维吾尔药材刺山柑组织快繁无菌系建立的初步研究

[目的]建立的刺山柑组织快繁无菌系.[方法]根据不同部位、不同采集时间等,确定刺山柑外植体的采集时间、部位、灭菌剂和灭菌时间.[结果]建立刺山柑的无菌体系时,选择晴天去采集外植体为好;带芽的茎段污染率高,腋芽的污染率低,选用腋芽作为外植体;操作台外的最佳消毒方法是饱和的洗洁精清洗后用自来水冲洗20 min;操作台内消毒对比10;次氯酸钠、2;双氧水、2;溴水、0.1;升汞,0.1;升汞灭菌效果好,而最佳操作台内最佳灭菌体系为75;酒精消毒10 s,以灭菌去离子水冲洗2次,后于0.1;升汞中浸泡9 min,以灭菌去离子水冲洗5次.[结论]对外植体的采集时间晴天相对雨天污染率低,腋芽出芽率高,酒精和升汞双灭菌效果最佳.     

不同消毒剂及激素对江西省野生白花凤仙花组培诱导的影响

[目的]研究不同消毒剂和激素对江西野生白花凤仙花外植体诱导效果的影响。[方法]把江西省铜鼓县大沩山野生白花凤仙花移植温室内,待其长出新枝后,剪去带有腋芽的嫩梢为材料,研究0.1%升汞、2%次氯酸钠、10%次氯酸钙和饱和漂白粉溶液等不同消毒剂在不同处理时间对外植体的消毒效果,以及不同浓度的6-BA和NAA组合对外植体诱导率的影响。[结果]以酒精消毒30 s后再用0.1%升汞消毒,白花凤仙花外植体诱导的培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA,诱导率高达94%。[结论]消毒剂和激素对江西野生白花凤仙花外植体的诱导均有一定程度的影响。     

省沽油组培过程中外植体灭菌技术的研究

[目的]寻求省沽油组织培养中适宜的外植体灭菌方法。[方法]研究了70%乙醇、0.1%HgCl2、0.1%HgCl2+70%乙醇组合在不同灭菌时间内对外植体生长的影响。[结果]适宜的外植体灭菌技术:茎尖用1%HgCl2+70%乙醇处理时间分别为5 min+50 s,成活率100%;茎段用1%HgCl2处理时间为15 m,成活率95%;幼叶用1%HgCl2处理时间为12 min,成活率85%。[结论]1%HgCl2+70%乙醇、1%HgCl2是省沽油外植体的有效灭菌剂。     

梭梭种子组织培养表面灭菌方法研究

[目的]对梭梭组织培养的灭菌方法及外植体进行筛选,以期为其组织培养提供指导方法。[方法]以梭梭种子为试验材料,研究不同灭菌剂处理的灭菌效果和不同粒径种子对无菌苗成活率的影响。[结果]梭梭种子最佳灭菌方法为75%酒精5 min+0.1%升汞8min;以直径￠2.0 mm的种子外植体,组培能获得较高的无菌苗成活率,可达65%以上。[结论]该研究结果建立了适合梭梭种子组织培养的表面灭菌方法。     

辣木外植体消毒试验研究

[目的]探讨辣木茎段的最佳消毒方法。[方法]以辣木茎段为外植体,用不同消毒剂(升汞、次氯酸钠),选用不同浓度,在不同消毒时间下对辣木茎段进行消毒处理。[结果]次氯酸钠最佳消毒组合为浓度15 g/L消毒20 min,污染率为26%,成活率为34%。升汞最佳消毒组合为0.20 g/L消毒液消毒5 min,污染率为2%,成活率达84%。[结论]辣木茎段最佳消毒方法为:在75%酒精中浸泡30s后,用0.20 g/L升汞处理5 min,污染率为2%,成活率达84%。     

不同消毒处理对竹芋组培无菌外植体获得的影响

以过渡栽培植株的侧芽或顶芽为外植体,研究了不同消毒处理对竹芋组培无菌外植体获得的影响。结果表明:采用抗菌素浸泡5h、熏蒸12min并配合常规消毒处理(75%酒精浸泡1min;3.0%～5.0%的次氯酸钠和0.1%升汞1∶1混合溶液浸泡10～12min)对外植体进行综合灭菌,能较快地杀灭竹芋外植体表面细菌,使初次接种污染率控制在20%以下。     

不同消毒方式对华中枸骨组织培养的影响

[目的]考察不同消毒方式对华中枸骨组织培养的影响.[方法]以华中枸骨的带芽新梢茎段为外植体,分顶芽和侧芽,研究乙醇、升汞的作用时间以及吐温的用量对外植体消毒的影响.[结果]华中枸骨新梢顶芽的最佳消毒方式为：浓度75％乙醇作用50 s,浓度0.1％升汞作用6 min,Tween-801滴;侧芽的最佳消毒方式为：浓度75％乙醇作用50 s,浓度0.1％升汞作用7min.[结论]该方法优化了华中枸骨组织培养的消毒方法,为华中枸骨的进一步开发利用提供依据.     

龙选蕉组培快繁技术

[目的]探讨不同灭菌剂对外植体的灭菌效果及不同激素浓度和组合对不定芽诱导和增殖的影响,建立龙选蕉的高频再生体系.[方法]以龙选蕉吸芽为外植体,以升汞和0.2%次氯酸钠对外植体灭菌;采用0~6.0 mg/L 6-BA、0.1~0.2 mg/L NAA激素组合对不定芽进行诱导或增殖培养.[结果]相对于升汞,次氯酸钠对龙选蕉外植体灭菌的效果更理想,灭菌率达到90.47%,且外植体生长良好,无中毒现象.在不定芽诱导培养基中,随着6-BA浓度的升高,不定芽萌发率呈先增加后降低趋势,其中以添加6-BA3.0mg/L的诱导效果最理想,萌发率为66.67%;随着6-BA和NAA浓度的提高,不定芽的增殖系数也随之增加,其中以4.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA为最佳组合,不定芽增殖效果最理想,增殖系数为4.05,芽苗粗壮,叶片颜色正常.[结论]次氯酸钠对龙选蕉吸芽的消毒效果优于升汞,操作简便,易于获得无菌外植体并利于不定芽生长;不定芽诱导最佳培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA;不定芽增殖最佳培养基为MS+ 4.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA.     

国兰组培中外植体高效消毒方法研究（英文）

以湖南本地种的蕙兰种子和春兰新芽为外植体,以75%乙醇、0.1%升汞、10%次氯酸钠为消毒剂设计了6个消毒方案进行外植体消毒试验。结果表明:蕙兰种子组织培养时采用75%酒精45 s+0.1%升汞消毒8min的效果较佳,75%酒精45 s+0.1%升汞消毒5 min对春兰新芽组培灭菌效果较好;同时,升汞的消毒效果总体优于次氯酸钠,但需要掌握消毒时间,以免过度处理给外植体造成伤害导致其死亡。     

国兰组培中外植体高效消毒方法研究

以湖南本地种的蕙兰种子和春兰新芽为外植体,以75%乙醇、0.1%升汞、10%次氯酸钠为消毒剂设计了6个消毒方案进行外植体消毒试验。结果表明:蕙兰种子组织培养时采用75%酒精45 s+0.1%升汞消毒8 min的效果较佳,75%酒精45 s+0.1%升汞消毒5 min对春兰新芽组培灭菌效果较好;同时,升汞的消毒效果总体优于次氯酸钠,但需要掌握消毒时间,以免过度处理给外植体造成伤害导致其死亡。     

牡丹组织培养若干影响因子研究

以‘太平红’牡丹为材料,研究了不同灭菌方式、抗褐化物质、激素配比、培养基、生根培养条件对牡丹组织培养的影响。结果表明:以0.1%升汞液消毒8 min,再用7%次氯酸钠溶液消毒8 min灭菌效果最佳,鳞芽、土芽和种子的污染率分别为0、4.5%和22.0%;在改良MS培养基中联合添加PVPP 0.5 g/L和AC 0.5 g/L可有效减少牡丹外植体的褐化;改良MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+GA 0.3 mg/L+CH 0.5 g/L+PVPP0.5 g/L+AC 0.5 g/L适宜牡丹鳞芽的诱导;MS+BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+PVPP 1.0g/L适宜于牡丹芽的增殖;1/2MS+IBA 5 mg/L+AC 0.5 g/L适用于牡丹试管苗生根。     

不同粗度灵武长枣休眠枝水培发芽情况及其无菌外植体的建立研究

[目的]研究不同粗度对灵武长枣(Ziziphus jujuba Mill.)休眠枝水培发芽的影响,并对水培芽无菌外植体的建立进行研究。[方法]试验以灵武长枣1年生休眠枝为材料,采用水培催芽的方法在冬季获得外植体。[结果]灵武长枣1年生休眠枝茎段基部粗度大于3.5 cm时水培效果较好,抽生枣头较多,生长健壮;以这样的枣头作外植体成活率高达90%以上。外植体消毒灭菌以75%乙醇消毒20 s+0.1%氯化汞消毒15 min+2滴吐温效果良好,污染率为10.0%。[结论]该研究获得了灵武长枣休眠枝水培催芽和水培芽消毒处理的最佳方案,可为延长初代培养的取材时限,提高水培芽的消毒处理效果提供科学依据,并为其下一步的试管繁殖、生根等研究提供技术参考。     

南方红豆衫细胞体系建立的优化

[目的]优化南方红豆杉愈伤组织诱导及训化条件。[方法]以南方红豆杉幼芽、幼茎以及幼叶为外植体,比较不同外植体诱导愈伤组织的效率,并对愈伤组织的增殖条件及悬浮细胞培养条件进行了研究。[结果]以幼芽作为外植体的诱导效果最佳;南方红豆杉外植体消毒的最佳方法为链霉素浸泡2 h＋洗洁精浸泡3 h＋75%酒精消毒30 s＋10%次氯酸钠浸泡25 min＋1‰氯化汞10 min;愈伤继代的最佳配方为B5＋4.0 mg/LNAA＋0.5 mg/L2.4-D＋0.2 mg/LGA＋0.5 mg/L6-BA＋2 g/L活性碳。[结论]该研究建立了南方红豆杉的高效再生体系。     

南方红豆衫细胞体系建立的优化（摘要）

[目的]优化南方红豆杉愈伤组织诱导及训化条件。[方法]以南方红豆杉幼芽、幼茎以及幼叶为外植体,比较不同外植体诱导愈伤组织的效率,并对愈伤组织的增殖条件及悬浮细胞培养条件进行了研究。[结果]以幼芽作为外植体的诱导效果最佳;南方红豆杉外植体消毒的最佳方法为链霉素浸泡2h＋洗洁精浸泡3h＋75%酒精消毒30s＋10%次氯酸钠浸泡25min＋1‰氯化汞10min;愈伤继代的最佳配方为B5＋4.0mg/LNAA＋0.5mg/L2.4-D＋0.2mg/LGA＋0.5mg/L6-BA＋2g/L活性碳。[结论]该研究建立了南方红豆杉的高效再生体系。     

蛇足石杉茎尖灭菌方法与组织培养的研究

[目的]研究蛇足石杉组织培养的灭菌方法和培养条件。[方法]以野生孢子体茎尖为外植体,先用不同灭菌液单独或配合使用对外植体进行表面灭菌,将表面无菌外植体转到添加多种抗生素和孔雀石绿的培养基上杀灭内生菌,然后将外植体分别接种到不同的培养基上,筛选茎尖培养的最佳灭菌方法和培养条件。[结果]最佳表面灭菌方法为70%乙醇灭菌40 s,0.1%升汞溶液灭菌8 min,70%双氧水溶液灭菌10 min,培养2周,表面无菌率为63%。适宜的杀灭内生菌方法为表面无菌的外植体在附加0.5 mg/L孔雀石绿和100 mg/L抗生素AAS的培养基上培养4~6周,无菌率达52%。适宜的培养基为1/4MS矿质元素+1/2MS有机元素+2%蔗糖+4.5 g/L琼脂,pH5.8。在此培养基上茎尖外植体可生长出新枝,并可再生根。[结论]建立了蛇足石杉茎尖组织培养的灭菌方法且筛选出适合其生长的适宜培养基,为蛇足石杉组织培养的深入研究提供实验基础。     

雪莲果叶片愈伤组织的诱导

[目的]研究雪莲果叶片愈伤组织诱导的最佳灭菌方法和最佳培养基。[方法]以雪莲果叶片为外植体,用浓度0.1%升汞浸泡不同时间,筛选最佳灭菌方法;以MS为基本培养基,比较不同浓度生长调节物质对愈伤组织诱导的影响。[结果]用浓度0.1%升汞溶液灭菌8 min,外植体污染率为54.55%,死亡率为3.64%;最佳诱导培养基为MS+6-BA 1.0~1.5 mg/L+NAA 0.5~1.0 mg/L。[结论]最佳灭菌方法为浓度0.1%升汞对叶片灭菌8 min;诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA 1.0~1.5 mg/L+NAA 0.5~1.0 mg/L。     

降低软枣猕猴桃初代培养污染率的研究

[目的]筛选降低软枣猕猴桃外植体初代培养污染率和提升外植体诱导率的处理方法。[方法]采用半木质化的软枣猕猴桃新梢作为外植体,根据外植体灭菌时间和氨苄青霉素培养基浓度差异组合,分析降低软枣猕猴桃外植体初代培养污染率和提升外植体诱导率的因素,筛选出最适宜的处理方法。[结果]增加外植体75%乙醇灭菌时间至10 s可降低软枣猕猴桃初代培养污染率,培养基中氨苄青霉素浓度为100~150 mg/L时,软枣猕猴桃初代培养污染率随培养基中氨苄青霉素浓度的增加而降低。增加外植体灭菌时间和培养基中氨苄青霉素浓度均能增加软枣猕猴桃外植体诱导率。[结论]污染率低且诱导率高的处理方法为1/2MS+100 mg/L氨苄青霉素、1/2MS+150 mg/L氨苄青霉素、外植体75%乙醇灭菌10 s+0.1%升汞灭菌8 min和外植体75%乙醇灭菌10 s+0.1%升汞灭菌10 min。     

木薯外植体表面灭菌与增殖培养的研究

[目的]筛选出适合木薯组织培养的灭菌体系,为加快木薯组织快繁提供科学依据。[方法]以木薯品种GR891的腋芽为外植体,研究经甲基托布津杀菌剂处理和无处理外植体分别采用不同组合、不同处理时间对其表面灭菌的效果,同时研究6-BA和6-BA与NAA组合对丛芽诱导培养效果的影响。[结果]经甲基托布津杀菌剂处理后用体积分数75%乙醇消毒10 s＋质量分数0.1%升汞处理8 min效果最好,外植体存活率为61.3%;以MS＋6-BA 1.5 mg/L＋糖30 g/L＋琼脂6.5 g/L培养基诱导培养芽效果最好,有的丛芽能达到7～9株,丛芽生长速度快,健壮。[结论]建立了木薯GR891组织培养外植体灭菌与增殖培养体系。     

湖州雪藕的茎尖离体培养技术研究

[目的]为莲藕种藕的快速繁殖提供参考。[方法]以湖州主栽莲藕品种"迟来早"的地下茎尖为外植体,考察不同消毒时间和消毒方式(0.1%HgCl2、1.0%NaClO+0.1%HgCl2)对外植体的消毒效果,并研究取材时间和培养基中6-BA、NAA浓度对外植体分化的影响。[结果]HgCl2和NaClO联合对外植体消毒效果最好;最佳诱芽培养基为MS+1.0 mg/L6-BA+0.2 mg/L NAA;莲藕地下茎处于冬季休眠期时取材最佳,外植体分化率最高;将再生芽接种到培养基MS+1.0 mg/L6-BA上进行增殖,然后挑选生长良好的芽苗接种到生根培养基MS+0.1 mg/L6-BA+1.0 mg/LIBA+0.2%AC上可正常生根。[结论]该研究确定了莲藕品种"迟来早"地下茎尖的最佳离体培养条件。