草鱼尾鳍组织二倍体细胞系GCCF-2的建立及其部分生物学特性分析

本文从草鱼尾鳍组织建立了一个二倍体细胞系GCCF-2。该细胞系用TC-199培养液加15％小牛血清培养。细胞生长旺盛,最高分裂指数达30.04‰。现已在体外培养近92个月。细胞在28℃生长良好。染色体检查表明,GCCF-2为二倍体细胞系。初步估计其细胞周期为21—33小时。GCCF-2对草鱼呼肠弧病毒(GCRV)敏感,并在细胞中发现病毒颗粒。     

草鱼肾组织细胞系CIK的建立及其生物学特性

作者于1982年1月开始进行草鱼肾组织单层细胞培养，至今已连续培养32个月，传至120多代，建立了细胞系，定名为草鱼肾组织细胞系(CIK)。本文介绍了原代和传代培养、细胞形态、细胞生长速度和分裂指数、细胞的保存和对温度的适应性、细胞染色体分析以及细胞系对病毒敏感性的试验和研究结果。CIK生长迅速、适应性强、以20℃-38℃生长较好，28℃左右生长稳定，pH为6．5时仍能保持致密单层，染色体数为非整倍体，众数为55。对草鱼出血病左右病毒FRV具敏感性。     

中国蛤蜊的组织培养

用1640培养基，对中国蛤蜊(Mactra chinensis)的鳃和外套膜组织进行了原代培养。实验结果表明．在温度26-27℃、pH7．4、培养基中不添加小牛血清的条件下，中国蛤蜊的组织能正常生长。鳃组织培养24小时后即有游离细胞从组织块迁移出来，最长培养时间可持续至第12天；外套膜组织培养48小时后即出现游离细胞．最长培养时间可持续至第14天。     

《草鱼出血病病毒敏感细胞系CIK的建立》技术鉴定会在沙市召开

<正> 中国水产科学研究院长江水产研究所完成的《草鱼出血病病毒敏感细胞系CIK的建立》的科研成果,于1984年8月28—30日在湖北沙市进行了技术鉴定。这次会议是湖北省水产局受农牧渔业部水产局委托主持召开的。参加会议的有来自中国科学院武汉病毒研究所、中国科学院水生生物研究所、武汉大学病毒系及湖北医学院等21个单位的代表共35人。代表们一致认为,草鱼肾脏组织细胞系CIK是继浙江淡水所的草鱼吻端组织二倍体细胞株ZC—7901之后又一新的草鱼细胞系,为国内首次建立。该细胞系生长稳定、繁殖旺盛、适应性强,且     

淡水鱼类细胞库的构建↑（*）

以几种淡水养殖鱼的组织和胚胎为材料，经12一24个月的继代培养，先后建立T鲢尾鳍细胞晕(简称SCF)、鳙吻端细胞系(简称BHS)、团头鲂尾鲔细胞系(简称WCF)、银鲫囊胚细胞系(简称CGB)、鲤胚胎细胞系(简称CE)和太鳞副泥鳅胚胎细胞系(简称LB)。上述细胞的最适培养温度是25—28℃，细     

欧洲鳗鲡对水中亚硝酸盐浓度耐受性的研究

欧洲鳗鲡亚硝酸盐急性毒性试验的结果表明，在水温28．0-28．5℃，pH6．8-7．3时，欧洲鳗鲡对水中亚硝酸盐浓度的耐受性为，24小时的LC50为100．0mg／L，48小时的LC50为84．1mg／L，96小时的LC50为26．6mg／L，而且LC50值随试验时间的延长而降低。SC为2．66mg／L。     

虎纹蛙病毒体外培养及其理化特性

从发病濒死的虎纹蛙（Rana tigrina rugulosa)蝌蚪中分离到一种病毒，在25℃条件下，该病毒能在鲤鱼表皮瘤细胞系（EPC），胖头Shiu肌肉细胞系（FHM）和草鱼性腺细胞系（CO）三种鱼类细胞上产生空斑状的细胞病理变化（CPE）。该病毒对氯仿，热（56℃，20min)和酸（pH3)敏感，其体外培养的适合增殖温度范围为20-30℃，电镜下观察，病毒为对称的二十面体，切面正六边形，对角直径125nm左右。     

黄颡鱼吻端细胞培养研究

采用M199培养基对黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)吻端组织进行体外培养研究,继代培养细胞传至第8代。实验结果显示:吻端组织接种培养3~5 h,细胞迁移伸展,6 d后生长细胞集落汇合,每4~6 d递次进行继代培养,培养生长的细胞呈纤维样。比较继代细胞在不同温度(15、27、37℃)和血清浓度(0、10%、20%)条件下的生长,27℃、10%血清的培养条件最适宜吻端细胞的增殖。通过染色体组型分析,证明离体吻端细胞为正常的二倍体细胞。研究结果表明,黄颡鱼离体吻端细胞对温度等培养条件有很强的适应性,培养细胞增殖迅速,具有建立连续细胞系的潜力。     

罗非鱼肾脏细胞系的建立及其生物学特性

采用组织块移植法，对尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）的肾脏组织细胞进行原代培养，建立了罗非鱼肾脏细胞系，已稳定传代培养50代以上，命名为TiK。罗非鱼肾脏细胞系为纤维样细胞，其最佳培养基为DMEM，最适培养温度为28℃，最适血清浓度为15%。在最适培养条件下，罗非鱼肾脏细胞系的群体倍增时间为45.8 h。细胞经液氮冷冻保存6个月后进行复苏，经台盼蓝染色，约（89.84±3.48）%的细胞具有活性，复苏后细胞生长旺盛。染色体分析显示，第32代罗非鱼肾脏细胞系染色体数目分布在20~66之间，众数为48。使用本实验室分离鉴定的罗非鱼病毒感染罗非鱼肾脏细胞，可产生典型的细胞病变效应，表明罗非鱼肾脏细胞对该病毒敏感。该细胞系的建立为罗非鱼病毒病防控技术研究提供了重要的实验材料。     

快速获得大量鱼类肾细胞中期分裂相的PHA体内注射法

本文报导了PHA(Phytohemaggtutinin植物血球凝集素)体内注射制备鱼类肾细胞染色体的方法。在北京鳊、广东鲂、鲮鱼、倒刺鲃、胡子鲶、鳗鲡、乌鳢、罗非鱼等分属不同科、目的近30种鱼类均获得较高的分裂指数。PHA体内注射法的平均细胞有丝分裂指数为肾培养的1．56倍，血培养的1．82倍，常规空气干燥法的4．51倍，达到9．86％。研究结果表明，PHA在体内同样具有刺激肾细胞有丝分裂的作用。PHA注射剂量8--10ug／g(鱼体重)，秋水仙素注射剂量4—6ug／g(鱼体重)，胸鳍基部各一次注射，效应时间4—4．5小时，在7小时内便可获得大量中期分裂相。所建立的方法不需进行细胞体外培养，简便快捷，适用于实验室和野外现场制备鱼类染色体。