应用外源总DNA直接导入法改良高粱农艺和抗性性状

应用外源总ＤＮＡ直接导入法改良高粱农艺和抗性性状杨立国，石太渊（辽宁省农业科学院高粱研究所１１０１６１）目前基因操作和遗传转化是高等植物遗传和育种研究的重要手段，愈来愈引起人们的重视。然而，由于知识、技能和资金的局限，特别是大量控制植物特，注的有意义...     

新消息

新消息０２３７小麦配对部分同源基因Ｐｈ１的细胞遗传活性和作用方式——ＭｏｓｈｅＦｅｌｄｍａｎ的研究证明普通小麦的配对部分同源基因Ｐｈｌ是决定该多倍体小麦种的类似于双倍体的细胞学性状的主要因子。在过去３０年里，Ｐｈｌ基因一直是细胞遗传研究的一个重要课题...     

由限制性片段长度多态性和随机放大多态DNAs鉴定出优良高粱系的遗传

９５２０６由限制性片段长度多态性和随机放大多态ＤＮＡｓ鉴定出优良高粱系的遗传多样性──（Ｒ．Ａ．Ｖｉｅｒｌｉｎｇ等），ＴｈｅｏｒｅｔｉｃａｌａｎｄＡｐｐｌｉｅｄＧｅｎｅｔｉ－ｃｓ．１９９４．Ｖｏｌ．８７，Ｎｏ，７，８１６～８２０（英文）本研究的目的是...     

促进部分同源染色体配对的Ph基因从拟斯卑尔脱小麦向普通小麦的导入

多倍体小麦中的二倍体化染色体配对由几个有着主要和次要作用的Ｐｈ（部分同源配对）基因控制，在这些基因缺失或被来自于其它物种的基因（Ｐｈ基因）所抑制时都是会出现部分同源配对，把拟斯卑尔脱小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍｓｐｅｌｔｏｉｄｅｓ即Ａｅｇｉｌｏｐｓｓｐｅｌｔｏｄｉｅｓ）的Ｐｈ基因导入了普通小麦（Ｔ．ａｅｓｔｉｃｕｍ），并在此基础上进一步分析了被导入的成对Ｐｈ和独立Ｐｈ基因的表现。因Ｐｈ基因对小麦的Ｐｈ的     

生物技术在杂交水稻上的应用

近十年来，生物技术，尤其是高等植物的组织培养及分子生物学，取得了长足的进步，花药培养，胚胎拯救（ｅｍｂｒｙｏｒｅｓｕｅ），原生质体融合，分子标记和ＤＮＡ转化等的技术，为杂交水稻的进一步发展提供巨大的潜力，各方面的进展包括，籼，粳稻的原生质体培养均获得再生植株，应用原生质体融合技术，培育了胞质杂种（ｅｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｈｙｂｒｉｄｓ，ｃｙｂｒｉｄｓ）并应用该技术把胞质雄性不育性（ｃｙｔｏｐｌａｍｉ     

水稻不同胞质育性恢复基因分子定位及其相互关系

基于日本水稻基因组（ＲｉｃｅＧｅｎｏｍｅＲｅｓｅａｒｓｈＰｒｏｇｒａｍ）的水稻ＲＦＬＰ分子遗传标记连锁图,对水稻野败型雄性不育的主要恢复基因和包台型恢复基因的分子位点作了分析比较,首次发现这两个基因位于同一ＤＮＡ区域,都与这一区间的分子标记紧密连锁,因而认为无论是与包台型还是与野败型主要恢复基因紧密连锁的分子标记都可以用于鉴定这两个类型的恢复基因。由于这两个雄性不育型不仅恢复基因位于同一染色体区域内,而且这两个体系的雄性不育系有着相似的恢保关系,因而这两个体系的主要恢复基因在遗传进化上可能有着密切的联系。     

人工诱变和自发突变产生的水稻核雄性不育突变体的花粉特征和遗传研究

对２３个水稻（Ｏｒｙｚａ　Ｓａｔｉｖａ Ｌ．）核雄性不育（ｍｓ）突变体的花粉特征、不育性遗传和不育基因等位性 进行了研究。 １０个突变体由乙基甲烷磺酸（ｅｔｈｙｌ　ｍｅｔｈａｎｅ　ｓｕｌｆｏｎａｔｅ）诱变而来，１个由亚乙基亚胺 （ｅｔｈｙｌｅｎｅｉｍｉｎｅ）引变，７个通过ｒ射线诱变，１个被链霉素（ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ）引变，１个通过组织培养而成，还有３个 大田中自发突变产生。在这些ｍｓ突变体中观察到４种花粉败育类型；３个属无花粉型（ＮＰ），６个为花粉完全败 育型（ＣＰＡ），１３个属花粉部分败育型（ＰＰＡ）和１个为花粉染败型（ＳＰＡ）。 ２年的后代测定（Ｐｒｏｇｅｎｙ ｔｅｓｔｓ）表明每种突变体都是一对隐性基因遗传。对 ２３个ｍｓ。突变体的不完全双列 杂交试验表明，突变体Ｅ２与Ｇ４等位，Ｅ５与Ｅ９等位，Ｎ２和Ｎ３等位，其它３个突变体Ｅ２、Ｇ６和Ｔ１具有相同的 ｍｓ位点。这些突变体的基因符号已被命名为ｍｓ－４６（ｔ）～ｍｓ－６３（ｔ）。     

棉属详尽的RFLP图谱介绍

棉属详尽的ＲＦＬＰ图谱介绍张天真南京农业大学棉花遗传育种研究室南京２１００９５棉花是最早开展性状遗传研究的农作物之一。但是由于染色体小、数目多、多倍体遗传特性等原因，棉花的性状遗传研究还不够深入。１９９４年，美国得克萨斯州ＡＸＭ大学的Ｐａｔｅｒｓｏｎ...     

随机扩增多态性DNA（RAPD）及其在茶叶科学领域的应用

随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）是用于作物种质资源鉴定及育种的分子标记。近年发展非常迅速，应用范围很广。本文就茶叶科学的几个方面论述了ＲＡＰＤ标记在茶叶科学研究的应用及前景：（１）茶树品种遗传连锁图谱的绘制，（２）茶叶种质资源鉴定及分类；（３）茶树目标性状基因的标记研究。     

PCR产物的RFLP分析在大豆根瘤菌研究中的应用

采用ＰＣＲ扩增１６—２３ｓｒＲＮＡ基因间序列和限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）法,分析了２７株属于快生、慢生二个类型的大豆根瘤菌。慢生大豆根瘤菌都产生了一条约１９０４ｐｂ大小的ＤＮＡ产物带。用ＨａｅⅢ、ＭｓｐⅠ和ＣｏｆⅠ限制性酶处理２７株菌株ＰＣＲ扩增产物,除ＤＨ４４４和ＬＬ１６外,其余菌株３种酶处理的结果一致,可以分成９种遗传模式组。９种遗传模式组与菌株的地理起源相关,但与细菌的血清学分组无直接关系。利用大豆根瘤菌１６—２３ｓｒＲＮＡ基因序列间的多态性特性,采用ＰＣＲ—ＲＦＬＰ法分组,比血清学更能反映根瘤菌的遗传进化关系。     

拟南芥抗病基因RPP8转化烟草及其表达分析

拟南芥的RPP8（at5g43470）基因编码一种NBS—LRR类抗病蛋白,特异性识别病原菌Peronospora parasitica 8。将该基因亚克隆到植物转化载体pBINPLUS上,通过农杆菌介导的方法将其转入烟草（Nicotiana benthamiana）。用PCR方法对转基因植株进行了初步鉴定,再利用RT—PCR分析了RPP8在烟草中的表达情况。结果表明拟南芥RPP8基因能在烟草中正确表达,说明烟草的转录系统能正确识别拟南芥RPP8基因的启动子、外显子和内含子并在mRNA水平进行正确的剪接。对拟南芥RPp8基因在烟草中的表达进行了初步的分析,这对在烟草中进行拟南芥的R基因的功能鉴定与验证提供了借鉴。     

侵染红花的黄瓜花叶病毒的鉴定及株系初步研究

１９９５和１９９６年分别在武昌和云南红花病株上获得两个黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）分离物ＣＭＶ—ＣＷ和ＣＭＶ—ＣＹ。ＣＭＶ—ＣＷ引起红花黄化花叶、严重矮化，而ＣＭＶ—ＣＹ仅引起红花轻花叶。在供试２３种植物中，两个分离物侵染１６种植物。两个分离物均能被桃蚜以非持久性方式传播，不通过红花种传；体外稳定性状分别为：致死温度５５～６０℃和５０～６０℃，稀释限点１０－４～１０－５和１０－３～１０－４，体外存活期３ｄ和４ｄ；病毒颗粒球状，直径分别为２７．２ｎｍ和２８．０ｎｍ；外壳蛋白分子量分别为２７５００和２８１００Ｄ。ＣＭＶ—ＣＷ和ＣＹ血清学性质和ＣＭＶ—ＣＡ相近。通过ＲＴ—ＰＣＲ扩增，获得ＣＭＶ—ＣＷ和ＣＭＶ—ＣＹ预期的５３４ｂｐ病毒外壳蛋白基因ｃＤＮＡ片断。株系研究表明，参试的ＣＭＶ—ＣＷ、ＣＭＶ—ＣＹ和其他２个ＣＭＶ中国分离物在温度敏感实验和血清学性质上与ＣＭＶ—Ｄ株系一致或相近，属于ＣＭＶ亚组Ｉ。依据在一组寄主植物上的反应，将４个参试ＣＭＶ分离物作了初步株系划分。     

大豆E3连接酶基因GmPLR-2 的克隆及抗旱功能鉴定

PEG模拟干旱胁迫条件下E3连接酶GmPLR-2 基因在大豆根茎叶中呈上调表达，推测其可能参与大豆抗 旱调节。本研究克隆GmPLR-2 基因，构建植物过表达载体pCAMBIA3301-GmPLR-2、RNA干扰表达载体pCAM⁃ BIA3301-GmPLR-2-RNAi并转化到吉农38中，对T2转基因植株进行分子检测，连续7 d不浇水后测定转基因叶片 中相关生理生化指标。结果表明：共获得T2过表达阳性植株12株，RNA干扰阳性植株11株。干旱胁迫7 d后过表 达植株中相对含水率、POD活性、SOD活性、Pro含量均高于未转化植株，而RNA干扰植株中则低于未转化植株；另 一方面过表达植株中相对电导率、MDA含量均低于未转化植株而RNA干扰植株中含量则高于未转化植株，且差异 极显著，说明GmPLR-2 基因的表达与大豆中相关抗旱指标的变化有关。     

药用万寿菊多倍体的诱导与特征分析

为获得四倍体药用万寿菊材料,采用秋水仙素对药用万寿菊‘内蒙1号’的种子进行多倍体诱导研究。以0.15%浓度的秋水仙素处理露白的万寿菊种子24 h,幼苗变异率较佳,可达到56%。幼苗定植于田间,初步筛选并标记形态变异植株,自花授粉后采收种子播种并观测子代形态指标,对形态变异明显的植株进行流式细胞仪检测,确定获得15株纯合四倍体。通过将四倍体与二倍体进行比较,四倍体植株茎粗、栅栏组织厚度、栅栏组织与海绵组织的比例和单朵花重量显著高于二倍体植株,四倍体植株总叶量、叶宽、叶长、叶长宽比、叶片气孔密度和单株花朵数量显著低于二倍体植株。获得的四倍体万寿菊植株单株花总重量比二倍体显著增加。     

刚果12号桉离体组织的多倍体诱导

以刚果12号桉（Eucalyptus 12ABL）下胚轴诱导出的愈伤组织及丛生芽为材料,采用浸渍法、点滴法、混培法等3种秋水仙碱处理法对其进行多倍体诱导.结果表明：在诱导愈伤组织时,浸渍法以处理时间为10 h与药液处理浓度为7 500mg/L、处理时间为22 h与药液处理浓度为2 500 mg/L的2个组合变异率最高,达到40%,点滴法以药液处理浓度为2 500mg/L变异率最高,达到42.9%;在诱导不定芽时,混培法以药液浓度为40 mg/L处理10 d的变异率最高,达到22.5%,点滴法以药液浓度为2 500mg/L的处理变异率最高,达到26.7%.多倍体植株形态特征表现为叶片肥厚宽大,叶色浓绿,茎较粗壮、气孔较大且数目较少,其染色体数目变为2n=4X=44.     

芜菁花叶病毒外壳蛋白基因的克隆与序列分析

根据芜菁花叶病毒（Ｔｕｒｎｉｐ Ｍｏｓａｉｃ Ｖｉｒｕｓ ＴｕＭＶ）外壳蛋白（ＣＰ）基因序列人工合成引物，用ＲＴ法合成ｃＤＮＡ后，通过ＰＣＲ法扩增并克隆ＴｕＭＶ海南分离物外壳蛋白基因。结果表明，外壳蛋白基因全长８６４个碱基，编码２８８个氨基酸。与Ｔｒｅｍｂｌｙ，Ｍ．Ｆ等报道的该苷酸同源率为９５．８％，氨基酸同源率为８４．８％。与徐平报道的核苷酸同源率为９６．３％，氨基酸同源率为９５．１％。与孔令洁     

转异苞滨藜BADH基因玉米高世代株系苗期外源基因表达及耐盐性功能分析

以转来自耐盐植物异苞滨藜的甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)玉米T8代株系BZ-136及受体对照自交系郑58(耐盐)为试材,采用盆栽种植方法,分析转基因植株中外源基因的表达情况,检测耐盐相关生理指标。结果表明,转基因株系BZ-136中的BADH酶活性及甜菜碱含量显著高于受体对照,随着盐胁迫时间的延长,其表达量先增加后减少,在胁迫7 d时分别达到了最大值。转基因株系幼苗株高和干重从盐胁迫第3天开始显著高于对照,鲜重和含水量在胁迫第5天和第7天时转基因株系显著高于对照;转基因株系根总体积显著高于对照,直径和根尖数在胁迫第5天时显著高于对照;转基因株系电导率和丙二醛含量均低于对照,分别在胁迫第3天和第7天开始达显著差异,叶绿素含量高于受体对照,从第3天开始二者差异达显著水平。由于外源BADH基因的表达显著提高了基因株系的耐盐性。     

二倍体西瓜及其同源四倍体叶片sRNA表达谱分析

植物多倍化后的基因表达平衡重建受到sRNA调节,miRNA是植物多倍化中基因表达进行反式调控的主要小分子成员。本研究利用新一代高通量测序对西瓜二倍体(2n)及其同源四倍体(4n)叶片的sRNA进行表达谱测序分析。结果表明:(1)2n中sRNA以21 nt为主,4n中则以24 nt为主。(2)在2n和4n鉴定出已知miRNA分别为110个和172个,新miRNA分别为246和829个,其中差异表达的已知miRNA 205个,新miRNA 815个。(3)GO功能显著性富集分析表明差异表达的miRNA在细胞组成、代谢过程及催化活性上显著富集。(4)KEGG代谢分析表明,差异表达的已知miRNA主要富集在初级代谢和次级代谢途径上,新miRNA则主要富集在植物激素信号转导途径、RNA转运途径和ABC转座子途径上。(5)差异表达的miRNA中与植物抗逆胁迫相关的已知miRNA 25个,新miRNA 62个,且80.46%抗逆miRNA在西瓜二倍体中上调表达,是四倍体中的4倍以上。根据miRNA的负向调控原理推测这些上调表达的miRNA在西瓜二倍体中可能会抑制部分抗逆基因的表达,影响二倍体的抗逆性。本研究在转录后调控调控水平上为西瓜多倍体较二倍体拥有更强抗逆性提供了理论依据,同时对西瓜多倍体及二倍体之间的基因表达谱分析做了补充。     

Down-Regulated Expression of RACK1 Gene by RNA Interference Enhances Drought Tolerance in Rice

The receptor for activated C-kinase 1 (RACK1) is a highly conserved scaffold protein with versatile functions, and plays important roles in the regulation of plant growth and development. Transgenic rice plants, in which the expression of RACK1 gene was inhibited by RNA interference (RNAi), were studied to elucidate the possible functions of RACK1 in responses to drought stress in rice. Real-time PCR analysis showed that the expression of RACK1 in transgenic rice plants was inhibited by more than 50%. The tolerance to drought stress of the transgenic rice plants was higher as compared with the non-transgenic rice plants. The peroxidation of membrane and the production of malondialdehyde were significantly lower, and the superoxide dismutase activity in transgenic rice plants was significantly higher than those in non-trangenic rice plants. It is suggested that RACK1 negatively regulated the redox system-related tolerance to drought stress of rice plants.     

大豆炸荚基因GmAGL8的转基因鉴定与功能初探

炸荚是大豆的一种自然特征属性,是影响大豆产量的重要因素之一。本研究以前期获得的转大豆炸荚相关基因GmAGL8的T_1代植株为材料,继续繁育获得T_2和T_3代;采用PCR和RT-q PCR检测方法对转基因植株进行基因遗传稳定性和表达情况分析;并以野生型中黄10号为对照,对大豆炸荚性状进行了鉴定分析。结果表明:转基因植株阳性率T_1代为87.5%,T_2和T_3代均达到100%,说明GmAGL8基因已基本能够在转基因后代中稳定遗传。RT-q PCR检测结果显示,转基因植株中GmAGL8基因的相对表达量都明显高于非转基因植株,且各转基因植株之间表达量具有差异性。对T_1、T_2和T_3代植株炸荚率进行了统计,不同世代转基因大豆的平均炸荚率为9.09%,而非转基因大豆炸荚率为83.3%,转基因与非转基因大豆之间炸荚率存在显著差异。综上所述,GmAGL8基因已基本实现在大豆转基因后代中稳定遗传并正常表达,表型鉴定结果初步证明了GmAGL8基因与大豆炸荚性状相关。