免疫小鼠脾脏中抗原提呈细胞的快速分离

应用胶原酶消化脾脏、 Ｂ Ｓ Ａ 梯度离心富集低浮密度细胞和 Ｆ Ａ Ｃ Ｓ分选细胞法,自小鼠脾脏中分离出高纯度树突细胞、吞噬细胞和 Ｂ淋巴细胞。分离的 ３ 种细胞样品中分别含 ９７％ 树突细胞、９６％ 吞噬细胞和 ９９％ Ｂ淋巴细胞。而纯化前,树突细胞和吞噬细胞在低浮密度细胞中仅分别占 ６５％ 和 ３５％ , Ｂ 淋巴细胞占脾细胞的 ４２％ 左右。该程序简便、快速、准确,在一个工作日内可制备大量细胞, 并适用于其他淋巴组织中抗原提呈细胞的纯化。     

鸡T细胞特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

以鸡胸腺细胞免疫ＢＬＡＢ／ｃ小鼠,进行细胞融合,获得了１５株杂交瘤克隆株,其中有５株（１Ｂ６、１Ｃ５、３Ｅ４、９Ｈ６、５Ｅ１０）杂交瘤克隆抗体（ＭｃＡｂｓ）只对鸡胸腺细胞和外周血Ｔ细胞发生特异性反应。ＷｃｓｔｅｒｎＢｌｏｔ分析表明,这组ＭｃＡｂｓ反应的膜抗原分子量为６０～６５ＫＤ,该抗原分布于６３３～７２４％的胸腺细胞、１７３％～２４５％的脾细胞,２３％～２７％的外周血淋巴细胞,而法氏襄细胞的反应性不超过１３％。以此ＭｃＡｂｓ作诊断试剂,对禽类Ｔ细胞分离、纯化及Ｔ细胞亚类鉴定提供了重要的研究手段。     

翘嘴鳜细菌性败血症的免疫预防研究

从患细菌性败血症的翘嘴鳜分离嗜水气单胞菌ＢＳ－１菌株，制成福尔马林灭活疫苗（Ｆ－ＡＨ）、酚灭活疫苗（Ｐ－ＡＨ）和提取菌体脂多糖（ＬＰＳ）作为免疫原。注射接种体重为３５．５±５．６ｇ的翘嘴鳜后，通过检测血清中的凝集抗体效价、血液和头肾中吞噬细胞的吞噬活性以及应用活菌攻毒等方法，比较了３种不同免疫原的免疫效果。结果表明，ＬＰＳ的免疫效果最好，Ｐ－ＡＨ次之，Ｆ－ＡＨ较差。用活菌攻毒后，３种受免鱼体的免疫保护力分别为９２．２％，８４．７％和８０．７％。     

甘蓝型油菜原生质体培养和植株再生

从甘蓝型油菜试管苗下胚轴和幼叶分离的原生质体，在含２．４－Ｄ０．８ｍｇ／１，ＮＡＡ０．５ｍｇ／１，６－ＢＡ０．５ｍｇ／１的改良ＢＧ培养基中浅层液体和固体平板培养６天，分裂细胞为８％－２０％，至１５天形成３２细胞的细胞团。愈伤组织在含ＮＡＡ０．２ｍｇ／１，ＩＢＡ０．１ｍｇ／１，６－ＢＡ１．０ｍｇ／１的ＭＳ分化培养基上培养基上培养３－４周，产生不定芽，并在附加ＩＢＡ０．５ｍｇ／１，６－ＢＡ０．２ｍ...     

新颖抗猪流行性腹泻免疫制剂

以新生乳猪增殖猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ），通过蔗糖密度梯度离心纯化，获得结构较为完整的病毒颗粒，病毒ＥＬＩＳＡ效价为１：３×１０＾５，蛋白含量为３．９６ｍｇ／ｍＬ。将提纯的ＰＥＤＶ免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠，取其脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞进行融合，融合率为９５．６％。用间接ＥＬＩＳＡ筛选并进行３次再克隆，阳性率达１００％，共获得１５株能稳定分泌特异性抗ＰＥＤＶ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞。其染     

曼海母宫殿组织培养

曼海母宫殿以当年生枝条上饱满未萌发的侧芽为外植体．进行组织培养、在附加６－ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上．芽诱导效果最好，在附加６－ＢＡ１．５＋ＮＡＡ０．０５＋ＺＴ０．１ｍｇ／Ｌ或ＫＴ１．０＋ＮＡＡ０．０５＋ＺＴ０．１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上．芽的分化效果最好。在附加ＫＴ０．３＋ＮＡＡ０．０５＋ＺＴ０．１ｍｇ／Ｌ或６－ＢＡ０．３＋ＮＡＡ０．０５＋ＺＴ０．１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上，壮苗效果最好。在附加ＩＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ或ＩＢＡ０．１＋ＮＡＡ０．０２ｍｇ／Ｌ的１／２ＭＳ培养基上生根效果最好。试管苗高２．５～４．０ｃｍ，且具有３～５条短根时，开瓶锻炼３～５ｄ。移栽入土效果好、种植在保温保湿环境中．试管苗成活率高。     

多巴胺抑制剂在草鱼人工繁殖中的使用效果

在草鱼的人工繁殖中，使用了三种不同的催产剂ＬＲＨ－Ａ３、ＬＲＨ－Ａ３＋ＲＥＳ、ＬＲＨ－Ａ２＋ＲＥＳ，结果表明：使用ＬＲＨ－Ａ３＋ＲＥＳ和ＬＲＨ－Ａ２＋ＲＥＳ组的催产率分别高出单独使用ＬＲＨ－Ａ３组的３７．５％和３８．９％，受精率分别比单独使用ＬＲＨ－Ａ３组高出２０．１％和３０．１％。     

尿激酶原基因cDNA在BHK21细胞中的表达

将人尿激酶原基因ｃＤＮＡ分别插入到真核表达载体ｐｃＤＮＡ３的ＣＭＶ启动子和ｐＳＶ２ｎｅｏ的ＳＶ４０启动子下游,构建了重组表达质粒ｐｃＤＮＡ３－ＵＫ和ｐＳＶ－２－ＵＫ分别将这两种表达质粒以脂质体载体法转染ＢＨＫ２１细胞。ＥＬＩＳＡ检测结果表明,ｐｃＤＮＡ３－ＵＫ和ｐＳＶ２－ＵＫ在哺乳动物细胞中能够表达,７２ｈ表达量分别为２８．７ｎｇ／ｍｌ和１３．５ｎｇ／ｍｌ。     

鹌鹑主要免疫器官的组织学和细胞化学的研究

鹌鹑腔上囊的中间层与鸡比较不明显,淋巴滤泡皮质ＲＮＡ阳性率６２．５％,比髓质高,表明淋巴滤泡的皮质区是Ｂ淋巴细胞的活化区。胸腺的被膜下及小隔周围,有生长期较大的胸腺细胞,具有细胞免疫潜能,是Ｔ淋巴细胞的先躯。脾脏内的淋巴小结及淋巴细胞组织鞘是Ｂ及Ｔ淋巴细胞的活化部位,此处ＲＮＡ的阳性率较高,为６１．３％。     

用直接荧光抗体法对鲤血液中淋巴细胞类型的初步鉴定

用荧光素标记的兔抗鲤ＩｇＭ和胸腺淋巴细胞表面抗原（ＣＡＴＬＣ）抗体,对从鲤血液中分离的淋巴细菌类型进行了鉴定。结果表明,正常鲤血液淋巴细胞中Ｂ淋巴细胞样细胞约占（２５．３±７．２４）％,Ｔ淋巴细胞样细胞约占（３１．６±９．４８）％。     

尿激酶原基因cDNA在BHK21细胞中的表达

将人尿激酶原（Ｐｒｏ－ＵＫ）基因ｃＤＮＡ分别插入到真核表达载体ｐｃＤＮＡ３的ＣＭＶ启动子和ｐＳＶ２－ｎｅｏ的ＳＶ４０启动子下游,构建了重组表达质粒ｐｃＤＮＡ３－ＵＫ和ｐＳＶ２－ＵＫ,分别将这两种表达质粒以脂质体载体法转染ＢＨＫ２１细胞。ＥＬＩＳＡ检测结果表明,ｐｃＤＮＡ３－ＵＫ和ｐＳＶ２－ＵＫ在哺乳动物细胞中能够表达,７２ｈ表达量分别为２８．７ｎｇ／ｍｌ和１３．５ｎｇ／ｍｌ。     

TDZ对枣子离体培养繁殖的影响

厍有ＴＤＺ０．０１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ＋６ＢＡ１ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ的培养基中，对离体芽的繁殖系数、高于对照高于ＭＳ＋６ＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ）．２ｍｇ／Ｌ的培养基２倍和３倍，枯梢率下降至零，在生根培养基１／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ上，生根可达８０％以上。     

佛手瓜下胚轴离体培养及再生植株

对佛手瓜下胚轴再生植株、试管苗移栽及大田定植进行了试验，结果表明：在ＭＳ＋ＩＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＬＨ２００ｍｇ／Ｌ培养基上容易形成下胚轴愈伤组织；愈伤组织分化芽的培养基为ＭＳ＋ＩＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ，诱导分化率可达５７５％；顶芽和带腋芽茎段生根的培养基分别为ＭＳ＋ＩＡＡ１．０ｍｇ／Ｌ和１／２ＭＳ＋ＩＡＡ０．３ｍｇ／Ｌ，生根率分别为８１．８％和８３．３％；移栽培     

鹌鹑主要免疫器官的组织学和细胞化学的研究

鹌鹑腔上囊的中间层与鸡比较不明显,淋巴滤泡皮质ＲＮＡ阳性率６２．５％,比髓质高,表明淋巴滤泡的皮质区是Ｂ淋巴细胞的活化区。胸腺的被膜下及小隔周围,有生长期较大的胸腺细胞,具有细胞免疫潜能,是Ｔ淋巴细胞的先躯。脾脏内的淋巴小结及淋巴组织鞘是Ｂ及Ｔ淋巴细胞的活化部位,此处ＲＮＡ的阳性率较高,为６１．３％。     

“无饲养细胞”杂交瘤制备技术

在３７℃温度下，用４５％ＰＥＧ（ｐＨ７．４）对ＮＳ０瘤细胞和免疫Ｂａｌｂ／ｃ鼠脾脏细胞做１ｍｉｎ融合。细胞融合后，加入１６４０／ＨＡＴ培养基，在不加饲养细胞和预加饲养细胞的两种环境中培养。结果发现融合细胞培养中不加小鼠腹腔巨噬细胞，杂交瘤克隆孔形成的量较预加小鼠腹腔巨噬细胞的多。     

黄曲霉毒素B1间接竞争抑制ELISA定量分析法的建立和应用

以合成的黄曲霉毒Ｂ１（ＡＦＢ１）－Ｃ３－羧甲基肟－牛血清白蛋为免疫原,制备了高亲和力的多抗血清,建立了简便、灵敏的ＡＦＢ１间接竞争抑制ＥＬＩＳＡ定量分析法。ＡＦ类似物Ｂ１,Ｂ２,Ｇ１,和Ｇ２与ＡＦＢ１抗体的相对交叉反应率分别为１００％,３．４％,９．１％和小于１．３％。本法测定ＡＦＢ１的线性检测范围为１２．５～２５０ｐｇ,批内和批间平均变异系数分别为５．３％和７．９％,大米和混合饲料中测定ＡＦＢ１     

花椰菜高频再生系统的研究

本文研究了ＢＡ、ＮＡＡ、ＡｇＮＯ３、子叶龄、培养密度以及Ｋｍ对花椰菜子叶再生和影响，建立了一个高频再生系统，使再生频率达１００％，其最佳各成分的配比是：ＭＳ＋ＢＡ４．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＡｇＮＯ３５．０￣１０．０ｍｇ／Ｌ。     

山桃原生质体培养再生愈伤组织

以山桃县浮培养物为分离材料,在ＣＰＷ＋１．０％ＥＬＬＵＬＡＳｏＮＺＵＫＡｒ－１０＋０．５％ＭａｃｅｒｏｚｙｍｅＲ－１０＋０．７ｍｏｌ／Ｌ甘露醇＋１％ＰＶＰ的酶解液中酶解１２ｈ生质体产量和活力分别达到３．５＊１０＾７个／ｇ．ＦＷ和９６％。     

肥城桃幼子叶不定植株再生

以我国重要的名特优肥城桃为试材,基本培养基为ＭＳ,细胞分裂素有ＢＡ和ＴＤＺ,生长素有ＩＢＡ和２,４－Ｄ。ＬＨ和蔗糖都分别选用２种浓度,共设计７个处理。结果表明以ＢＡ５ｍｇ／Ｌ,ＩＢＡ０．３ｍｇ／Ｌ,ＬＨ５００ｍｇ／Ｌ,蔗糖３％的培养基诱导子叶不定梢再生率最高,达７８％,其他６种不同处理,子叶不定梢再生率都很低。     

东北马鹿脾脏T,B淋巴细胞及其DNA和RNA分布规律的研究

用核酸的组织化学方法，对东北马鹿脾脏Ｔ，Ｂ淋巴细胞及其ＤＮＡ和ＲＮＡ的分布进行研究。结果表明：东北马鹿脾脏Ｂ－淋巴细胞主要分布在脾索中；Ｔ－淋巴细胞分布在脾小结外周，动脉周围淋巴鞘，边缘区和椭球内。ＤＮＡ存在于Ｔ，Ｂ淋巴细胞核内，ＲＮＡ存在于胞浆中。东北马鹿脾脏白髓不发达，脾小结未见生发中心。红髓发达，脾窦宽大。椭球数量较少，但体积较大。脾小梁丰富。