基于双平台的InDel标记玉米杂交种纯度鉴定方法

种子纯度是种子质量检测重要指标,也是玉米生产中利用玉米杂种优势,获得高产稳产的重要保证。开发建立一套高效、高通量和低成本的玉米杂交种纯度鉴定方法,是我国玉米生产应用中迫切需要解决的问题。选用郑单958、京科968、农大108等10个玉米杂交品种为材料,利用20个InDel分子标记,建立了一套玉米杂交种纯度筛检分离的鉴定方法。该方法利用荧光毛细管电泳平台组建的多重PCR及多重电泳,结合KASP平台鉴定玉米杂交种纯度,实现高效、高通量和低成本的目标,经验证KASP平台纯度鉴定结果与预期结果一致。     

利用幼苗芽鞘颜色鉴定玉米杂交种种子纯度

玉米种子的纯度一直是种子生产者和经营者关注的问题，种子纯度的高低直接影响玉米的产量。而其纯度的鉴定尤为重要。笔者根据多年工作中的实践经验和学习积累，摸索出室内利用幼苗芽鞘和第一叶缘颜色鉴定玉米杂交种子纯度的方法，以供生产用种和种子调运时参考借鉴。     

热研一号油绿苦瓜种子纯度的SSR鉴定

利用SSR分子标记技术对‘热研一号’油绿苦瓜杂交种纯度进行鉴定。从26对SSR引物中筛选出在亲本间表现明显多态性的8对引物，其中5对为共显性标记，3对为显性标记，利用3对共显性标记对其进行纯度检测。结果表明，‘热研一号’油绿苦瓜种子纯度为99.38％，与田间形态学鉴定结果高度一致。说明SSR分子标记可以快速、准确地鉴定‘热研一号’油绿苦瓜杂交种纯度。     

应用SSR标记技术鉴定玉米杂交种纯度

以张玉1号、纪元1号、蠡玉6号、万佳11杂交种及其各自亲本为实验材料．利用16对玉米SSR引物进行SSR扩增,筛选出了适合该杂交种纯度鉴定的SSR引物．建立了一套利用SSR标记技术快速、准确、简便易行地进行玉米杂交种纯度鉴定的技术。     

玉米杂交种纯度室内鉴定方法

品种纯度检验是玉米新品种保护及种子生产的技术依据．本文综述了玉米杂交种纯度室内鉴定的方法与技术,利用种子的形态鉴定、幼苗鉴定、电泳测定方法测定玉米纯度．经多年试验证明这些鉴定方法准确度高、检验周期短,是室内检验的可靠方法。     

玉米功能性Insertｉon/Deｌetｉon(InDeｌ)分子标记的挖掘及其在杂交种纯度鉴定中的应用

InDel作为重要的遗传标记已被广泛用于作物连锁图谱的构建及多样性研究。通过生物信息学方法从玉米全基因组水平进行InDel标记的挖掘并对其在玉米杂交种纯度鉴定中的应用进行分析,根据B73全基因组序列(第二版)及Mo17的二代电子拼接序列发现了40 000多个InDel位点,其中约有11 400个含有InDel位点的序列可用于特异性引物的开发。新发展的143个代表基因(<1 kb)或基因内部的功能性InDel标记在B73及Mo17间得到了验证并用于玉米杂交种纯度的鉴定。经过分析,共有13个共显性InDel标记在6个杂交种亲本间表现出明显的长度多态(>50 bp)。结合玉米子粒DNA快速提取方法,利用这些共显性InDel标记对6个杂交种1 400多个样本纯度进行鉴定,结果显示该方法可以快速、准确、经济地鉴定玉米杂交种纯度。     

利用SSR标记技术检测玉米杂交种纯度

对玉米子粒DNA提取、SSR扩增片段检测方法等进行了研究,并以4个利用常规种子贮藏蛋白质电泳技术难以鉴定纯度的玉米杂交种及相应自交系和9对玉米SSR位点引物为材料,分别筛选出适合这些不同杂交种纯度鉴定的SSR位点引物,建立了一套利用SSR标记进行玉米杂交种纯度鉴定的技术规程.该程序包括从粉碎干种子提取DNA和利用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离SSR扩增片段,对仪器设备要求较低、简单、快速,易于推广。     

基于DNA-SSR分析2015年度我国主推棉花杂交种纯度

生产上棉种尤其是杂交种的真实性和纯度检测是1项大家十分关注的问题。2015年受7家棉种企业的委托,承担了棉种纯度鉴定工作,共接受样品95份,其中杂交种93份,亲本2份。利用SSR检测技术,发现2015年的纯度比2014年略提高,2年均明显优于2013年,表明近年杂交种的制种质量有明显的提高。检测工作开展以来,杂交种的做假行为得到了有效遏制。     

利用SSR标记鉴定西瓜杂交种纯度的研究

建立快速、准确、稳定的种子纯度检测技术是保证西瓜杂交种质量的有效措施。利用分子标记技术对小型西瓜‘美月’杂交种纯度进行鉴定。从均匀分布于不同西瓜染色体上的88对SSR引物中筛选出8对引物在‘美月’亲本间表现明显的多态性,分别位于第1、2、3、6、8、9、10染色体上,多态性比率为9.09%,多态性标记均为共显性标记。为了提高检测效率,结合多态性片段大小,同时对标记SSR48和SSR62进行扩增,可成功获得221 bp和131 bp的两组特异性条带,成功建立了双重PCR体系。为了提高鉴定结果的准确性,选用位于西瓜不同染色体上的4对共显性标记对‘美月’进行纯度检测,4对标记的检测结果高度一致,‘美月’杂交种纯度为99.44%。标记鉴定结果与田间表型鉴定结果比较分析表明,2种鉴定结果高度一致。研究结果可为西瓜杂交品种纯度快速检测和品种权保护提供理论依据与技术支撑。     

利用SSR标记检测棉铃种仁DNA鉴定杂交种纯度

利用棉铃种皮DNA和种仁DNA的差异，通过Simple sequence repeats (SSR)分子鉴定技术在棉花制种后期快速检测制种质量。筛选杂交种亲本间的多态性SSR引物，应用多态性引物鉴定棉铃种仁的指纹图谱，指纹图谱与种皮一致，表明该棉铃为自交铃；种仁图谱为共显性谱带，则该棉铃为杂交铃，计算杂交铃的比例得出杂交种的制种纯度。F₂的图谱分离验证了遗传的分离规律，F₂的个体间具有不同的指纹图谱，育种过程中的杂交后代的分子检测能加速育种进程。     

玉米纯度分子鉴定标准研制相关问题的探讨

通过分析纯度鉴定和一致性鉴定的关系,探讨与纯度鉴定标准制定相关的8个问题,包括是否覆盖所有品种类型、是否鉴定所有杂株类型、是否提供杂交种的制种亲本、是否用田间小区种植鉴定结果进行校正、是否指定检测平台、是否在纯度鉴定前先鉴定真实性、是否所有样品都能鉴定、是否适用于转基因品种纯度鉴定,确定一套切实可行的纯度分子鉴定技术规范和标准。以玉米杂交种纯度分子鉴定为例,确立鉴定引物选择和鉴定程序,并分析弱苗、病苗、非典型株和种子发芽率对田间小区种植和室内分子鉴定结果吻合性的影响。     

水稻杂种纯度鉴定方法现状

杂交水稻的纯度问题一直是杂交水稻生产中的一个十分重要的问题,这一问题无论是对生产者来说,还是对使用者来说,事关重大。如果杂交种纯度不达标甚至严重超标,生产者不仅面临经济赔偿问题,更重要的是失去信誉,失去市场,失去生存空间。而给使用者带来的则是直接经济损失。因此,生产者对水稻杂种纯度鉴定提出了愈来愈高的要求,要求鉴定方法简单、鉴定周期短,鉴定结果要与生产要求基本相符。为了保证杂种纯度在“源”上抓提纯,在“流”上抓鉴定方法。笔者查阅了国内的有关资料,对水稻杂种纯度的鉴定方法作了简要的概述。1　田间鉴定法将收获的…     

鉴定玉米杂交种郑单958种子纯度的SSR标记筛选

利用SSR标记技术,选用50对SSR引物以玉米杂交种郑单958及其父母本DNA为材料,筛选出了4对在杂交种中呈现双亲互补带型的引物。研究表明：这4对引物均可用于玉米杂交种郑单958种子的纯度鉴定。     

棉花多种质量标记性状亲本在杂交制种上的应用

利用棉花杂种优势是提高棉花产量和纤维品质的一条重要途径 ,杂交种的纯度是杂种优势能否充分发挥的关键所在 ,而提高亲本的纯度、鉴别真假杂交种则是提高杂交种纯度的前提。为此 ,从1 983年开始 ,我们利用棉花质量性状基因 R1、l2 s、gl2 gl3 、fg,选育出了具有不同标记性状的亲本 1 5种 (表 1 ) ,由于亲本具有标记性状 ,容易进行去杂保纯。利用这 1 5种具有标记性状的亲本组配出了 2 4种具有 2～ 3个不同于母本标记性状的杂交组合(表 2 )。杂交种 F1的标记性状与母本的标记性状具有明显差异 ,杂交种纯度的鉴定简便易行。这些杂交组合母本…     

棉花杂交制种的纯度保障

棉花杂交制种的纯度直接影响杂交种生产、销售和应用。因棉花杂交制种过程中，混杂和搀假现象时有发生，因此应加强监管。     

中国玉米新品种DNA指纹库建立系列研究Ⅰ.玉米品种纯度及真伪鉴定中SSR技术标准实验体系的建立

本研究从DNA提取、PCR扩增、电泳检测等环节对SSR技术进行了优化,最终建立一套完善的适用于玉米品种鉴定的SSR标准体系.并以玉米杂交种农大108的纯度鉴定为例,探索了该体系在玉米杂交种鉴定中实际应用的可行性.     

热辣2号辣椒纯度鉴定及优良自交系遗传多样性分析

为了提高种子质量和充分利用辣椒种质资源,应用SSR分子标记对热辣2号杂交种纯度进行鉴定并对部分辣椒优良自交系进行遗传多样性分析。以热辣2号母本材料CAYB02和父本材料CAYB01为模板筛选85对辣椒SSR引物,其中12对引物在亲本间能扩增出明显的多态性,多态性比率为14.12%,多态性标记分别位于辣椒1、3、4、6、7、9、11、12号染色体,利用3对位于不同染色体上的SSR标记对热辣2号黄灯笼椒杂交种的纯度进行鉴定,热辣2号种子纯度为98.79%,标记鉴定结果与田间鉴定结果一致。研究结果表明,利用SSR标记鉴定辣椒杂交种纯度是切实可行的。利用12对多态性明显、稳定可靠的SSR引物对部分辣椒自交系进行遗传多样性分析,共扩增出60条条带,多态性位点比率为100%,平均每对引物检测出5个等位基因。30份辣椒自交系间遗传相似系数变幅为0.33~1.00,平均为0.65,表明供试材料间具有丰富的遗传多样性。聚类分析结果表明,在遗传相似系数为0.47时,可以将中国辣椒和一年生辣椒区分开来。在遗传相似系数为0.85时,30份辣椒优良自交系分为11个类群,辣椒种质遗传关系与地理来源和农艺性状具有一定的相关性。     

2017―2018年棉花推广品种SSR标记纯度检测简报

2017年、2018年共接受16家棉种企业和科研单位的委托,承担了棉种纯度检测工作,共接受杂交棉样品252份。检测结果,简单重复序列（Simple sequence repeat,SSR）标记纯度在83.3%～100.0%,杂交种纯度较高。2013―2018年的检测结果对比表明,杂交种的纯度不断提高。同时接受了杂交制种亲本182份,纯度普遍较高,亲本的高纯度是保证杂交种质量的关键。利用SSR标记开展分子检测工作以来,生产上棉种质量有明显的提高。     

中国玉米新品种DNA指纹库建立系列研究Ⅰ.玉米品种纯度及真伪鉴定中SSR技术标准实验体系的建立※

本研究从DNA提取、PCR扩增、电泳检测等环节对SSR技术进行了优化,最终建立一套完善的适用于玉米品种鉴定的SSR标准体系.并以玉米杂交种农大108的纯度鉴定为例,探索了该体系在玉米杂交种鉴定中实际应用的可行性。     

分子标记在杂交水稻种子纯度鉴定中的应用

对杂交水稻种子纯度鉴定的蛋白质指纹鉴定法和DNA分子标记法的研究与应用作了介绍，讨论了各种方法的优缺点，并指出SSR技术将是最有潜力的杂交水稻种子纯度鉴定方法。