菠萝非胚性愈伤组织的类型及其器官发生

以菠萝[Ananas comosus(L.)Merr.]非胚性愈伤组织为材料,利用离体培养及组织细胞学等方法研究了其在增殖、分化过程中的特性和再生规律。在增殖培养基上经过3次以上继代培养后,非胚性愈伤组织形态上逐渐表现出一定差异。根据其形态结构、分化能力和组织细胞学特征,可把非胚性愈伤组织分为节瘤状组织、薄壁组织团、致密深层愈伤组织和表面疏松愈伤组织4种类型;在增殖培养基MS+3.0mg/LBA+2.0mg/LNAA上,一种类型的非胚性愈伤组织通常只会生长出同类型的非胚性愈伤组织,但通过改变培养基配方等方法可使不同类型之间发生转换。同时,增殖继代过程中的器官发生现象很常见,通常是在薄壁愈伤组织表面细胞分化成具有分生能力的细胞,然后进行不定芽的分化。4类非胚性愈伤组织都可以通过拟原球茎、多芽体以及不定芽的形式进行器官发生;也可以经胚性诱导由体细胞胚发生途径再生成植株,其中拟原球茎产生体细胞胚的能力最强,多芽体其次。生长素及细胞分裂素对非胚性愈伤组织的形态结构、分化途径以及增殖能力有很大的影响。     

银杏成熟胚乳培养的细胞组织学观察

诱导银杏（GinkgobilobaL．）成熟胚乳产生愈伤组织时无需胚的存在。单独使用生长素或在细胞分裂素／生长素为0．5～0．9的范围内均能诱导部分胚乳切块产生愈伤组织。并且在White＋Kt2．7mg·l-1＋2,4－D1．0mg·l-1＋NAA2．0mg·l-1的培养基上,愈伤组织的诱导率最高,达到83．3％。胚乳细胞脱分化进行有丝分裂和无丝分裂,其中无丝分裂可以观察到劈裂和缢裂两种类型。愈伤组织起源于胚乳表皮及其下方2～3层细胞,且愈伤组织的形成需经历一个“假愈伤组织化”阶段。     

银杏成熟胚乳培养的细胞组织学观察

诱导银杏成熟胚乳产生愈伤组织时无需胚的存在，单独使用生长素或在细胞分裂素／生长素为０．５－０．９的范围内均能诱导部分胚乳切块产生愈伤组织。并且在Ｗｈｉｔｅ ＋Ｋｔ２．７ｍｇ．１＾＿１＋２．４－Ｄ１．０ｍｇ．ｌ＾－１＋ＮＡＡ２．０ｍｇ．ｌ＾－１的培养基上，愈伤组织的诱导率最高，达到８３．３％。胚乳细胞脱分化进行有丝分裂和无丝分裂，其中无丝分裂可以观察到劈裂和缢裂两种类型。愈伤组织起源于胚乳表皮及其下     

巴西香蕉吸芽高效胚性再生体系研究

以巴西蕉吸芽分生组织切片为外植体在较短时间内诱导出了较多的胚性组织,胚性组织诱导率超过50%,大大提高了胚性组织的诱导率和缩短了胚性愈伤诱导时间,并观察到香蕉体胚发育存在3种主要途径。实验表明,(1)2,4-D浓度0.5～1.0 mg.L-1是诱导巴西香蕉脱分化愈伤的较好浓度,愈伤组织诱导率可达100%;(2)在2,4-D浓度一致的情况下,细胞分裂素种类是影响巴西香蕉吸芽切片胚性组织诱导率的关键因素,3种细胞分裂素6-BA、ZT、TDZ,只有ZT能诱导吸芽切片产生胚性组织。     

中国科学院植物研究所在植物细胞全能性分子调控方面取得新进展

正植物细胞极高的全能性是植物可重复再生的基础,而基于植物细胞全能性的植物激素诱导的离体再生体系已被广泛应用于农业生产和基因改良中。长期以来,生长素诱导多能性的愈伤组织形成被认为是植物细胞获得全能性的过程,也是经典植物离体再生体系的起始步骤。然而,生长素如何启动愈伤组织     

大葱成熟胚离体再生过程中内源激素的变化

 对大葱成熟胚的愈伤组织诱导及分化过程进行了观察, 并对再生过程中内源激素水平进行了测定。研究结果表明: 大葱愈伤组织诱导过程中, ZR在3 d时含量达峰值, 可能是导致6 d时增长率最高的主要原因, ABA在此过程中可能为负调控因子。GA₃ 在愈伤组织分化过程中的含量明显高于继代过程,说明其对大葱愈伤组织的分化有重要作用。适当高的6-BA与NAA比值有利于芽的分化, 但是细胞分裂素类浓度过高时则会对不定芽造成伤害。     

杜仲叶片愈伤组织诱导研究

以杜仲幼嫩叶片为试材,在MS为基本培养基上添加不同浓度的生长素和细胞分裂素,对愈伤组织诱导的优化条件进行了研究。结果表明:2,4-D和6-BA对诱导杜仲叶片愈伤组织诱导均有影响,最优培养基为MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 0.3 mg/L,诱导率达87.5%,且愈伤组织生长较好。培养基中添加5 g/L活性炭能有效地抑制外植体褐化。     

CPPU对草莓花药愈伤组织诱导和分化的影响

在草莓花药组织培养中，常用的诱导愈伤组织形成和不定芽分化的细胞分裂素为６－ＢＡ和ＫＴ。ＣＰＰＵ是一种新型植物生长调节剂，具有细胞分裂素活性，在草莓组织培养中的利用尚未见报道。因此，笔者进行了本研究。１材料与方法１．１供试植物材料及其表面灭菌供试草莓品...     

植物生长调节剂在樱花组织培养中的影响研究进展

综述了近20多年来国内外樱花组织培养中植物生长调节剂的影响研究现状,重点分析了在樱花组织培养中植物生长素类、细胞分裂素类以及赤霉素GA3对芽诱导及增殖、愈伤组织诱导和根诱导的影响。     

桔梗花药愈伤组织诱导培养基筛选

以处于单核靠边期的桔梗花药为试材,以MS和N6为基本培养基,研究了不同种类生长素和细胞分裂素对桔梗花药愈伤组织诱导效果的影响。结果表明:桔梗花药愈伤组织培养中以MS作为基本培养基时的诱导率和分化率都好于N6;以6-BA为细胞分裂素时的诱导率和分化率均好于KT;以2,4-D为生长素时的愈伤组织诱导率和分化率均好于NAA和IAA,NAA又好于IAA。故MS+1.0mg/L 6-BA+0.2mg/L 2,4-D和N6+1.0mg/L 6-BA+0.2mg/L 2,4-D为桔梗花药较理想的诱导培养基配方。     

白象牙杧幼胚愈伤组织诱导研究初报

以白象牙杧幼胚为外植体,研究不同植物生长调节剂配比培养基对其胚性愈伤组织的诱导。结果表明,2,4-D对白象牙杧幼胚愈伤组织诱导作用显著。诱导愈伤组织的最佳培养基为B5+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,出愈率达到75.00%。     

香榧体细胞胚发生、发育的形态与细胞学观察

将香榧(Torreya grandis‘Merrillii’)的未成熟合子胚置于SH+0.1 mg·L-1 NAA+500 mg·L-1AC+3%蔗糖+0.5 g·L-1 Gln培养基上暗培养45 d,诱导产生半透明颗粒状胚性愈伤组织;将胚性愈伤组织转入SH+20 g·L-1 PEG+10 mg·L-1 ABA培养基中暗培养3个月诱导体细胞胚。采用碘—碘化钾染色和石蜡切片技术对体胚起源、形态发育与细胞组织学进行了观察。结果表明:胚性愈伤组织起源于合子胚胚轴表皮或皮层细胞的对称分裂。胚性愈伤组织含有两类细胞,一种是细胞质浓厚、细胞核大、体积小的圆形胚性细胞,另一种是高度液泡化拉长的细胞。胚性愈伤组织包含由这两种细胞构成的原胚团Ⅰ、原胚团Ⅱ和原胚团Ⅲ,以及一些游离细胞。原胚团Ⅲ在无植物生长调节剂的SH基本培养基上形成原胚,原胚接入成熟培养基,历经球形、棒状、心形、鱼雷形胚后发育成子叶胚。将子叶胚转入萌发培养基后胚根伸长,胚芽发育长出针叶,形成完整的再生植株。同时在离体培养中合子胚胚柄处退化的裂生多胚也能重新发育形成胚体。在初生体胚发育过程中表面常伴有次生体细胞胚的形成。     

桔梗胚珠培养中愈伤组织诱导培养基的优化

以桔梗未受精胚珠为试材,研究比较了不同生长素和细胞分裂素组合对其愈伤组织诱导及鲜重大小的影响,以筛选最佳诱导培养基。结果表明:诱导桔梗未受精胚珠愈伤组织形成的比较理想的培养基组合有2个,一是N6+1.0mg/L 2,4-D+0.1mg/L KT,其诱导率最高,达到了100%,同时愈伤组织平均鲜重较大;二是N6+0.5mg/L NAA+0.1mg/L KT,其诱导率较高为90%,愈伤组织平均鲜重最大。     

油松未成熟合子胚离体培养诱导胚性愈伤组织

研究了油松未成熟合子胚不同发育时期和不同植物生长调节剂组合对油松胚性愈伤组织诱导的影响。结果表明:在沈阳地区,油松未成熟合子胚诱导胚性愈伤组织的最佳采种时间为7月10日左右;以DCR为基本培养基,添加较低浓度的KT和较高浓度的2,4-D有利于油松胚性愈伤组织的诱导,其中以添加2,4-D 2mg/L和KT 0.5mg/L时诱导率最高,可达88.3%。     

波叶红果树叶片愈伤组织诱导研究

以波叶红果树无菌苗叶片为外植体,研究了生长素(NAA、2,4-D)、细胞分裂素(6-BA)以及不同植物激素组合对波叶红果树愈伤组织诱导和生长的影响.结果表明:以6-BA1.0 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L激素组合愈伤组织诱导效果最佳,诱导率高达95.00％,生长旺盛.     

不同激素处理对乌拉尔甘草愈伤组织中甘草酸含量的影响

为获得乌拉尔甘草愈伤组织中甘草酸生产的最佳配方。现利用随机区组设计和高效液相色谱法分析测定愈伤组织中甘草酸的含量。结果表明:细胞分裂素与生长素搭配使用有利于甘草酸的积累,特别是生长素IAA与BA组合有利于甘草酸形成,单独使用激素BA不利于甘草酸含量积累;适宜甘草愈伤组织中甘草酸形成的培养基配方为MS+BA 0.5 mg/L+IAA0.5 mg/L+蔗糖20 g/L,甘草酸产量平均最高为120 mg/g;适宜的外植体为根状茎。     

TDZ对诱导大蒜愈伤组织形成的影响

TDZ是一种新型植物生长调节剂,具有很强的细胞分裂素活性(CTK).研究了不同浓度TDZ对大蒜愈伤组织培养和大蒜鳞茎分化的影响.试验结果表明,15%浓度的TDZ对大蒜愈伤组织培养的促进作用最明显.诱导率达到75%;而在MS+15%TDZ的培养基上,愈伤组织增殖最快,诱导出黄色致密愈伤组织分化能力最强,质量最好.     

朱顶红‘Red Lion’胚性愈伤组织诱导及体细胞胚发生

以‘Red Lion’朱顶红(Hippeastrum vittatum)的鳞片为外植体进行体细胞胚诱导和形态学与组织学的胚性鉴定。结果表明,鳞片在MS+2 mg·L~(-1) BA+1 mg·L~(-1) NAA+2 mg·L~(-1) TDZ+30 g·L~(-1)蔗糖培养基上胚性愈伤组织诱导率可达90.63%,而不添加TDZ的培养基上胚性愈伤组织诱导率为0。胚性愈伤组织可呈白色松散、透明膨松、透明致密、微棕色松脆和翠绿色松脆等类型;非胚性愈伤组织呈微棕色致密状。胚性愈伤组织中可明显观察到球形胚、心形胚和棒状胚3个发育时期。体细胞胚在不添加植物生长调节剂的MS培养基上可发育形成芽和根,长成完整小植株。     

外源多胺对荔枝愈伤组织增殖及体胚发生的作用

[目的]研究多胺[腐胺(Put)、亚精胺(Spd)、精胺(Spm)]对愈伤组织增殖及体胚诱导的作用,为揭示多胺在荔枝离体再生中的功能提供依据.[方法]采用单因素试验设计,分别在愈伤组织增殖及体胚诱导过程中添加多胺及其合成抑制剂[D-精氨酸(D-Arg)、环己胺(Cha)],比较不同处理下妃子笑荔枝愈伤组织增殖及体胚诱导差异.[结果]低浓度多胺或高浓度多胺合成抑制剂促进愈伤组织增殖,愈伤组织增殖量达显著水平,胚性愈伤组织(EC)与非胚性愈伤组织(NEC)颜色状态界限更加明显.与对照相比,经过多胺处理增殖的愈伤组织乳白胚诱导数及萌发率均降低,而多胺合成抑制剂处理增殖的愈伤组织乳白胚诱导数及萌发率随着多胺合成抑制剂浓度升高而升高,当Cha质量浓度为200 mg·L-1时,乳白胚数量最多,达960个·g-1,萌发率29.41％;当D-Arg质量浓度为700 mg·L-1时,乳白胚萌发率最高,为32.35％,胚数量为450个·g-1.体胚诱导培养基上添加多胺及其合成抑制剂对体胚诱导作用差异较大,Spd促进体胚发生作用较明显,当Spd质量浓度为20mg·L-1时,乳白胚数量为590个·g-1,萌发率为30.30％.体胚发生培养基上添加Cha或高浓度D-Arg抑制体胚发生,而添加低浓度D-Arg则促进体胚发生.[结论]在愈伤组织增殖培养基上添加3种多胺可促进愈伤组织增殖并保持胚性,且抑制原胚发生,而Cha及高浓度D-Arg促进原胚发生.体胚诱导培养基中添加低浓度Spd促进体胚分化.     

正交试验法在荔枝体胚诱导过程中的应用

应用正交试验方法,研究MS培养基中附加的BA、KT、NAA、2,4-D以及琼脂和蔗糖浓度对荔枝胚性愈伤组织体胚诱导的影响。结果表明,BA 0.5 mg.L-1 KT 0.5 mg.L-1组合有利于荔枝胚性愈伤组织诱导体胚,NAA及2,4-D对体胚诱导效果不明显;在高浓度蔗糖(60 g.L-1)和琼脂(10 g.L-1)作用下,荔枝体胚诱导率较高,其中琼脂的作用效果明显高于蔗糖。通过正交试验方法选用MS BA 0.5 mg.L-1 KT 0.5 mg.L-1 LH 500 mg.L-1 蔗糖60 g.L-1 琼脂10 g.L-1组合,荔枝胚性愈伤组织诱导的体胚达9.05百个.g-1,是MS基本培养基的4.6倍,减少了试验次数,提高了荔枝体胚诱导的工作效率与准确性。