玉米再生体系建立及其影响因素的研究

以玉米骨干自交系K12、137、87-1和综3的幼胚为外植体,研究基因型、胚龄、继代次数、诱导（分化）培养基中激素浓度对玉米幼胚胚性愈伤组织的诱导、保持和植株分化的影响。结果表明,基因型是玉米幼胚培养能力的主要影响因子。中等大小（1.0～2.0 mm）的幼胚都具有较高的愈伤组织诱导率。2,4-D浓度对玉米幼胚的胚性愈伤组织诱导率有很大的影响,而且不同基因型的最大诱导率所需的2,4-D浓度也不相同。为防止2,4-D浓度过高引起无性系的变异,本试验确定的诱导培养基的2,4-D浓度为2.0 mg/L。继代培养基中1 mg/L的2,4-D对胚性愈伤组织诱导和保持起关键作用。最佳分化培养基为N6盐＋B5有机＋2.0 mg/L甘氨酸＋1 g/L CH＋1.0 mg/L 6-BA＋30 g/L蔗糖。     

玉米自交系幼胚高效再生系统的建立

以22份玉米自交系为试验材料,以幼胚为外植体,研究基因型、诱导（分化）培养基、继代次数、Ag-NO3浓度对玉米幼胚胚性愈伤组织的诱导、保持和植株分化的影响。结果表明,玉米幼胚培养能力受基因型、培养基及二者互作效应的影响,基因型是主要的影响因子。3 mg/L的2,4-D对胚性愈伤组织诱导和保持起关键作用;0.5 mg/L 6-BA抑制胚性愈伤组织的发生;8-12 mg/L AgNO3明显改善部分基因型愈伤组织质量,提高胚性愈伤组织诱导率。分化培养基中添加1 mg/L的KT和0.5 mg/L的IBA促进绿苗的分化和根系的生长。胚性愈伤组织继代3-5次后调整到最佳状态。确定了玉米幼胚培养胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为N6＋3 mg/L 2,4-D＋8-12 mg/L AgNO3＋0.2 mg/L IAA,最佳分化培养基为N6＋1 mg/L KT＋0.5 mg/L IBA。     

4种玉米自交系幼胚遗传再生体系的建立

选取4种玉米自交系H99、A188、7922和1322的幼胚作为外植体,接种于10种不同诱导培养基上,诱导愈伤组织并建立遗传再生体系,同时探讨了不同基因型、培养基种类、幼胚大小、蔗糖浓度、激素浓度和配比对愈伤组织诱导率的影响。结果表明:基因型对愈伤组织诱导率高低影响显著,4种基因型玉米幼胚在诱导培养基中均产生了愈伤组织,但继代培养后只有H99能诱导出胚性愈伤组织,诱导率为46.2%;对于不同基因型培养基诱导效果依次为N6MBMS;选择幼胚长度为1.5~2.0 mm、添加蔗糖浓度为30 g/L、2,4-D浓度为2.0 mg/L及Ag NO3浓度为10 mg/L时玉米愈伤组织诱导率最高且质量较好。     

不同玉米自交系幼胚愈伤组织诱导和分化的研究

[目的]通过对玉米幼胚培养,建立一套稳定性好、再生率高的组织培养体系.[方法]以4个玉米自交系幼胚为外植体,研究不同基因型、幼胚大小、2,4-D浓度、AgN03浓度对愈伤组织诱导的影响,进一步研究6 - BA和蔗糖浓度对愈伤组织分化及IBA和NAA对再生苗的生根影响.[结果]2,4-D浓度为2.0 ～3.0mg/L,幼胚长度为1.0～2.0 mm时,对胚性愈伤组织诱导有良好效果;在诱导期间采用隔代法添加10 mg/LAgNO3能提高胚性愈伤组织的诱导率;当6- BA为0.5 mg/L、蔗糖浓度为50 g/L时,愈伤组织分化率最高且有利于小植株的形成;IBA浓度为0.6 mg/L对植株生根较有利.[结论]对4个玉米自交系幼胚培养研究筛选出适宜玉米幼胚培养的最佳诱导、分化及生根培养基.     

燕麦成熟胚的组织培养及植株再生

以燕麦成熟胚为外植体,通过对不同基因型、培养基的激素种类和配比、盾片放置方式的研究,探索影响燕麦成熟胚愈伤组织诱导及分化的因素.结果表明:基因型对燕麦愈伤组织的诱导及分化有显著影响;不同基因型材料诱导愈伤及分化所需激素及其比例不同,‘白燕2号’和‘陇燕3号’的最佳诱导培养基为MS+4mg/L 2,4-D+1mg/L NAA,分化培养基分别为MS+0.4mg/L NAA+0.2mg/L KT+1.0mg/L 6-BA和0.8mg/L NAA+0.8mg/L KT+1.0mg/L 6-BA;‘丹麦444’的最佳诱导培养基为MS+2mg/L 2,4-D,分化培养基为0.2mg/LNAA+0.4mg/L KT;接种时将成熟胚盾片朝下直接接触培养基放置,可获得更高的诱导率;‘陇燕3号’的成熟胚有利于燕麦再生体系的建立.     

无种质基因型限制结缕草组培快繁体系研究

结缕草从愈伤组织发育成胚性愈伤再进一步分化为完整植株一直是该领域的研究重点与难点。本研究通过试验建立起一套完善的无种质基因型限制的结缕草组培快繁体系。结果表明,愈伤组织诱导培养基为MS+2 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA+40 g/L蔗糖最为合适,体胚细胞诱导培养基为改良MS+2 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA+40 g/L蔗糖最为合适,胚状体增殖与生长培养基为MS+0.1～0.2 mg/L 2,4-D+1 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖最为合适,成苗快繁培养基为MS+0.02～0.05 mg/L NAA+1～2 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖最为合适,生根培养基MS最为合适。     

高留胚率水稻辽粳294成熟胚组织培养条件的优化

以高留胚率水稻辽粳294成熟胚为外植体,对影响高留胚率水稻愈伤组织诱导、分化的接种方式、培养基中激素水平进行研究。结果表明,用解剖刀在胚上纵切1刀后再将种子接在培养基上,种子灭菌彻底,愈伤组织诱导率高且质量较好。诱导培养基中激素6-BA和KT的浓度对愈伤组织的诱导率有极显著的影响,诱导培养基为N6+2 mg/L 2,4-D+0.3 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT时,诱导率较高,可达90.0%;分化培养基为MS+0.8 mg/L NAA+2 mg/L 6-BA时,绿苗分化效果好,分化率为73.0%。     

水稻武育粳3号成熟胚愈伤组织诱导及植株再生研究

以粳稻品种武育粳3号的成熟胚为外植体,研究不同基本培养基、蔗糖浓度、2,4-D浓度以及激素配比对愈伤组织诱导率的影响.研究表明,愈伤组织诱导培养基为:M_8+30 g/L蔗糖+10 g/L琼脂+5 g/L山梨醇+2 mg/L2,4-D+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+2 mg/L ABA,最高出愈率为87.5%,多种激素配合使用比单一使用效果好;植株分化培养基为:MS+30g/L蔗糖+8 g/L琼脂+0.5 mg/L 2,4-D+1 mg/L 6-BA+1 g/L活性炭,植株分化率可以达到38%.     

玉米幼胚再生体系主要影响因素的优化

以玉米幼胚为受体材料,研究了基因型、2,4-D质量浓度以及蔗糖质量浓度对胚性愈伤组织诱导率的影响,以及幼胚大小对愈伤组织诱导率的影响。结果表明,基因型是影响胚性愈伤组织诱导率的一个最重要因素,H99×A188的诱导率最高,达到45.28%;幼胚长度1.5~2.0 mm的愈伤组织诱导率最高,达到98%;N6诱导培养基中添加2,4-D的质量浓度为2.0 mg/L时胚性愈伤组织的色泽鲜艳,呈鲜黄色,且呈颗粒状,具有良好的胚性。蔗糖的最佳质量浓度为30 g/L。     

4种骨干玉米自交系幼胚愈伤组织诱导条件的优化

采用10种含有不同植物激素的愈伤组织诱导培养基,研究了4种骨干玉米自交系的愈伤组织诱导情况。结果表明,基因型对愈伤组织诱导率影响显著,且基因型和培养基之间存在互作;2,4-D对玉米幼胚愈伤组织的诱导是必需的,2.0～3.0mg/L的2,4-D大多能诱导出胚性愈伤组织;幼胚长为1.5～2.0mm时,玉米愈伤组织诱导率较高且质量较好;10mg/L的AgNO3可以明显提高愈伤诱导率,6-BA对愈伤组织的诱导率没有明显影响。     

蒙古扁桃的组织培养与快速繁殖技术研究

[目的]对蒙古扁桃（Prunus mongolica Maxim.）的组织培养与快速繁殖技术进行研究。[方法]以蒙古扁桃幼嫩茎段为外植体进行组织培养试验。[结果]筛选出适合蒙古扁桃外植体的诱导培养基为MS＋6-BA0.80mg/L＋IAA1.20mg/L＋30g/L蔗糖＋5g/L琼脂粉,pH值为6.0～6.2;愈伤组织诱导培养基为MS＋6-BA1.00mg/L＋NAA0.10mg/L＋30g/L蔗糖＋5g/L琼脂粉,pH值为6.0～6.2;继代芽分化培养基为MS＋6-BA0.80mg/L＋IAA1.50mg/L＋NAA0.05mg/L＋30g/L蔗糖＋5g/L琼脂粉,pH值为6.0～6.2;生根培养基为1/2MS＋IBA0.50mg/L＋根皮苷5.00mg/L＋15g/L蔗糖＋5g/L琼脂粉,pH值为6.0～6.2;以草炭：蛭石：珍珠岩=2：1：1为移栽基质效果最好。[结论]为蒙古扁桃品种改良及工厂化繁育提供参考。     

'甜查理'草莓花药培养脱毒技术

本试验以花粉发育处于单核靠边期的‘甜查理’草莓花蕾为外植体进行花药脱毒培养。结果表明：预冷处理72h是最适合的花药低温处理时间。最适合花药愈伤组织的诱导培养基是Ms＋6-BA1．0mg／L＋2,4-D2．0mg／L,出愈率为70．9％;最适合的不定芽分化培养基是Ms＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L,分化率为38．0％。     

不同激素组合和附加物对翠菊下胚轴愈伤组织诱导的影响

用翠菊下胚轴作外植体,研究不同激素组合和附加物对翠菊下胚轴愈伤组织诱导的影响。结果表明,在初代培养过程中,以MS+6-BA 0.5mg/L+IAA 2.0mg/L对翠菊愈伤组织诱导具有较好的促进作用,愈伤诱导率最高,为86.67%。培养基中同时加入500mg/L水解酪蛋白和1 000mg/L的L-脯氨酸可显著提高胚性愈伤组织的诱导率,诱导率达86.67%;甘露醇和AgNO3对胚性愈伤组织诱导率提高无明显作用,但愈伤组织生长更加旺盛,较致密,更有利于以后继代和分化。     

库伦大三棱荞麦愈伤组织诱导的研究

以库伦大三棱荞麦为研究对象,以子叶、下胚轴为外植体诱导愈伤组织,为建立荞麦的遗传转化体系奠定基础。研究结果表明:去皮荞麦种子的最适消毒条件是0.1%升汞消毒1.5min;以子叶为外植体诱导愈伤组织的最适培养基为MS+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉+1.2mg/L6-BA+0.05mg/L NAA+0.1mg/L2,4-D;以下胚轴为外植体诱导愈伤组织的最适培养基为MS+30g/蔗糖+7g/L琼脂粉+0.5mg/L6-BA+0.05mg/LNAA+0.05mg/L2,4-D;下胚轴比子叶更适合作为外植体诱导愈伤组织。     

中香梨的离体培养研究

[目的]对中香梨的离体培养进行研究。[方法]以中香梨茎尖和嫩叶为外植体,筛选适合中香梨茎尖培养及叶片愈伤组织诱导的最佳培养基。[结果]中香梨茎尖培养的最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.15 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+6 g/L琼脂;叶片的最佳愈伤组织诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IBA+40 g/L蔗糖+6 g/L琼脂。[结论]通过茎尖培养可很快获得中香梨植株,但从愈伤组织诱导植株较为困难。     

番茄耐低温材料离体再生体系的建立

以筛选出的耐低温番茄TTI1103B-2为材料,以下胚轴为外植体进行离体培养,通过不同激素组合处理,诱导愈伤组织、不定芽及不定根的形成,建立其高效再生体系。结果表明,6-BA、IAA与愈伤组织的诱导和不定芽的分化有极显著差异性,诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+3.0mg/L 6-BA+0.2mg/L IAA,诱导不定芽分化的最佳培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA,最适宜生根培养基为MS+IAA0.2mg/L。     

杉木体细胞胚胎发生胚性愈伤组织诱导条件的优化

目的优化杉木体细胞胚胎发生过程中胚性愈伤组织的诱导条件，探究基本培养基、供体母株基因型和外源添加剂对杉木体胚诱导的影响。方法以3个供体母株基因型（Z1、Z2、Z3）的杉木雌配子体（其未成熟合子胚处于裂生多胚期）为外植体，采用6种基本培养基及不同浓度的外源添加剂塞苯隆（TDZ）和茉莉酸甲酯（MeJA）处理，并对诱导培养过程中的愈伤组织进行细胞学观察。结果以DCR为基本培养基，诱导培养效果最好，愈伤组织诱导率达70.74%，胚性愈伤组织的诱导率达17.36%；供体母株基因型对胚性愈伤组织诱导有较大影响，Z1基因型供体母株的雌配子体最适合用于诱导产生胚性愈伤组织，诱导率为14.73%；诱导培养时以DCR为基本培养基，添加蔗糖30 g/L、活性炭1 g/L、倍力凝5 g/L并附加植物生长调节剂2,4-D 1.5 mg/L、KT 0.4 mg/L、MeJA 1.2 μmol/L和TDZ 0.004 mg/L，杉木胚性愈伤组织的诱导率最高，达19.83%；仅需4 d就可诱导产生胚性愈伤组织，不同阶段原胚团的结构和极性特征有明显差异。结论基本培养基、供体母株基因型和外源添加剂都会明显影响杉木体胚诱导培养，以Z1供体母株基因型的杉木雌配子体为外植体、DCR为培养基并组合添加MeJA和TDZ可明显提高杉木体胚诱导率。      

绿萝组织培养与快繁技术

[目的]研究绿萝组培快繁技术要点,为绿萝再生体系建立和工厂化生产提供技术支持.[方法]以绿萝叶片和无节茎段为外植体,以MS为基本培养基,探讨不同浓度的激素组合(1.0~3.0 mg/L 6-BA、0.1~0.3 mg/L NAA、0.1~0.3mg/L IBA)对愈伤组织诱导及其分化、不定芽诱导、生根培养等的影响.[结果]两种外植体均能产生愈伤组织,但茎段产生愈伤组织较快,产生不定芽也快.叶片诱导愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L.茎段诱导愈伤组织及其分化的最适培养基均为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2 mg/L,最适生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg/L.[结论]绿萝叶片和茎段可作为愈伤组织培养的较好外植体,茎段培养效果优于叶片.     

青钱柳愈伤组织诱导与增殖的初步研究

[目的]对青钱柳愈伤组织的诱导与增殖进行初步研究。[方法]以青钱柳茎段和叶片为外植体,利用MS、WPM、改良DKW 3种基本培养基,添加不同浓度配比的6-BA和IBA,来探讨愈伤组织诱导和增殖的最佳培养基配方。[结果]诱导茎段和叶片愈伤组织产生的最佳培养基配方分别为:MS+4.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L IBA和MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA;愈伤组织增殖时的最佳培养基为:MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IBA。200 mg/L Vc对抑制青钱柳愈伤组织褐化效果最好,褐化率仅为5.71%。[结论]为青钱柳组培快繁体系的建立和分子育种研究的开展奠定了一定理论基础。