不同接种物对蛹虫草子实体营养成分的影响

以蛹虫草菌株母种的表层菌皮、母种基内菌丝和成熟的待分离的新鲜子实体顶端接种到液体培养基进行液体培养,分析比较栽培所获得不同蛹虫草子实体的有效成分得出:以母种表层菌皮接种液体培养所获得的子实体虫草素和硒元素含量最高;以母种培养基的基内菌丝接种培养栽培所获得子实体的虫草酸、腺苷、虫草多糖、SOD酶、蛋氨酸、酪氨酸含量较高。     

低温刺激对蛹虫草子实体产量及品质的影响

目的:研究温差刺激对蛹虫草子实体干重、虫草素和腺苷含量的影响.方法:以蛹虫草同一子实体头部和中部组织分离的异核体菌株CMS1和CMZ1为材料,采用小麦固体栽培基质室内培育子实体,在原基形成阶段进行温差刺激,培养45 d后,测定子实体数及干重、虫草素和腺苷质量分数.结果:低温10℃处理,CMS1菌株处理6 h/d时,子实...     

北虫草菌丝体诱变及优良菌株的筛选

以北虫草‘CM016’为出发菌株,将液体培养的菌丝体片段用生理盐水稀释104倍,在20 W紫外灯下32 cm处照射100 s,研究了紫外线诱变对北虫草优良菌株筛选的影响.结果表明:经紫外线诱变共获得了31个菌丝体长势较好的菌株;拮抗试验表明,其中15株诱变菌株与出发菌株存在拮抗线,对其进一步采用脂酶同工酶电泳鉴定亲缘关系,筛选出了与出发菌株有明显差异的诱变新菌株11个,将其进行出草试验及统计产量和虫草素含量测定,有8个菌株具有出草能力,其中C16菌株子实体产量极显著高于出发菌株,C6菌株子实体虫草素的含量极显著高于出发菌株.     

蛹虫草优良菌株的筛选

本试验通过对8株蛹虫草菌株的菌丝生长速度、菌落平均直径、液体发酵菌丝体干重、培养周期以及子实体形态、重量、粗多糖含量的对比研究,筛选出优良的蛹虫草菌株。试验结果表明,蛹虫草菌株CC-8液体培养菌丝生物量明显高于其他菌株,子实体出草整齐均匀,出草率高,形态好,产量高,颜色为橘黄,子实体粗多糖含量高于其他菌株,表明菌株CC-8具有较高的经济价值,可以作为栽培菌种进行产业化生产。     

蛹虫草不同栽培菌株产虫草素及腺苷差异性研究

目的：测定不同栽培菌株蛹虫草子实体中虫草素和腺苷的含量,为人工蛹虫草的质量评价提供依据。方法：采用高效液相色谱法测定11个栽培菌株人工蛹虫草样品中虫草素和腺苷的含量。结果：所测定的不同栽培菌株人工蛹虫草的腺苷含量为0.1%-0.17%,虫草素含量为0.06%-0.39%,表明蛹虫草不同栽培菌株的虫草素含量变化较大,腺苷含量则相对稳定。     

硒和钙对蛹虫草活性物质含量的影响

向培养液中分别添加不同浓度的亚硒酸钠、氯化钙,用液体振荡培养法培养蛹虫草菌丝体,用HPLC法测定虫草素与腺苷含量,用苯酚-硫酸法测定多糖含量,用高碘酸钠比色法测定虫草酸含量.以研究2种微量元素对蛹虫草菌丝体中虫草素、腺苷、多糖和虫草酸含量的影响.结果表明:向培养液中添加适量的硒或钙,可显著提高蛹虫活性物质含量.添加15 mg/L亚硒酸钠,虫草素和虫草酸含量比对照组分别提高了29.0％和34.9％;添加16 mg/L氯化钙,虫草素含量比对照提高24.05％.     

蛹虫草虫草素高产原生质体融合子鉴定与筛选

以蛹虫草(Cordyceps militaris)4号和8号菌株作为亲本,采用灭活原生质体融合技术获得228个再生菌株。酯酶同工酶与ISSR-PCR方法相结合鉴定融合子,以虫草素含量和子实体性状为筛选指标,经过初步的遗传稳定性测试,得到虫草素含量显著提高的5个稳定融合子——CM59、CM61、CM69、CM136和CM186 ,其虫草素含量分别为8号菌株的1 .17 ~1 .73倍。实验证明融合子菌丝中虫草素含量普遍提高。筛选得到的5个融合子经进一步遗传稳定性验证后可用于以获得虫草素为目的的菌丝体发酵培养。     

多糖、粗蛋白含量高的灰树花菌株筛选

为满足灰树花栽培与加工需求,提供特定优良灰树花菌株,本试验将收集的13个灰树花菌株进行人工栽培、摇瓶发酵培养,通过比较不同菌株子实体间、菌丝体间胞内多糖和粗蛋白含量,筛选出G5、G6菌株胞内多糖含量高,G5菌株适宜子实体提取胞内多糖,G6菌株适宜液体发酵菌丝体提取胞内多糖;G6、G7菌株粗蛋白含量高,G7菌株适宜子实体提取粗蛋白,G6菌株适宜液体发酵菌丝体提取粗蛋白。     

蛹虫草固体发酵生产虫草素的条件优化

用直径6 cm,高10 cm聚乙烯培养罐固体发酵蛹虫草(Cordyceps militaris),以固体发酵产物中虫草素含量为指标,从16个蛹虫草菌株中筛选出虫草素含量最高的菌株,考察固体发酵该菌株的培养基组成、培养时间、培养基装量、料液比、培养温度、接种量和添加物对虫草素含量的影响,得到了有利于蛹虫草固体发酵产虫草素的培养条件:培养罐装20 g小麦,按小麦干重6％的量分别加入玉米粉和黄豆粉,按料液比1∶1.4(w∶v,以小麦干重为基准)加入营养液(g/L:2.0 K2HPO4·3H2O,0.5 MgSO4·7H2O,16甘氨酸),培养温度为26℃,时间46 d,接种量10％.     

蛹虫草对金属锌的耐受性与富集特征

以蛹虫草为试材,通过在培养基中添加不同浓度的锌,利用罗丹明B分光光度法测定菌丝体和子实体锌含量,蒽酮-硫酸法和DNS法测定子实体多糖和还原糖含量,探究了锌对蛹虫草菌丝体、子实体生长和生理活性的影响,以期为富锌蛹虫草培育提供参考依据。结果表明:锌对蛹虫草菌丝体、子实体均有一定的影响,适量浓度促进生长,过高则抑制生长,最适合蛹虫草生长的培养基锌浓度为678 mg·kg^-1,该浓度下蛹虫草子实体生长良好无退化现象,干质量出现最大值为3.56 g,多糖含量为7.32%,锌富集率达6.45%。     

不同类型菌种与栽培主料栽培蛹虫草对比试验

以温室大棚为栽培场地，研究固体菌种和液体菌种及不同栽培主料栽培蛹虫草对其产量和品质的影响。结果表明，液体菌种栽培蛹虫草比固体菌种栽培蛹虫草的产量高10%，且产量较稳定；以大米为栽培主料时蛹虫草子实体产量和质量均较好。     

不同碳氮源培养蛹虫草液体菌种及栽培试验

以葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖为供试碳源,各碳源浓度均设为10 g/L、15 g/L、20 g/L、25 g/L、30 g/L;以硫酸铵、蛋白胨、酵母粉、尿素为供试氮源,各氮源浓度均设为6 g/L、8 g/L、10 g/L、12 g/L、14 g/L。分别制作液体菌种培养基培养蛹虫草液体菌种,并将获得的液体菌种用于栽培蛹虫草试验。测定蛹虫草液体培养菌丝生物量、子实体鲜重及子实体多糖含量。结果表明:在液体菌种培养阶段,最佳碳源为25～30 g/L的蔗糖,最佳氮源为6 g/L酵母粉;以20 g/L蔗糖作为碳源,10 g/L硫酸铵为氮源培养液体菌种栽培蛹虫草产量最高;以10 g/L葡萄糖为碳源,12 g/L蛋白胨为氮源培养基上培养的液体菌种栽培蛹虫草子实体多糖含量较高。     

保健型虫草蜜汁饮料的研制

冬虫夏草简称“虫草”,是我国一种传统珍贵的中药材和滋补品,素与人参、鹿茸齐名.近年来大量的研究表明,人工虫草菌丝体与天然冬虫夏草具有相似的化学成分、药理作用和临床疗效,且毒性比天然虫草小.这就为人工培养虫草菌丝体代替天然冬虫夏草提供了科学依据.我们通过多次实验,确定了最佳虫草菌丝体液体培养基配方,进行液体培养获得发酵液,再将菌丝体发酵液加工成营养保健型虫草蜜汁饮料,这种饮料的加工,既可以满足市场对虫草的需求,又丰富了疗效保健食品的品种.     

拟黑虫草菌cnig-56固体发酵生产虫草素工艺

以虫草素含量为指标,采用正交实验优化了适合拟黑虫草(Cordyceps nigrella)菌株cnig-56固体发酵的培养基,并探讨了该菌株固体发酵的最佳条件。结果表明,菌龄为3d的拟黑虫草菌种按10%接种量接入优化的固体培养基上(配方为大米粉9.9%,青稞粉6.6%,玉米粉9.9%,蚕蛹粉3.3%,粗麸皮70.15%,KH2PO40.05%,MgSO40.1%)于24℃发酵培养30d,其产物的虫草素含量最高为101μg/g。     

液体发酵蜜环菌培养条件的优化及菌体多糖的分离

以四因素三水平的正交实验设计培养基中碳源、氮源浓度，对蜜环菌进行液体发酵，通过对生长的菌丝体干重的测定得到该菌株生长最适培养基配方，并证明氮源为其生长的最重要因素，同时对该菌株的培养优化条件进行了研究，并提取蜜环菌菌体多糖，发现液体发酵菌体的多糖含量远高于人工栽培的蜜环菌菌素。     

蛹虫草子实体的人工培养及超氧化物歧化酶的活性测定

笔者在人工控制环境条件下，使接种在不同培养基上的蛹虫草菌长出了与野生蛹虫草一样的子实体，并测定了子实体及培养基－菌丝体混合物中超氧化物歧酶酶的活性。     

比色法测定广东虫草虫草酸含量

利用比色法快速测定广东虫草人工培养子实体、液体发酵菌丝体和培养后大米培养基中虫草酸的含量,并采用水提取和乙醇提取两种预处理方法进行虫草酸含量测定方法的比较。结果表明,虫草酸的最大特征吸收峰在412 nm处,质量浓度在10 mg/L-50 mg/L内线性良好,其线性回归方程为：Y=0.0946X-0.0987,R2=0.9989;样品显色后在120 min内基本无变化,稳定性较好;样品平均回收率及RSD分别为98.83%和3.6%;广东虫草子实体、液体发酵菌丝体和培养后大米培养基中虫草酸含量不同,其中子实体的虫草酸含量最高,大米培养基中含量最低;不同预处理方法也对虫草酸含量的测定有不同影响,醇提取法的测出量高于水提取法。广东虫草子实体、发酵菌丝体、大米培养基水提液中的虫草酸含量分别为11.87%,9.49%,3.88%,醇提液中的虫草酸含量分别为17.09%,11.28%,4.03%。     

蛹虫草人工优质高产栽培技术研究

本试验通过对四个人工分离蛹虫草品种的菌丝体生长情况、子实体产量进行对比分析，结果显示：沈阳人工分离种（S）为优质品种，武汉（W）、河南（H）、北京（B）种为淘汰种。以大米加4个蚕蛹为基质的培养基子实体生物学效率最高；液体菌种生长周期短，生物学效率较高。     

应用干蚕蛹栽培蛹虫草

蛹虫草Cordyeps militaris（L．ex Fr．）Link的人工栽培，按其培养基一般分为米饭和蚕蛹两种栽培方式。蚕蛹栽培中又有活蛹、毛脚蛹和干蛹之分。基于干蛹来源丰富、耐贮藏、运输方便，栽培也易于成功。同时，蚕蛹又是一味中药，接种虫草菌经培养后，所含虫草素比米饭等培养基高，因此它是栽培蛹虫草的理想原料。现将桑蚕（Bombyr mori Linaeus）干蛹的栽培技术作简要介绍如下。     

蛹虫草高产菌株人工栽培条件的优化

采用单因素试验考察了蛹虫草诱变菌株Z9人工栽培的最佳条件，并探索植物生长激素对诱变菌株生长的影响。试验结果表明：蛹虫草诱变菌株栽培的最佳的原料一大米蛹粉比（g/g）为100：15，原料含水量以65％为佳，最适子实体生长温度为23℃，最适pH为7．5，在500lx的散射光照时产量最高为5．13g；喷洒赤霉素能有效促进蛹虫草诱变菌株Z9的生长，培养26d子实体产量比未喷洒赤霉素提高7．7％。