浙江金线莲组织培养体系的建立

通过对类原球茎诱导、增殖、分化和生根条件的探索,建立了浙江金线莲(ZJJ)的快速繁殖体系。结果表明:在液体培养基中,类原球茎诱导的最佳条件为TDZ 0.6 mg·L^-1+NAA 0.4 mg·L^-1,诱导率为62.5%;在固体培养基中,类原球茎诱导的最佳条件为TDZ 0.6 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+6-BA 2.0 mg·L^-1,诱导率为59.3%;类原球茎增殖的最佳条件为稀效唑1.5 mg·L^-1+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1,增殖系数为8.4,其中稀效唑是类原球茎增殖的主要因子;类原球茎分化的最佳条件为6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1,分化率为87.3%;植株生根诱导的最佳培养条件为1/2 MS+NAA 1.0 mg·L^-1+IBA 1.0 mg·L^-1,生根率达100%。     

费菜组织培养体系的探讨

研究不同浓度6-BA和NAA对费菜嫩叶愈伤组织诱导分化的影响。结果表明,费菜叶片愈伤组织诱导最适宜培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1,丛生芽诱导最适宜培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.6 mg·L^-1,壮苗培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1,生根培养基为1/2MS+NAA 0.1 mg·L^-1,幼苗移栽到经灭菌处理的等体积混合的草炭土、蛭石、珍珠岩基质中,成活率为90%。     

梵净山石斛无菌播种及快繁技术

以梵净山石斛成熟的蒴果为外植体,研究不同培养基、激素浓度处理对梵净山石斛种子萌发、原球茎增殖、不定芽分化与生根的影响。结果表明,梵净山石斛无菌播种最佳的培养基为KN+6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+10%CM+AC 1.0 g·L^-1,萌发率达到95.5%;原球茎增殖最优培养基为B5+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+AC 0.5 g·L^-1;筛选出不定芽分化最适培养基为1/2MS+6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+10%土豆泥+AC 2.0 g·L^-1,不定芽增殖最适培养基为1/2MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+10%土豆泥+AC 2.0 g·L^-1;小苗生根适宜的培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg·L^-1+10%土豆泥+AC 2.0 g·L^-1。     

不同植物组合对水体氮磷的去除效果

于2017年4月选用三峡库区常见的浮萍、金鱼藻、睡莲、茭白、黄花鸢尾5种水生植物,设置3种氮磷浓度水池,开展不同类型水生植物组合去除氮磷效果的试验。结果表明:在3种供试浓度下,浮萍+茭白组合去除氮磷的效果均高于其他组合。高浓度下总氮(TN)、总磷(TP)去除量为浮萍+茭白(1.781、0.538 mg·L^-1)>睡莲+黄花鸢尾(1.073、0.524 mg·L^-1)>金鱼藻+黄花鸢尾(0.696、0.382 mg·L^-1),中浓度下TN、TP去除量为浮萍+茭白(3.628、0.879 mg·L^-1)>金鱼藻+黄花鸢尾(1.086、0.454 mg·L^-1)>睡莲+黄花鸢尾(1.011、0.400 mg·L^-1),低浓度下TN、TP去除量为浮萍+茭白(1.914、0.585 mg·L^-1)>金鱼藻+黄花鸢尾(0.966、0.437 mg·L^-1)>睡莲+黄花鸢尾(0.967、0.386 mg·L^-1)。     

兰州百合组培快繁体系的构建

以兰州百合新鲜鳞茎为外植体,选择MS和1/2 MS培养基为基本培养基,采用正交设计研究不同消毒剂组合对外植体存活率、不同植物生长调节剂组合对愈伤组织诱导率和发芽率的影响;并用响应面法优化不同激素组合对生根率的影响。结果表明:(1)最佳消毒剂组合为75%乙醇消毒20 s+2%次氯酸钠溶液浸泡10 min,外植体成活率可达96.30%。(2)愈伤组织诱导最佳培养基配方为MS+0.3 mg·L^-1 NAA+3 mg·L^-1 6-BA,诱导率可达96.33%。(3)促进发芽的最佳培养基配方为MS+0.3 mg·L^-1 NAA+3 mg·L^-1 6-BA,发芽率可达98.00%。(4)促进生根的最佳培养基配方为1/2 MS+0.5 mg·L^-1 NAA+3 mg·L^-1 6-BA+2 mg·L^-1活性炭,生根率可达94.00%。本研究建立的组培快繁体系可用于兰州百合的快速大量繁殖,可为兰州百合组培苗的工厂化生产提供参考。     

粳恢35成熟胚的再生体系

以粳恢35成熟胚为外植体,研究粳恢35成熟胚在不同培养基中的诱导和分化,建立最佳的粳恢35再生体系培养方法。结果表明,不同培养基的诱导率和分化率不同;愈伤组织在NMBD2培养基增殖效果较好;分化培养基是加入6-BA 2 mg·L^-1、NAA 1 mg·L^-1、脯氨酸 500 mg·L^-1、谷氨酰胺500 mg·L^-1和 水解酪蛋白 300 mg·L^-1 的NMB培养基,分化效果最佳。并且无菌干燥处理 1 d 更利于愈伤组织的分化。     

微型月季快繁技术体系

以微型月季为材料,研究其组织培养体系。结果表明:以微型月季幼嫩茎尖为外植体,75%乙醇灭菌30 s,用无菌水清洗,再用0.1% HgCl₂+体积分数0.5%吐温20灭菌6 min,具有较好的灭菌效果。MS培养基+6-BA 1 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂7.8 g·L^-1条件下,微型月季茎尖出芽诱导率可达到83.3%,培养22 d左右,诱导出的小苗生长健康、发育迅速。增殖培养最佳培养基为MS+6-BA 1 mg·L^-1+NAA 0.06 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂7.8 g·L^-1。生根培养基宜选用1/2 MS+IBA 0.3 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂7.8 g·L^-1。生根1个月后炼苗移栽,种植于穴盘中。待主根粗壮、植株生长健壮后转移至营养钵,基质采用草炭∶珍珠岩体积比3∶1。     

外源激素对紫薇种子萌发的影响

以红火箭、红火球和百日红3个紫薇栽培品种的种子为试验材料,研究了NAA、IBA和GA₃外源激素对紫薇种子发芽率、发芽势、萌发时间等指标的影响。结果表明,3种外源激素均可正向调控红火箭的发芽率,红火球和百日红的发芽率主要受IBA正向调控,10 mg·L^-1 IBA显著提高3个紫薇品种的种子发芽率和发芽势,20~100 mg·L^-1 GA₃均能显著提高3个紫薇品种种子发芽势;1 mg·L^-1 NAA、10 mg·L^-1 IBA、20~50 mg·L^-1 GA₃浸泡红火箭种子后,发芽率和发芽势显著高于对照及其他处理。10 mg·L^-1 IBA浸泡红火球种子后,发芽率和发芽势显著高于对照及1、5、20 mg·L^-1 IBA处理。5和10 mg·L^-1 IBA浸泡百日红种子后,发芽率和发芽势显著高于对照及其他处理。其中,1 mg·L^-1 NAA、10 mg·L^-1 IBA、5 mg·L^-1 IBA分别浸泡红火箭、红火球、百日红后,发芽率最高为88.0%、85.3%、87.3%;此外,各处理与对照组起始萌发时间相差不大,1 mg·L^-1 NAA、10 mg·L^-1 IBA、5~10 mg·L^-1 IBA分别使红火箭、红火球、百日红的萌发时间缩短5、3、4 d。试验结果对紫薇栽培品种的苗木快繁提供理论依据和实际生产的支撑。     

甜樱桃砧木吉塞拉6号组织培养体系优化

以吉塞拉6号为试验材料,进行组织培养体系优化。结果表明:以75%乙醇灭菌30 s,0.1% HgCl₂灭菌10 min效果较优,MS+0.2 mg·L^-1 IBA+0.5 mg·L^-1 6-BA+30 g·L^-1蔗糖为初代培养基,MS+0.1 mg·L^-1 NAA+0.5 mg·L^-1 6-BA+30 g·L^-1蔗糖为最佳增殖培养基,1/2 MS+0.3 mg·L^-1 IBA+0.3 mg·L^-1 NAA+30 g·L^-1蔗糖为最佳生根培养基。其中,活性炭含量是影响生根的关键因素。以椰糠和草炭为介质,能增强根系韧性,提高移栽成活率。     

毒死蜱和百菌清对斑马鱼早期发育阶段的联合毒性效应

为评价毒死蜱和百菌清的单剂毒性和联合毒性,以斑马鱼为受试生物,采用静态法和实时荧光定量PCR方法,研究毒死蜱和百菌清单剂,以及二元组合时对斑马鱼胚胎的急性毒性和对斑马鱼幼鱼性腺轴相关基因的影响。结果显示,毒死蜱和百菌清对斑马鱼胚胎分别表现为中等和高等毒性,96 h-LC₅₀(半致死浓度)分别为2.139 mg·L^-1和0.353 mg·L^-1。毒死蜱和百菌清联合作用类型为协同作用,联合暴露时,对斑马鱼胚胎的96 h-LC₅₀分别为0.38 mg·L^-1和 0.063 mg·L^-1。中浓度(26.7 μg·L^-1)和高浓度(106.7 μg·L^-1)的毒死蜱可以诱导斑马鱼幼鱼体内芳香化酶基因(CYP19α)、卵黄蛋白原基因(VTG1、VTG2)和雌激素受体基因(ERα、ERβ1、ERβ2)不同程度的上调表达;低浓度(1.1 μg·L^-1)百菌清诱导斑马鱼体内VTG1、VTG2、ERβ1和ERβ2基因的上调表达;低浓度(6.7 μg·L^-1毒死蜱+1.1 μg·L^-1百菌清)二元组合会引起斑马鱼体内VTG1、ERβ1、ERβ2和ERα基因下调。说明毒死蜱和百菌清对斑马鱼幼鱼具有雌激素内分泌干扰效应,但毒死蜱和百菌清二元组合对斑马鱼幼鱼的雌激素内分泌干扰效应降低。在评估农药对水生生物的危害时,应充分考虑复合污染时的联合效应。     

掌叶覆盆子组培快繁体系中生长调节剂与矿质元素的优化

掌叶覆盆子(Rubus chingii Hu)药食同源,营养保健价值凸显,经济效益显著。为加快掌叶覆盆子良种繁育,以药用成分含量较高的优质株系L14茎段为外植体,采用调整植物生长调节剂的组合、质量浓度,以及矿质元素含量的方式,优化组培快繁体系。结果表明,添加0.1 mg·L^-1萘乙酸(NAA)时,5.0~30.0 mg·L^-1 6-糠氨基腺嘌呤/激动素(KT)促进掌叶覆盆子组培苗增殖的效果与0.5~3.0 mg·L^-1 6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)相当,可见,6-BA的作用强度约为KT的10倍。0.5~3.0 mgL^-1的6-BA会引起试管苗的玻璃化,0.1~1.0 mg·L^-1 KT的添加有助于减轻玻璃化,其中,0.5 mg·L^-1 6-BA+1.0 mg·L^-1 KT的细胞分裂素组合下掌叶覆盆子组培苗增殖系数最大,达10.33,且苗生长健壮。调整培养基中具体矿质元素的含量,可进一步促进试管苗的生长。因此,优化后的掌叶覆盆子增殖培养基配方为:改良的MS培养基(2倍浓度的Ca、Cu和Mn,1/4 Mg和1/2 Zn)+ 6-BA 0.5 mg·L^-1 + KT 1.0 mg·L^-1 + NAA 0.1 mg·L^-1,试管苗增殖良好,生长健壮,能有效抑制玻璃化的产生。     

表油菜素内酯对夏黑葡萄幼苗生长的影响

为研究叶面喷施表油菜素内酯(EBR)对葡萄幼苗生长的影响,采用盆栽试验,以夏黑葡萄幼苗为材料,叶面喷施不同浓度(0、0.5、1.0、1.5、2.0 mg·L^-1)的EBR,测定EBR对葡萄幼苗生物量、光合特性、抗氧化系统的影响。结果表明,叶面喷施不同浓度的EBR提高了葡萄幼苗的生物量、根冠比和光合色素含量,降低了叶绿素a/b;除了叶温下蒸气压亏缺值有所降低,幼苗叶片的光合参数(净光合速率、气孔导度、蒸腾速率和胞间CO₂浓度)升高;叶片的抗氧化酶活性、游离脯氨酸和可溶性蛋白质含量均升高,且均在EBR浓度为1.0 mg·L^-1和1.5 mg·L^-1时升高幅度较大;喷施1.0 mg·L^-1和1.5 mg·L^-1EBR时,叶片的相对电导率降低;喷施1.5 mg·L^-1EBR时,幼苗根、茎的可溶性糖含量升高;喷施0.5 mg·L^-1和1.0 mg·L^-1 EBR时,幼苗叶片的可溶性糖含量升高。总体上,叶面喷施1.0 mg·L^-1 EBR能够促进夏黑葡萄幼苗的生长,并且能够提高幼苗的抗氧化性。     

浙江省新昌县茶叶炭疽病病原鉴定及其药剂敏感性测定

为了确定浙江新昌茶叶炭疽病的病原菌,采用组织分离法对其进行病原菌分离和病害特征描述,通过对病原菌形态结构特征的观察、致病性的试验和rDNA ITS序列的测定比较,对病原菌进行了鉴定,并针对该病原菌采用生长速率法进行了药剂敏感性测定。病原鉴定结果表明,引起浙江省新昌县的茶叶炭疽病的病原菌为胶孢炭疽菌(Colletotrichun gloeosporioides);15种药剂敏感性测定结果表明,250 g·L^-1吡唑醚菌酯乳油、65%代森锌可湿性粉剂、45%咪鲜胺微乳剂、250 g·L^-1丙环唑乳油和70%甲基硫菌灵可湿性粉剂对茶叶炭疽病菌丝生长具有较强的抑制效果(EC₅₀<1 mg·L^-1);325 g·L^-1苯甲·嘧菌酯悬浮剂、10%苯醚甲环唑水分散颗粒剂、430 g·L^-1戊唑醇悬浮剂、38%唑醚·啶酰菌水分散颗粒剂和10%己唑醇悬浮剂的抑制效果次之(1 mg·L^-150<10 mg·L^-1);12.5%烯唑醇可湿性粉剂、25 g·L^-1咯菌腈悬浮种衣剂和42.8%氟菌·肟菌酯悬浮剂的抑制效果相对较差(EC₅₀>10 mg·L^-1);50%多菌灵可湿性粉剂和50%啶酰菌胺水分散颗粒剂对茶叶炭疽病菌丝生长基本无效。     

11S通过NF-κB信号通路引起猪小肠上皮细胞损伤

通过体外培养猪小肠上皮细胞(IPEC-J2),研究大豆球蛋白(11S)对猪小肠上皮细胞的影响。将IPEC-J2细胞分为6组[A(对照组)、B、C、D、E和F],各组中分别添加0、1、5、10、5、5 mg·mL^-1的11S,并且在E组和F组分别添加1 μmol·L^-1吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)和1 μmol·mL^-1 Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)。分别于8、16、24 h,用CCK-8法检测细胞存活率,用ELISA法检测细胞一氧化氮(NO)、二胺氧化酶(DAO)、5-羟色胺(5-HT)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素10(IL-10)含量,用western blot法检测细胞p-NF-κB p65、iNOS、COX-2的蛋白表达量,用qPCR法检测细胞NF-κB p65、IKKβ、iNOS、IKKα、COX-2 mRNA的相对表达量。结果表明:11S可以降低猪小肠上皮细胞存活率,添加PDTC和L-NAME可以提高小肠上皮细胞存活率;11S可促进NO、DAO、5-HT和IL-6的分泌,降低IL-10的分泌,增加p-NF-κB p65、iNOS、COX-2的蛋白表达量及NF-κB p65、IKKβ、iNOS、IKKα、COX-2 mRNA的相对表达量,添加PDTC和L-NAME可抑制11S的作用。综上,11S可引起猪小肠上皮细胞损伤,随着11S浓度的增大,损伤程度增加,PDTC和L-NAME可以降低11S对细胞的损伤。     

鸡蛋磺胺间甲氧嘧啶残留研究

随机选择32周龄、体质量1.6 kg的蛋鸡80羽进行试验,在饮水中分别添加159 mg·L^-1(标签推荐最高剂量)和79.5 mg·L^-1的磺胺间甲氧嘧啶,连续用药5 d,分别作为高剂量组和低剂量组,停药后收集鸡蛋样品。鸡蛋样品采用QuEChERS方法进行前处理,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)对鸡蛋样品中磺胺间甲氧嘧啶的残留量进行定量测定。结果发现,高剂量组在休药后第1、3、5、10、16、20、24天鸡蛋磺胺间甲氧嘧啶残留量分别为2 497.3、220.1、38.9、6.0、1.3、0.5、0.1 μg·kg^-1,低剂量组在休药后第1、3、5、10、16天鸡蛋磺胺间甲氧嘧啶残留量分别为694.3、45.2、15.5、1.5、0.1 μg·kg^-1。磺胺间甲氧嘧啶在鸡蛋中的消除速率为0.4~0.6 μg·kg^-1·d^-1。高、低剂量组分别在停药后第5天和第3天鸡蛋中磺胺间甲氧嘧啶残留量低于国家限量标准。从食品安全角度考虑,如采用标签推荐最高剂量,建议休药期控制在5 d以上。     

纳米二氧化钛对水生生物的急性毒性与安全评价

为系统评价纳米二氧化钛(nTiO₂)对水生生物的安全性,研究其对斜生栅列藻(Scenedesmus obliquus)、大型溞(Daphnia magna Straus)、斑马鱼(Brachydanio rerio),以及非洲爪蟾(Xenopus laevis)蝌蚪的急性毒性,并进行安全评价。结果表明,nTiO₂对斜生栅列藻、大型溞、斑马鱼和非洲爪蟾蝌蚪的急性毒性分别为0.140 mg·L^-1(72 h-EC₅₀)、1.26 mg·L^-1(48 h-EC₅₀)、22.0 mg·L^-1(96 h-LC₅₀)和5.02 mg·L^-1(96 h-LC₅₀),毒性级别分别为高毒、中毒、低毒和中毒。     

丙二酸处理对豇豆采后贮藏品质的影响

以新鲜豇豆为试材,研究100、200、300、400 mg·L^-1 丙二酸处理的豇豆在(8±2) ℃贮藏期间锈斑指数及生理生化指标的变化。结果表明,贮藏12 d后,丙二酸处理的豇豆锈斑指数均显著低于对照,200、300 mg·L^-1 丙二酸处理效果最好;丙二酸处理的失重率始终低于对照,300 mg·L^-1 丙二酸处理显著低于对照;贮藏9 d时,丙二酸处理的豆荚、豆粒可溶性蛋白含量始终高于对照,贮藏12 d时,300 mg·L^-1丙二酸处理的豆荚可溶性蛋白含量最高,高于对照68.49%,豆粒可溶性蛋白含量高于对照6.42%;贮藏期间豇豆的叶绿素、维生素C含量呈下降趋势,300 mg·L^-1丙二酸处理组始终高于对照;豇豆豆荚、豆粒的可溶性糖含量在贮藏期间迅速下降,200、300 mg·L^-1丙二酸处理豆荚可溶性糖含量始终高于对照;豇豆的纤维素含量呈上升趋势,300 mg·L^-1丙二酸处理豇豆纤维素含量均显著低于对照组;豇豆多酚氧化酶(PPO)活性总体呈上升趋势,但在贮藏期间,丙二酸处理的PPO活性始终低于对照;所有处理的过氧化物酶活性均在第6天达到峰值然后下降,300、400 mg·L^-1丙二酸处理在贮藏期间过氧化物酶(POD)活性变化一直比较平稳。不同浓度丙二酸处理通过抑制豇豆锈斑指数增加,延缓失重率、纤维素含量、PPO活性的升高和叶绿素、可溶性糖、可溶性蛋白含量的降低,保持较高水平的POD活性清除自由基,来维持豇豆采后品质,从而提高豇豆采后保鲜效果;综合比较4个丙二酸浓度处理,以300 mg·L^-1 丙二酸处理豇豆保鲜效果最好。     

不同浓度茉莉酸甲酯对春蜜桃果实品质的影响

探讨不同浓度茉莉酸甲酯(MJ)对桃果实品质的影响,以早熟桃春蜜为试材,于果实发育S3时期(果实第二次快速生长期)用125、250、500、1 000和2 000 mg·L^-1 5个不同浓度MJ对早熟桃进行处理,研究果实发育期以及成熟期的单果质量、纵横径、可溶性固形物、可滴定酸、色泽、果实硬度等品质指标的变化。结果表明,与对照相比,250 mg·L^-1 MJ处理显著增大了春蜜桃果实的单果质量及纵横径,125和500 mg·L^-1 MJ处理则无显著变化,而1 000和2 000 mg·L^-1 MJ处理比对照显著减小;不同浓度MJ处理均增加了果实中可溶性固形物含量,降低了可滴定酸含量,但处理间无显著差异;250和2 000 mg·L^-1 MJ处理增大了果实硬度,其他处理与对照相比无显著差异;MJ处理对桃果实的着色影响不显著;在果实成熟期,单果质量、纵横径、果实硬度及着色研究效果与果实生长期结果相一致;不同浓度MJ处理增大了春蜜桃果实的固酸比,处理间差异不显著;不同浓度MJ处理对果实的果形指数、可溶性固形物、可滴定酸含量无显著影响(P>0.05)。综合来看,250 mg·L^-1 MJ处理浓度在早熟桃春蜜上有较好的应用效果。