3‐yr‐old counterparts.     

草鱼NK-lysin基因的克隆、原核表达与活性分析

为研究草鱼抗菌肽NK-lysin基因的组成结构、在组织中的表达差异及其抑菌活性,实验根据已知鱼类NK-lysin基因保守区序列设计上下游引物,采用RT-PCR和RACEPCR技术克隆草鱼NK-lysin基因(Cinkl),RT-PCR进行各组织间的表达分析,并构建Cinkl成熟肽的原核表达载体,采用琼脂糖孔穴扩散法检测重组蛋白的抑菌活性。结果显示,Cinkl c DNA全长768 bp,编码121个氨基酸;基因组DNA全长3 361 bp,包含4个外显子和3个内含子。经多序列比对分析和结构域预测表明,Ci Nkl氨基酸序列具有SAPLIP家族的特征:含有6个保守的半胱氨酸和saposin B蛋白结构域,与斑马鱼Nklc、Nkld的相似性分别为57.98%和63.03%。构建NK-lysin氨基酸序列系统进化树,发现Ci Nkl与斑马鱼Nklc、Nkld聚为一支。RT-PCR检测结果显示,Cinkl m RNA在所有检测的草鱼组织中均有表达,在脾脏中表达量最高,心脏、鳃、中肾和头肾的表达量次之,皮肤、脑、肝脏和肠有微量表达。p ET-28b-MBP与Ci Nkl成熟肽序列构建的原核表达质粒在宿主菌Rosetta(DE3)表达出约57 ku的可溶性融合蛋白,利用Ni-NTA His·Bind树脂进行纯化,Ci Nkl重组蛋白对G–细菌如大肠杆菌M15株、嗜水气单胞菌,以及G+细菌如金黄色葡萄球菌均具有抑菌活性。基于草鱼NK-lysin的组织表达特征和重组蛋白的抑菌活性,推测NK-lysin在草鱼的先天性免疫防御中发挥调节作用。     

Lead (Pb) accumulation,oxidative stress and DNA damage induced by dietary Pb in tilapia (Oreochromis niloticus)

With the increasing occurrence of dietary lead (Pb) contamination in aquaculture, a better understanding of the toxic effects of dietary Pb on aquatic animals is needed. Tilapia (Oreochromis niloticus) were exposed to dietary Pb at concentrations of 0, 100, 400 and 800 μg g^?1 dry weight for 60 days, and Pb accumulation in tissues and blood, oxidative stress in posterior kidney and DNA damage in peripheral blood cells were investigated. The results showed that dietary Pb exposure resulted in significant Pb accumulation in tissues and blood, which increased with the dietary Pb concentrations. Pb accumulated in sampled tissues in the following order: posterior kidney>bone>liver>gill>spleen>testis>muscle>brain. Dietary Pb caused a significant increase in the malondialdehyde level and a significant decrease in the total antioxidant capacity content when compared with the control group (P<0.05), accompanied by concentration‐dependent decreases in the glutathione content, glutathione peroxidase and superoxide dismutase activities. Pb dose‐dependent DNA damage was observed in peripheral blood cells of tilapia exposed to dietary Pb. The results suggest that dietary Pb exposure can induce significant Pb accumulation in tissues and blood, followed by oxidative stress in posterior kidney and DNA damage in peripheral blood cells of tilapia.     

不同倍性长牡蛎闭壳肌和精子的组织学和超微结构观察

以二倍体、三倍体、四倍体长牡蛎(Crassostrea gigas)闭壳肌和精子为研究对象, 采用石蜡组织切片、透射电镜和扫描电镜方法, 比较了 3 种倍性长牡蛎闭壳肌和精子的组织学特性及超微结构的差异。研究结果显示, 二、三、 四倍体闭壳肌组织的肌纤维都包含粗肌丝、细肌丝、肌膜、肌束膜、肌内膜、线粒体、囊泡、小管、细胞核、肌浆网等结构, 但三者的形态及超微结构不同, 其中三倍体闭壳肌线粒体直径、肌纤维直径、粗肌丝密度显著大于二倍体和四倍体, 肌纤维密度显著小于二倍体和四倍体。不同倍性精子的扫描电镜和透射电镜结果显示, 二、三、四倍体长牡蛎精子在组成结构上相似, 分别由头部、中段和尾部构成, 但不同倍性精子中各结构大小和线粒体数目不同。在长牡蛎精子头部长度、宽度, 顶体高度、宽度, 线粒体长度的测量分析中, 四倍体精子的头部、顶体以及线粒体显著大于二、三倍体。三倍体精子的头部和顶体显著大于二倍体, 但三倍体精子的线粒体大小与二倍体相比无显著差异。此外, 二、三倍体精子均含 4 个线粒体, 但在本研究中发现了二倍体精子含有 5 个(占比 1%)线粒体的特例。四倍体长牡蛎精子的线粒体数目不同, 含有 4 个(占比 46%)、5 个(占比 52%)、6 个(占比 2%)这 3 种情况。 该研究阐明了不同倍性长牡蛎闭壳肌及精子的组织学特性和超微结构, 为深入研究长牡蛎肌纤维生物学特性和精子繁育生物学提供了基础资料。