苦参药材中总生物碱含量的测定

[目的]用酸性染料比色法测定不同产地苦参药材中总生物碱的含量。[方法]苦参总生物碱的浓度50%乙醇溶液,加一定pH值的缓冲溶液溴麝香草酚蓝指示液振摇后,氯仿萃取,萃取液于一定波长处测定吸光度A。[结果]氧化苦参碱检测浓度在0.013~0.026mg/ml范围内与吸光度线性关系良好(r=0.997 1)。用氧化苦参碱作为对照品,在pH值7.0的条件下加入2.0 ml的溴麝香草酚蓝溶液,在417 nm处有最大吸光度,该条件下可准确地测定苦参药材中总生物碱的含量。试验测得不同产地苦参药材中总生物碱含量差异较大,其中所购得的陕西、甘肃苦参药材中总生物碱含量较高,分别为1.801、1.778 mg/kg。[结论]该试验所采用的方法操作简便、准确,可通过总生物碱的含量客观全面地评价苦参药材的质量。     

木薯叶多酚氧化酶的提取及其酶学性质研究

以木薯叶为原料,研究木薯叶多酚氧化酶PPO的最佳提取条件与酶学性质。结果表明,木薯叶PPO 的 最佳提取条件为磷酸缓冲液PBS的pH 值6.8料液比4 mL/g提取时间6 h;木薯叶PPO 酶促反应产物在399 nm 处有最大吸收峰,以邻苯二酚为底物的酶促反应的米氏常数Km=0.8 mol/L动力学方程为V=2000[S]/0.8+[S]该酶最 适温度为37益,最适pH 值为7.0。     

分光光度法对马铃薯中酪氨酸酶活性的测定

[目的]研究酪氨酸酶的活性,为防止马铃薯及其他舍酪氨酸酶的水果和蔬菜等发生褐变提供参考。[方法]以马铃薯为原料,利用分光光度法测定酪氨酸酶的活性;为确定提取酪氨酸酶的适宜条件,测定不同温度和不同pH值对酶活性影响。[结果]结果显示,多巴溶液的吸收光谱最大吸收峰λmax为480nm,随着时间的增大吸光度变化趋于稳定。以此建立动力学曲线,由曲线的斜率可计算出酪氨酸酶的活性,并由试验得出酪氨酸酶的活性受温度和溶液的pH值影响较大。因此,提取和测定酪氨酸酶的活性时的适宜条件为：可见波长λmax为480nm,温度控制在30℃,pH值6．5。[结论]为保障酪氨酸酶的活性,在提取和测定时应选择适宜的条件。     

麻黄中麻黄碱萃取工艺优化

[目的]优化乙酸乙酯萃取麻黄碱工艺参数,为改进麻黄碱提取方法提供参考。[方法]用乙酸乙酯作为萃取剂,分别考察溶液pH值、振摇时间、相比、萃取级数对麻黄碱萃取率的影响。[结果]最佳萃取条件为：溶液的pH为12~13,料液比为1∶1,振摇时间为2.0m in,采用三级逆流萃取。[结论]该工艺污染小、工艺简单,可作为麻黄碱提取纯化的一种方法。     

中药大黄水浸液的三维荧光光谱分析

[目的]为中药大黄的快速定性分析提供技术支持。[方法]以青海大黄为试材,制备不同浓度的大黄水浸液并对其进行荧光扫描;取一定浓度的大黄水浸液,加入不同pH值的HOAc—NaOAc缓冲溶液后对其进行荧光扫描。[结果]随着大黄水浸液浓度的减小,荧光强度逐渐减小,其荧光强度与浓度呈线性关系。当缓冲溶液的pH值为2．6～4．2时,荧光强度随着pH值的增大而增大。当缓冲溶液的pH值为4．2—5．8时,荧光强度随着pH值的增大而减小。当缓冲溶液的pH值为4．8～5．2时,荧光强度几乎不变。中药大黄水浸液的三维荧光等高线光谱图中有一个明显的荧光峰,其发射波长位于401．8nm。[结论]该试验确定了中药大黄水浸液荧光光谱分析法的测定条件。为中药大黄的定性分析提供了新方法。     

林蛙皮多肽制备及其理化性质

从林蛙皮肤中提取的小分子多肽具有诸多生物活性。以鲜活林蛙为试验材料,剥离皮肤,采用酶解法提取小分子活性多肽,并研究其理化性质。结果表明:制备的林蛙皮多肽的紫外特征吸收峰位于220 nm处,280 nm附近吸收峰较小;分子量主要分布在190~1 000 u,并且在250~540 u的分布最多,占37.47%;该混合多肽具有多种生物活性因子,尤其是抗菌肽和凋亡调控蛋白;在不同p H值缓冲溶液中都具有良好的溶解性;抑菌试验表明其对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有不同程度的抑菌活性。证明制备的小分子混合多肽有望成为新的制剂原料。     

DNS比色法测定污泥中淀粉酶活性的研究

[目的]研究利用DNS比色法测试污泥中淀粉酶活性,以解决测试条件差异大和测试结果可比性低等问题。[方法]以水解酸化反应器中的污泥为原料,研究工作波长、显色及培养时间、培养pH值、灭菌时长等因素对测试结果产生的影响。[结果]结果表明,最大吸收波长处的背景干扰大且测试不稳定,工作波长应在背景干扰相对较小的长波方向选择。该研究的最适工作波长为510 nm;显色的适宜时间为8 min;在培养阶段添加的缓冲溶液pH值与原污泥pH值不一致,会造成实际酶活力的放大或缩小;灭菌时间过短则灭菌不完全,会造成测试结果偏低,该研究确定的灭菌时间为10min;同时确定了最适的培养反应时间为90 min。[结论]为DNS-淀粉酶测定方法的完善提供依据。     

土壤磷酸酶测定中不同缓冲溶液对显色液吸收波长的影响

确定了土壤磷酸酶测定时最大吸收波长以及显色时应加入的最佳pH缓冲溶液。研究结果表明,加入pH为8.0~10.0的缓冲液时显色时间快,在可见光区的最大吸收峰在604 nm处,其中以pH 9.0的吸光度最高,摩尔吸光系数为1.717×104L/(mol.cm),灵敏度较高。因此确定加入的最佳缓冲溶液pH为9.0,同时选择604 nm作为最大吸收波长。     

盐地碱蓬红色素提取条件的研究

[目的]为碱蓬红色素的进一步开发利用提供理论依据。[方法]以滨海盐地碱蓬为原料,采用浸提法提取红色素,通过单因素试验研究盐地碱蓬红色素的提取条件。[结果]碱蓬红色素为甜菜红素,易溶于水和含水有机溶剂,属于水溶性色素,碱性条件下不稳定,酸性条件下稳定,在538nm波长附近有特征吸收峰。碱蓬红色素的提取效率随提取时间的增加先提高后降低,提取20min时效果最好。碱蓬红色素的提取效率随提取温度的升高而增加,温度为50℃时,提取效果最好。随着提取溶剂pH值的升高,碱蓬红色素的提取效率先提高后降低,当pH值为5时,提取效果最好。[结论]盐地碱蓬红色素的最佳提取条件为:以pH值为5的水作提取溶剂,50℃下浸提20min。     

紫外分光光度法测定发酵液中卑霉素的含量

[目的]介绍利用紫外分光光度法测定发酵液中卑霉素含量的方法。[方法]以乙酸乙酯为提取剂,扫描卑霉素的乙酸乙酯溶液在200～400 nm的吸收峰,准确配制出系列浓度的卑霉素乙酸乙酯溶液,绘制标准曲线,在最佳波长下进行测定,然后对发酵样品进行3次离心处理得到样品溶液,再对样品液进行重现性、稳定性的研究和回收率的计算,用抑菌圈法验证样品的抑菌效果。[结果]选择275nm波长作定量峰,卑霉素的乙酸乙酯溶液浓度在0.5～12.0 mg/L范围内、pH值为4.6的条件下,其吸收度与浓度的线性关系良好,线性回归方程y=15.968 0x＋0.030 7,相关系数为0.995 5。样品溶液在室温条件下放置24 h保持仍稳定,平均回收率为102.13%。[结论]试验证明,用紫外分光光度计法检测发酵液中的卑霉素含量是可行的。     

不同培养条件对环草石斛愈伤组织中次生代谢产物的影响

[目的]探索环草石斛生长与其主要的次生代谢产物——石斛碱和石斛多糖积累之间的关系。[方法]用苯酚-浓硫酸法和溴甲酚绿酸性染料比色法测定了不同培养条件对环草石斛愈伤组织中的多糖和总生物碱含量的影响。[结果]环草石斛悬浮培养的愈伤组织生长曲线呈"S"型。在光照条件下,环草石斛悬浮培养的愈伤组织中总生物碱和多糖含量的积累与其生长基本同步,光照有利于悬浮培养愈伤组织的生长和多糖的积累;在暗培养条件下,愈伤组织生长缓慢,多糖的积累不与其生长同步,但暗培养却可以提高愈伤组织中总生物碱的含量。[结论]环草石斛生长与其主要的次生代谢产物——总生物碱和石斛多糖积累之间有着密切的关系,不同培养条件对环草石斛中次生代谢产物具有一定的影响。     

刺玫果多糖含量测定方法优选

[目的]优选刺玫果多糖的含量测定方法。[方法]通过精密度试验、稳定性试验、回收率试验和线性关系考察比较苯酚硫酸法和蒽酮硫酸法2种常用多糖含量测定方法在测定刺玫果多糖中的应用。[结果]苯酚硫酸法测定刺玫果多糖含量优于蒽酮硫酸法。[结论]该研究确定的多糖含量测定方法稳定、可靠,可用于刺玫果多糖的含量测定。     

金顶侧耳多糖体内免疫活性的初步研究

[目的]探究金顶侧耳多糖提取方法及对动物机体免疫功能的影响。[方法]通过液体培养金顶侧耳,以乙醇沉淀法从发酵液中提取金顶侧耳多糖,并采用蒽酮比色法和3,5-二硝基水杨酸法相结合测定多糖的得率。通过称量胸腺、脾脏的重量,计算胸腺指数和脾脏指数来探讨不同剂量的金顶侧耳多糖对小鼠免疫功能的影响。[结果]该法提取的金顶侧耳多糖得率为14.35%,随金顶侧耳多糖的剂量的增加,小鼠脾脏重量增加,注射多糖的小鼠免疫力明显高于环磷酰胺（CY）对照组,低于生理盐水对照组。[结论]金顶侧耳多糖能对CY有减毒作用,能够增强小鼠免疫功能。     

绞股蓝皂苷最佳提取条件的研究

[目的]确定绞股蓝皂苷的最佳提取条件。[方法]制备标准曲线,用香草醛—高氯酸比色法测定绞股蓝皂苷的含量,通过正交试验研究浸提次数、浸提温度、乙醇浓度、料液比不同水平对绞股蓝皂苷提取率的影响。[结果]浸提次数、浸提温度、乙醇浓度、料液比对绞股蓝皂苷提取率的影响依次减小,浸提温度和浸提次数对提取绞股蓝皂苷的影响明显大于乙醇浓度和料液比。直观性分析表明,绞股蓝皂苷的最佳提取工艺为:70%乙醇溶液,料液比1∶12,在40℃下浸提3次,每次2 d。F检验表明,在3个乙醇浓度水平和3个料液比水平内提取绞股蓝皂苷的效果无显著差异,而温度和浸提次数各水平间的差异显著。[结论]在绞股蓝皂苷的提取过程中,不同提取条件对绞股蓝皂苷的提取率有很大的影响。     

苏丹草愈伤组织酚类物质提取工艺的研究

[目的]探索苏丹草愈伤组织酚类物质的最佳提取工艺。[方法]以3种不同类型的苏丹草愈伤组织为材料,采用Folin-Ciocalteu比色法研究了超声波破碎时间、乙醇浓度以及抽提次数对酚类物质提取效率的影响。[结果]提取苏丹草愈伤组织酚类物质的最佳工艺条件为:抽提液乙醇浓度50%,超声波破碎时间32 min,抽提次数3次。3种不同类型的苏丹草愈伤组织中,Ⅱ型愈伤组织的酚类物质含量最高。[结论]该研究为苏丹草的综合开发和深度利用提供技术支持。     

榴莲壳多糖微波提取及脱蛋白方法

[目的]优化榴莲壳多糖的微波提取及脱蛋白最佳工艺。[方法]采用L9(34)正交试验,以多糖含量为评价指标,利用苯酚-硫酸法测定多糖的含量,确定多糖的提取工艺;以脱蛋白率与多糖损失率为指标,选择最佳脱蛋白方法。[结果]最佳提取工艺为料液比1∶30g/ml,微波功率450 W,提取时间6 min,提取次数为1次;三氯乙酸法(TCA)为最佳脱蛋白方法。[结论]优化后的工艺条件稳定可行,可为榴莲壳多糖工业化生产提供理论依据。     

不同地区桔梗中总皂苷含量分析

[目的]分析比较不同地区生产的桔梗中总皂苷的含量。[方法]以桔梗皂苷为考察指标,采用超声水提法提取5个产地的桔梗中的总皂苷,并采用比色法测定其含量。[结果]5个产地的桔梗总皂苷得率大小顺序为安康〉商洛〉通化〉安国〉淄博;其中安康的桔梗总皂苷得率最高,为5．10％;淄博的总皂苷得率最低,为3．04％。5个产地桔梗待测液的纯度大小顺序为安国〉商洛〉通化〉淄博〉安康;其中安国的桔梗待测液纯度最高,为65．55％,安康的桔梗待测液纯度最低,为53．38％。[结论]不同地区生长的桔梗总皂苷的得率及纯度相差较大。     

不同提取方法对马尾藻多糖含量的影响

[目的]比较不同提取方法对马尾藻多糖提取效果的影响。[方法]分别采用水提醇沉、梯度醇提和101果汁澄清剂提取马尾藻多糖,经纯化后用苯酚-硫酸法测定提取液中有效成分多糖含量。[结果]101果汁澄清剂法提取的马尾藻多糖含量和纯度均优于其他2种方法,精制马尾藻多糖的含量为6.55%,红外光谱确认为较纯的多糖结构。[结论]101果汁澄清剂法提取马尾藻多糖的方法为最优,稳定且可行性高。