辣椒种质资源TMV抗性的鉴定与评价

对来源于国家蔬菜种质资源中期库的51份辣椒种质资源进行烟草花叶病毒(TMV)的田间抗性调查。结果显示,各种质病情指数在17.04~75.56之间,有14份种质田间表现出了TMV抗性。各种质抗性分布基本符合正态分布,略向感病区域偏离。将筛选出的14份抗病材料和7份感病材料进行TMV苗期人工接种抗性鉴定,21份种质的病情指数在6.28~65.48之间,获得抗病材料15份。相关分析结果表明,TMV田间成株自然发病病情指数与苗期人工接种鉴定病情指数的相关系数r=0.789,呈极显著相关。结合田间抗性调查和人工接种抗性鉴定结果,利用12对与L基因连锁的分子标记对13份TMV抗病种质进行分子鉴定,6份材料中共检测到6个抗性分子标记。抗TMV辣椒种质的主要农艺性状表现出一定的多样性。     

芥菜类蔬菜对芜菁花叶病毒病抗病性材料的鉴定及筛选

通过田间自然发病鉴定和苗期人工接种芜菁花叶病毒(Turnip Mosaic Virus,TuMV)鉴定,筛选榨菜和雪菜种质资源中的抗病性材料。对367份材料田间自然发病鉴定,筛选出对芜菁花叶病毒病表现为免疫的材料20份,表现为高抗的材料30份,表现为抗病的材料29份。对96份自交3代以上材料进行苗期人工接种鉴定,筛选出11份抗病毒病材料,其中品种编号为06191和06222的2份榨菜材料对病毒病表现高抗,病情指数分别为3.13和3.57。06222田间鉴定和苗期接种鉴定均表现为高抗。芥菜抗源材料的筛选为抗病育种工作奠定了基础。     

抗番茄黄化曲叶病毒病基因ty-5的功能标记开发与利用

番茄黄化曲叶病毒病是番茄重要病害之一。在ty-5基因编码序列分析的基础上,设计ty-5基因的功能标记,对番茄黄化曲叶病毒病抗病自交系t33-14、感病自交系t2301、t33-14 × t2301的F₂株系和不同来源的26份番茄材料进行基因型鉴定,并进行表型相关性分析。结果表明,功能标记TySNP能准确地区分育种亲本以及杂交后代群体的番茄黄化曲叶病毒病抗病材料纯合基因型、感病材料纯合基因型以及感病杂合基因型,且不同的基因型跟表型能较好对应吻合,可对杂交后代进行有效选择。因此,功能标记TySNP可用于番茄分子标记辅助育种,可为定向改良番茄品种对黄化曲叶病毒病的抗性提供分子辅助育种手段。     

不同甘蓝类蔬菜材料对根肿病的抗性鉴定及分子标记辅助选择

根肿病是十字花科蔬菜主要病害之一,严重影响十字花科蔬菜生产,选育抗病品种是防治根肿病的有效途径之一。本试验采用灌根法苗期人工接种根肿菌4号生理小种,对29份甘蓝类蔬菜材料进行根肿病抗性鉴定;并利用与抗病基因CRb连锁的SCAR标记(OA)和与抗病基因CRb^Kato连锁的SSR标记(B0902)对人工接种鉴定表现免疫、高抗、抗病、耐病的材料进行分子标记辅助鉴定。结果表明:人工接种鉴定筛选出8份抗病材料,其中Cr7表现免疫,绿抗9号、青莲甘蓝表现高抗,S148、Cr5、Cr6表现抗病,S146、S296表现耐病。分子标记鉴定结果显示,4份材料含有CRb基因,8份材料含有CRb^Kato基因,验证了这8份抗病材料的真实性;其中Cr5、绿抗9号、青莲甘蓝、S296含有CRb基因和CRb^Kato基因2个抗性位点,可将这4份材料直接应用到甘蓝抗根肿病育种中。     

SCAR标记与人工接种鉴定黄瓜种质黑斑病抗性

利用SCAR引物862对288份黄瓜自交系进行黑斑病抗性检测,结果有32份资源抗病.通过对36份资源与人工接种抗性鉴定结果相比较,二者的符合率达94.44%;对76份田间表现感病的材料进行标记检测,4份材料具有抗病带,符合率达94.74%.在育种应用中,可先通过标记初步进行大量材料的抗性检测,在此基础上根据需要有针对性地做人工接种抗病性鉴定,该方法可以有效提高黄瓜种质资源抗性筛选的效率.抗黑斑病资源的获得,为进行抗黑斑病黄瓜新品种的选育奠定基础.     

番茄颈腐根腐病病原菌鉴定与抗病种质材料的筛选

2014年在山东寿光农户种植番茄的日光温室内采集典型颈腐根腐病症状的发病植株进行病原分离、纯化,结合形态学观察及rDNA-ITS序列分析,确定病原菌为尖孢镰刀菌番茄颈腐根腐病专化型（Fusarium oxysporum f. sp. radicis-lycopersici）。利用源自秘鲁番茄颈腐根腐病抗性基因Frl的共显性标记C2-25,对田间未表现典型颈腐根腐病症状的25份种质材料进行鉴定,鉴定出19份纯合抗病材料,2份杂合抗病材料,4份纯合感病材料,此结果与人工接种病原菌鉴定方法相一致。     

番茄枯萎病抗性鉴定方法及种质资源抗性鉴定研究

采用有重复的正交试验设计，对番茄枯萎病苗期抗性鉴定方法进行了筛选。结果表明，当番茄幼苗生长至二片真叶时，采用孢子悬浮液浸根接种法，接种浓度为１０２孢子／ＭＬ，移栽在温度为２５℃左右温室中培养为最适鉴定方法。采用此方法发病快，方法简便，能达到最佳鉴定结果，可真实反映出番茄种质资源的抗、感情况。并利用此方法鉴定了６６份番茄种质资源材料，其中高抗材料１２份，抗病材料２５份     

不同丝瓜种质资源对枯萎病的抗性鉴定与评价

为探究不同丝瓜种质资源对枯萎病的抗性水平,采用室内人工接种法,对68份丝瓜种质资源进行了枯萎病抗性鉴定.结果表明,供试材料中,高抗材料有2份,病情指数分别为6.25和8.26;抗病材料18份,病情指数16.13～29.83;中抗材料33份,病情指数30.73～49.30;感病材料12份,病情指数50.19～68.83;高感材料3份,病情指数78.39～94.82.说明供试的68份丝瓜种质资源中,高抗和抗病材料有20份,可以作为丝瓜抗病育种的亲本,以便选育抗病新组合并进一步推广种植.     

番茄抗黄化曲叶病ty-5基因的PCR快速检测

以番茄抗病材料CLN32120a-23(含ty-5基因)和感病材料Moneymaker(不含抗病基因)为试材,通过杂交、自交获得的F1、F2代,利用SSR分子标记技术筛选出了1个与抗病性状共分离的共显性SSR标记。结果表明:该标记在CLN32120a-23中可以扩增出550bp的条带,在Moneymaker中可以扩增出780bp的条带,在F1中可以扩增出上述2条条带,标记结果与田间鉴定基本一致,证明该标记能够区分抗病材料、感病材料及杂合抗病材料,是与番茄抗黄化曲叶病毒病基因ty-5紧密连锁的共显性标记。对27份番茄材料进行检测,鉴定出有15份材料基因型为ty-5/ty-5,分子标记检测与田间检测结果吻合率达80%。该标记可用于番茄抗黄化曲叶病毒ty-5基因的PCR快速检测,同时为ty-5分子标记辅助选择育种的应用提供一定的参考依据。     

番茄斑萎病毒病研究进展

番茄斑萎病毒（Tomato spotted wilt virus,TSWV）于1915年在澳大利亚被首次报道,现已蔓延至世界各地,自1989年在广州出现以来,已在云南、贵州、四川、广东、广西、山东、河南、河北、北京、天津、陕西、宁夏等番茄主产区大面积发生,成为继番茄黄化曲叶病毒病之后的又一种重要病害。对番茄斑萎病毒的基因组结构特征特性、危害情况以及番茄抗性资源的鉴定等研究进行综述,以期为抗病育种、抗病基因的分子标记开发、基因定位以及克隆等技术提供参考。     

马铃薯高世代选系疮痂病抗性评价及SSR辅助筛选

利用国外种质资源创造的20 份高世代马铃薯无性系为试材，以尤金为感病对照，克新18 号为抗病对照，采用自然 病圃和人工接种的鉴定方式进行疮痂病抗性评价，利用SSR 分子标记分析试材之间的亲缘关系，并对比SSR 遗传相似性系 数聚类结果和试材抗病性分类结果，探究利用SSR 分子标记辅助筛选疮痂病抗病资源的可行性。从试验地土壤和感病块茎 共分离纯化具有链霉菌特征的菌株278 份，其中240 份来自于块茎，38 份来自于土壤。具有致病力的菌株127 株，经鉴定 全部属于Streptomyces scabies 菌种。试材间的抗病性存在明显差异，可分为高抗、中抗、中感和高感4 个类型。人工接种与 自然病圃抗性鉴定结果存在极显著相关（R²=0.946 7）。抗病类型与感病类型通过SSR 遗传相似性系数聚类大致可以区分。     

四川主要辣椒栽培品种对疫病的抗性鉴定及评价

为了全面、准确地评价四川省主栽辣椒品种对疫病的抗性水平，采用室内苗期接种（6～8 片真叶期）、移栽大田后接种（分枝期）和病圃试验（结果期）3 种方法对四川省主栽的56 个辣椒品种进行疫病抗性鉴定。结果表明，5 个辣椒品种采用3 种鉴定方法均对疫病具有抗性，18 个品种均表现为感病，其余品种由于接种时期和栽培环境不同抗性类型发生变化；相关性分析结果表明，室内苗期人工接种能更准确地反映辣椒在田间的真实抗性水平。     

利用KASP 分子标记技术辅助筛选多抗番茄材料

广西大部分地区春秋两季阴雨天气较多、降雨量偏高，利于晚疫病产生的致病疫霉（Phytophthora infestans）及其 孢子囊的存活及传播。利用田间抗性鉴定与KASP 分子标记技术，对16 份番茄材料进行晚疫病抗性检测，筛选聚合多抗材料。 结果表明：10 份材料田间对晚疫病表现高抗或抗病；3 份材料含晚疫病纯合体抗性基因Ph-3，2 份材料含番茄黄化曲叶病毒 病纯合体抗性基因Ty-1，4 份材料含番茄黄化曲叶病毒病纯合体抗性基因Ty-3，10 份材料含黄萎病纯合体抗性基因Ve-2， LF-15、LF-35、LF-41 等3 份材料同时含有4 种抗性基因，其中LF-35 含有的4 种抗性基因皆为纯合体。     

47份鲜食玉米对丝黑穗病和瘤黑粉病的抗性鉴定与评价

2018年通过田间人工接种对47份鲜食玉米杂交种进行了由丝孢堆黑粉菌(Sporisorium reilianum)引起的玉米丝黑穗病和玉蜀黍黑粉菌(Ustilago maydis)引起的玉米瘤黑粉病的抗性鉴定和评价。对丝黑穗病的鉴定结果表明,47份鲜食玉米杂交种中无高抗材料;4份材料表现抗病,分别是三禾甜加糯6号、金辉588、金辉895和黑甜糯520,占8.5%;1份材料盛彩甜3号表现中抗,占2.1%;14份材料表现感病,占29.8%;28份材料表现高感,占59.6%。对瘤黑粉病的鉴定结果表明,47份鲜食玉米杂交种中27份材料表现高抗,占57.4%;6份材料表现抗病,占12.8%;6份材料表现中抗,占12.8%;5份材料表现感病,占10.6%;3份材料表现高感,占6.4%。鲜食玉米新品种中抗丝黑穗病品种比较匮乏,抗瘤黑粉病品种比较丰富,但兼抗两种病害的品种严重缺乏。     

辣椒种质的抗性基因分子标记检测

利用已发表的与辣椒抗细菌性疮痂病Bs2、Bs3基因,抗根结线虫Me1、Me3/Me4基因,抗病毒病L4、Pvr4、Tsw基因,抗白粉病PMR1基因,抗疫病Phyto5.2位点连锁的分子标记,对209份辣椒种质进行分子标记检测。结果表明,209份辣椒种质中携带Bs2基因的种质1份、携带Bs3基因的种质4份;携带Me1基因连锁标记16880-1-V2片段的纯合位点种质48份、杂合位点种质12份,携带Me3/Me4基因连锁标记片段SCAR_B94的种质1份;携带抗TMV L~4/L~4基因型的纯合抗病材料11份,L~4/L~0基因型的杂合抗病材料1份;携带抗PVY Pvr4基因连锁标记CSO片段的纯合位点种质30份,杂合位点种质8份;携带抗TSWV Tsw位点连锁标记SCAC_(568)片段的种质4份;携带PMR1基因连锁标记ZL1_1826片段的种质3份;携带Phyto5.2位点连锁标记OpD04.717片段的种质38份,初步明确了209份供试辣椒种质的抗性基因型,为辣椒抗病育种提供材料选择依据。     

菜薹(菜心)亲本材料的创制及新品种18A1菜心的选育

为了拓宽菜薹(菜心)种质资源,筛选优良亲本材料,进而选育菜心雄性不育系杂交种,本试验利用菜心与大白菜亚种间杂交、菜心与芥菜种间杂交及自然突变体筛选等3种途径,创制和鉴定优良的菜心育种材料,并广泛转育菜心CMS96细胞质不育系和配制CMS96细胞质不育系组合。结果表明,菜心与大白菜杂交、菜心与芥菜杂交及自然突变体筛选等方法是创制菜心种质资源的有效途径。利用亚种间杂交,获得菜心CMS96细胞质不育系、菜心瓣化型萝卜胞质Ogu CMS,叶片深紫色菜心,叶片塌地菜心;利用种间杂交,获得圆叶锯齿菜心,叶色翠绿菜心和叶片浅紫色菜心;基于自然突变,筛选到橘红色花菜心,乳白色花菜心和隐性核雄性不育系突变体。同时,以菜心细胞质不育系CMS96.农家菜心8与新西兰50天自交系杂交,成功选育出菜心新品种18A1菜心,中熟,叶色深绿,菜薹油绿,臺质脆嫩,口感好,适合广州等南方地区秋冬季和菜场基地种植。     

砧用南瓜品种资源抗旱性鉴定

以14份砧用南瓜品种为材料,对发芽期(23%PEG-6000模拟干旱)和幼苗期(控制浇水量)进行干旱胁迫处理,采用非加权算术平均法(UPGMA)聚类分析方法分析各品种资源的抗旱性,并对适宜鉴定砧用南瓜抗旱性的形态指标进行筛选。通过测定发芽势、发芽率、活力指数、发芽指数、茎粗、株高、叶面积、鲜质量、干质量、干旱胁迫指数、壮苗指数等11个发芽期和幼苗期的性状指标,将14份砧用南瓜品种资源分为抗旱品种、较抗旱品种、干旱较敏感品种和干旱敏感品种4类。在发芽期和幼苗期均表现出较强抗旱性的品种为大维10号、佳合台木、金刚1号、昆仑、日本根力神、日本绿霸、日本强力士、神砧和胜利(白)等9个品种。种子相对发芽率、相对发芽势、相对发芽指数、相对活力指数以及相对株高可作为砧用南瓜品种抗旱性鉴定的可靠指标,相对干质量可作为砧用南瓜品种资源抗旱性鉴定的有益指标。综合分析14个品种的耐盐性、耐寒性、耐热性和抗旱性,发现日本绿霸和日本强力士的多重抗性较强,可作为黄瓜嫁接的优质砧木。     

番茄斑萎病毒TSWV 的鉴定及抗病种质的筛选

 在北京顺义地区番茄栽培温室中随机抽取了15份疑似感染番茄斑萎病毒（TSWV）的植株叶片和果实,利用TSWV试剂盒进行DAS-ELISA检测,结果均为阳性,表明其感染了TSWV。利用来自秘鲁番茄的抗TSWV基因Sw-5的共显性SCAR标记,对442份番茄材料进行分析,筛选出24份含有Sw-5的材料,其中4份为野生番茄,1份为杂交种,16份为高代育种自交系,3份为野生潘那利番茄渐渗系。4份野生番茄综合农艺性状较差,如果实小、产量低、品质和风味差等,不能直接应用于育种;其余20份含Sw-5的材料综合农艺性状较好,可作为番茄抗TSWV的育种材料。     

胡萝卜黑斑病抗性的动态遗传分析

采用加性- 显性遗传模型，利用19 份橘色胡萝卜试材配制63 个杂交组合，研究3 个发病时期下黑斑病抗性的动态 遗传规律。结果表明，各时期的遗传效应以加性效应为主，在发病中期和晚期（V_A=0.656 和0.551）达到显著水平，并且在 发病中期显著增加，说明该时期是挖掘相关抗病基因的适宜时期；显性效应在发病晚期显著增加，达到最高值（V_D=0.311）。 黑斑病抗性存在显著的狭义遗传率和广义遗传率，最高为0.574 和0.827，说明通过选择抗性亲本可以提高后代的抗病性。 获得5 份可以显著增加后代黑斑病抗性的亲本材料P12、P14、P15、P16、P17。     

湖北长阳山区萝卜根肿病抗性鉴定筛选

长阳山区是湖北高山地区主要的根肿病病区。以100份萝卜种质资源为材料,分别在长阳胡家坪和火烧坪进行根肿病田间成株期抗病性鉴定和苗期人工接种抗病性鉴定。综合成株期和苗期鉴定结果,筛选出抗根肿病种质资源13份,其中白皮萝卜8份(富源1号、华绿8号萝卜、重庆冰糖圆白、春不老、玉堂春、汉白玉、春玉和短叶13号),红皮萝卜3份(红罐、南京红和大红袍),绿皮萝卜2份(灌糖青和德日2号)。利用长阳火烧坪根肿病病圃田间鉴定了155个萝卜杂交组合,筛选出抗根肿病优良组合3个。