枣离体叶片高效再生植株的研究

 以‘黄骅冬枣’组培苗叶片为试材, 研究了叶片幼嫩程度、叶片来源、组培苗状态以及植物生长调节剂等对离体叶片诱导不定芽再生的影响, 并获得了完整的再生植株。结果表明, 以未生根组培苗中上部叶片再生效果较好; TDZ诱导叶片再生不定芽的效果显著优于BA; 离体叶片在MS + TDZ 1.0 mg·L ^{- 1} + IBA 0.1 mg·L ^{- 1}培养基中诱导培养28 d后, 转入MS + IBA 0.1 mg·L ^{- 1} + GA₃ 0.05 mg·L ^{- 1}培养基中二次培养, 叶片再生效果最好, 再生率可达92.45%。将叶片再生植株转入MS +BA 1.0 mg·L ^{- 1} + KT0.5 mg·L ^{- 1} + IBA 0.1 mg·L ^{- 1}培养基中继代增殖培养, 增殖系数达3.64。以1 /2MS + IAA 1.0 mg·L ^{- 1}培养基诱导生根, 生根率87.1%。生根苗大田移栽成活率达到57%。     

抗病南瓜种质482-2离体快繁技术研究

以抗病南瓜种质482-2的种子为起始材料,通过对组培条件下的培养基筛选试验,建立离体快繁技术体系.结果表明:MS+6-BA 1.0 mg/L是南瓜子叶诱导不定芽的适宜培养基,不定芽在MS+6-BA 1.0 mg/L培养基中增殖系数能够达到4.0,在MS+IBA 0.2 mg/L培养基上不定芽生根率达到83.3%.再生小植株经驯化、移栽,成活率可达95%.     

'砀山酥'梨叶片再生体系的建立

以‘砀山酥’梨(Pyrus bretschneidericv.Dangshansu)叶片为材料,研究基本培养基种类、植物生长调节物质浓度、抗氧化剂、碳源对再生的影响,以及不同浓度生长激素对再生芽生根的影响。结果表明:NN69培养基是叶片再生不定芽的最佳培养基,诱导不定芽的分化以培养基NN69+6-BA 3.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L+琼脂6 g/L为佳;AgNO3比活性炭和PVP更利于叶片的诱导;与蔗糖相比山梨醇更适宜作为叶片再生的碳源,最佳浓度是10 mg/L,叶片再生频率最高为74.03%,平均再生芽数1.01。生根培养基以ASH+IBA 10 mg/L+间苯三酚80 mg/L+蔗糖15 g/L+琼脂6 g/L为佳,生根率高且根粗壮。     

苹果新品种'鲁丽'离体叶片高效不定芽再生体系的建立

以早熟苹果优良新品种'鲁丽'无菌苗的离体叶片的外植体为试材,采用离体组织培养方法,研究了植物生长调节物质及碳源对叶片高效不定芽再生的影响,以期获得诱导'鲁丽'叶片高效不定芽再生的适宜培养基组成.结果 表明:不依赖于植物生长调节物质的组成,碳源D-山梨醇相比蔗糖明显提高不定芽再生率和平均单位叶片不定芽数.在相同碳源条件下,不定芽再生率和单位叶片不定芽数均表现为塞苯隆(TDZ)高于6-苄基氨基嘌呤(BA),但TDZ和BA之间没有达到差异显著水平;TDZ及BA不同浓度间差异不显著.诱导不定梢绿苗生根,除了较高浓度1.0 mg·L-1 IBA处理外,基本培养基1/4MS比1/2MS显著提高不定梢生根率;在基本培养基1/4MS上,生长素物质吲哚乙酸(IAA)比吲哚丁酸(IBA)显著提高生根率和单株生根数.在基本培养基1/2MS上,IAA和IBA的生根率和单株生根数均差异不显著.IAA比IBA诱导生根速度快,IAA诱导的不定根从绿苗茎横切面直接产生,没有愈伤产生,最高生根率为80.8％,平均单株生根数为4.2条.     

梨矮化砧木'青砧D3'叶片高效再生体系的构建

以梨矮化砧木'青砧D3'为试材,进行了离体叶片组织培养高效再生体系的构建。结果表明:TDZ和IBA均可以促进'青砧D3'离体叶片不定芽的诱导,但TDZ效果更显著,其诱导效果和TDZ的浓度成正比,研究发现'青砧D3'离体叶片不定芽再生最佳培养基为NN69+TDZ 3.0 mg·L~(-1)+IBA 0.3 mg·L~(-1)+琼脂7 g·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1),再生率与再生芽数分别为100.00%和7.69;IBA对'青砧D3'不定根的诱导优于NAA,不定根再生最佳培养基为1/2MS+IBA 0.2 mg·L~(-1)+琼脂7 g·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1),根诱导率达到100%。该研究的开展为梨矮化砧木'青砧D3'的工厂化育苗奠定了基础。     

苹果抗寒矮化砧木‘BP-176’的组织培养及其叶片不定梢诱导

【目的】建立苹果抗寒矮化砧木‘BP-176’的组织培养快繁技术体系及其离体叶片不定梢再生技术体系,为工厂化生产优质苗木及利用生物技术手段改良品种奠定技术基础。【方法】以苹果抗寒矮化砧木‘BP-176’的半木质化新梢为试材,建立初代无菌试管苗。以试管苗为试材,研究了基本培养基、植物生长调节物质对试管苗继代生长及生根的影响。以离体叶片为外植体,研究了细胞分裂素种类和浓度及碳源对不定梢再生的影响。【结果】半木质化新梢在芽启动培养基上的腋芽萌发率达85%以上。在基本培养基MS和QL上,试管苗的增殖没有显著差异,但生长表现不同,QL培养基上的增殖苗表现出该品种田间生长的红色特征。当细胞分裂素为BA时,蔗糖比D-山梨醇易诱导出叶片不定梢;当细胞分裂素为TDZ并且浓度较高时,D-山梨醇比蔗糖易诱导出叶片不定梢。以添加3 mg·L-1BA和30 g·L-1蔗糖处理获得的不定梢再生率最高,为71.6%。生根诱导,基本培养基1/2MS比1/4MS有效,生长素IBA比NAA有利于提高生根率。【结论】苹果砧木‘BP-176’试管苗适宜的继代增殖培养基为添加1.0 mg·L-1BA和0.1 mg·L-1IBA的QL培养基;最佳不定梢再生培养基为:NM+3 mg·L-1BA+0.3 mg·L-1IBA+30 g·L-1蔗糖;最佳生根培养基为1/2MS+0.3 mg·L-1IBA+20 g·L-1蔗糖,最高生根率为69.8%。     

鸭梨叶片不定芽再生体系的建立

为建立鸭梨(Pyrus bretschneideri Rehd.cv.Yali)叶片不定芽再生体系,采用正交试验设计研究了不同培养基、植物激素和植物生长调节剂的种类及其浓度、蔗糖含量对鸭梨叶片不定芽再生的影响。结果表明,基本培养基是影响叶片不定芽的诱导、继代和生根的关键因素,分别以NN69、MS和1/2MS为宜;IBA是影响叶片不定芽增殖的重要因素;最适诱导培养基为NN69+BA3.0mg·L-1+IAA0.5mg·L-1,再生频率和再生芽数分别为80.00%和1.77;最适增殖培养基为MS+BA1.0mg·L-1+IBA0.5mg·L-1,增殖系数可达2.23;最适继代培养基为MS+BA1.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1,平均苗高4.98cm;最适生根培养基为1/2MS+蔗糖30g·L-1+IBA0.5mg·L-1,生根率和平均根数分别为50.00%和2.04。该再生体系可为鸭梨遗传转化提供有效的受体系统。     

美人指葡萄不定芽离体诱导再生植株的研究

6-BA、TDZ与IBA不同浓度组合对美人指葡萄叶片、叶柄和茎段不定芽离体器官发生途径诱导再生植株有不同的影响。以茎段为外植体在MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.01mg/L培养基上分化效果最好,再生率75.00%;叶片、叶柄分别在MS+6-BA3.0mg/L+IBA0.10mg/L和MS+6-BA2.0mg/L+IBA0.05mg/L培养基上分化效果较好。TDZ和IBA研究的几种组合都能诱导不定芽再生,但再生率不高。     

车轮梅茎段高效再生体系的建立

 以车轮梅 (Rhaphiolepis indica L.)茎段为外植体。探讨基本培养基种类、植物生长调节剂组合、蔗糖浓度和AgNO3等因素对茎段器官发生和植株再生的影响。结果表明：MS+6-BA 2.0 mg·L^-1 +NAA 0.5 mg·L^-1 + AgNO3 1.0 mg·L^-1+蔗糖40 g·L^-1培养基最适合不定芽的分化和增殖,不定芽分化率达90%以上,平均每外植体分化不定芽数达5.38个。不定芽可在1/2MS培养基中有效伸长,适宜生根培养基为1/2MS+NAA 1.0 mg·L^-1,生根率达到100%。     

激素配比对草莓叶片不定芽分化的影响

以"晶瑶"草莓叶片为外植体,研究了不同激素配比、AgNO3浓度和暗培养对草莓叶片不定芽分化的影响。结果表明:当培养基为MS+噻二唑苯基脲(TDZ)1.0mg/L+吲哚丁酸(IBA)0.4mg/L+AgNO32.0mg/L时,不定芽再生率高达70.3%,每个外植体平均再生芽数为4.2个;AgNO3可以有效抑制"晶瑶"草莓叶片玻璃化和褐变;暗培养处理促进"晶瑶"草莓叶片的不定芽诱导,最佳暗培养时间为14d。     

甜樱桃四倍体杂种砧木Y1高频、高效离体再生体系研究

以甜樱桃四倍体矮化砧木Y1试管苗叶片为外植体,探讨了不同基本培养基、激素组合、暗培养时间和叶片发育阶段对其不定芽再生的影响,建立甜樱桃四倍体矮化砧木的高频、高效离体再生体系,为进一步进行遗传转化研究奠定基础。结果表明,甜樱桃四倍体矮化砧木Y1采用WPM培养基再生效果最好,明显优于MS和DKW培养基;最佳激素组合为6-BA2.0 mg.L-1+IBA1.0 mg.L-1;接种后暗培养可以明显提高不定芽再生率,最适宜暗培养时间为14 d;Y1试管苗顶部完全展开的幼嫩叶片再生能力最高。通过以上条件的优化,成功建立了甜樱桃四倍体矮化砧木的高频、高效离体再生体系,离体叶片不定芽再生率达90%,每叶片平均再生不定芽数达4.1。     

欧李离体叶片再生体系的建立

【目的】以欧李试管苗叶片为外植体进行不定芽再生研究,以期为核果类果树的品种改良、基因遗传转化和功能验证等生物技术育种奠定一定的基础,【方法】使用不同的基本培养基和激素组合促进其不定芽再生并建立再生体系。【结果】结果表明,欧李幼芽增殖对基本培养基类型较敏感,改良MS培养基优于MS、F14和WPM。在MS(改良)+NAA 0.1 mg.L-1+BA 0.2 mg.L-1培养基上,增殖系数为5.6,增殖效果较好。离体叶片不定芽再生的最适植物生长调节剂组合为MS(改良)+TDZ 4.0 mg.L-1+IBA 0.2 mg.L-1,再生率达到63.1%,平均每外植体再生芽数为4.9。暗培养10 d可以提高不定芽再生率。再生不定芽1/2 MS(改良)+IBA3.0 mg.L-1培养基上生根率最高,生根率达93.3%。【结论】在改良MS培养基上TDZ与IBA组合诱导不定芽再生的效果最好。     

朝鲜白头翁的组织培养与快繁技术

以朝鲜白头翁的叶片、叶柄和花梗为材料,研究了细胞分裂素zeatin、kinetin、6-BA 和生长素IAA 组合对诱导不定芽的影响;以不定芽为材料研究了植物生长调节剂对不定芽的增殖和生根的影响;研究了不同基质配比对组培苗移栽成活的影响。结果表明: 1）叶柄和花梗接种在MS + 0.5 mg · L^-1 zeatin +0.05 mg · L^-1 IAA 培养基培养6 周后不定芽再生率为100%。2）不定芽切成小块或单株带类似愈伤的组织块转到MS + 0.5 mg · L^-1 zeatin + 0.05 mg · L^-1 IAA 或MS + 1.0 mg · L^-1 6-BA + 0.05 mg · L^-1 IAA 的培养基时不定芽的增殖与生长良好。 3）在增殖培养基中长至3 cm 以上的小植株转入到1/2 MS + 1.5 mg · L^-1NAA的生根培养基中培养42 d 后,生根率高达93%,平均根长12.3 cm,每株平均根数11 条,且可缩短生根时间。4）组培苗移栽到东北山土和珍珠岩比例为2︰1 的混合基质时,成活率高达66.7%。     

梨矮化中间砧S_5离体增殖培养基的研究

采用4×4正交试验对梨矮化中间砧S5进行了离体增殖研究。结果表明,不同种类的培养基及不同配比的植物生长调节剂对试管苗增殖的效果不同。MS培养基较QL、AS、WPM培养基更有利于S5茎的增殖,中等浓度的细胞分裂素(BA)与较低浓度的生长素(IBA)、赤霉素(GA3)配合使用效果更理想。综合茎质量、茎数量以及茎长度等指标认为,MS+2.0mg/LBA+0.1mg/LIBA+1.0mg/LGA3是S5试管苗茎增殖的最佳培养基。     

扎米莲( Zamioculcas zamiifolia) 叶片的植株再生

 建立了从扎米莲叶片直接再生植株的有效方法。结果表明, 扎米莲叶片外植体在仅加6-BA 或NAA 或2 ,4-D 的培养基中培养8 周后都不能产生幼芽; 但在含不同浓度6-BA (1.0～2.0 mg/L) 和NAA(0.02～0.2 mg/L) 组合的MS 培养基上培养3 周后开始产生幼芽, 其幼芽分化的最佳培养基为MS + 6-BA 2.0 mg/L + NAA 0.02 mg/L。再生芽在添加IBA 0.5 mg/L 的MS 培养基中生根。     

地被月季‘Royal Bassino’高频再生体系的建立

 以地被月季‘RoyalBassino’为试材, 进行了组培快繁和外植体再生条件的研究。结果表明,以带有腋芽的茎段为外植体, MS中添加6-BA 1.5 mg/L和IBA 0.1 mg/L 为最适诱导培养基, 诱导出芽率100%; MS中添加6-BA 0.5 mg/L和IBA 0.05 mg/L可以获得最高增殖倍数(6.3) ; 而添加IBA 0.01 mg/L的1/2MS为最佳生根培养基, 生根率92%。试管苗经7 d驯化后, 移栽成活率在99%以上。分别以叶柄、叶盘和茎段为外植体进行再生培养, 以MS为基本培养基, 叶柄在添加噻苯隆(TDZ) 7μmol /L的诱导培养基中暗培养10 d后, 转接到添加6-BA 0.5 mg/L的再生培养基中光照培养约20 d, 可以获得57.1%的芽再生率。     

樱桃砧木CAB-6p离体叶片再生体系的优化

以欧洲甜樱桃优良矮化砧木CAB-6p试管苗幼嫩叶片为试材,从基本培养基、激素配比、叶片生理状态和培养基中琼脂用量等方面对影响离体叶片再生的关键因素进行了研究。结果表明,CAB-6p试管苗幼嫩叶片以WPM为基本培养基再生效果最好,明显优于QL和DKW培养基,1/2MS培养基再生效果最差;最佳激素配比是BA2mg/L+IAA2mg/L,用IBA或NAA替代IAA出现愈伤组织生长量大但再生率低;CAB-6p试管苗顶部新发出合拢的幼嫩叶片再生能力最高,半展开的幼嫩叶片和完全展开的幼嫩叶片未能再生植株;用4.5g/L琼脂配制偏软的再生培养基明显有利于提高离体叶片的再生效率。通过以上几个方面的优化,建立CAB-6p试管苗幼嫩叶片高效离体再生技术体系,再生率可稳定地保持在90%左右,平均每叶再生4～5芽。     

木那格葡萄的组培快繁试验

以木那格葡萄的茎尖、单芽茎段为外植体，进行组培快繁试验。蛄果看出，适宜茎尖分化的培养基为B5 BA1．0mg／L IBA 0．1mg／L。适宜单芽茎段一次成苗生长的培养基为B3 BA0．05mg/L IBA0．2mg／L。适宜的生根培齐基为1／2MS IBA 0．2mg／L 蔗糖40g／L。健壮生根的试管苗要待4片叶以上移栽，移栽基质以蛭石较好。时间宜在4—5月份。     

慈姑茎尖组织培养与快速繁殖

以慈姑茎尖为外植体,用不同培养基进行组织培养,以所获得的试管苗为材料进行快速繁殖技术研究。结果表明,慈姑茎尖培养的最适启动培养基为MS+6-BA1.0mg·L~(-1)+NAA0.3mg·L~(-1);继代增殖的最适培养基为-S+6-BA3.0mg·L~(-1)+NAA0.1mg·L~(-1),增殖系数为4.35。