新时期推进农业科研单位离退休干部党支部建设的思考

采用单芽片贴接、双芽枝条皮质层插皮腹接、双芽砧木劈接技术对日本甜柿成活率,早花、座果率、单株产量进行研究。结果表明,单芽片贴接技术各项指标均大于另外两种嫁接技术,成活率达91.79%,开花时间提早3～5 d,座果率高出5%和8%,单株均产果量高6.9%和34.05%,抗风断枝情况好,对提高日本甜柿产量有显著效果。     

热带特色果树——尖蜜拉繁殖技术研究

为探讨热带特色果树——尖蜜拉的有效繁殖技术，扩大推广种植，开展尖蜜拉播种繁殖与芽接繁殖技术研究。试验结果表明，播种繁殖能获得较高的发芽率，但种子苗长势弱；以本地菠萝蜜种子苗为砧木，能成功芽接尖蜜拉，芽接成活率为76%，砧木和接穗的亲和力高，芽接苗长势较好。生产中可采用芽接法繁殖尖蜜拉的优良种苗并推广种植。     

龙眼和芒果小苗切接技术

一、龙眼小苗低位切接技术对于龙眼嫁接方法的研究，近几年有很大的发展．从舌接法到目前普遍使用的切接法，更显得方法简单易行，提高工效和节省接穗等优点。低接位的优点一是生产上有利矮密早栽培，二是解决个别龙眼苗种植后接口处产生上大下小，植株生长不良的问题，即树头培土重新引发接位处生根。然而，由于龙眼嫁接技术性较强，往往因某个环节操作不当或气候条件不适而影响成活率．尤其是低位嫁接，因组织相对老化，而成活率不高。为了探索龙眼小苗低位切接的技术，经过多年的嫁接实验，其成活率达85％以上。现将这项技术介绍如下。一…     

云南大叶种茶树老枝封蜡嫁接技术

从多年茶树嫁接实践中研究得出一套老枝封蜡嫁接技术,解决了传统嫁接方法中因接穗易失水或渍水导致成活率低的问题,并创新探索出腹接与切接相结合的"腹切混接"方法。     

不同嫁接方法对文冠果嫁接成活率的影响

[目的]探讨文冠果嫁接的最佳方法。[方法]在陕西省富县中心苗圃进行文冠果嫁接方法的试验,研究常规嵌芽接法、改良嵌芽接法、切接法对文冠果嫁接成活率的影响。[结果]3种嫁接方法中,以改良嵌芽接法进行文冠果嫁接育苗效果最佳,成活率最高,切接法效果最差。[结论]在一定时间和温度范围内,不同的嫁接方法和技术水平对文冠果嫁接成活率的影响显著。     

棉花高效嫁接新方法及其应用研究

建立适合双子叶植物幼苗和幼嫩枝条高效嫁接方法，解决转基因植株、体细胞再生植株、茎尖培养植株等无菌苗直接定植困难问题。首次将“Y型”劈接法嫁接技术用于棉花组培再生植株的嫁接，详细介绍了操作过程和实用技巧。本研究采用合接法、贴接法、切接法、常规劈接法、插皮接法、嵌合法6种已报道嫁接方法与新建立的“Y型”劈接法进行棉花嫁接比较试验及不同嫁接时期成活率及生长速率的比较试验。另外，将“Y型”劈接法在其他双子叶植物中也进行了嫁接试验。结果表明，“Y型”劈接法嫁接棉苗的成活率最高，达到92%以上，适合嫁接的砧木使用时间较长（1～6片真叶均可），此嫁接方法操作简便、砧木与接穗固定方便且愈合快，嫁接速度快，对环境的温、湿度无需严格控制，应用广泛。此技术体系可整年用于棉花转基因苗和组培苗的嫁接，突破了苗木一般在春季进行嫁接的局限。     

芒果嫁接技术的创新研究

通过芒果传统育苗方法(包括枝接法、芽接法)进行创新研究，对传统接穗(休眠芽)和创新接穗(活动芽)进行了比较试验，结果表明：采用创新接穗比传统接穗具有出苗质量一致，出苗较快且具有高达88 %以上的成活率。为我国芒果产业节约资源，快速更新、推广新品种提供了一种新的嫁接方法。     

青梅高接换种试验初报

通过四种不同方法高接换种对青梅嫁接成活率、桩口愈合表现、高接枝折裂情况以及嫁接第二、三、四年表现的产量等性状进行试验观察。试验结果表明：青梅成年树大枝高接采用双头对芽切接法，两芽向内交叉生长，再次靠接后连成一体，桩口愈合好，接口牢固，生长旺，树冠恢复快，产量高，具有较高的生产推广价值。     

不同体积切种处理对甘蔗单芽育苗效果的影响

通过切割不同体积单芽茎段和使用ABT溶液浸泡单芽茎段,探讨不同体积单芽茎段处理方式对育苗效果的影响,为推广甘蔗单芽茎段繁殖技术提供技术支撑。以桂糖42号为供试品种,设3个不同处理,分别为完整单芽茎段,1/2单芽茎段和1/4单芽茎段,其中每个处理又分为清水浸泡茎段2小时与50mg/L ABT浸泡2小时2个处理。出苗后调查甘蔗苗株高、苗粗、展开叶片数和根鲜重干重等指标。结果表明,完整处理的单芽茎段各项指标均极显著优于1/2单芽茎段和1/4单芽茎段;1/2单芽茎段育苗效果显著优于1/4单芽茎段;而ABT浸泡种茎对育苗效果没有显著影响。     

热区桃树育苗技术研究

对解除桃种子休眠的3种方法及2种嫁接方法在不同生长季节的嫁接成活率进行比较研究。结果表明，用冷藏和除去种皮的方法可解除桃种子的休眠，切接和嵌芽接对桃树嫁接的成活率都较高，但用嵌芽接法嫁接较好。     

转基因番木瓜 55-1 转化事件定性 PCR 检测方法的建立

为了防止国外商业化生产的转基因番木瓜流入国内市场,建立转基因番木瓜 55-1 转化事件定性 PCR 检测方法,对于保护国内消费者知情权意义重大。本研究以转基因抗环斑病毒番木瓜 55-1 为研究材料,利用外源基因和番木瓜基因组序列设计了 9 对特异性检测引物,通过特异性引物筛选、熔解曲线分析、退火温度优化、特异性验证、灵敏度分析及检测限验证,建立转基因番木瓜 55-1 转化事件定性 PCR 检测方法。结果表明：本研究筛选出的检测引物,可特异的检出转基因番木瓜 55-1 转化事件,引物的检测灵敏度达到了 0.1%的标准,高于欧盟0.9%的检测要求,完全可满足转基因检测标识制度的顺利实施。     

施用不同配比肥料对番木瓜产量与品质的影响

为探讨不同氮磷钾配合施肥对海南地区番木瓜产量和品质的影响,在海南儋州地区进行了氮磷钾不同配比施肥试验。结果表明:施肥可增加番木瓜的产量,不同氮磷钾的施肥组合有不同的增产效果,增产率变化在25.30%~69.08%之间。其中氮的增产效果最好,磷肥次之,钾肥最差。结合氮、磷、钾各水平的增产情况和经济效益分析,认为N 340 g/株、P2O5470 g/株和K2O 340 g/株为番木瓜高产的推荐配方。番木瓜不同品质指标对氮磷钾不同水平组合的响应不同。施肥显著增加单果重,增幅在5.92%~23.64%之间。钾对单果重的贡献优于磷,氮最差。尽管施肥没有造成番木瓜大多品质指标上的显著差异,但从各品质指标与各元素水平之间的变化趋势关系上给出施肥建议是,番木瓜要维持较高品质,必须慎施氮肥,多施磷、钾肥。结合经济效益和环保因素,从理论上N 210 g/株、P2O5210 g/株和K2O 340 g/株为番木瓜优质的推荐配方。     

基于RNAi抗PRSV番木瓜株系的培育及其分子特征验证

根据RNAi原理构建的抗海南番木瓜环斑病毒(PRSV)植物表达载体p CAMBIA2300-35S-CP-RNAi-OCS,通过基因枪法将载体导入番木瓜的愈伤组织中,经卡那霉素抗性筛选后再分化成为植株。描述转化植株的分子特征同时进行抗病毒试验分析其抗病性。实验结果显示:转基因株系474为单拷贝插入的杂合子,插入位点在第7号染色体supercontig_61的717 141位置;抗病毒试验中,在接种病毒后28 d内非转基因株系1280有高浓度的病毒积累并很快表现出明显的病症,而转基因株系474基本无病毒积累且无发病症状。表明转基因株系474具有较好的PRSV抗性,有待于进一步田间试验。     

基于点评估方法的两广地区番木瓜中农药残留膳食暴露风险研究

为评估两广地区番木瓜中主要农药的残留情况及其产生的风险,采集了广东、广西地区40个生产基地的番木瓜样品进行测试分析,研究其生产过程中使用的杀虫剂、杀菌剂、杀螨剂和植物生长调节剂等各种农药残留情况,并对我国不同人群的膳食暴露风险进行了评估。结果显示,40批次番木瓜中检出农药残留32批次;在检出的32份番木瓜样品中,检出率超过10%的有咪鲜胺、吡虫啉、多菌灵、啶虫脒和苯醚甲环唑5种农药,检出率分别为51.1%、21.5%、13.3%、11.1%、10.9%。采用点评估方法,选择检出率在10%以上的咪鲜胺、吡虫啉、多菌灵、啶虫脒和苯醚甲环唑,进行农药残留慢性膳食摄入风险（%ADI）评估、急性膳食摄入风险（%ARfD）评估,并进行不同消费人群暴露点评估。结果显示：检出的5种农药%ADI均低于100.00%,为0.00023%~0.0059%;%ARfD远低于100%,为0.50%~28.3%,5种农药的急性和慢性摄入风险均为儿童高于成年人,绝大多数女性的摄入风险高于男性;5种农药急性摄入风险均高于慢性摄入风险,风险水平由高到低为咪鲜胺>啶虫脒>苯醚甲环唑>多菌灵>吡虫啉,但点评估结果均远低于100%,说明通过食用番木瓜摄入的农药残留极其微量,不会对人体产生急性或慢性风险。     

番木瓜籽蛋白提取工艺及其性质研究

为开发利用番木瓜籽中的蛋白质,以番木瓜籽蛋白提取率为指标,通过单因素实验比较超声辅助提取(UAE)与超声-微波协同辅助提取(UMAE)对番木瓜籽蛋白提取的影响,并确定辅助提取方法及条件,后采用Box-Behnken试验设计优化提取工艺,并对番木瓜籽蛋白等电点、溶解性、起泡性、乳化性、持水性等性质进行研究。结果显示:UMAE较UAE提取番木瓜籽蛋白具有更快速、高效、节能的特点;响应面优化UMAE提取工艺条件为料液比1∶90,提取2 min,功率50 W,提取率约为52.31%,与理论值无显著差异;番木瓜籽蛋白的等电点p I4.56,p H4.5时起泡性最好,乳化性、溶解度最低;该蛋白持水能力较低,为(1.58±0.3)g/g。     

巴西橡胶树自根幼态无性系耐低温分析

为比较橡胶树新型种植材料——自根幼态无性系与同源老态芽接无性系的耐低温能力,本研究将1蓬叶稳定的热研7-33-97老态芽接苗和自根幼态无性系苗5 ℃低温处理后,测定叶片的相对电导率、可溶性糖含量和游离脯氨酸含量等生理指标,并进行叶片受害调查。结果显示,自根幼态无性系叶片相对电导率低于老态芽接苗,可溶性糖含量和游离脯氨酸含量均高于老态芽接苗。此外,对5 ℃处理4 d后叶片受害情况调查发现,自根幼态无性系大部分叶片未受害,而老态芽接苗叶片几乎全部干枯或脱落。因此,室内低温模拟实验表明,自根幼态无性系在耐低温能力方面较老态芽接无性系更强,这为自根幼态无性系的生产应用提供了更广阔的前景。     

用Golden Gate法构建广谱抗番木瓜环斑病毒海南株系的CRISPR/FnCas9植物表达载体

分子生物学育种是目前防治番木瓜环斑病毒(PRSV)最有效的方法。早期转基因番木瓜抗病毒的策略是根据"致病菌衍生的抗病性"(PDR)原理,将病毒来源的基因全长序列,转入番木瓜并获得抗性。PDR策略最主要特点依赖于靶目标病毒基因序列相似性,不能有效解决海南的番木瓜环斑病毒遗传多样性复杂的株系。本研究着眼于创制广谱的抗PRSV新策略,用最新的CRISPR/FnCas9基因编辑技术和Golden Gate载体构建系统,依据不同PRSV株系的保守序列分析结果,将5个sgRNA(2个CP sgRNA,2个Nib sgRNA和1个HC-Pro sgRNA)串联在一个载体上,实现一个载体可识别剪切5个位点,从而达到广谱抗PRSV的效果,应对海南地区PRSV株系复杂的问题。目前载体已经进行了测序验证,并在番木瓜上进行了叶片局部瞬时表达,初步表现出对PRSV的抑制效果,这为获得广谱抗番木瓜环斑病毒的番木瓜品种奠定良好基础。      

禾生素和水杨酸对番木瓜PRSV病情及其防御酶活性的影响

为了研究禾生素(CTS-N)和水杨酸(SA)对番木瓜(Carica papaya L.)较长期抗番木瓜环斑病毒(PRSV)的效果,测定了CTS-N和SA处理后番木瓜300 d内PRSV病情指数变化和CTS-N处理后关键防御酶活性的变化。结果表明,施用CTS-N后番木瓜PRSV病情指数持续偏低,清水和SA处理的则较高,田间第240、270和300天,CTS-N处理的PRSV病情指数显著低于清水和SA处理。CTS-N处理后,番木瓜叶片中多酚氧化酶(PPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)的     

超高产橡胶芽接树的树皮结构特征

据数年来的观测表明,在生产实践中出现有少量的植株(称其为"超高产橡胶芽接树"),其单株产胶量约达当地普通橡胶芽接树平均单株产胶量的15～20倍.为了探索这些超高产芽接树高产的原因.对砧木为无选择种子砧木,接穗为PB86的树干割线上10 cm背面的树皮和输导根的结构进行了研究.结果表明,超高产橡胶芽接树树干有输导功能韧皮部的厚度、幼嫩乳管列数、总乳管列数、幼嫩乳管列占总乳管列比例、乳管口径和筛管口径均显著大于普通芽接树.特别是超高产芽接树有输导功能韧皮部乳管列数与有输导功能韧皮部细胞层数的比值显著大于普通芽接树;另外,超高产橡胶芽接树输导根的皮层薄壁细胞厚度和皮层薄壁细胞层数显著小于普通芽接树,而导管口径却显著地大于对照(普通芽接树),这表明超高产橡胶芽接树形成层分化为乳管的能力、营养物质和水分运输能力都强于对照株.     

马铃薯单细胞分离技术的研究

以马铃薯栽培品种“甘农薯1号”的无菌苗、子叶以及已建立的细胞悬浮培养系为材料,分别用酶解法和过滤细胞悬浮培养系的物理方法进行了马铃薯单细胞分离技术的研究。结果表明,酶解时,果胶酶浓度为0.20%～0.25%,解离4h获得的单细胞产量最高,且单细胞分裂频率可达16%以上;另外,酶解愈伤组织分离单细胞,比酶解子叶和叶片效果更好。而在用细胞悬浮培养物进行单细胞分离研究时,发现瓶壁法是一种最好的细胞悬浮液继代方法,可直接获得90%的单细胞频率,且细胞形状圆、胞质浓厚。采用过滤法分离单细胞,可得到98%的单细胞频率;3层细胞筛过滤法可有效提高所得单细胞的植板率。总体比较,过滤细胞悬浮培养物的物理操作方法获得的单细胞比酶解法获得的单细胞分裂能力更强。