酶联免疫法(ELISA)测定瓶装黄酒中黄曲霉毒素B

采用酶联免疫法对瓶装黄酒中黄曲霉毒素B1含量进行测定,并对该方法的线性、灵敏度、回收率和重现性进行验证,同时对如何预防瓶装黄酒中黄曲霉毒素B1污染进行讨论。黄曲霉毒素B1标准品在0.1~2.0μg·L-1范围内线性良好,y=-0.4679x+0.3132,R2=0.998 2,该方法对黄曲霉毒素B1的最低检出浓度为0.05μg·kg-1,不同浓度添加回收试验所得回收率为90.2%~106.0%,重复性好,精密度为3.5%。通过对26个不同产品特性黄酒样品中黄曲霉毒素B1的测定,发现所有样品均有检出,但黄曲霉毒素B1的含量均小于2.0μg·kg-1。酶联免疫检测方法研究结果表明,该方法测定快速,定量准确,重现性好,可高效率地定量检测大量市售黄酒样品中黄曲霉毒素B1的含量。     

植物乳杆菌BS22对黄曲霉毒素B1的吸附效果 及对肉鸡消化道菌群的影响

为探明植物乳杆菌BS22对黄曲霉毒素的解毒作用及对肉鸡肠道菌群的影响,设饲料添加不同量的BS22试验(不饲喂)和饲料添加BS22饲喂肉鸡试验。在含有50μg黄曲霉毒素B1(AFB1)的1 kg饲料中加入106、107、108 CFU/g植物乳杆菌BS22,于加入0、15、30 d检测AFB1含量。检测结果:加入BS22后,各组饲料中的AFB1含量均显著下降;同一添加量下,随饲料贮存时间的增加,AFB1含量均有所提高。肉鸡饲喂设3个组:I组(对照组),饲喂基础日粮;II组,饲喂基础日粮+50μg/kg黄曲霉毒素B1;III组,饲喂基础日粮+50μg/kg黄曲霉毒素B1+1.0×108 CFU/g植物乳杆菌BS22。试验期为28 d。采用RCR–DGGE比较4周龄肉鸡嗉囊、腺胃、十二指肠、空肠、回肠及盲肠内容物及黏膜细菌群落的结构。对消化道内容物而言,除回肠外,消化道其他部位的内容物的细菌多样性指数、均匀度和丰富度均是III组的高于II组和对照组;聚类图显示,除腺胃和盲肠外,其他部位均是II组与对照组聚在一起,而III组单独存在。对消化道黏膜而言,除空肠和盲肠外,其他部位的黏膜的细菌多样性指数和丰富度均是II组的均高于III组和对照组,且III组和对照组的细菌多样性指数相近或相同;除回肠和盲肠外,其他部位III组和对照组聚在一起,而试验II组单独存在。综合分析,黄曲霉毒素B1对各肠段内容物菌群的作用不明显,对黏膜菌群有较大影响,尤其是对十二指肠的黏膜菌群影响更明显,植物乳杆菌BS22能调节由于黄曲霉毒素B1引起的肠道黏膜菌群失衡。     

UPLC-MS/MS、HPLC和ELISA法测定普洱茶中黄曲霉毒素研究

以市场随机购买的普洱茶为研究对象,采用酶联免疫吸附法(ELISA)、高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)、超高效液相色谱-串联质谱联用法(UPLC-MS/MS)对普洱茶茶叶进行黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2检测,分析3种方法检测普洱茶中黄曲霉毒素的适用性以及茶叶中黄曲霉毒素含量情况.结果表明,ELISA法测得结果为8.94～588μg/kg,HPLC法测得结果为0.318～0.677μg/kg,UPLC-MS/MS法结果均为未检出.UPLC-MS/MS法具有选择性强、重现性好、稳定性高的特点,对普洱茶茶叶这种基质复杂的样品进行测定,能减少杂质干扰,有效避免假阳性结果,更适用于检测茶叶中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2含量.     

陈皮中黄曲霉毒素测定及其安全评价

经免疫亲和柱处理,结合高效液相色谱-荧光检测仪,测定23个不同来源的陈皮中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的含量,以评价陈皮的安全性。结果显示,黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的含量分别在0～6.20、0～3.34、0～54.80、0～20.13μg/kg之间。试验结果揭示了陈皮中药材的安全性对人体健康造成不同程度的影响,必要的安全评价对陈皮中药材的挑选和污染控制具有重要的指导作用。     

黄曲霉毒素B1中毒小鼠动物模型的初步研究

为了解黄曲霉毒素B1的致病机制,本研究通过黄曲霉毒素B1检测试剂条检测为阳性的饲料及黄曲霉毒素B1标准品污染的饲料饲喂5组小鼠,进行了50d试验,对不同试验组小鼠进行临床、病理学分析以及受损肝脏及胃肠内容物中黄曲霉毒素B1的检测,结果表明:本试验初步建立了黄曲霉毒素B1中毒小鼠模型。本研究成果对黄曲霉毒素统一诊断标准的建立具有重要意义,对黄曲霉毒素的致病机制和临床药物的筛选等均有重要的参考价值。     

饲料中黄曲霉毒素B_1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇对鲤鱼的联合毒性研究

为了探讨黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)和脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)两种真菌毒素单独或联合应用对水产养殖的影响,本试验选用鲤鱼270尾(体重为(18±0.1)g),均分为9组,每组设3个平行,2个平行组进行试验观察和统计,1个平行组作为试验过程中解剖检查用。试验采用二因素三水平设计,AFB1的含量分别为0、0.05和0.1mg·kg-1,DON的含量分别为0、1和5mg·kg-1。试验期为40d。每20d进行增重、体长、丰满系数的检测。试验结束时进行肝胰脏重/体重值、血清生化指标(碱性磷酸酶(ALP)、白蛋白(ALB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总蛋白(TP))检测以及肝胰脏、脾脏和肠道的组织学检查。试验结果表明:除1mg·kg-1DON组外,其他7个试验组鲤鱼的增重都明显受到抑制(P<0.05),但在体长、丰满系数等方面差异不显著(P>0.05)。生化指标中AST活性增加明显(P<0.05)。肝脏的病理变化为肝细胞变性、坏死;肠道为肠黏膜脱落、绒毛萎缩,而毒素对脾脏的影响较小。两种毒素联合作用后毒性具有一定的协同效应。     

复方霍山石斛含片清咽功能的动物试验研究

[目的]研究复方霍山石斛含片是否具有清咽功能。[方法]根据国食药监保化[2012]107号文件清咽功能动物试验要求,采用大鼠棉球植入、大鼠足趾肿胀、小鼠耳廓肿胀3种试验方法。具体将80只健康雄性大鼠、40只健康雄性小鼠按体重随机分2个大组,每个大组按低、中、高和空白对照4个剂量组[0.27、0.53、1.60、0 g/(kg·bw·d)],连续灌胃32 d后分别对不同剂量组进行棉球植入试验(肉芽肿的形成及测定)、足趾肿胀试验及测定、耳肿胀试验及测定。[结果]1.60 g/(kg·bw·d)组肉芽肿净量低于0 g/(kg·bw·d)组;0.53、1.60 g/(kg·bw·d)组1、2、4 h足趾肿胀率均低于0 g/(kg·bw·d)组,1.60 g/(kg·bw·d)组6 h足趾肿胀率低于0g/(kg·bw·d)组;1.60 g/(kg·bw·d)组耳廓肿胀率低于0 g/(kg·bw·d)组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。[结论]复方霍山石斛含片清咽功能的动物试验结果为阳性,具有清咽功能。     

不同植物精油对玉米黄曲霉毒素B1脱毒效果的研究

为了研究植物精油对玉米黄曲霉毒素B1的脱毒效果,试验选用肉桂精油、山苍子精油、罗勒精油作为脱毒物质,试验采用酶联免疫法测定黄曲霉毒素B1含量,研究三种精油用量为60 mg/20g熏蒸30天的脱毒效果；研究三种精油用量60 mg/20g时的最佳熏蒸天数；研究三种精油熏蒸30天时的最佳精油用量。结果表明肉桂精油、山苍子精油、罗勒精油均对玉米黄曲霉毒素B1有一定的脱毒效果,且熏蒸天数不同、精油用量不同脱毒效果有差异。关键词：玉米；黄曲霉毒素B1；肉桂精油；山苍子精油；罗勒精油；脱毒率     

雏鸭黄曲霉毒素中毒与曲霉菌病并发病例的病理学诊断

对湖北省襄樊某鸭场病死雏鸭进行了流行病学调查、病理解剖、病理组织学观察、饲料黄曲霉毒素B1检测等一系列诊断。结果表明:死亡雏鸭肝脏肿大,肝质硬化,表面有白色网格状花纹;肺脏表面及切面有灰白色病灶;肝细胞发生水泡变性和脂肪变性及坏死,胆管上皮细胞呈条索状增生;肺脏内有肉芽肿形成,肺气管内可见霉菌菌丝;饲料中黄曲霉毒素B1含量为8.3μg/kg。据以上结果,确诊为雏鸭黄曲霉毒素中毒和曲霉菌病并发。     

不同植物精油对玉米黄曲霉毒素B1的脱毒效果研究

为了研究植物精油对玉米黄曲霉毒素B1的脱毒效果,本试验选用肉桂精油、山苍子精油、罗勒精油作为脱毒物质,采用酶联免疫法测定黄曲霉毒素B1含量,研究3种精油用量为60 mg/20 g,熏蒸30 d的脱毒效果;研究3种精油用量为60 mg/20 g时的最佳熏蒸天数;研究3种精油熏蒸30 d时的最佳精油用量。结果表明,肉桂精油、山苍子精油、罗勒精油均对玉米黄曲霉毒素B1有一定的脱毒效果,且熏蒸天数不同、精油用量不同脱毒效果有差异。     

黄曲霉毒素对猪生长性能及肝脏功能的影响

选用60头质量28 kg左右的“杜长大”三元杂交猪,随机分为2组,每组3个重复,每重复10头猪(公母各半),分别饲喂基础日粮(C组)和基础日粮+0.1 mg/kg黄曲霉毒素(AF组),预试期7 d,正试期90 d,研究黄曲霉毒素对猪生长性能、内脏器官相对质量、血清和肝脏酶活性指标的影响。结果表明,黄曲霉毒素(AF)显著降低了试验猪的生长性能,AF组猪日增重降低了12.90%(P<0.01),料重比提高了7.54%(P<0.01);AF显著影响试验猪内脏器官的相对质量,AF组猪肝脏、肾脏、脾脏、胰脏的相对质量分别较C组提高了8.24%(P<0.05)、27.27%(P<0.01)、41.18%(P<0.01)、42.86%(P<0.01);AF使试验猪肝脏功能严重受损,胞内酶大量释放到血液中,AF组猪血清酶活性指标显著升高,肝脏酶活性指标显著降低。这些结果表明,长期饲喂黄曲霉毒素污染的日粮诱发了猪黄曲霉毒素的慢性中毒。     

密蒙花总黄酮的抗氧化及免疫调节作用

为研究密蒙花总黄酮(TFB)对D-半乳糖所致衰老小鼠的抗氧化和免疫调节作用,以200 mg/(kg·d)的剂量对昆明雄性小鼠皮下注射D-半乳糖建立衰老模型小鼠,对模型小鼠分别灌胃TFB 25、50、100 mg/(kg·d)或维生素E 50 mg/(kg·d),正常对照组及模型对照组灌服等剂量的蒸馏水,连续灌胃40 d,取血清测定谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)及总胆红素(TBIL)和总蛋白(TP)含量,取肝脏与脾脏计算脏器指数并测定肝及脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力及谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量,并做组织切片观察肝脏组织病理学变化。结果表明,与模型对照组比较,50、100 mg/(kg·d)剂量的TFB能显著抑制衰老小鼠血清AST、AST、ALP、LDH活力和TBIL含量的升高;并且能使小鼠肝和脑组织中的SOD活力和GSH含量显著升高,使MDA含量降低。其中,50 mg/(kg·d)剂量组使肝和脑组织中SOD活力分别显著升高10.49%和26.16%,使GSH含量分别显著升高42.10%和31.64%,使MDA含量分别显著降低55.03%和20.86%。各剂量组TFB均能明显提高衰老小鼠的脾脏指数和胸腺指数,50 mg/(kg·d)TFB剂量组使胸腺指数显著升高23.08%。肝组织切片病理学检查显示,TFB各剂量均可以减轻肝脏组织病理性改变。综上,TFB对D-半乳糖损伤模型小鼠的损伤具有改善作用。     

饲料中黄曲霉毒素B1检测的探讨与研究

黄曲霉毒素B1具有非常强烈的致癌性,饲料当中存在的黄曲霉毒素B1会损伤动物的肝脏并对其产生很大的毒性作用,严重危害着动物健康。所以准确、快速的对饲料中的AFTB1含量进行检测对养殖业与人们的食品安全具有重要的意义。本文就此对黄曲霉毒素B1的检测方法进行了探讨与分析。     

饲料中黄曲霉毒素B1检测的探讨与研究

黄曲霉毒素B1具有非常强烈的致癌性,饲料当中存在的黄曲霉毒素B1会损伤动物的肝脏并对其产生很大的毒性作用,严重危害着动物健康。所以准确、快速的对饲料中的AFTB1含量进行检测对养殖业与人们的食品安全具有重要的意义。本文就此对黄曲霉毒素B1的检测方法进行了探讨与分析。     

食品中黄曲霉毒素B_1 ELISA试剂盒检测方法的建立及验证

建立了黄曲霉毒素B1酶联免疫试剂盒检测的方法,并通过对食用油、花生、谷物中黄曲霉毒素B1测定进行验证。结果表明,在25℃条件下加入50μL标准品溶液、50μL抗体工作液、50μL酶标二抗反应30 min变异性最小;ELISA试剂盒检测灵敏度高,对食用油、谷物、花生样品中黄曲霉毒素B1最低检测限分别为88.82 ng/L和48.51、176.56 ng/kg;平均回收率和变异系数符合相关规定;与高效液相色谱法相比,检测结果一致。     

柱前衍生化高效液相色谱法测定中草药提取物中的黄曲霉毒素B1

样品经提取、过滤、离心后通过免疫亲和柱净化、衍生,荧光检测器检测。该方法灵敏度高,达到了国际上对食品中黄曲霉毒素B1的要求,外标法定量。黄曲霉毒素B1的检测限为0．1μg／kg,线性范围为1．0～45μg／kg,加标回收率为80％-110％,结果准确可靠。     

改性蒙脱石对黄曲霉毒素B1吸附机理的研究

研究了改性蒙脱石对黄曲霉毒素了的等温吸附,以及赖氨酸、酸碱度、温度、离体肠管吸收及透析袋透析对其吸附的影响。结果表明,改性蒙脱石在pH2．0和pH8．0时对黄曲霉毒素B1的最大吸附量分别为598．8μg/g、682．4μg/g;赖氨酸含量为2．0mg／mL和4．0mg／mL时对吸附无影响I酸碱度在pH2．0至pH8．0及温度在20℃至60℃时对吸附无明显影响;改性蒙脱石可减少离体肠管对黄曲霉毒素B1的吸收率及黄曲霉毒素B1通过透析袋的透析率。改性蒙脱石对黄曲霉毒素B1可能以化学吸附为主鸡小肠对黄曲霉毒素B1存在主动吸收过程。     

DON、ZEA联合染毒对体外培养鸡脾脏淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的影响

旨在研究DON、ZEA联合染毒对体外培养鸡脾脏淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的影响。DON、ZEA联合染毒剂量为0.012 5μg·mL~(-1)和0.006 25μg·mL~(-1)、0.050μg·mL~(-1)和0.025μg·mL~(-1)、0.2μg·mL~(-1)和0.1μg·mL~(-1)、0.8μg·mL~(-1)和0.4μg·mL~(-1),进行DON、ZEA联合染毒48 h对鸡脾脏淋巴细胞上清液IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ含量及其mRNA表达的影响。结果表明,各染毒组细胞上清液IL-10和IFN-γ蛋白含量,细胞内IL-2、IL-4和IL-10 mRNA水平随毒素剂量的升高而增加(P0.01);各染毒组细胞上清液IL-2和IL-4蛋白含量均随毒素浓度的升高而降低(P0.01);细胞内IFN-γmRNA表达量均随毒素浓度的升高而先升高后降低(P0.01)。DON、ZEA联合染毒导致细胞因子IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ分泌失衡,且呈剂量依赖性;DON、ZEA联合染毒鸡脾淋巴细胞上调或下降促炎性细胞因子的水平;Th1和Th2细胞因子平衡失调,因此造成细胞免疫损伤,从而对细胞产生毒性。     

12种花生品种黄曲霉毒素B_1污染风险评估

为验证不同花生品种对黄曲霉侵染和产毒的抗性,检测侵染后不同品种黄曲霉毒素B_1的含量,采用人工接种法对12种不同花生品种进行接种,高效液相色谱—柱后衍生法进行检测。结果显示,12种花生品种对黄曲霉高抗品种2份、中抗品种3份、中感品种5份、高感品种2份,未发现免疫品种;高效液相色谱—柱后衍生法检测HH22花生品种黄曲霉毒素B_1含量最高,达378.14μg/kg, SH48花生品种黄曲霉毒素B_1含量最低,为27.92μg/kg。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)致BALB/c小鼠的急性、亚急性和免疫毒性研究

研究了脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)对BALB/c小鼠的毒性作用。结果表明:DON对BALB/c小鼠的LD_(50)为3.3 mg/(kg·bw)。0.6 mg/(kg·bw)和2.4 mg/(kg·bw)DON组小鼠体重和采食量显著低于对照组和0.15 mg/(kg·bw)DON组;2.4 mg/(kg·bw)DON组肝脏、肾脏和脾脏系数显著高于对照组和0.15 mg/(kg·bw)DON组。病理组织学结果显示,2.4 mg/(kg·bw)DON组肝脏组织表面有白色坏死灶,肝细胞间质出现红细胞浸润;肾脏明显肿大,肾小管管腔狭窄,肾小球萎缩。与对照组相比,2.4 mg/(kg·bw)DON组淋巴细胞百分比显著下降;单核细胞百分比、中性粒细胞百分比和红细胞压积显著升高;脾脏CD4~+/CD8~+也显著低于对照组和0.15 mg/(kg·bw)DON组。可见,2.4 mg/(kg·bw)DON可对BALB/c小鼠造成显著的肝脏、肾脏毒性以及免疫抑制作用。