Picloram,ABA和TDZ对香蕉体细胞胚胎发生的影响

 研究Picloram、ABA和TDZ对贡蕉未成熟花序来源的胚性细胞悬浮系体细胞胚胎发生的影响。结果表明, 8.28 μmol/L Picloram替代2, 4-D可获得15.56%的胚性愈伤组织诱导率; 在体细胞胚诱导初期加入ABA则抑制体细胞胚的发生, 并造成其萌发时严重愈伤化; TDZ可有效地改善体胚萌发率和植株转换率, 其中0.2 μmol/L TDZ处理的体胚萌发率和植株转换率分别从对照的17.28%、16.49%提高到72.77%和67.05%。     

生长素和细胞分裂素诱导植物胚性愈伤组织研究进展

植物胚性愈伤组织在植物研究与应用中是一种重要的试材,有很多关于植物胚性愈伤组织诱导方法研究的报道。生长素和细胞分裂素被广泛应用于胚性愈伤组织的诱导,是胚性愈伤组织诱导的关键因子。阐述了生长素和细胞分裂素在植物胚性愈伤组织诱导及体细胞胚胎发生过程中的作用,讨论了其在植物胚性愈伤组织诱导中的作用、使用方法与原则,为愈伤组织诱导、愈伤组织胚性化诱导等研究中植物生长调节剂的使用提供依据。     

仙客来体细胞胚胎发生的研究进展

综述了近年来国内外对仙客来体细胞胚胎发生的研究,表明品种的基因型、外植体的类型、外源激素、外界条件以及附加成分等对胚性愈伤的产生都有重要的影响,另外综述了仙客来胚性愈伤和体细胞胚胎的保存方法.     

水芋体细胞胚胎发生及植株再生休系的建立

以水芋幼叶为外植体,应用均匀设计法筛选其最适合的胚性愈伤组织及胚性细胞复合体诱导、体细胞胚胎发育及植株再生的培养基,建立了水芋体细胞胚胎发生体系.对不同阶段培养材料的形态结构及超微结构的观察证明了水芋体细胞胚胎的发育过程.结果表明:水芋叶片胚性愈伤组织及胚性细胞复合体诱导最适宜培养基为:LS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 2.0mg/L,诱导率为98.5%;体胚发育及植株再生最适宜的培养基为:LS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.5mg/L+IAA 1.0 mg/L,体胚萌发率为96%,萌发的体胚在发育培养基上继续培养25 d后全部发育成完整植株.     

朱顶红体细胞胚胎发生及植株再生研究

 通过诱导朱顶红（Hippeastrum hybridum）小鳞茎形成胚性愈伤组织,建立间接的体细胞胚胎发生途径和植株再生的无性繁殖体系。试验结果表明,0.5  mg · L^-1的2,4-D附加0.5 mg ·  L^-1 6-BA对试管小鳞茎外植体初代胚性愈伤组织的诱导和继代增殖有明显的促进作用,初培养松脆愈伤组织诱导率可达83.3%。2.5 ~ 5.0 mg · L^-1 的6-BA对体细胞胚胎的发育有显著的促进作用,培养50 d大于20个体细胞胚发生的愈伤组织约为50%;相同浓度6-BA附加不同浓度NAA的试验组间体细胞胚发育无明显差异。     

球根海棠离体培养的形态发生研究

 球根海棠外植体可在同一条件下同时诱导不定芽和胚状体, 经间接途径和直接途径的体细胞胚胎发生频率均很高, 体细胞胚为单细胞起源或多细胞起源。以再生嫩叶为继代中间体, 在较高温度(28 ℃) 下诱导, 可建立高效扩繁体系。纵切芽丛继代形成大量愈伤组织, 愈伤组织继代半年后几乎完全丧失分化能力, 发生激素驯化作用, 而且愈伤组织细胞染色体数目已发生广泛变异。     

柑橘体细胞胚发生的组织细胞学研究

以伏令夏橙长期继代培养的愈伤组织诱导体细胞胚发生。切片观察表明:胚性愈伤组织由胚性和非胚性细胞组成,体细胞胚发生以单细胞外起源方式为主,也可能来自胚性细胞团。胚性细胞分裂产生两个细胞,进而分化发育成多细胞原胚、球形胚、心形胚及子叶胚。次生胚和畸形子叶胚的产生较常见。通过PAS反应发现,胚性细胞和球形胚时期有两次淀粉积累高峰,淀粉的消长与体细胞胚发生的能量供应密切相关。     

仙客来体细胞胚发生和发育过程中淀粉粒的动态变化

以仙客来(Cyclamen persicum Mill.)开花植株的新生叶片为外植体,诱导筛选胚性愈伤组织,并使其进一步发育成体细胞胚.组织切片观察结果表明:胚性愈伤组织由胚性和非胚性细胞组成,胚性细胞多以胚性细胞团的形式存在,胚性细胞团起源于诱导的胚性决定细胞.体细胞胚起源于单个胚性细胞,经多细胞原胚、球形胚、心形胚和鱼雷胚等时期发育成完整植株.在体细胞胚的发生发育过程中,淀粉粒出现4次积累高峰,分别为胚性细胞、球形胚、早期鱼雷胚和成熟胚发育成完整的小植株时期,淀粉代谢与体细胞胚发生、发育及小植株的形态建成密切相关.     

芸芥体细胞胚胎发生的组织细胞学研究

以芸芥子叶为外植体, 在MS + 2, 4-D 1.0 mg·L^-1培养基上培养2周后可诱导体细胞胚胎的发生。胚性愈伤组织在MS + 2, 4-D 0.2 mg·L^-1培养基上大量增殖, 体细胞胚胎在N₆培养基上成熟后, 可在附加0.1 mg·L^-1 IBA的1/2MS培养基上生长。切片观察表明: 芸芥体细胞胚胎为单细胞发生方式, 与合子胚形成过程相似。芸芥胚性细胞具有细胞小、胞质浓、核大、核仁明显, 排列紧密的特点, 首先由单个细胞分裂形成2 - 细胞原胚, 2 - 细胞原胚分裂成3 - 细胞原胚或4 - 细胞原胚, 3 - 细胞原胚或4 - 细胞原胚继续分裂形成多细胞原胚, 进一步发育成一个成熟的体细胞胚胎。     

仙客来体细胞胚发生和发育过程中淀粉粒的变化

 以仙客来（Cyclamen persicum Mill.）开花植株的新生叶片为外植体，诱导筛选胚性愈伤组织，并使其进一步发育成体细胞胚。组织切片观察结果表明：胚性愈伤组织由胚性和非胚性细胞组成，胚性细胞多以胚性细胞团的形式存在，胚性细胞团起源于诱导的胚性决定细胞。体细胞胚起源于单个胚性细胞，经多细胞原胚、球形胚、心形胚和鱼雷胚等时期发育成完整植株。在体细胞胚的发生发育过程中，淀粉粒出现4次积累高峰，分别为胚性细胞、球形胚、早期鱼雷胚和成熟胚发育成完整的小植株时期，淀粉代谢与体细胞胚发生、发育及小植株的形态建成密切相关。     

利用未成熟种子建立野生阿宽蕉胚性细胞悬浮系和植株再生的研究

以纵切的野生阿宽蕉60d龄未成熟种子为外植体,在MI1愈伤组织诱导培养基(MS大量和微量元素及铁盐+MorelandWetmore维生素+0.1mmol/LKH2PO4+87mmol/L蔗糖+4.5μmol/L2,4-D+1g/LGelrite)中培养60d后开始出现浅黄色松散的胚性愈伤组织,150d后愈伤组织诱导率为(15.11±1.95)%。该类愈伤组织被转移到含18μmol/L2,4-D的MI2培养基中继代60d后,可获得状态均一的理想的胚性愈伤组织。胚性愈伤组织悬浮培养后,通过2个月的筛选和继代培养,可得到均质的胚性细胞悬浮系。理想的胚性愈伤组织在体细胞胚诱导培养基中培养10d后可见到白色半透明体细胞胚的发生,体细胞胚诱导率为7.70×105个/gFW。成熟体细胞胚的萌发率为(33.33±3.37)%,植株再生率为(20.83±1.68)%。     

柑桔胚珠培养及胚状体发生的研究

选用‘椪柑’、‘锦橙’、‘桃叶橙’、‘华农本地早’花后7周幼果胚珠进行培养.其胚状体发生的百分率分别是:48.5%、21.2%、19.8%、6.4%;胚性愈伤组织则为:28.2%、13.5%、15.8%、5.8%.各品种胚状体和胚性愈伤组织发生的百分率明显不同.与品种胚数多少相一致.不同激素和有机物对柑桔胚珠培养、胚状体的发生及胚性愈伤组织形成产生不同的影响.多单胚的‘华农本地早’仅从基本培养基中产生胚状体和胚性愈伤组织.胚珠培养中,胚状体发生的方式,根据来源不同分为三种:第一种是由胚珠(或已黄的球形胚上)长出白色的胚性愈伤组织,继而产生胚状体:第二种是在已分化的幼苗下胚轴或根部产生胚性愈伤组织和胚状体;第三种是在畸形胚上直接不断的分化出胚状体.     

荔枝体胚发生过程中的细胞学观察

以荔枝三月红胚性愈伤组织为材料,采用改良的石蜡切片法观察荔枝胚性愈伤组织结构及体胚发生过程,结果显示荔枝的体胚发生经历球形、心形、鱼雷形、子叶形4个过程;荔枝在胚性细胞分裂发育形成体胚之前,出现与周围细胞明显不同的界限,形成细胞间隔离;比较荔枝胚性愈伤组织与非胚性愈伤组织的细胞学特性,发现胚性愈伤组织具有核大、质浓、染色深、细胞排列紧密等特点,与非胚性愈伤组织明显不同。通过系统观察荔枝胚性愈伤组织结构以及胚性细胞分裂、生长方式和体胚发生过程,为胚性愈伤组织的利用提供细胞组织学依据。     

山核桃间接体细胞胚发生和植株再生

 以山核桃（Carya cathayensis Sarg.）自然授粉后10周的幼胚为外植体,对影响胚性愈伤组织和体胚发生的主导因子（基本培养基、植物生长调节物质等）进行了比较分析;对影响体胚萌发的脱水处理时间进行了比较;并采用石蜡切片法对幼胚脱分化产生胚性愈伤组织及体胚发生发育过程进行了组织细胞学观察。结果表明,幼胚胚轴和子叶接种在基本培养基1/2 MS上,胚性愈伤组织诱导率显著高于其它处理,达45.3%。接种于基本培养基DW中的幼胚体细胞胚诱导率显著高于其它培养基处理,达16.7%。显微镜下可观察到球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚。培养基添加1.0 mg · L-1 6-BA和0.01 mg · L-1 picloram（氨氯吡啶酸）组合时,胚性愈伤组织诱导率最高,为48.6%;而1.0 mg · L-1 6-BA与0.001 mg · L-1 picloram组合,体胚诱导率最高,为23.6%。体细胞胚发生方式属于间接体胚发生。用饱和Ca(NO3)2 · 4H2O对体胚进行脱水处理,脱水处理3 d后萌发率为39.03%,显著高于对照及其余处理。将脱水处理后的体胚接种至WPM基本培养基中,光照条件下培养,10周后可长成具3 ~ 4片真叶的完整植株。     

Histological examination of callogenesis and adventitious embryogenesis in immature ovary culture of grapevine (Vitis vinifera L.)

Summary

Histological examinations of callogenesis and adventitious embryogenesis in immature ovary culture of grapevine (Vitis vinifera L. ‘Neo Mat’) were carried out during different phases of ontogenetic development. Adventitious embryos and/or embryogenic calli were obtained when immature ovary explants were cultured on a callus induction medium (C medium) for two months followed by transfer of callus-forming explants onto an embryogenesis induction medium (E medium). Microscopic observations of serial sections of the explants revealed that the calli formed on C medium were initiated preferentially from receptacle parenchyma cells. No cell division in the embryo sac was observed and most of them degenerated four weeks after the onset of culture. Two to four weeks after transfer of the explants onto E medium, calli characterized by dense cytoplasm, conspicuous nuclei and thick cell walls were newly formed in the initially-formed, receptacle-derived ones. Proembryos simultaneously developed in the newly formed calli, indicating that they were embryogenic calli. Cell division of embryo sacs was never observed even on E medium, and adventitious embryos and embryogenic calli were hence of somatic origin. Adventitious embryos developed asynchronously and passed through globular, heart, torpedo and cotyledonary stages. These adventitious embryos germinated and developed into plantlets following their transfer onto a plant growth regulator-free medium.     

葡萄花丝培养中的胚胎发生

葡萄花丝在含6—BA2mg·1~(-1)+2,4—Dlmg·1~(-1)的B_5培养基上,培养20d发生绿色、结构紧密、坚硬凸起不规则胚性愈伤组织,诱导率达30％;将此愈伤组织转入含6—BA0.5mg·1~(-1)的B_5培养基上,30d后分化出胚状体;将胚状体转入含6—BA0.3mg·1~(-1)+NAA0.01mg·1~(-1)的B_5培养基上,30d后萌发成苗。     

适于制作人工种子的一品红体细胞胚的培养

 MS + 2,4-D 2.0 mg·L ^{- 1} + 6-BA 0.5 mg·L ^{- 1}固体培养基较适合一品红苞片诱导愈伤组织。MS+ 2,4-D 1.0 mg·L ^{- 1} + 6-BA 0.5 mg·L ^{- 1} +水解酪蛋白80 mg·L ^{- 1}固体培养基上体细胞胚分化率最高。活性炭、MS培养基和悬浮振荡培养有利于高频率体细胞胚发生。球形、心形及梨形胚及时转入添加NAA 0.2 mg·L ^{- 1}、6-BA 0.5 mg·L ^{- 1}及水解酪蛋白80 mg·L ^{- 1}的MS液体培养基中, 有利于高质量体细胞胚发生。子叶期胚及时转入添加ABA 0.5 mg·L ^{- 1}的上述培养基中, 会提高正常体细胞胚的百分率。用高质量(子叶期) 的一品红体细胞胚包埋制作人工种子, 在无菌条件下萌发率为58.1%。