玉米自交系Pa405控制对小麦条斑花叶病毒抗性的三基因

玉米自交系Ｐａ４０５控制对小麦条斑花叶病毒抗性的三基因──（Ｍ．Ｄ．Ｍ￣ｃＭｏｌｌｅｎ等），ＭａｉｚｅＧｅｎｅｔｉｃｓＣｏｏｐ－ｅｒａｔｉｏｎＮｅｗｓｌｅｔｔｅｒ，１９９４，Ｖｏｌ．６８，３８（英文）小麦条斑花叶病毒（ＷＳＭＶ）是一种螨类传播的多型病...     

栽培甜菜（Beta vulgaris L．）和白花甜菜（B．corollifloraZoss．）种间杂交的研究Ⅱ．种间杂种回交后代染色体分布及形态变异

栽培甜菜（Ｂ．ｖｕｌｇａｒｉｓＬ．，ＰＴ６、２ｎ＝１９）与白花甜菜（Ｂ．ｃｏｒｏｌｌｉｆｌｏｒａＺｏｓｓ．，２ｎ＝３６）杂交获得ＶＣ８８～１杂种Ｆ＿１，其染色体组为ＶＶＣＣ，２ｎ＝３６．ＶＣ８８─１类似于异源多倍体，减数分裂基本正常，以其为母本与栽培甜菜（２ｎ＝１８）回交，或与其它物种如Ｂ．ｍａｒｉｔｉｎａＬ．杂交，皆获大量后代（Ｂ１０，Ｂ１４等），其染色体组为ＶＭＣ、ＶＶＣ等，２ｎ＝２７．以Ｂ１０～Ｂ１４（Ｂ＿１Ｆ＿２）为母本与栽培甜菜（２ｎ＝１８）回交，产生许多形态变异及各种染色体分布的后代（Ｂ＿２Ｆ＿３），其中以２ｎ＝１８染色体的植株最多达４１．５８％，推测它们当中可能含有代换系及易位系；２ｎ＝２７的个体出现频率高达３０．１９％，预示存在着无融合生殖现象；２ｎ＝１８＋１的植株以１０．３９％的频率出现，它们是带有白花甜菜染色体的单体附加系；附加２～８个染色体的植株频率为５．的％，低于前人报道数字；嵌合体频率达８．９３％，表现不稳定；极少数为２ｎ＝３６、２ｎ＝４５个体．     

植物幼苗中同分异构过氧化物酶的异同

植物幼苗中同分异构过氧化物酶的异同——（Ⅰ．Ｍ．Ｓａｖｉｃｈ），ＦｉｚｉｏｌｏｇｉｙａｉＢｉｏｋｈｋｉｍｉｙａＫｕｌ’ｔｕｒｎｙｋｈＲａｓｔｅｎｉｉ，１９９１，Ｖｏｌ．２３，Ｎｏ．４，３８１～３８６（俄文）用氨基酸团聚体和免疫化学法查出了不同植物种（...     

甘蓝型油菜芜菁花叶病毒分离物TuMVH_1的生物学研究

采自杭州甘蓝型油菜上的芜菁花叶病毒分离物ＴｕＭＶＨ１，经寄主反应测定，不侵染茄科普通烟和心叶烟，对多数供试甘蓝型油菜和十字花科蔬菜品种（品系）有强的致病力。枯斑指示植物检测和ＥＬＩＳＡ检测，选择城青２号大白菜作为毒原繁殖寄主，提纯病毒的得率为６—７ｍｇ病毒／１００ｇ鲜病叶，用提纯病毒制备的免抗血清经环状沉淀反应测得其效价为１／２００００，免疫电镜观察，ＴｕＭＶＨ１与同源抗血清有强的阳性反应，与另一个芜菁花叶病毒抗血清亦有阳性反应。提纯病毒经蛋白酶Ｋ处理，酚：氯仿抽提后在琼脂糖凝胶电泳中测定其ＲＮＡ分子量约为９．４ｋｂ。在接种ＴｕＭＶＨ；３０天的城青２号大白菜和甘蓝型油菜的植株细胞中观察到分散的线状病毒粒子和典型的风轮状内含体。ＴｕＭＶＨ１风轮状内含体的结构介于Ｅｄｗａｒｄｓｏｎ等所描述的亚型和Ⅳ型之间。     

超薄种皮的遗传

超薄种皮的遗传──（ＩｎｓｕｐＬｅｅ等），ＭａｉｚｅＧｅｎｅｔｉｃｓＣｏｏｐｅｒａｔｉｏｎＮｅｗｓｌｅｔｔｅｒｅｒ，１９９４，Ｖｏｌ．６８，１００（英文）笔者曾报道为改进杂交种品质而培育出的一韩国蜡质型自交系具极薄种皮（ＭＮＬ６７：１０９，１９９３）...     

在特立尼达州鉴定开放授粉的玉米品种

９６１１３在特立尼达州鉴定开放授粉的玉米品种──（Ｄ．Ｓｐａｎｅｒ等），ＰｌａｎｔＶａｒｉｅｔｉｅｓａｎｄＳｅｅｄｓ，１９９５，Ｖｏｌ．８，Ｎｏ．２，１２５～１３４（英文）１９９３～１９９４年对１０个玉米品种，包括ＣＩＭＭＹＴ选育的８个开放授粉品种，...     

玉米杂交种F_1中RAPD的遗传

玉米杂交种Ｆ＿１中ＲＡＰＤ的遗传─—（Ｍ．Ｈｅｕｎ等），ＴｈｅｏｒｅｔｉｃａｌａｎｄＡｐｐｌｉｅｄＧｅｎｅｔｉｃｓ，１９９３，Ｖｏｌ．８５，Ｎｏ．８，９６１～９６８（英文）对包括了１６个玉米杂交种Ｆ＿１（５个正反交）及其５个亲本系的一个部分双列杂交的...     

玉米抗茎腐病菌源Gibberella zeae侵染的数量特征基因位点

玉米抗茎腐病菌源Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａｚｅａｅ侵染的数量特征基因位点（ＱＴＬｓ）的勘测─—（Ｗ．Ｅ．Ｐｅ等），ＭｏｌｅｃｕｌａｒａｎｄＧｅｎｅｒａｌＧｅｎｅｔｉｃｓ，１９９３，Ｖｏｌ．２４１，Ｎ０．１／２，１１～１６（英文）为了解玉米抗茎腐病Ｇ．ｚｅａ...     

具有BT毒素基因的抗虫棉品系的产量,产量组成与纤维特性

具有外源抗虫基因的作物，产量与品质常会受到一定影响。孟什都（Ｍｏｎｓａｎｔｏ）公司的科学家培育了九个转基因陆地棉品系，它们都具有１－２个苏云金芽孢杆菌（ＢＴ）中Ｋｕｒｓｔａｋｉ的毒素基因、ｃｒｙＩＡ（ｂ）或ｃｒｙＩＡ（ｃ），这类基因可编码合成对鳞翅目有毒性的毒蛋白。我们从事的本项研究目的是确定这些转基因品系是否具有某些不良的农艺或纤维品质性状。在亚利桑那州（ＡＺ）Ｍａｒｉｃｏｐａ，我们分别于１９９０、１９９１、１８８２年种植了５、４、３个转基因品系，同时在每年试验中都以亲本品种柯字３１２（Ｃｏｋｅｒ３１２）和当地抗议的、无蜜腺型高纤维强度品系──“Ｍｄ５ｌｎｅ”作对照。体细胞无性变异，具抗虫蛋白基因以抗虫性的表达总体上并未导致皮棉产量、产量组成与纤维品质性状的下降。转基因品系在所测试的每一项性状上都有所变化。三年平均皮棉产量是转基因系１３５．４±４．５ｇ／ｍ２；柯字３１２为１１５．１±７．７ｇ／ｍ２；ＭＤ５ｌｎｅ为１４１．２±１１．４ｇ／ｍ２。九个转基因系中有六个皮棉产量较柯字３１２显著增产（１３－３０％）。同是这六个转基因系产量与ＭＤ５ｌｎｅ持平（－１０％～十７％）。与柯字３１２相比，九个转基因系中有４个     

为植物育种的分子标记：RFLP和RAPD基因型检测的费用比较

为植物育种的分子标记：ＲＦＬＰ和ＲＡＰＤ基因型检测的费用比较─—（Ｍ．Ｒａｇｏｔ等），ＴｈｅｏｒｅｔｉｃａｌａｎｄＡｐｐｌｉｅｄＧｅｎｅｔｉｃｓ，１９９３，Ｖｏｌ．８６，Ｎｏ。８，９７５～９８４（英文）本文比较了光化学限制性片段长度多态性（ｃＲＦＦＬ...     

芝麻坏死花叶病毒(SNMV)部分cDNA合成及序列分析

提取芝麻坏死花叶病毒RNA ,反转录合成cDNA ,对滞后重组质粒进行点杂交 ,得到阳性克隆并且测定序列。经计算机分析 ,获得 336 8个核苷酸 (nt)的序列。该序列含有一个完整的开放阅读框架 (ORF) ,该ORF由1134nt组成 ,推测编码 377个氨基酸 ,分子量为 4 0 .0 4 7× 10 3 道尔顿 (Da)。经比较它与Tombusviride科中Avreusvirus属石柑子潜隐病毒 (Pothoslatentvirus,PoLV)、Tombusvirus属病毒Cymbidiumringspotvirus(CRSV)外壳蛋白 (CP)氨基酸序列同源性分别为 4 0 .7%、4 0 .1% ,其起始氨基酸与Tombusvirus、Aureusvirus属另外的病毒CP起始氨基酸具有很高的保守性。根据这个完整ORF所编码蛋白的大小 ,与CRSV、PoLV病毒CP具一定的同源性 ,CP 5′端氨基酸的保守性 ,推测这个完整的ORF可能包含该病毒的外壳蛋白基因 ,并且这个病毒可能类似PoLV病毒 ,是Tombusviride科Aureusvirus属的一种新病毒     

海南黄灯笼辣椒顶死病病原病毒的分离鉴定

从海南省黄灯笼辣椒顶死病株上分离纯化得到一个病毒分离物.研究结果表明,该病毒分离物能通过汁液磨擦接种侵染供试植物中的4科11种植物,可由桃蚜传播;提纯病毒粒子呈球形,直径28～30 nm,外壳蛋白分子量约为28 ku;分离物与CMV抗血清在ELISA测定中呈阳性反应;提取病毒分离物RNA,应用RT-PCR方法克隆了病毒外壳蛋白（CP）基因.CP基因675 bp,编码218个氨基酸.对CP基因序列分析表明,该病毒分离物的CP基因核苷酸序列与黄瓜花叶病毒亚组Ⅰ分离物的同源性均在92.1%以上,所推导的氨基酸序列同源性在96.3%以上,而与亚组Ⅱ分离物的核苷酸序列同源性均低于77.3%,所推导的氨基酸序列同源性均低于80.7%.据此将该病毒分离物鉴定为黄瓜花叶病毒,归属于亚组Ⅰ.     

大肠杆菌glgC基因的定点突变及高效表达

通过PCR方法,从E.coliJM109基因组DNA中扩增到全长为1296bp的glgC基因,对其进行定点突变,获得第296位和336位氨基酸同时突变的glgC336基因。将2者亚克隆进pET-30a,成功构建了重组表达载体pET-C和pET-C336,转化大肠杆菌BL21(DE3),在1mmol/LIPTG诱导下进行表达。SDS-PAGE电泳分析显示,在约53kD处有1条明显的蛋白表达带,证明目的基因已得到高效表达,且重组蛋白表达量占菌体蛋白总量的77.3%。     

花生(Arachis hypogaea L.) CaM基因克隆与序列分析

提取花生(Arachis hypogaea L.)幼嫩叶片基因组DNA,合成5'端和3'端引物,进行PCR并克隆测序,得到CaM基因组的2个异型基因PGCaM-1和PGCaM-3,登录Genebank并注册为AY517933、AY572856。序列分析表明,PGCaM-1序列全长1425 bp,在第25个氨基酸之后有一个长度为973 bp的内含子,PGCaM-3序列全长447 bp。两个异型基因的开放读码框均由447个核苷酸组成,共编码148个氨基酸,同属于EF手型CaM超家族成员,核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为96%和98%,与已知花生CaM cDNA序列及氨基酸均有极高的同源性,序列之间的差异可能引起表达和功能上的差异。     

甘蓝型油菜BnADC基因的克隆及原核表达

利用同源克隆和RACE(Rapid amplification of cDNA ends)技术从甘蓝型油菜中克隆到精氨酸脱羧酶(Arginine decarboxylase,ADC)基因cDNA全长序列,命名为BnADC。BnADC全长为2 649bp,包含344bp的5′非翻译区(5′ Untranslated region,5′-UTR)、226bp的3′非翻译区(3′ Untranslated region,3′-UTR)和2 079bp的完整开放阅读框(open reading frame,ORF),编码75.1kD的蛋白质。5′-UTR中含有12bp的uORF (Upstream open reading frame),编码MIRE 4个氨基酸。氨基酸同源性比对表明,BnADC蛋白与其他植物ADC蛋白具有很高的相似性,与芥菜的同源性高达93%;系统进化树分析表明,BnADC与芥菜、拟南芥的ADC亲缘关系较近。在获得全长cDNA的基础上,构建融合表达载体pET30a(+)-BnADC,转化大肠杆菌（Escherichia coli）表达菌株BL21(DE3),SDS-PAGE检测到一个约81.1kD的融合蛋白被E. coil表达,且融合蛋白主要存在于菌体沉淀中。     

花生条纹病毒株系生物学特性及壳蛋白基因序列分析

根据在花生上的症状,将５个ＰＳｔＶ中国分离物划分为轻斑驳,斑块和坏死三个株系类型。在其它鉴别寄主上,５个ＰＳｔＶ上分离物有相似所症状。轻斑驳株系对花生主茎高度影响不明显,荚果减产２１．０％－３５．６％,种子带毒率高。而斑块型株系分别降低花生高度和荚果产量９．２％－１６．３％,和３０．３％－５４．４％,种子带毒率低。     

水稻黑条矮缩病毒基因组片段S10的cDNA克隆及全序列分析

基于RT-PCR策略克隆了水稻黑条矮缩病毒（rice black streaked dwarf virus,RBSDV）浙江分离株基因组S10,并测定了它的全序列。结果表明,水稻黑条矮缩病毒浙江分离物（RBSDV-Zj）基因组片段S10全长1801 nt（EMBL登录号为AJ297433）,仅含有一个大的开放阅读框（open reading frame,ORF）,编码一个63.1 kD的多肽,与日本的水稻黑条矮缩病毒基因组片段S10在核苷酸和氨基酸水平上同源性分别为93.8%和96.2%;与意大利玉米粗缩病毒（maize rough dwarf virus,MRDV）的基因组片段S10在核苷酸和氨基酸水平上的同源性分别为87.7%和92.0%,推测它们是同一病毒的不同地理小种。     

橡胶树炭疽病菌Cap20基因的克隆和序列分析

根据鳄梨胶孢炭疽菌Cap20基因序列设计引物,利用同源基因克隆法获得橡胶树胶孢炭疽菌和尖孢炭疽菌Cap20基因,同时进行核苷酸序列、氨基酸序列及聚类分析。结果表明:2种橡胶树炭疽菌的Cap20基因均含2个外显子和1个内含子,编码183个氨基酸;橡胶树胶孢炭疽菌与鳄梨胶孢炭疽菌同源性最高,其核苷酸序列同源性达90.3%,氨基酸序列同源性达98.9%;来自橡胶树的2种炭疽菌Cap20基因序列存在较大差异,其核苷酸水平同源性仅为73.8%,氨基酸水平同源性为79.8%;炭疽菌CAP20和绿僵菌MPL1蛋白结构具有42%的同源性,所含蛋白结构域相似,推测炭疽菌Cap20基因可能与绿僵菌Mpl1基因功能具有相似性。     

水稻抗病基因同源序列的克隆及测序分析

 根据已知的NBS LRR类及丝/苏氨酸蛋白激酶类抗病基因结构中氨基酸的保守区域，设计了两组简并引物用于扩增广谱抗稻瘟病品种云系2号中的抗病基因同源序列。结果一共获得11类的NBS-LRR类抗病基因同源片段及16类的丝/苏氨酸蛋白激酶类抗病基因同源片段。所有11类的抗病基因同源系列均含有NBS-LRR类抗病基因的保守序列，如P-loop、Kinase 2、Kinase 3a以及跨膜区域等。所有16类的蛋白激酶的序列均含有丝/苏氨酸蛋白激酶所共有的催化区Ⅵ（共有氨基酸序列：DLKPEN）、Ⅷ（共有氨基酸序列：GT/SXXYXAPE）以及蛋白激酶的其他催化区。两条NBS-LRR类的抗病基因同源片段YR1、YR12分别与抗病基因I2 C-2及Xa1氨基酸同源性很高(>50%)。7条丝/苏氨酸蛋白激酶类的抗病基因同源片段与已克隆的[WTBX][STBX]Xa21、Pto、Lr10[WTBZ][STBZ]等抗病基因的氨基酸序列超过60%的相同以及76%~78%的氨基酸类似。     

多年生野生大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因的克隆及分析

利用RT-PCR方法,从对蚜虫高抗的多年生野生大豆短绒野大豆(G.tomentella)(2n=78)未成熟子叶中扩增到了大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂同源基因单一目的片段,该基因和蛋白分别被命名为KTiPW54和KTiPW54。序列分析表明:该片段为654 bp的完整编码序列,编码218个氨基酸残基,编码的蛋白与栽培大豆(G.max)、野生大豆(G.soja)、短绒野大豆(G.tomentella)的Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因编码蛋白高度保守的区域一致。将KTiPW54编码区克隆到表达载体pTWIN1,在宿主菌BL21(DE3)中经IPTG诱导获得高效表达。