低温对小麦花培愈伤组织绿苗分化率的影响

小麦花药培养的技术关键在于提高花粉植株诱导率。花粉植株诱导率由花药愈伤组织诱导率和愈伤组织绿苗分化率共同决定。本试验以12个不同小麦杂交组合的F2代为材料，研究了在转愈初期短期低温处理对小麦愈伤组织绿苗分化率的影响。结果表明，在转愈伤组织初期，采用了4℃和6℃低温培养1～3d能大幅度提高小麦花培愈伤组织绿苗分化率，提高育种效率。     

基因型及外源因子对小麦花药培养一步成苗的影响

研究了不同基因型及几种外源因子在小麦花药培养一步成苗中的效应。结果表明 ,花药培养一步成苗的愈伤组织诱导率、绿苗分化率、白苗分化率及绿苗产量存在基因型间的差异。高蔗糖浓度有利于获得高频率的花药愈伤组织 ,但同时又提高了花药培养中白化苗频率。动力精 (KT)对花药愈伤组织诱导率影响的差异不大 ,但对绿苗分化率、绿苗产量及绿苗 /白苗 (G/ W)均有显著影响。在试验浓度范围内 ,随 KT浓度的增大 ,绿苗产量提高 ,绿苗分化率明显增加 ,而白苗分化率下降 ,因而 G/ W值明显增大。说明 KT主要是通过提高绿苗分化率和降低白苗分化率 ,增大 G/ W而提高花培一步成苗效率的。在与 KT的配合使用中 ,2 ,4 - D比 NAA更有利于提高小麦花药培养中的愈伤组织诱导率和苗分化频率     

有机添加物对矮败小麦F1可育株花药培养及花培苗越夏的影响

【目的】探讨有机添加物对矮败小麦F1可育株花药培养特性的影响,研究其花粉植株越夏方法。【方法】应用单因子试验,分析水解酪蛋白、谷氨酰胺和生物素3种有机添加物对矮败小麦F1可育株可育株花药培养特性的影响,比较不同基因型矮败小麦F1可育株花药愈伤组织诱导率、绿苗分化率,研究多效唑对矮败小麦F1可育株花粉植株越夏的影响。【结果】在一定质量浓度范围内,水解酪蛋白、谷氨酰胺和生物素对矮败小麦F1可育株花药愈伤组织的诱导都有一定正向促进作用,在其最适质量浓度(水解酪蛋白500 mg/L、谷氨酰胺5.0 mg/L和生物素2.0 mg/L)时,矮败小麦F1可育株花药愈伤组织的诱导率分别较对照提高了47.07%,22.48%和55.27%;基因型对矮败小麦F1可育株花药愈伤组织诱导和绿苗再分化有重要影响,矮败小麦与小偃22、101、西农213 3个小麦品种(系)杂交F1可育株花药愈伤组织诱导率分别为5.49%,4.73%和5.85%,三者之间差异均达极显著水平。矮败×小偃22愈伤组织的绿苗分化率明显高于矮败小麦与101、西农213杂交F1代2个供试材料,达到了13.70%。在添加多效唑和连续继代培养条件下,成功地进行了矮败小麦F1花粉植株越夏,证明在越夏培养过程中,4.0 mg/L多效唑表现出的延缓生长作用较3.0 mg/L更好,并未见有毒害作用。【结论】添加500 mg/L水解酪蛋白、5.0 mg/L谷氨酰胺和2.0 mg/L生物素,能使矮败小麦F1可育株花药愈伤组织的诱导率较对照有明显提高;添加多效唑和连续继代培养可使矮败小麦F1花粉植株成功越夏,获得生长健壮、移栽成活率高的花培苗。     

提高小麦花粉植株诱导频率的研究

对影响小麦花粉植株诱导频率部分因素进行了研究,获得以下结果:(1)在现有的小麦花药愈伤组织诱导培养基中,W_(14)和马铃薯-Ⅱ的效果最好;(2)低温预处理的效果因杂交组合的不同而表现不同;(3)短期高温预培养可明显提高愈伤组织的产量;(4)绿苗分化率与愈伤组织年龄关系密切,愈伤组织转移的最适年龄与愈伤组织诱导培养基的种类有关;(5)大量元素减半的MS培养基绿苗分化率显著高于190—Ⅱ培养基。     

组培小麦花粉植株当年结籽的研究

采用小麦冬季温室加代材料花药培养成苗,并于当年夏季结籽,可使小麦单倍体育种速度加快1年。而且温室加代花药培养1年1代与正常花药培养2年1代的愈伤组织出愈率、绿苗诱导率和分化率,以及绿苗自然加倍率等基本一致。     

提高小麦花药培养诱导愈伤组织和分化绿苗频率的研究

小麦花药培养,旨在利用单倍体植株加倍后的纯合性,缩短杂交育种时间,随着“花培一号”、“京花一号”、“豫花一号”等小麦新品种的育成,无疑单倍体育种是小麦育种的新途径之一,但目前小麦花药培养在诱导愈伤组织和分化绿苗频率仍很低。本文研究了不同试验材料,不同培养基及试验材料采前灌水对诱导愈伤组织和分化绿苗频率的影响,为提高诱导愈伤组织和分化绿苗频率提供理论依据。     

AgNO3对小麦花药培养的影响

在3个春小麦品系的花药愈伤组织诱导培养基中加入2 mg/L的AgNO3,研究其对小麦花药培养的影响,结果表明,AgNO3的介入降低了花药愈伤组织诱导率,但提高了分化率和绿苗率。     

小麦花药培养效率的影响因素研究

【目的】研究影响小麦花药培养特性的因素,优化小麦花药培养条件,提高小麦花药培养效率。【方法】以10个普通小麦品种(系)及其16个杂交F₁代花药为材料,研究了普通小麦基因型、基本培养基种类及低温预处理时间、诱导培养基附加脯氨酸和硝酸铈对小麦花药培养特性的影响。【结果】不同基因型小麦花药培养特性差异较大,供试基因型的花药反应率与愈伤组织诱导率相关性高,而两者与绿苗分化率无相关性。荔高6号×置丰0502 F₁、周麦16×BI0452 F₁、烟农19×开麦18 F₁、豫麦69×新麦208 F₁、煤生0308和皖麦41×烟农19 F₁有较高的绿苗产率;基本培养基种类对供试小麦花药愈伤组织诱导率、反应率、绿苗产率有显著影响,对绿苗分化率影响不显著,癸培养基小麦花药培养特性总体优于C₁₇培养基;小麦花药低温预处理时间以0.5 d最佳;在诱导培养基中加入3.0～4.5 mg/L硝酸铈后,小麦花药愈伤组织诱导率提高83%～430%,绿苗产率提高82%～557%;600 mg/L的脯氨酸可以使小麦花药的愈伤组织诱导率提高118%,绿苗产率提高222%。【结论】选择花药培养特性好的基因型、对花药低温预处理0.5 d、在癸诱导培养基中添加4.5 mg/L硝酸铈和600 mg/L脯氨酸,可大幅度提高小麦花药的培养效率。     

人参粉对小麦和小黑麦花药培养的影响

小麦花药培养中愈伤组织诱导率和绿苗分化率低一直是悬而未决的问题.本试验表明,在NT_5-1培养基中附加1.5g/1人参粉后,能显著提高普通小麦和八倍体小黑麦花粉愈伤组织诱导率.其中普通小麦花粉愈伤组织诱导率可达2.98%(对照为1.49%),出愈时间(22天)较对照早3天,唯绿苗分化率(19.21%)低于对照(28.5%);八倍体小黑麦花粉愈伤组织诱导率达15.86%(对照为8.33%),出愈时间(25天)比对照提早4天,绿苗分化率(4.26%)亦高于对照(3.33%).     

磁场预处理对花椰菜花药培养的影响

采用磁场强度300，500，700mT预处理大部分花粉发育处于单核中期和单核靠边期的花蕾，以提高花椰菜花药培养的愈伤组织诱导率和绿苗分化率，结果表明，磁场预处理可以明显提高愈伤组织诱导率，以均匀磁场预处理30min、磁场强度为300mT的效果较好，提高诱导率28.87%；经过磁场预处理，两种不同培养基的愈伤组织诱导率的差异比对照间差异明显缩小，即经磁场预处理的材料对培养基的选择性降低；在同一种诱导出的愈伤组织绿苗分化率的差异更明显，M2培养基上诱导出的愈伤组织绿苗分化率比M1培养基上的愈伤组织平均高13.2%-26.2%。     

黄独胚性愈伤组织冻后黑暗培养及其再生植株半薄切片观察

以黄独胚性愈伤组织为材料,对黄独胚性愈伤组织冻后黑暗培养的时间进行探讨,并对冻后黑暗培养胚性愈伤组织的显微结构及其再生植株进行半薄切片观察。结果表明,包埋玻璃化法超低温保存后,黑暗培养1~5 d,黄独胚性愈伤组织的冻后成活率随着时间的延长而增加,超过5 d,成活率显著下降。半薄切片观察结果表明,冻后黄独胚性愈伤组织直接置于光周期下培养,会造成细胞排列疏松,局部出现较大的细胞空隙;而经黑暗培养后再置于光周期下培养,细胞排列较为紧密,细胞空隙较小。经半薄切片观察,黄独冻后黑暗培养胚性愈伤组织再生植株与常温继代再生植株相比较,根、茎、叶结构无显著差异,叶肉细胞的平均叶绿体数量也无显著差异。因此,冻后黑暗培养一定程度上保证了胚性愈伤组织细胞结构的完整性,且其再生植株无形态学变异。     

葡萄胚珠诱导成苗的研究

通过对葡萄几个品种胚珠愈伤组织的诱导、再分化,以胚状体发生途径实现植株再生。结果表明:以葡萄的胚珠为外植体,在附加不同浓度的2,4-D与6-BA的MS、B5和NN-1969培养基上培养,愈伤组织诱导以NN+2,4-D0.5mg/L+6-BA1.0mg/L培养基最佳,诱导率为84.1%,胚性愈伤组织诱导率为79.5%;将胚性愈伤组织置于含NAA0.03mg/L和6-BA0.5mg/L的NN培养基中,胚状体诱导率为6%～15%;胚状体在无激素MS培养基中的成苗率为0%～20%。     

金荞麦的离体快繁及同源四倍体的诱导

该试验结果表明：金荞麦的快繁技术最适宜的培养为MS附加2mg/LBA,0．2mg／LIBA;同时,结合组织培养技术进行的多倍体诱导试验结果表明：在组织培养条件下,将其带绿色芽点的愈伤组织和无菌苗浸泡在不同浓度的秋水仙素溶液中或接种于添加一定浓度秋水仙素的培养基上处理一定时间后再进行培养,均可诱导金荞多倍体的产生,但以浸泡愈伤组织的效果较好,最高的诱导率可达43．3％。通过试管苗茎尖染色体显微观察,鉴定出同源四倍体,为今后优良的选育打下基础。     

沙棘优良抗旱品种离体再生体系的建立和优化

本文在沙棘杂交育种工作和抗旱性综合评价研究的基础上,获得了优良抗旱品种雄性植株无性系,并较系统地研究了该无性系通过器官发生途径实现离体培养,建立和优化再生体系所需的条件。结果表明:春季采集生长旺盛的健康新梢,建立无菌培养体系效果最好,试管苗再生可以通过两条途径实现:1)采用培养基WPM+BA0.5mg/L+2,4-D0.5mg/L可以诱导无菌叶片和茎段切口处产生愈伤组织,采用培养基WPM+BA0.4～0.6+IBA0.02～0.03,可以诱导茎段来源的愈伤组织再分化形成大量绿色不定芽点;经继代培养后,不定芽最终可以生长成为具有一定高度和粗度的健壮新梢;在生根培养基1/2WPM+IBA0.5mg/L+NAA0.5mg/L上培养20d后,生根率可以达到100%。2)不定芽也可以直接从茎段或叶片的切口处发生,采用最佳的培养基(WPM+TDZ0.01～0.02mg/L+IBA0.01～0.02mg/L)和适宜的试材类型(从无根组培苗上剪取的茎段和从有根组培苗上剪取的叶盘),不定芽发生率可以达到100%,平均每个茎段上产生的不定芽数为4.45个,叶片上产生3.25个;不定芽再经过增殖、伸长、壮苗(培养基为WPM+BA0.2mg/L+IBA0.05mg/L)后,在生根培养基1/2WPM+IBA0.5mg/L+NAA0.5mg/L上培养20d后亦可100%生根。     

三七试管苗繁殖技术的研究

以三七4种外植体为材料,研究愈伤组织的诱导、植株的分化、壮苗及生根的情况,探讨获得高分化率的试管苗再生途径,结果表明以MS为基本培养基,选用幼嫩花序为外植体,愈伤组织诱导率及试管苗分化率高;在加入2,4—D的诱导培养基暗条件下可直接诱导出胚状体;愈伤组织在光下分化培养也可发生不定芽;通过胚状体发生途径分化成苗率高。成苗过程中,GA_2与MET分别起到促进胚状体成熟与生根作用。1989年初首次获得试管苗,现共获得植株2 214株,为建立三七试管苗工厂生产研究打下基础。     

菊花叶片离体高效再生体系的建立

本文报道了以菊花叶片为外植体，诱导植株再生，建立高效植株再生体系。获得诱导愈伤组织、芽和根的最佳培养基。在有6-BA、NAA的MS培养基上获得较高的愈伤组织诱导率，在有2，4-D的培养基上其愈伤组织诱导率很低。带有愈伤组织的外植体转移到有6-BA、NAA的MS培养基上催化芽的产生，并筛选出能直接诱导芽再生的培养基(MS 6-BA(3mg／L) NAA(1mg／L))。AgNO3可明显提高芽的再生率。茎段在1／2MS和有IBA或NAA的1／2MS培养基上诱导生根。生根的小苗在温室里生长良好。     

农杆菌介导的玉米自交系愈伤组织的转化

以农杆菌LBA4 4 0 4介导将外源基因导入玉米骨干自交系齐 319、掖 5 15、掖 5 0 2等胚性愈伤组织 ,并由筛选出的抗性愈伤组织再生出可育植株。农杆菌浓度、共培养时间和玉米的基因型显著影响农杆菌介导的玉米愈伤组织的转化率。农杆菌的浓度OD60 0 0 5～ 0 7,共培养时间 3～ 4天时转化率较高。在相同条件下不同基因型的玉米胚性愈伤组织的转化率为 3 3%～ 10 %。     

Gamma Irradiation of Embryogenic Callus Cultures and In Vitro Selection for Salt Tolerance in Sugarcane (Saccharum officinarum L.)

Radiation induced mutagenesis followed by in vitro selection was employed for salt tolerance in popular Indian sugarcane (Saccharum officinarum L.) cv.CoC-671.Embryogenic calli were gamma irradiated and exposed to different levels of NaCl (42.8,85.6,128.3,171.1,213.9,256.7,299.5,or 342.2 mM).The relative growth rate (RGR) decreased progressively with increasing salt stress and was the least with a salt stress of 256.7 mM (0.25±0.009),almost 10 fold lesser than the control.The RGR was significantly lower in 85.6 mM and higher salt stressed calli than the control.The survival percent also decreased,with an increase in NaC1 concentration.In case of 10 and 20 Gy irradiated calli,regeneration was observed up to 85.6 mM NaCl selection,medium,whereas,higher treatments (128.3 mM and beyond) exhibited browning initially.However,in the subsequent subcultures,regeneration was obtained in the case of 10 and 20 Gy irradiated calli on 128.3 and 171.1 mM NaCI selections.Higher dose of gamma irradiation (40 Gy) also showed regeneration,but only with 85.6 mM NaCI selection.The unirradiated calli regenerated the highest number of plantlets followed by 10 and 20 Gy irradiated calli on salt selection.A total of 147 plantlets were selected from different salt levels.The salt selected plants are being tested for their field performance.     

棉花体细胞培养中染色体的变异

以陆地棉体细胞培养获得的胚性愈伤、体细胞胚和再生植株的根尖为材料,用饱和对氯二苯预处理,固定、酸解、染色,进行染色体制片,观察分析棉花体细胞培养中染色体数目的变异。结果表明:继代培养14 d的胚性愈伤组织在饱和对二氯苯处理3.5 h后制成的染色体涂片具有很好的观察效果;染色体数目变异主要集中在偏向于52条染色体,随着体细胞胚的发生、成熟、植株再生,具有正常染色体数细胞的比例逐渐增加,推测具有非正常染色体的细胞在体细胞胚的发育及植株再生过程中丧失了植株的分化能力。