氮、钾配施追肥对金银花二、三、四茬花产量及药用成分含量的影响

为了探究氮、钾配施追肥对金银花二、三、四茬花产量和品质的影响,并研究其适宜用量及比例,以提高金银花二、三、四茬花的产量和品质、缩小其与一茬花之间的差距。以河北省邢台市巨鹿县纪家寨村田间巨鹿一号3 a生树龄金银花为材料进行氮钾配施追肥试验。结果表明,当每茬花追肥量为尿素32 g/株时,金银花二、三、四茬花总产量最高,绿原酸、咖啡酸的平均含量有所下降,木犀草苷平均含量增加不显著;当每茬花追肥量为尿素63 g/株、硫酸钾25 g/株时,金银花二、三、四茬花平均绿原酸、咖啡酸、木犀草苷含量最高,总产量与对照相比显著增加(P0.05)。对金银花的产量以及药用成分含量进行综合考虑,结合当地实际施肥情况,推荐金银花二、三、四茬花最佳追肥组合为尿素,硫酸钾=1.0∶0.4,追肥量为每茬花尿素63 g/株,硫酸钾25 g/株时,分别在金银花一、二、三茬花末期施入土壤,能够使得金银花二、三、四茬花花蕾平均药用成分含量达到最佳,同时保证总产量不降低。     

不同产地甘松药材的质量评价研究

目的评价不同产地甘松药材的质量。方法采用ICP-OES、GC-MS、HPLC等方法,测定不同产地甘松药材中甘松新酮、绿原酸、挥发油、常量元素、水分、总灰分的含量。结果 11批不同产地甘松药材的水分平均值为9.29%;总灰分平均值为5.98%。11批甘松药材均含有钙、镁、钾、钠4种元素,平均含量分别为3 802 mg·kg~(-1)、1 236 mg·kg~(-1)、8 662 mg·kg~(-1)和149.2 mg·kg~(-1),其中来自于泸定磨子沟的甘松样品镁、钾、钠含量明显高于其它10个产地样品。从11个产地甘松药材挥发油中共鉴别出80个化学成分,其中有6个共有成分,分别为桉叶油醇、4-甲氧基苯乙烯、(1aR)-1aβ,2,3,3a,4,5,6,7bβ-八氢-1,1,3aβ,7-四甲基-1H-环丙烷[a]萘、(-)-亚叶菊烯、白菖油萜、Espatulenol。11批不同产地甘松药材中绿原酸平均含量为0.27%,甘松新酮平均含量为0.47%;不同产地甘松样品中绿原酸和甘松新酮含量有一定的差异,产于泸定磨子沟的样品中绿原酸含量最高(0.54%),而甘松新酮在乡城二道桥的样品中含量最高(1.86%)。结论不同产地甘松药材中的挥发油、常量元素、绿原酸和甘松新酮成分有一定的差异,这可能与不同产地的气候、生长环境、土壤等因素有关。     

HPLC法测定乌韭的荭草苷和牡荆素含量

建立乌韭地上部分荭草苷和牡荆素含量的测定方法,检测不同产地乌韭中两种黄酮苷的含量,对乌韭资源进行评价.用超声波提取法提取,反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定,GeminiC18色谱柱,乙腈/1%磷酸溶液(体积比15∶85)为流动相,流速1 mL/min,检测波长340nm.荭草苷在0.025～0.148μg范围内有良好的线性关系,加样回收率为100.61%,相对标准偏差(RSD)2.18%;牡荆素在0.035～0.207 μg范围内有良好的线性关系,加样回收率为99.77%,RSD 2.37%.云南丘北所产乌韭的荭草苷和牡荆素质量分数都是最高,分别达到0.116 6%和0.145 7%,移栽到南京地区1年后荭草苷含量下降,牡荆素含量增高.以荭草苷和牡荆素含量为指标,云南丘北所产乌韭是较好的种源.     

金银花中异绿原酸A、B、C含量的HPLC测定方法研究

采用高效液相色谱法(HPLC)同时测定金银花中异绿原酸A、B、C的含量,并对色谱条件进行优化。结果表明,最佳色谱条件为Eclipse plus C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相为0.1%磷酸溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱,洗脱条件为0-20min,15%~30%B,20-30min,30%~50%B,流速1.0mL/min,检测波长325nm,柱温30℃,进样量10μL。在最佳的色谱条件下,实现了金银花对照品及样品中异绿原酸3种结构化合物的基线分离,为异绿原酸A、B、C含量的同时测定奠定了基础。该方法优化后缩短了测试时间,为金银花质量的快速检测提供参考依据。     

离子液体辅助提取刺玫果中木犀草素与金丝桃苷的工艺研究

为给刺玫果的开发利用提供参考依据。采用单因素试验与正交试验相结合的研究方法,以木犀草素、金丝桃苷的峰面积为指标,采用高效液相色谱法,建立了同时测定刺玫果中木犀草素、金丝桃苷含量的方法,探寻并优化了离子液体辅助提取刺玫果中木犀草素、金丝桃苷的工艺条件。检测与分析结果表明:色谱柱为伊利特ODS2 C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相以乙腈-0.2%磷酸水溶液梯度洗脱,进样量20μL,检测波长360 nm,柱温35℃;木犀草素、金丝桃苷进样质量浓度在0.19~15.20μg·m L-1范围内其线性关系(r=0.997 7)均良好;木犀草素的平均回收率为97.49%,RSD为1.76%;金丝桃苷的平均回收率为101.07%,RSD为1.83%。优化试验结果表明,离子液体辅助提取的最佳工艺条件为:离子液体浓度为0.45 mol·L-1,料液比为1∶25,乙醇的体积分数为70%,提取温度为80℃,提取时间为90 min,超声波功率为180 W;在此优化的提取条件下,木犀草素、金丝桃苷的提取率分别为11.99、25.36μg·g-1,其提取率分别提高了36.87%、49.09%。验证试验结果表明:建立的含量测定方法具有良好的精密度,结果准确可靠;优化的提取方法快速、简单、提取率高。     

不同产地杜仲雄花茶品质评价

通过对杜仲雄花茶的感官评定,以及多糖、总黄酮、桃叶珊瑚苷、绿原酸、京尼平苷含量等进行测定,评价了不同产地杜仲雄花茶品质。结果发现:对于多糖含量、总黄酮含量以及3种活性成分含量而言,陕西产地的杜仲雄花茶品质最佳,贵州产地雄花茶品质最差;南方产地杜仲雄花感官品质明显高于北方产地,北方产地杜仲雄花多糖含量明显高于南方产地。可为杜仲雄花茶的栽培区域的选择提供依据,为广大消费者提供参考价值。     

HPLC法同时测定凤尾草中5种黄酮类成分的含量

建立高效液相色谱法,同时测定10个不同产地凤尾草中5种黄酮类成分:新西兰牡荆苷、忍冬苷、野漆树苷、木犀草素和芹菜素的含量.使用Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以乙腈-0.1％甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱(0～10 min,15∶85;20～30 min,25∶75;35～40 min,50∶ 50),流速1.0 mL/min,检测波长350 nm,柱温25℃.结果新西兰牡荆苷、忍冬苷、野漆树苷、木犀草素和芹菜素5个黄酮类化合物在测定的范围内峰面积与浓度之间均表现出良好的线性(r≥0.999,n=5),加样回收率分别为97.18％ ～ 105.20％(RSD为1.72％～3.20％)、95.02％～104.92％(RSD为1.96％～2.93％)、98.45％～ 103.70％(RSD为1.66％～2.70％)、96.41％ ～ 104.73％(RSD为1.03％～3.46％)、95.82％～99.34％(RSD为1.85％～ 3.95％).结果表明凤尾草中5种黄酮含量的地区差异性不大,各地区凤尾草中5种黄酮类化合物总含量在0.5 ～2.2 mg/g范围内.     

不同产地香茅挥发油的化学成分比较研究

采用水蒸气蒸馏法提取香茅挥发油,利用气相色谱-质谱联用技术分别对5个不同产地香茅挥发油的化学组成进行了分析,并比较了不同部位之间挥发油化学成分的差异。结果表明:5个产地香茅均以叶的挥发油含量最高,其次为全草,茎的挥发油含量最低。不同产地香茅挥发油成分种类及其GC含量差异较大,湖南、广东、浙江、海南、福建香茅全草挥发油中分别鉴定出36、30、37、22和33种成分,叶挥发油分别鉴定出25、24、32、27和39种成分,主要成分均为(E)-柠檬醛、(Z)-柠檬醛、β-月桂烯、香叶醇等。5个产地香茅全草和叶挥发油中柠檬醛GC含量均最高,为70%~85%左右,其中(E)-柠檬醛为40.86%~51.15%,(Z)-柠檬醛为31.01%~36.46%;β-月桂烯GC含量为1.94%~15.43%,香叶醇GC含量为1.61%~4.89%。5个产地全草、叶挥发油中的成分主要为含氧单萜类(GC含量为81.91%~93.04%),含量具有地域性。     

芜湖产地金银花的质量分析

利用HPLC方法测定芜湖产金银花中的绿原酸的含量。采用HPLC法,色谱柱为Agllent HC-C18(5μm,4.6×250mm);流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液,洗脱;波长327nm,柱温30℃。线性良好(R=0.9997),精密度良好(0.11%),回收率良好(平均回收率为103.15%,RSD为1.97%)。结果表明,芜湖丫山产金银花中有效成分绿原酸高于药典规定,平均含量为2.1%。     

毛竹叶黄酮碳苷C-糖基化途径及C-糖基转移酶的分析

【目的】毛竹叶中含有大量具有很强生物活性的黄酮碳苷,C-糖基转移酶(CGT)是黄酮碳苷生物合成代谢途径中C-糖基化的关键酶。本研究从毛竹叶中分离纯化CGT,研究毛竹叶黄酮碳苷的C-糖基化途径以及CGT的酶学性质和一级结构氨基酸序列特征,为后续深入研究毛竹叶中的CGT奠定良好的基础。【方法】通过硫酸铵分层沉淀、透析、葡聚糖凝胶过滤、阴离子交换层析、超滤脱盐等方法纯化CGT,使用SDS-PAGE进行检测。分别用圣草素查尔酮、圣草素、木犀草素作为底物,根据已建立的CGT催化的C-糖基化反应体系,进行可能的C-糖基化途径验证。运用Q-TOF检测分析和数据库搜索比对等方法,确认毛竹CGT的基因序列和一级结构氨基酸序列。【结果】毛竹叶黄酮碳苷CGT的分子量大约是50 kDa,酶反应体系最佳的反应时间是40 min,最佳反应温度是28℃,缓冲盐的最佳pH8.1,底物木犀草素的最佳浓度是31.76μmol·L~(-1)。底物为木犀草素的反应体系在CGT催化下大量转化生成了异荭草苷,底物为圣草素查尔酮和圣草素的反应体系在CGT催化下大量转化生成了未知产物,只有少量转化生成异荭草苷。根据蛋白质质谱裂解规律和蛋白质碎片离子,解析出4个CGT肽段,并均可与毛竹基因(PH01000603G0510)编码的蛋白质氨基酸序列匹配,经数据搜索匹配,毛竹基因(PH01000603G0510)与水稻CGT基因(FM179712)匹配率为81%。【结论】通过对毛竹叶黄酮碳苷C-糖基转移酶提取、分离纯化及质谱鉴定得到可能的毛竹叶黄酮碳苷CGT基因序列(PH01000603G0510)。确定毛竹叶黄酮碳苷C-糖基化途径,主要途径是CGT催化木犀草素和UDP-葡萄糖直接合成异荭草苷,次要途径是CGT催化圣草素查尔酮和UDP-葡萄糖,或圣草素和UDP-葡萄糖间接合成异荭草苷。毛竹叶CGT极易催化生成C-6黄酮苷(异荭草苷),而极少催化生成C-8黄酮苷(荭草苷)。     

配方施肥对杜仲雄花主要活性成分含量的影响

为了研究氮N、磷P、钾K对杜仲雄花主要活性成分含量的影响,采用正交旋转设计进行不同配方施肥试验。结果表明:N、P、K肥对杜仲雄花中京尼平苷酸(GPA)、绿原酸(CA)、桃叶珊瑚甙(AU)三种主要活性成分含量的影响为NKP;通过比较、寻优、筛选,京尼平苷酸(GPA)、绿原酸(CA)、桃叶珊瑚甙(AU)的总量≥1.76%,京尼平苷酸(GPA)含量≥0.55%,绿原酸(CA)含量≥0.47%,桃叶珊瑚甙(AU)含量≥0.76%的优化施肥方案为:氮肥0.917～0.952 kg/株,磷肥1.470～1.634 kg/株,钾肥1.290～1.389 kg/株,N、P、K的用量比例为N∶P∶K=1∶1.66∶1.43。     

金银花采收期的试验研究

通过对秦岭山区金银花不同季节采收时期试验分析,研究结果表明,金银花以采收二白期和大白期花蕾入药质量最佳;叶以花期即初生花蕾时至花末期采摘,叶中的绿原酸含量最高,为最佳采叶期;藤中绿原酸含量嫩枝高于老枝,建议修剪时,应修剪枝条上部为最好;同株金银花植物中,药效成分绿原酸含量为：花蕾〉叶〉嫩叶〉老枝。这些为金银花最佳采收期提供了科学的依据。     

忍冬质量的研究

不同种源，不同生态环境等，对金银花的质量影响很大，山东栽培的金银花绿原酸含量和产量均高；但是产于广东，广西和贵州的红腺忍冬较其它品种的绿原酸量和产量也较高。     

凤山县石漠化不同植被恢复模式对土壤理化性质的影响

对广西凤山县石漠化不同植被恢复模式的土壤理化性质进行测定分析,结果表明:随着植被的恢复,其石漠化的土壤肥力效应有明显的变化,其土壤容重降低6.1%~16.8%,土壤总孔隙度增加7.5%~14.2%,土壤有机质含量增加21.4%~32.7%,水解氮含量增加32.2%~55.6%,土壤有效磷含量增加77.1%~144.6%,土壤速效钾含量增加15.2%~35.7%,但都随着土层深度的增加而减弱。不同植被恢复模式对土壤肥力效应的影响序列为任豆(Zenia insignis)-构树(Broussonetia papyrifera)模式任豆纯林模式香椿(Toona sinensis)-金银花(Lonicera japonica)模式任豆-山葡萄(Cayratia corniculata)模式。     

毛花柱忍冬花蕾化学成分研究

对毛花柱忍冬花蕾进行化学成分研究,从中分离鉴定了10个化合物:绿原酸(Ⅰ)、5-O-咖啡酰基-奎宁酸丁酯(Ⅱ)、5-O-咖啡酰基-奎宁酸甲酯(Ⅲ)、槲皮素(Ⅳ)、木犀草苷(Ⅴ)、芦丁(Ⅵ)、山奈酚-3-O-芸香糖苷(Ⅶ)、秦皮乙素(Ⅷ)、β-谷甾醇(Ⅸ)和胡萝卜苷(Ⅹ)。其中化合物Ⅶ为首次从该属植物中分离,化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ均为首次从该植物中分离。     

剥皮对杜仲次生代谢物含量及伤害修复能力的影响

【目的】研究不同剥皮处理对杜仲次生代谢物含量及伤害修复能力的影响,为杜仲资源的合理利用提供借鉴。【方法】以5年生杜仲为研究对象,分别进行50%、75%、100%剥皮处理,以植株不剥皮为对照,研究116天内杜仲叶片可溶性糖、游离脯氨酸、丙二醛、苯丙氨酸解氨酶、绿原酸、总黄酮、京尼平苷酸的含量变化。【结果】不同剥皮处理的杜仲叶片可溶性糖含量随剥皮时间均呈先上升后迅速下降并基本保持稳定的趋势;除21天和36天外,50%、75%剥皮处理间杜仲叶片可溶性糖含量均无显著差异(P0.05);36天时,100%剥皮处理的可溶性糖含量最高,为对照的1.3倍。不同剥皮处理均使杜仲叶片游离脯氨酸(Fpro)含量增加,其中,100%剥皮处理Fpro含量在86天前显著高于对照,86天后与对照无显著差异。不同剥皮处理的杜仲叶片丙二醛(MDA)含量随剥皮时间均呈先升高后降低的趋势,在21天时达到最大值。剥皮处理后,杜仲叶片苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性显著增加,21天时达到最大值,50%、75%、100%剥皮处理的杜仲叶片PAL活性分别为对照的2、2.1和2.6倍,21天后不同剥皮处理的PAL活性均呈下降趋势。剥皮处理后,杜仲叶片绿原酸含量出现2次显著增加,分别在21天和56天,其中56天时75%剥皮处理的叶片绿原酸含量显著高于对照及其他剥皮处理(P0.05),56天后不同剥皮处理的绿原酸含量均迅速降低。不同剥皮处理杜仲叶片总黄酮含量随剥皮时间显著增加,在21天时达到峰值,50%、75%、100%剥皮处理的叶片总黄酮含量分别为对照的1.2、1.3和1.9倍,41天后不同剥皮处理与对照间总黄酮含量无显著差异(P0.05)。不同剥皮处理杜仲叶片京尼平苷酸含量与绿原酸含量变化规律相似,京尼平苷酸含量在21天和56天时显著增加,其中又以75%剥皮处理的叶片京尼平苷酸含量增加最为明显,116天时不同剥皮处理的京尼平苷酸含量与对照均无显著差异(P0.05)。【结论】剥皮处理对杜仲植株有一定程度的伤害,但经过植物多方面的调节,这种伤害能得到修复;75%剥皮量有利于杜仲树体恢复,且可提高杜仲叶中次生代谢物含量。     

旱柳落叶化学成分研究

对旱柳落叶化学成分进行研究,从中分离鉴定了13个化合物,分别为:水杨醇(1),水杨苷(2),2′-苯甲酰水杨苷(3),咖啡酸(4),木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(5),柯伊利素(6),邻苯二酚(7),黑麦草素(8),绿原酸(9),原儿茶酸(10),3,5-二甲氧基-4-羟基苯乙醇(11),丁二酸(12),正丁酸(13).其中,水杨苷(2)占干燥落叶的质量分数超过0.07％,化合物6,8,10～13为首次从该属植物中分离得到.     

杜仲叶次生代谢物季节和地域差异性研究

研究了杜仲叶中京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷等次生代谢物季节、地域差异性。采用反相高效液相色谱法分析杜仲叶中这3种主要次生代谢物。结果表明,京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷6月份含量最高,分别达到0.562%、2.258%和0.571%。另外,杜仲叶中次生代谢物含量地域差异性显著,即对于同一年龄、同一杜仲品种而言,气候条件较差地区(年平均气温6.8~8.8℃、绝对最低湿度-29.6%~-22.6%、年降雨量576.7~1048 mm)杜仲叶次生代谢物含量高。由此得出,气候条件影响杜仲叶中次生代谢物的合成积累,而6月份为杜仲叶的最佳采收期。     

杜仲叶中3种主要活性成分的动态变化

采用高效液相色谱法(HPLC)测得江西栽培杜仲叶中绿原酸、京尼平苷和桃叶珊瑚苷3种活性成分在不同月份之间呈动态变化,绿原酸在6月含量最高(10 817.91μg/g),在12月含量最低(2 179.938μg/g);京尼平苷和桃叶珊瑚苷含量均在6月和10月出现2次积累高峰期,暗示与杜仲树体生长具有一定的相关性。6月杜仲生长较慢、3种活性成分含量相对较高、叶面积较大,6月采收杜仲叶既减少了对树体的损伤,又保证了杜仲叶的产量和质量,故杜仲叶6月采收最佳。     

鹅毛竹叶酪氨酸酶抑制物提取工艺优化及活性评价

该试验研究鹅毛竹叶酪氨酸酶抑制物的最佳提取工艺及其竹叶特征性成分的含量及活性。采用响应面法优化鹅毛竹叶酪氨酸酶抑制物的提取工艺,在此基础上利用分极法制备酪氨酸酶抑制活性部位(SAE),并采用HPLC法定量分析其中绿原酸、咖啡酸、异荭草苷、荭草苷、对香豆酸、牡荆苷、异牡荆苷、山奈酚和苜蓿素9个竹叶特征性成分;通过DPPH法、ABTS法、FRAP法和酪氨酸酶催化氧化左旋多巴速率法评价SAE及竹叶特征性成分的抗氧化和酪氨酸酶抑制能力。结果显示:鹅毛竹叶酪氨酸酶抑制物的最优工艺参数为乙醇浓度70%,料液比1∶16,提取温度80℃,提取时间1h。以此提取物为原料制备的SAE对酪氨酸酶的抑制IC50为658.46μg/m L,含有绿原酸(0.4285mg/g)、咖啡酸(0.0463mg/g)、异荭草苷(0.2999mg/g)、对香豆酸(0.4593mg/g)、山奈酚(1.7152mg/g)及苜蓿素(2.5513mg/g)6种竹叶特征性成分。其中咖啡酸的抑制酪氨酸酶活性最强,显著高于阳性对照熊果苷,推测为鹅毛竹叶抑制酪氨酸酶的主要活性成分之一。表明鹅毛竹叶是一种来源丰富的酪氨酸酶抑制原料,具有进一步研究和开发的意义。