尖膀胱螺对毒死蜱毒性的生物化学响应

以尖膀胱螺作为试验动物,研究毒死蜱对尖膀胱螺抗氧化系统、乙酰胆碱酯酶和一氧化氮合酶的影响.通过预试验获得尖膀胱螺72 h LC50为243 μg/L,推算的安全浓度为16 μg/L,正式试验以16和121.5 μg/L浓度组分别暴露尖膀胱螺96 h.在第24、48和96 h分别取材,测定尖膀胱螺体内超氧化物歧化酶(SOD)、乙酰胆碱酯酶(AChE)、一氧化氮合酶(NOS)的活性和丙二醛(MDA)含量变化情况.结果显示,在推算的安全浓度(16 μg/L)暴露后,尖膀胱螺体内MDA含量和NOS活性在各时间段变化均不明显,而SOD和AChE活性在96 h被抑制;在高浓度组(121.5 μg/L),尖膀胱螺SOD呈现先上升后下降后又有所回升的趋势,MDA水平持续上升,NOS水平被显著性诱导,AChE活性则被显著性抑制,且在48 h时抑制作用最强.试验结果表明毒死蜱对尖膀胱螺抗氧化系统和神经中枢均产生一定的影响,提示尖膀胱螺可作为毒死蜱毒理学试验模型动物,同时MDA和AChE可作为毒死蜱毒性的生物标记物.     

汞离子胁迫对红鳍笛鲷抗氧化酶及乙酰胆碱酯酶活性的影响

为探讨鱼体抗氧化系统以及神经系统对水体中汞胁迫的响应机制,在实验条件下研究了汞离子对红鳍笛鲷幼鱼[体长为(4.95±0.79)cm,体重为(4.57±2.02)g]的急性毒性及对鱼体肝脏、鳃组织的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及脑组织乙酰胆碱酯酶(AChE)活力的影响。结果表明:半静水实验条件下,汞离子对红鳍笛鲷幼鱼的安全浓度为0.040mg/L。汞离子暴露6h时,各浓度组的肝脏SOD酶活均比对照组有显著升高(P<0.05)。随暴露时间的增加,低浓度组SOD的活性变化较小,而高浓度组鱼体肝脏SOD的活性出现被诱导或被抑制的现象,表明鱼体在高浓度汞胁迫下抗氧化系统出现一定程度的紊乱。鳃的SOD活力在暴露6h亦显著升高,随时间的延长,各浓度组SOD的活性具不同程度的下降趋势。MDA含量的变化表明,鳃组织在暴露6h时已开始受到显著损伤(P<0.05),而肝在6h时无显著变化,在12h时开始受损伤。脑组织AChE活性在暴露6h时略受抑制(P>0.05);暴露12h时高浓度组显著增加(P<0.05),诱导率平均为36%;汞离子暴露24h时,鱼脑AChE的抑制率分别为28%～38%;暴露48h、96h时抑制率...     

菲胁迫对红鳍笛鲷急、慢性毒性效应的研究

为了解海洋菲污染对海洋水产经济鱼类的毒性及致毒机理,在实验室条件下采用半静态毒性实验研究了菲对红鳍笛鲷的96 h急性毒性,同时分析和比较了不同浓度(10.0、50.0、250.0μg/L)菲胁迫96 h后红鳍笛鲷肝脏、鳃中超氧化物歧化酶(SOD)活力,丙二醛(MDA)含量以及脑组织中乙酰胆碱脂酶(AChE)活力的变化。结果表明,菲对红鳍笛鲷幼鱼的24、48和96 h半致死浓度(LC50)分别为4.65、3.46和3.17 mg/L,安全浓度为0.317 mg/L。在整个胁迫过程中,低浓度(10.0μg/L)菲可诱导红鳍笛鲷肝脏和鳃组织SOD活力显著性升高(P<0.05);随着浓度升高,50.0和250.0μg/L浓度组肝脏SOD活力呈抑制-诱导的波动变化,鳃SOD活力的变化则呈抑制-诱导-抑制的趋势。随着菲曝露时间延长,各浓度组红鳍笛鲷肝脏和鳃组织的MDA含量明显升高;脑组织中AChE活力表现为先升高后降低的的趋势。结果提示,菲对红鳍笛鲷具有很强的毒性,可在96 h内通过氧化损伤途径对机体产生毒性作用,鉴于SOD、MDA、AChE指标对菲的高度敏感特点,可以用其作为生物标志物来指示多环芳烃类污染物对水生生物的...     

乙草胺对泥鳅肝脏乙酰胆碱酯酶和谷胱甘肽硫转移酶的影响

用急性染毒法研究了5种不同浓度、不同处理时间的乙草胺对泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)肝脏乙酰胆碱酯酶(AChE)和谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性的影响。结果表明,不同浓度的乙草胺处理对泥鳅肝脏中AChE均起抑制作用。低浓度的乙草胺处理对泥鳅肝脏中GST活性起诱导作用,而高浓度则起抑制作用。     

乙酰甲胺磷对鲫脑乙酰胆碱酯酶活性影响的初步研究

研究了乙酰甲胺磷对鲫24 h、48 h、72 h的半致死浓度(LC50)和不同乙酰甲胺磷浓度梯度下鲫脑乙酰胆碱酯酶(AChE)活力。结果:在18～21℃下,乙酰甲胺磷对鲫的24 h、48 h、72 h的半致死浓度(LC50)分别为59.3 mg/L、47.4 mg/L、40.3 mg/L。鲫在几组低浓度乙酰甲胺磷下暴露5 d,在同一检测时间内,脑AChE活力随浓度升高而下降;在同一浓度下检测,脑AChE活力随暴露时间的延长而升高。在乙酰甲胺磷暴露浓度为28.4 mg/L时,24 h取样检测,乙酰甲胺磷对鲫脑乙酰胆碱酯酶的抑制作用极显著(P≤0.01),72 h、120 h取样检测,抑制作用减弱但仍显著(P≤0.05)。     

罗非鱼肌肉乙酰胆碱酯酶的纯化、性质及农药敏感性研究

以罗非鱼脑组织为材料,研究了乙酰胆碱酯酶的分离纯化方法、性质及杀虫剂对酶的抑制作用。结果表明,当脑组织的TritonX-100抽提物采用(NH4)2SO4分级盐析、Sephadex G-100凝胶过滤和DEAE-纤维素DE23离子交换柱层析的分离纯化步骤后,可获得纯化的乙酰胆碱酯酶,酶的比活力达到20.628U.mg-1, 纯化倍数139,回收率22.1%。酶作用最适温度为35～40℃,最适pH为7.5～8.0,对碘化硫代乙酰胆碱的Km值为0.183mmol.L-1,有过量底物抑制现象,最佳底物浓度为6mmol.L-1。被测4种农药中,有机磷类杀虫剂对罗非鱼脑AChE的抑制能力高于氨基甲酸酯类,抑制能力分别为：敌敌畏 > 辛硫磷 > 三唑磷 > 灭多威, 4种杀虫剂对罗非鱼脑AChE的I50值均小于5μg.mL-1。     

邻苯二甲酸二丁酯对红鳍笛鲷幼鱼的胁迫效应

为了探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对红鳍笛鲷(Lutjanus erythropterus)幼鱼的胁迫效应,于DBP暴露后0、6、12、24、48和96 h时检测红鳍笛鲷鳃、肝和脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和乙酰胆碱酯酶(AChE)活性。结果表明,DBP对红鳍笛鲷的24 h、48 h和96 h LC50分别为7.10 mg/L、6.98 mg/L和6.66 mg/L,安全质量浓度为2.04 mg/L。随着浓度增加,鳃组织中的SOD酶活性表现为先升高后下降,具有明显的时间效应;肝组织中的SOD酶活性在0.5 mg/L和2.0 mg/L浓度组交替表现为升高和降低,与对照组比较有显著性差异(P<0.05);而0.125 mg/L浓度组肝SOD没有明显变化。鳃组织中MDA含量在DBP暴露6 h后显著性增加(P<0.05),之后随时间延长而下降;DBP暴露6 h和12 h后,0.5 mg/L和2.0 mg/L浓度组肝组织中的MDA含量都显著升高(P<0.05),之后随时间延长MDA含量下降并趋于稳定。与对照组比较,DBP暴露48 h后,红鳍笛鲷脑组织中AChE酶活性显著升高(P<0.01),96 ...     

草鱼3个6-磷酸葡萄糖酶催化亚基的基因表达分析及高糖饲料对其表达的影响

为了探讨6-磷酸葡萄糖酶催化亚基(glucose-6-phosphatase catalytic subunit,G6PC)在草鱼(Ctenopharyngodon idellus)糖代谢中的作用,采用同源序列比对的方式,在草鱼基因组中获取了3个g6pc基因的序列,通过序列比对和进化树分析,将其分别命名为g6pca、g6pcb1和g6pcb2,其编码的氨基酸序列与斑马鱼(Danio rerio)、虹鳟(Oncorhynchus mykiss)和人(Homo sapiens)具有较高的同源性,相似度分别为85%～94%、64%～83%和54%～66%。同线性分析表明g6pc在草鱼染色体上的分布与斑马鱼等高度相似,表明草鱼g6pc基因在进化中具有较高的保守性。利用RT-PCR检测3个基因在鳃、脂肪、脑、心脏、肝、肾、前肠、中肠、后肠和肌肉10个组织中的表达,结果显示, g6pca在脑和肝中表达量较高,脂肪组织次之; g6pcb1在肝中表达量最高,中肠次之; g6pcb2在心脏表达量最高,其次为脂肪组织。同时探讨了高糖饲料对草鱼不同g6pc亚型转录水平的影响,以及不同浓度葡萄糖和胰岛素刺激草鱼肝细胞(L8824)后对g6pca转录水平的影响。结果显示,饲喂高糖饲料(7周)后,与对照组相比,草鱼肝脏g6pca mRNA水平显著升高, g6pcb1和g6pcb2 mRNA水平无显著变化。离体情况,与5 mmol/L葡萄糖组相比,15 mmol/L葡萄糖显著增加了L8824的g6pca mRNA水平,且1 mol/L胰岛素可以抑制这种作用; 30 mmol/L葡萄糖对L8824 g6pca mRNA水平无显著性影响。本研究表明,草鱼g6pc发生加倍后存在功能分化,高糖可以诱导g6pca mRNA的表达,而对g6pcb1和g6pcb2的转录水平无影响,其具体功能还需进一步研究。     

盐度对黄鳝摄食和饥饿失重的影响

盐度对黄鳝最大摄食率有极显著影响(P<0.01),盐度(NaC l)为6或者4 g/L时,黄鳝最大摄食率最大(P<0.01);盐度为4、8、10 g/L时,黄鳝最大摄食率相近,但显著高于盐度12、14 g/L组和对照组(P<0.05)。同时,盐度对黄鳝排粪量与摄食量之比没有影响(P>0.05)。试验鱼19.53~32.37g的初始体重的差异和不同盐度对黄鳝饥饿失重率都有极显著影响(P<0.01),将黄鳝初始体重调整为25.56g后,得到不同盐度下黄鳝饥饿失重率从高到低的顺序:6 g/L>8 g/L>4 g/L>2 g/L>0.8 g/L>1 g/L>0.4 g/L>对照组(P<0.01)。     

甲氰菊酯对鳗鲡的急性毒性研究

以常温静水实验法用甲氰菊酯对鳗鲡 (体长 4 1～ 5 0cm)进行急性攻毒试验 ,结果表明 :甲氰菊酯对鳗鲡的半致死浓度 (96hLC50 )为 6 5 5 μg/L ,安全浓度 (SC)为 0 6 6 μg/L。甲氰菊酯对鳗鲡有剧毒。     

Acute toxicity of the pesticide methomyl on the topmouth gudgeon (Pseudorasbora parva): mortality and effects on four biomarkers

In this study, the acute toxicity of the pesticide methomyl on the topmouth gudgeon (Pseudorasbora parva) was evaluated using mortality and the activity of the enzymes acetylcholinesterase (AChE), glutathione S-transferases (GSTs), glutamic oxaloacetic transaminase (GOT) and glutamic pyruvic transaminase (GPT) as endpoints. LC50 values were 1.228, 0.782, 0.538, and 0.425 mg/l at 24, 48, 72, and 96 h of exposure, respectively. Methomyl caused a sharp decrease in specific activity of brain AChE around 48% at concentrations between 0.043 and 0.213 mg/l. A reduction higher than 40% in liver GST activity at concentrations between 0.085 and 0.213 mg/l was found, whereas no significant effects were observed in intestinal GST. A significant concentration-dependent decrease of GOT activity was found after 24 h of exposure to the pesticide but not after 96 h. No significant effects on GPT activity were observed. These results indicate that at the concentrations tested, methomyl is acutely toxic to the species P. parva, causing mortality, neurotoxic effects, and changes in some hepatic enzymes.     

毒死蜱(CPF)对河川沙塘鳢幼鱼的急性毒性

采用静水生物测试法研究了毒死蜱(CPF)对河川沙塘鳢(Odontobutis potamophila)幼鱼的急性毒性效应并进行了安全评价。设定0 mg/L、0.18 mg/L、0.36 mg/L、0.57 mg/L、0.86 mg/L和1.1 mg/L 6个CPF质量浓度梯度进行急性暴露实验,以肝超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和谷胱甘肽(GSH)含量为指标,研究CPF污染对幼鱼肝抗氧化系统的影响。结果表明,CPF浓度升高对实验鱼产生了较大毒性,24 h、48 h和96 h LC50分别为(0.296±0.019)mg/L、(0.16±0.036)mg/L和(0.052±0.003)mg/L,随着时间延长呈显著下降趋势,符合双曲线衰减模型(R=0.999 9,P<0.000 1),安全浓度为(0.014±0.003 1)mg/L;低浓度染毒条件下,CAT活性随时间变化较小,在0.57mg/L CPF染毒96 h后CAT活性达到最大值,之后随药物浓度的升高而降低,CAT活性随时间和药物浓度呈极显著变化(P<0.01);SOD活性变化与CAT相似,在时间和不同浓度CPF的共同作用下,SOD活性表现出显著差异(P<0.05);药物对GSH含量的影响不大,在0.36 mg/L以上浓度组,24 h和48 h的含量有所下降,96 h的含量则维持在较高水平,GSH含量随时间呈现极显著变化(P<0.001);由此可见,肝CAT、SOD酶活性和GSH含量作为毒理学指标能较好地评价CPF毒性效应。组织病理观察发现,CPF污染对河川沙塘鳢幼鱼的鳃、肝均造成严重损伤:鳃丝紊乱、上皮细胞增生,鳃小片肥大、充血,鳃弓软骨细胞变性、溶解;肝细胞发生实质空泡化,细胞间隙增大,胆管内皮细胞肥大隆起。     

ＭＣ与ＭＧ对尼罗罗非鱼和大口黑鲈游泳行为的影响

尼罗罗非鱼(Tilapia nilotica)和大口黑鲈(Micropterus salmoide)是中国主要的淡水经济鱼类,其养殖过程中常遇到微囊藻毒素(Microcystin,MC)与孔雀石绿(Malachite green,MG)的危害。MC和MG通过食物链在人体中富集,给人类的健康造成了严重的威胁。研究测定了人工饲养的尼罗罗非鱼和大口黑鲈在含有MC和MG的水体中的行为反应。结果表明,尼罗罗非鱼和大口黑鲈在0.2和0.5μg/L MC-LR的水体中处理60min内,其游泳行为相对于对照组无显著性差异,然而,在0.5mg/L MG的水体中处理30min后,尼罗罗非鱼胸鳍摆动频显著上升,大口黑鲈胸鳍摆动频率也在25、30、45min等3个不连续的时间点出现显著的变化。说明尼罗罗非鱼和大口黑鲈对天然毒素MC具有较强的抵抗能力,而对人工毒素MG较为敏感;胸鳍摆动频率可作为尼罗罗非鱼和大口黑鲈一个较为敏感的反映环境变化的行为指标。     

油酸诱导建鲤(Cyprinus carpio var. Jian)肝细胞脂肪变性模型的建立

通过对油酸诱导时间及有效作用浓度的研究,建立油酸致建鲤肝细胞脂肪变性模型.本研究以胰蛋白酶消化法获得的原代肝细胞作为实验材料,加入不同浓度油酸(0、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 mmol/L)与肝细胞共培养24-48 h,诱导肝细胞脂肪变性,分别收集不同时段的肝细胞及上清液,采用试剂盒测定肝细胞中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)的含量,同时测定上清培养液中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,MTT法测定肝细胞的存活情况,确定油酸最佳诱导浓度,油红O染色法观察细胞内脂肪滴的形成情况.研究结果显示,0.4 mmol/L油酸与肝细胞共培养48 h,可以显著提高肝细胞内TG、TC含量(P＜ 0.05或P＜ 0.01),极显著提高上清培养液中GOT、GPT、LDH、γ-GT的活性,显著降低上清培养液中SOD的活性,但与24 h相比有升高趋势,0.4 mmol/L油酸与肝细胞共培养24 h,光镜下可见细胞内有脂肪滴形成,以48 h最明显.综上所述,油酸浓度0.4 mmol/L、诱导时间48 h成功构建了肝细胞脂肪变性模型,为研究鱼类脂肪肝类疾病奠定了基础.     

Alteration in certain enzymological parameters of an Indian major carp, Cirrhinus mrigala exposed to short- and long-term exposure of clofibric acid and diclofenac

The extensive use of pharmaceuticals in human and veterinary medicine may enter the aquatic environment and pose a serious threat to non-target aquatic organisms like fish. In this study, Indian major carp Cirrhinus mrigala was exposed to different concentrations (1, 10 and 100 μg L^?l) of most commonly used pharmaceutical drugs clofibric acid (CA) and diclofenac (DCF) to evaluate its impacts on certain enzymological parameters during short- and long-term exposures. During short-term (96 h) exposure period, plasma glutamate oxaloacetate transaminase (GOT), glutamate pyruvate transaminase (GPT) and gill Na⁺/K⁺-ATPase activity were significantly altered at all concentrations of both the CA- and DCF-treated fish. In long-term exposure (35 days), gill Na⁺/K⁺-ATPase activity was found to be significantly increased at all concentration of CA and DCF exposures throughout the study period (except at the end of 7th day in 10 and 100 µg L-1) . However, a biphasic trend was observed in plasma GOT and GPT activity when compared to the control groups. In both short- and long-term exposure, a significant (P < 0.01 and P < 0.05) changes were observed in all enzymological parameters of fish C. mrigala exposed to different concentrations of CA and DCF. The alterations of these enzymological parameters can be effectively used as potential biomarkers in monitoring of pharmaceutical toxicity in aquatic environment and organisms.     

邻苯二甲酸二丁酯对汉氏棱鳀生化指标的影响

采用海洋中上层鱼类汉氏棱鳀（Thryssa ham iltonii）为试验生物,研究了邻苯二甲酸二丁酯（DBP）对海洋鱼类的毒性。结果显示,DBP对汉氏棱鳀的24 h、48 h和96 h的半致死质量浓度（LC50）分别为3.75 mg.L-1、1.52 m.gL-1和0.94 m.gL-1,安全质量浓度为0.07 m.gL-1。DBP对汉氏棱鳀内脏团中的超氧化物歧化酶（SOD）活性在第24小时表现为0.07 m.gL-1浓度组受诱导而0.55 m.gL-1浓度组被抑制,而第72小时0.07 m.gL-1浓度组被抑制而0.14 m.gL-1组被诱导升高,其他浓度组无显著变化;脑中各浓度组则表现为第24小时受到明显的诱导而到第72小时被抑制。DBP胁迫下仅第24小时引起了2组织细胞氧化损伤,细胞脂质过氧化物（MDA）的质量摩尔浓度都明显升高。内脏团中的乙酰胆碱酯酶（AChE）活性表现为0.07 m.gL-1浓度组受诱导升高而其他浓度组被抑制;而脑中0.55 m.gL-1浓度组为先受诱导升高后被抑制降低,其他浓度组则一直表现为受诱导升高。结果表明,DBP在此试验质量浓度下对汉氏棱鳀产生了明显的毒性作用,对海洋生物存在危害,应对其海洋环境生态风险加以关注。     

Effects of malathion and cadmium on acetylcholinesterase activity and metallothionein levels in the fish Seriola dumerilli

The potential use of acetylcholinesterase (AChE) and metallothionein (MT) responses as biomarker of organophosphorous (OPs) and trace metal were assessed in fish Seriola dumerilli exposed to 0, 4, 6 mg/kg of malathion for 2, 7 and 13 days, and to 0, 50, 100, 250 μg/kg of Cd for 2 days. Brain AChE was significantly inhibited after 2 and 7 days of malathion exposure, in a dose–response manner, but no inhibition was observed after 13 days of exposure. When exposed to Cd for 2 days, S. dumerelli presented an increase in AChE activity at a concentration of 50 μg/kg, but a strong and dose-dependent AChE inhibition at 100 and 250 μg/kg. Cd treatment also caused a rapid increase in MTs concentration in liver, even at the lower concentration. Our experiments indicate that the measurement of hepatic MT concentration and brain AChE activity in S. dumerilli would be useful biomarkers of OP and Cd exposure and/or effects.     

三唑磷短期暴露对翡翠贻贝的毒性效应

采用半静态毒性试验方法研究了三唑磷（triazophos,OP）短期暴露下对翡翠贻贝（Perna viridis）的毒性效应。结果显示,在OP胁迫下,翡翠贻贝内脏团和外套膜超氧化物歧化酶（SOD）活性在胁迫前期均被抑制,随时间延长活性被诱导。低质量浓度0P（0．4mg·L^-1和2mg·L^-1）使翡翠贻贝内脏团和外套膜谷胱甘肽-S转移酶（GST）活性先降低后升高;高质量浓度（10mg·L^-1）GST活性降低。OP能诱导还原型谷胱甘肽（GSH）的产生,而高质量浓度（10mg·L^-1）也能抑制GSH产生。受0P胁迫影响,翡翠贻贝内脏团和外套膜丙二醛（MDA）均升高。内脏团总抗氧化能力（T—AOC）显著降低;而外套膜T—AOC会被OP所诱导。转入清水恢复72h后仅外套膜MDA有所恢复。结果表明OP短期暴露会对翡翠贻贝抗氧化系统造成损伤。     

离子液体［Ｃ８Ｍｉｍ］Ｃｌ对泥鳅毒性效应的研究

以泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)为受试动物,采用急性毒性、遗传毒性及生理毒性试验,研究了[C8Mim]Cl对生物体的毒性效应.结果表明,[C8Mim] Cl对泥鳅有一定的毒性,其对泥鳅24h、48 h的LC50分别为324.13 mg/L、262.77mg/L,安全浓度为51.80 mg/L;各处理组的微核率均高于对照组(P＜0.05),且随着处理浓度的升高和时间的推移,红细胞微核率都有明显的升高;处理组血清中的谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活力均明显高于对照组(P＜0.05),且随离子液浓度升高以及时间的推移而增高;[C8Mim] Cl对泥鳅有显著的毒性作用.