平菇基因组文库的构建

结果1.高分子量平菇总 DNA的提取(1)每升培养物恒温摇培(25℃,125 rpm)5天,得平菇菌丝体12g,采用原生质体裂解法得平菇总DNA100mg 左右。(2)平菇菌丝体经Lywallzyme 酶解破壁和裂解缓冲液作用后,用 SS一酚/氯仿/异戊酵抽提(至少3次)去除蛋白质等杂质,经酒精沉淀后得总 DNA。抽提过程中避免剧烈振荡,可使总 DNA 的分子量大于50kb。     

冬虫夏草菌丝体多酚提取及对3种癌细胞抑制作用研究

以冬虫夏草的菌丝体为原料,提取溶剂为乙醇,采用Folin-Ciocalteu法测定冬虫夏草菌丝体中多酚的含量,目的在于研究乙醇浓度、料液比、提取温度和提取时间对多酚提取率的影响。以单因素试验为前提,以正交试验来指导优化提取参数,测定了所得多酚含量及其对Caco-2结肠癌细胞、Hep G-2肝癌细胞、MCF-7乳腺癌细胞的抑制作用。研究结果表明,在冬虫夏草菌丝体的提取工艺中,最佳的提取工艺条件为:温度为70℃,提取时间60 min,乙醇的浓度70%,料液比(g∶mL)1∶35;冬虫夏草菌丝体中提取的粗多酚对试验中3种癌细胞都表现出一定的抑制作用,当菌丝体粗多酚的浓度为100μg·mL~(-1)时,对3种癌细胞抑制率达到最高,分别为72.12%(Caco-2结肠癌细胞)、83.67%(HepG-2肝癌细胞)和58.78%(MCF-7乳腺癌细胞)。     

平菇多糖提取工艺中脱脂方法研究

应用3种不同的脂肪提取方法,对平菇子实体和菌丝体中的脂肪进行提取对比研究。结果表明:最适合平菇多糖提取工艺的是脱脂方法,即脂肪提取液:乙醇(80%);水浴温度:85℃;水浴时间:4h。     

玉竹黄酮提取纯化及体外抗氧化研究

为了探索玉竹黄酮提取纯化工艺及其抗氧化功效,本文通过单因素和正交试验,优化了超声波辅助法提取玉竹黄酮的工艺参数;以黄酮吸附率作为指标,采用大孔树脂分离纯化玉竹黄酮。结果发现,超声波辅助法提取黄酮的最优条件为乙醇浓度45%、液料比7:1(mL/g)、超声时间45 min、超声功率80 W,此条件下黄酮提取率为0.517 4%;D-101大孔树脂纯化玉竹黄酮最优条件为pH 8,吸附时间3 h,吸附液料比15:1(mL/g),乙醇用量20 mL。体外抗氧化试验表明,玉竹黄酮对DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基均具有良好的清除作用。     

蓝莓中花青素的提取工艺研究

为有效提取蓝莓中的花青素，本文以蓝莓为原料，采用溶剂提取法提取蓝莓中的花青素；用乙醇、柠檬酸混合溶液作为提取剂，通过单因素和正交试验优化提取工艺。结果表明，蓝莓中花青素的最佳提取工艺参数为提取温度30℃，乙醇和柠檬酸的体积比3∶7，提取时间180 min，料液比1∶20(g/mL)，此时花青素的提取量为63.128μg/g，此试验为蓝莓花青素的提取应用提供了依据。     

响应面法优化东北接骨木总黄酮的超声波提取工艺

对乙醇体积分数、超声时间、液料比、超声温度进行单因素试验,在此基础上选取乙醇体积分数、超声时间、液料比进行响应面法优化东北接骨木总黄酮的超声波提取工艺的研究,利用响应面分析这3个因素对东北接骨木总黄酮提取的影响。结果表明:东北接骨木中总黄酮超声提取的最佳工艺为:乙醇体积分数为76.03%,超声时间48.86min,液料比为19.53mL/g,黄酮提取量达到5.79692mg/g。     

微波法提取甘草中类黄酮的工艺研究

以甘草根茎为试材,以微波处理强度、微波处理时间、提取液乙醇浓度和料液比为考察因素,研究了微波法各提取因素对甘草中类黄酮得率的影响。结果表明:从甘草中提取类黄酮的最佳提取工艺为微波处理强度600 W、微波处理时间3min、提取液乙醇浓度70%、料液比1∶25g/mL,此条件下类黄酮得率为61.17mg/g。     

减压法提取中华卷柏总黄酮的研究

采用减压法提取中华卷柏各器官中的总黄酮.结果表明:用60％的乙醇在提取压力约为-0.08 MPa,提取温度50℃,提取时间10 min时,提取总黄酮的得率最高.在该条件下提取得到的中华卷柏根中总黄酮的含量为1.187 mg/g,茎中为1.510 mg/g,叶中为2.420 mg/g.与超声波法及常压溶剂提取法相比,减压法具有提取温度低、提取速度快、得率较高等优点.     

玫瑰花渣中黄酮的提取与纯化工艺研究

玫瑰花含有多糖、黄酮、花青素等多种生物活性物质,应用价值高。本研究以提取精油后的玫瑰花渣为原料,研究玫瑰花渣中黄酮的提取、纯化工艺。结果表明,玫瑰花渣中黄酮最佳提取工艺为乙醇浓度70%、料液比1∶20,提取温度75℃,提取时间2 h,在该工艺条件下,提取液中黄酮的提取率为49.75%;最适合玫瑰黄酮纯化的树脂为AB-8树脂,优化了吸附和解吸工艺,吸附时进样流速为3 BV/h,进样浓度为3 mg/mL,水洗体积为3 BV;解吸剂为60%乙醇,解吸流速为2 BV/h,解吸液浓缩干燥后黄酮纯度达80%以上。     

响应面法优化蓝靛果花色苷提取工艺研究

以野生蓝靛鲜果为试材,以吸光度为评价指标,研究了乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度对蓝靛果花色苷提取量的影响;并通过响应面法优化,研究了蓝靛果花色苷提取的最佳工艺条件。结果表明:蓝靛果花色苷的最佳提取条件为料液比1∶12g/mL、乙醇体积分数66%、提取温度57℃、提取时间92min,在此条件下蓝靛果花色苷的提取量为328.55mg/100g。     

响应面法优化草菇菌丝凝集素超声波提取工艺研究

以草菇菌丝体为试材,以凝集素提取液的总活力为指标,在单因素试验的基础上,利用3因素3水平的Box-Benhnken中心组合试验和响应面分析法设计优化了草菇菌丝凝集素的超声波提取工艺。结果表明:超声功率为310W、超声处理时间为36min、液料比为4.5∶1,是草菇菌丝凝集素超声波提取的最佳工艺;在该条件下,其20g草菇菌丝的凝集素提取液的总活力为76 386U。     

响应面法优化新疆野酸梅果肉多酚提取工艺研究

以新疆野酸梅果肉为原料,以多酚提取量为指标,在单因素试验基础上,采用3因素3水平的Box-Benhnken试验设计优化新疆野酸梅果肉多酚提取工艺。结果表明:新疆野酸梅果肉多酚最佳提取工艺为乙醇体积分数39%,料液比1∶35g/mL,提取温度63.1℃,提取时间90min,多酚提取量为13.89mg/g,与理论预测值(13.96mg/g)相符合。表明响应面法用于优化野酸梅果肉多酚提取工艺稳定、可行。     

番茄总黄酮两种提取工艺优化及比较研究

以番茄果实为研究对象,用黄酮含量作为提取工艺的指标,采用传统加热法和超声辅助法提取番茄总黄酮,并比较2种提取工艺效果;通过单因素试验与正交实验相结合,研究提取时间、提取温度、料液比、提取次数等对番茄总黄酮含量的影响。结果表明:番茄总黄酮的最佳提取工艺为超声辅助法:50%乙醇,提取时间为20min,提取温度60℃,料液比为1∶40mg/mL;在最佳提取条件下,番茄总黄酮的含量为576.95mg/100g。     

樟芝子实体和菌丝体萃取物的抑菌及抗氧化活性

以樟芝(Taiwanofungus camphoratus)子实体、液体发酵菌丝体和固体培养菌丝体为研究对象,分别利用石油醚、氯仿和正丁醇有机溶剂进行萃取,获得相应的萃取物,测定其抑菌和抗氧化活性.结果表明:子实体氯仿和正丁醇萃取物以及固体发酵菌丝体氯仿萃取物对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)有较好的抑制效果;子实体石油醚、氯仿、正丁醇萃取物和固体发酵菌丝体氯仿萃取物对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)有较好的抑制效果,并且子实体氯仿萃取物对供试菌的抑菌效果均好于其它萃取物;子实体氯仿、正丁醇萃取物和固体发酵菌丝体氯仿萃取物具有超氧阴离子清除能力,清除超氧阴离子的IC50值分别为5.94、1.32和1.97 mg/mL;子实体石油醚、氯仿和正丁醇萃取物具有过氧化氢的清除能力,清除过氧化氢的IC5o值分别为0.13、0.11和0.18 mg/mL.     

香菇中γ-谷氨酰转肽酶的分离纯化及其酶学性质研究

通过(NH4)2SO4沉淀、Phenyl Sepharose FF疏水层析分离纯化香菇中的γ-谷氨酰转肽酶(γ-Glutamyltranspeptidase,GGT),纯化后的GGT的比活力到达了19.59 U/mg.SDS-PAGE分析表明,GGT由分子量分别为28 kDa和60 kDa的两个亚基组成.酶学性质试验结果表明,GGT反应的最适温度为37 ℃,最适pH 值为7.6;金属离子Na+、K+和Ca2+对酶有激活作用,而Ag+、Cu2+、Zn2+和Fe3+则有抑制作用;试验范围内,GGT水解γ-glutamyl-p-nitroanilide的米氏动力学参数Km 值为2.601 μmol/mL,Vmax值为0.0287 μmol/min;组成的氨基酸中,Glu和Asp含量较高,Met和Cys含量较低.     

龙牙百合叶总黄酮提取工艺及抗氧化性研究

以龙牙百合叶片为研究对象,采用优化超声波法提取龙牙百合叶片总黄酮,对黄酮进行了抗氧化活性分析,并在单因素试验的基础上采用正交实验法,研究了乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度对总黄酮提取效果的影响,并确定了最佳工艺条件,对其体外抗氧化活性进行了初步研究。结果表明:最佳工艺条件为提取温度50℃,乙醇浓度80%,料液比1∶5g·mL~(-1),提取时间30min。此条件下,百合叶总黄酮含量为12.691mg·g~(-1)。抗氧化试验结果表明,龙牙百合叶总黄酮提取液对DPPH·的清除效果优于相同浓度下维生素C溶液,并呈显著差异。     

超声波法提取长白山野菊花中类黄酮的工艺研究

以长白山野菊花中类黄酮得率为指标,通过单因素试验和正交实验设计,对乙醇浓度、超声提取温度、超声提取时间、料液比因素进行优化,研究提取长白山野菊花中类黄酮的最佳工艺.结果表明:超声波法提取长白山野菊花中类黄酮的最佳提取条件为:乙醇浓度60％,超声提取温度70℃,超声提取时间20 min,料液比1:20 (g/mL);在此最佳条件下,类黄酮得率为46.89 mg/g.     

灵芝孢子、子实体和菌丝体的抗氧化活性比较

为探讨灵芝(Ganoderma lucidum)孢子、子实体和菌丝体的抗氧化活性差异,对同一菌种的3种样品进行水提、不同溶剂(石油醚、乙酸乙酯、乙醇、水)依次提取和醇沉分级,运用化学发光法分别测定其抗氧化能力。结果发现:菌丝体水提液对过氧化氢的清除能力最强,在1mg/mL浓度下清除率达80.2%,子实体水提液对羟基自由基的清除能力最强,在1mg/mL浓度下清除率达到62.9%。不同溶剂依次提取所得提取液中,孢子粉的乙酸乙酯提取液对羟基自由基清除率较高,达到35.6%;乙醇提取液对过氧化氢的清除率较高,达到17.2%。子实体的水溶性部分对羟基自由基和过氧化氢的清除率较高,分别为40.0%和56.2%;菌丝体的水溶性部分对羟基自由基和过氧化氢的清除率较高,分别为34.4%和71.1%;就抗氧化活性而言,三种样品乙醇沉淀部分远远低于上清液,因此上清液是抗氧化的主要部分。     

灵芝色素的提取、鉴定及稳定性研究

对灵芝(Ganoderma lucidum)色素进行了提取、纯化和鉴定并对其稳定性进行了初步研究。结果表明:灵芝色素易溶于碱性溶液,不溶于水、氯仿和乙醇等有机溶剂;经紫外-可见光谱和傅里叶红外光谱扫描,初步鉴定灵芝色素属于3,4-二羟基苯丙氨酸类黑色素;20~60℃范围内,黑暗条件,pH 4~8范围内灵芝色素稳定性较好。     

比色法测定广东虫草虫草酸含量

利用比色法快速测定广东虫草人工培养子实体、液体发酵菌丝体和培养后大米培养基中虫草酸的含量,并采用水提取和乙醇提取两种预处理方法进行虫草酸含量测定方法的比较。结果表明,虫草酸的最大特征吸收峰在412 nm处,质量浓度在10 mg/L-50 mg/L内线性良好,其线性回归方程为：Y=0.0946X-0.0987,R2=0.9989;样品显色后在120 min内基本无变化,稳定性较好;样品平均回收率及RSD分别为98.83%和3.6%;广东虫草子实体、液体发酵菌丝体和培养后大米培养基中虫草酸含量不同,其中子实体的虫草酸含量最高,大米培养基中含量最低;不同预处理方法也对虫草酸含量的测定有不同影响,醇提取法的测出量高于水提取法。广东虫草子实体、发酵菌丝体、大米培养基水提液中的虫草酸含量分别为11.87%,9.49%,3.88%,醇提液中的虫草酸含量分别为17.09%,11.28%,4.03%。