诱导大豆疫霉菌大量产生游动孢子囊的最佳方法研究

大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)是疫霉菌中难在培养条件下形成孢子囊的菌种之一。对诱发大豆疫霉菌产生游动孢子囊的10种方法进行比较研究,结果表明,供试的10种方法除了MSS溶液法外均能诱发产生游动孢子囊,其中以土壤浸出液法和皮氏液加土壤浸出液法效果最佳,产孢量大,所需的时间最短,游动孢子囊成熟度一致,且能一次性释放出游动孢子,从而成功地解决了大豆疫霉菌产生孢子囊难这一重要问题。     

西葫芦根腐病病原菌(Phytophthora nicotianae)的生物学特性研究

烟草疫霉菌Phytophthora nicotianare是山西省西葫芦根腐病的主要病原,采用致病菌的室内培养方法研究了西葫芦根腐病病原烟草疫霉菌。结果表明,菌丝生长和产生孢子囊的最适温度27℃,最适pH 6,最适培养基为燕麦培养基。黑暗不利于烟草疫霉产生孢子囊。     

辣椒疫霉产孢能力与致病力的相关性分析

[目的]探究安徽省辣椒疫霉(Phytophthora capsici)的游动孢子囊产量与对辣椒致病力的关系。[方法]采用液体培养的方法对采自安徽的56个辣椒疫霉进行游动孢子囊产量测定,分析游动孢子囊产量与致病力的相关性。[结果]安徽省不同地区的辣椒疫霉菌株在10%V8培养液中的游动孢子囊产量存在极显著差异,辣椒疫霉的致病力与游动孢子囊产量呈正相关,但相关性较小(r=0.165,R2=0.027 2)。[结论]辣椒疫霉产孢性能较稳定,游动孢子囊产量与辣椒疫霉菌致病力的强弱相关性很小,认为不相关。     

一种大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)纯营养菌丝的培养方法

比较了胡萝卜琼脂和玻璃纸胡萝卜琼脂培养大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)对菌丝生长速度、卵孢子产生、孢子囊产生时间及RNA提取效果的影响。结果表明,玻璃纸胡萝卜琼脂培养的大豆疫霉菌,10 d内不会产生卵孢子,当大豆疫霉菌从玻璃纸上取下时,不会带有培养基,能够提取出高质量的RNA,满足差异显示反转录PCR对RNA质量的要求,是一种适合大豆疫霉菌纯营养菌丝的培养方法。     

拮抗真菌F-310对辣椒疫霉菌的抗生活性及防效

筛选得到的1株对辣椒疫霉菌具有拮抗作用的真菌F 310在平板上能强烈地抑制辣椒疫霉菌丝的生长。F 310培养滤液能抑制辣椒疫霉菌孢子囊的形成及孢子囊、孢子的萌发,同时能杀死菌丝细胞使其丧失致病性。F 310培养滤液粗提物同样具有抗生活性。盆栽试验结果显示,土壤接种F 310菌株及培养滤液对辣椒疫病的防治效果可达到64 5%。     

辣椒疫霉菌孢子诱导技术研究

通过将辣椒疫霉菌在马铃薯、胡萝卜、玉米粉、燕麦、大豆配制的5种固体培养基上繁殖并进行连续光照培养、连续暗培养、低温4℃、高温40℃和间断光照5种不同处理诱导孢子囊进行比较。结果表明:辣椒疫霉在CA培养基上暗培养,经间歇光照处理,仅培养了9 d孢子囊产量就高达11.05个/视野。持续暗培养的菌丝体未产生孢子囊,持续光培养的菌丝体上孢子囊数量随光照时间的延长而增多。培养基种类影响辣椒疫霉菌菌落形态、生长速度;气生菌丝较发达的培养基上菌丝体产孢量明显大于气生菌丝细弱的培养基;菌丝体生长速度与产孢量之间关系不明显。     

培养基种类对繁殖辣椒疫病菌的影响

利用取自北京,黑龙江丹东市的疫霉菌进行了胡萝卜,碧丰豆种,三尺绿豆种,青豇８０号豆种,鲜架豆荚配制的７种培养基繁殖辣椒疫病菌的比较试验。结果表明：北京疫病菌在碧丰豆种和ＣＡＡ培养基上产生的初生,次生孢子囊量最大;丹东疫霉菌在ＣＡＢ培养基上产生的初生孢子囊量最大。     

辣椒疫霉菌保存及游动孢子诱导技术研究

[目的]探索辣椒疫霉菌保存和游动孢子诱导技术。[方法]辣椒疫霉菌在5种不同培养基中,26℃暗培养3 d,再光照培养6 d后,将培养基平分6块,置于2个培养皿中,加入40 ml无菌水,一个计算孢子囊数,另一个于16℃光照0.5 h后,计算游动孢子数。[结果]辣椒疫霉菌在5种培养基中的菌落形态差异明显,生长速度关系是OMA>CMA>CA>PSA>BA,产生孢子囊数量最多的培养基是BA和PSA,最少的为OMA;释放游动孢子量在CMA上最多,BA、PSA、CA和OMA上无显著差异;该菌在试管斜面中,于16℃下可以保存9个月。[结论]诱导辣椒疫霉菌游动孢子的最佳方法是:将该菌在CMA培养基上,于26℃暗培养3 d,再持续光照培养6 d后,加无菌水置16℃光照0.5 h;最佳的保存温度是16℃;游动孢子的浓度与孢子囊的浓度没有正相关性。     

四川辣椒疫霉菌生物学特性和辣椒抗霉疫病性鉴定方法初探

 对四川辣椒疫霉菌的生物学特性以及辣椒室内叶片抗性鉴定和田间抗性鉴定的方法进行研究。结果表明，辣椒疫霉菌菌丝生长的最适温度24～30℃，在CAA培养基上生长的菌丝产生游动孢子囊数量最高，光照与黑暗交替培养能提高游动孢子囊数量。通过5种抗性鉴定方法的比较，表明灌根法最接近田间自然发病，室内叶片鉴定与田间灌根法鉴定结果吻合率在72.61%。     

诱发辣椒疫霉菌大量产孢的最佳方法

对诱发辣椒疫霉菌大量产生游动孢子囊的５种方法（丝瓜培养法、土壤浸出液法、病茎浸出液法、Ｐｅｔｒｉ溶液法及ＭＳＳ熔液法）进行了比较研究，结果表明，供试的５种方法虽均能诱发产生大量孢子囊，但以ＭＳＳ溶液法效果最佳，产孢量大，所需时间短，孢子囊成熟度一致，且能一次性释放游动孢子，从而成功地解决了辣椒疫霉病抗性鉴定和筛选工作中产孢难这一重要问题。     

诱发辣椒疫霉菌大量产孢的最佳方法

对诱发辣椒疫霉菌在量产生游动孢子囊的５种方法（丝瓜培养法、土壤浸出液法、病茎浸出液法、Ｐｅｔｒｉ溶液法及ＭＳＳ溶液法）进行了比较研究，结果表明，供试的５种方法虽均能诱发产生大量孢子囊，但以ＭＳＳ溶液法效果最佳，产孢量大，所需时间短，孢子囊成熟度一致，且能一次性释放游动孢子，从而成功地解决了辣椒疫霉病抗性鉴定和筛选工作中产孢难这一重要问题。     

哈密地区辣椒疫霉菌的鉴定及部分生物学测定

哈密地区辣椒上的疫霉病菌,经分离培养和镜检,其孢子囊多为倒梨形、卵圆形,孔突较明显,未见厚垣孢子和卵孢子。此菌不仅对辣椒和番茄高度致病,还侵染黄瓜和豇豆,其特性不同于瓜疫霉菌和寄生疫霉菌,与国内外报道的辣椒疫霉菌基本一致。其菌丝体和孢子囊在高湿条件下可高度侵染无人为伤口的辣椒根、茎、叶、果实等器官,潜育期2—3天;菌丝在20℃和25℃干燥条件下只能存活2—3天,在水中的致死温度为45℃(10min)。病果种子带菌率可达100％,但在哈密室内外干燥条件下种子上的病菌只能存活2—3天。     

荔枝果皮多酚对荔枝霜疫霉生物学特性的影响

【目的】探讨荔枝多酚对荔枝霜疫霉生长发育的影响。【方法】溶剂浸提法提取荔枝果皮中的总多酚,采用常规植物病理学手段研究荔枝多酚质量浓度对荔枝霜疫霉菌落形态、生物量、孢子囊萌发方式、游动孢子萌发及卵孢子数量的影响。【结果】荔枝多酚质量浓度为150～300μg·mL~(-1)时,荔枝霜疫霉菌落致密,菌丝生长量和产孢量显著减少,孢子囊以释放游动孢子的方式萌发;培养基中荔枝多酚为100～300μg·mL~(-1)时,可显著促进游动孢子的萌发,抑制孢子囊的萌发;在无荔枝多酚的PDA培养基上荔枝霜疫霉不易产生卵孢子,当培养基中荔枝多酚质量浓度达到100μg·mL~(-1)时,荔枝霜疫霉产生卵孢子为10.8 mm~(-2)。【结论】荔枝多酚类物质参与荔枝霜疫霉生长发育的调控,抑制霜疫霉生长和产生孢子囊,具有开发新型安全性生物源杀菌剂的潜力。     

辣椒疫病防治剂的室内筛选*

 用菌丝生长抑制法和孢子囊萌发抑制法分别测定了烯酰吗啉、氢氧化铜、王铜、甲霜灵、福美双、三乙膦酸铝、氨基寡糖素、霜霉威、百菌清、代森锰锌等10种杀菌剂对辣椒疫霉菌的毒力。结果表明,烯酰吗啉对辣椒疫霉菌菌丝生长的抑制效果最好,EC₅₀为1.06 μg/mL;氢氧化铜对孢子囊萌发的抑制效果最好,EC₅₀为1.68 μg/mL;代森锰锌对菌丝生长和孢子囊萌发也具有较好的抑制作用;霜霉威对辣椒疫霉菌的菌丝生长和孢子囊萌发几乎都没有抑制作用。对辣椒疫霉菌产孢子囊培养基的筛选结果为米糠琼脂培养基为最佳培养基,产孢子囊量最多且个体较大、均匀一致。     

陕西辣椒疫病病原鉴定及其防治剂的室内筛选

通过对陕西辣椒疫病病原菌的分离培养和形态学观察,将引起陕西辣椒疫病的病原菌鉴定为辣椒疫霉(Phytophthora capsici Leonia);利用一套鉴别寄主,通过常规抗病性鉴定技术,对陕西辣椒疫霉菌进行生理小种鉴定,并采用菌丝生长抑制法和孢子囊萌发抑制法测定了12种常用的防治剂对辣椒疫霉菌的毒力.结果表明:陕西辣椒疫霉菌分离物属于生理小种3;不同供试药剂对菌丝生长和孢子囊萌发的抑制中浓度差异达到极显著水平;对辣椒疫霉菌菌丝生长抑制效果较好的是辣椒病菌清和活康壮,EC50分别为252.76 μg/mL(r=0.8669)和376.18 μg/mL(r=0.9304);对孢子囊萌发抑制效果较好的是69%烯酰吗啉WP和80%代森锰锌WP,EC50分别为317.61 μg/mL(r=0.9767)和421.70 μg/mL(r=0.9573);60%椒霸菌毒克星WP和50%扑海因WP对辣椒疫霉菌菌丝生长和孢子囊萌发几乎没有抑制作用.     

氢氧化铜·烯酰吗啉混剂对辣椒疫霉菌的毒力

分别以菌丝生长法与孢子囊萌发法测定了氢氧化铜·烯酰吗啉混剂对辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici Leonian)的毒力.结果表明,由上述2种药剂混合的5种不同配比的混剂对辣椒疫霉菌菌丝的生长有显著的抑制作用,对孢子囊萌发也有一定的抑制效果,其中以氢氧化铜∶烯酰吗啉为5∶3的混剂抑制作用最为显著,对菌丝生长抑制作用的共毒系数为267,对孢子囊萌发抑制作用的共毒系数为189.     

致病疫霉生防木霉菌株筛选鉴定及生物学特性1）

通过拮抗研究和发酵液抑制致病疫霉菌丝生长、孢子囊萌发以及孢子囊释放游动孢子的研究,从6株生防木霉菌株中筛选出对致病疫霉菌具有生防作用的高效生防木霉菌株T-28,该菌株对致病疫霉的拮抗等级为I级,发酵液对菌丝生长抑制率为64．71％,孢子囊萌发相对抑制率为64．41％,孢子囊游动孢子释放相对抑制率为68．31％。经ITS PCR扩增产物分析,T-28菌株与Trichoderma harzianum Rifai的ITS序列具有99％的最大同源性,验证为哈茨木霉。对哈茨木霉T-28进行生物学特性测定发现其对生长温度、pH、碳源和氮源要求不严格,是具有广泛适应性和广阔应用前景的高效生防菌。     

荔枝霜疫霉的生防菌株与化学制剂的筛选

结果表明:枯草芽孢杆菌BS-2、解淀粉链芽孢杆菌TB2和枯草芽孢杆菌TL2菌株对荔枝霜疫霉有明显的抑制作用,108cfu.mL-1的TB2和BS-2菌液对荔枝霜疫霉菌丝生长和孢子囊萌发的抑制率最高,分别为63.34%和79.29%;化学农药烯酰吗啉对荔枝霜疫霉的菌丝生长和孢子囊萌发具有较好的抑制效果,其EC50分别为1.70和0.84μg.mL-1.     

建立掘氏疫霉单游动孢子无性系方法的研究

建立单游动孢子无性系是研究疫霉菌遗传学的重要试验手段。采用常规的实验室诱发掘氏疫霉孢子囊和游动孢子的方法,其单游动孢子发育为有效菌株的比率较低(一般低于50％)。作者经过多次比较试验,对诱导产生孢子囊的方法和单孢分离的方法进行改进,使有效菌株率提高到80％以上,每小时可分离60-80个单游动孢子。     

不同浓度臭氧水对致病疫霉菌Phytophthora infestans孢子萌发抑制作用初报

本文采用不同浓度臭氧水对致病疫霉菌Phytophthora infestans (Mont.) de Bary孢子囊萌发进行了试验，结果表明：臭氧水处理对孢子囊萌发的影响与臭氧水浓度密切相关，以9 mg/Kg臭氧水处理1 min可以抑制95%以上孢子囊萌发，以18 mg/Kg臭氧水处理1 min则100%抑制孢子囊萌发。无论在高浓度还是在低浓度条件下，处理时间1分钟或2分钟对孢子囊萌发没有产生显著影响，杀菌作用几乎是瞬间完成的。臭氧水处理孢子囊后导致孢子囊形态发生变化，这种变化随时间延长变得更加明显。鉴于高浓度臭氧水对植物本身不产生毒害作用，因此，高浓度臭氧水在控制晚疫病方面显示出广阔的应用前景。