罗尔斯通氏菌菌株H16新毒素蛋白Reu对菜青虫中肠组织病理学研究

在从罗尔斯通氏菌菌株H16内分离纯化出具有胃毒活性的毒素蛋白Reu的基础上,将毒素Reu饲喂菜青虫幼虫,通过观察菜青虫中肠组织的变化研究毒素Reu的杀虫机理.经毒素Reu处理的菜青虫幼虫,中肠组织的病理变化类似于发光杆菌Tca毒素和苏云金芽孢杆菌δ-内毒素.菜青虫4龄幼虫口服毒素Reu 16 h后,中肠组织开始发生变化,围食膜前端破碎,中肠柱状细胞伸长;32 h后整个围食膜被破坏消失,中肠组织病变加重,肠壁细胞排列疏松混乱.     

罗尔斯通氏菌菌株H16新杀虫蛋白的纯化及活性测定

利用(NH4)2SO4盐析、超滤、Sephacryl-400HR凝胶过滤层析及DEAE-Sephadex A-50阴离子交换层析等方法,从罗尔斯通氏菌菌株H16(Ralstonia eutropha H16)中分离纯化出一种新的杀虫毒素蛋白.生物活性测定结果表明,此杀虫毒素蛋白存在于胞内和胞外上清液中,电泳结果显示胞内和分泌到胞外的杀虫毒素可能是同一种物质.此毒素对菜青虫初孵幼虫有较强的口服毒性,LD50为2.7mg/头.SDS-PAGE图谱显示此杀虫毒素是由两个亚基组成的复合蛋白.     

伯氏致病杆菌(Xenor habdus bovienii BE)杀虫活性物质的分离和生物测定

对斯氏线虫(Steinernera feltiae)比利时品系的共生菌伯氏致病杆菌(Xenorhabdus bovienii BE)进行发酵培养,测定结果显示,该菌发酵液对供试昆虫大蜡螟老龄幼虫有很高的血腔毒性.对发酵液硫酸铵盐析和乙酸乙酯抽提物等衍生物进行测定,发现共生菌的杀虫物质主要为胞外和胞内蛋白成分,且胞内粗提蛋白活性明显高于胞外蛋白.对两种粗提蛋白进行Marker分子量范围为(1.43～9.72)×104 的SDS-PAGE分析,发现胞外粗提蛋白在此分子量范围内没有明显的条带,而胞内粗提蛋白则有较明显的5个条带.研究表明胞内粗提蛋白具有较高的热稳定性,测定的盐析最佳硫酸铵饱和度为80%,此粗提蛋白在24 h和48 h后对昆虫血腔毒性的LD50值分别为4.731 6 g/L和 1.571 5 g/L;其在5 d后对二龄幼虫的口服LD50为 253.757 9 μg/g.胞内粗提蛋白凝胶过滤后呈现4个峰值,分别对其进行SDS-PAGE分析,只有浓度较大的峰值1和4产生明显条带,分子量分别为6.64×104 和(2.01～2.90)×104 的2种复合蛋白;分别对它们进行血腔和口服毒性生物活性测定,发现分子量为(2.01～2.90)×104的2种复合蛋白杀虫活性高于分子量为6.64×104 蛋白的杀虫活性,其在24 h和48 h后对昆虫血腔毒性的LD50分别为 0.377 2 g/L和 0.123 8 g/L,其在5 d后对二龄幼虫的口服LD50为 93.002 1 μg/g.     

土荆芥精油对菜青虫毒杀、拒食和生长抑制作用的研究

采用室内生物测定方法,研究土荆芥(Chenopodium ambrosioidesL.)精油对菜青虫(Pieris rapaeL.)的触杀、熏蒸、拒食和生长抑制作用。结果表明,土荆芥精油对菜青虫1~5龄幼虫的触杀毒力大小顺序依次为3龄>2龄>1龄>4龄和5龄,对菜青虫3龄幼虫的熏蒸作用的致死中浓度(LC50)明显高于1龄幼虫,对4龄幼虫明显高于1龄和2龄幼虫,但对1龄和2龄、2龄与3龄、3龄与4龄幼虫的熏蒸效果没有明显差异;对4龄幼虫拒食作用的测定结果表明,菜青虫拒食率随着土荆芥精油浓度升高而升高,处理后48 h的拒食中浓度(AFC50)明显高于处理后24 h;土荆芥精油对菜青虫4龄幼虫生长发育有明显的抑制作用,蛹重和化蛹率均随着土荆芥精油浓度升高而显著下降,蛹重比率的抑制中浓度(EC50)为200.646 6μg.g-1,化蛹率的EC50为126.438 2μg.g-1。     

雷公藤生物碱制品对小菜蛾和菜青虫的控制效果

测定了雷公藤总生物碱对小菜蛾和菜青虫的室内毒力,以及0.1%雷公藤生物碱乳油对两种害虫的田间防效。结果表明,雷公藤总生物碱对小菜蛾3龄幼虫48和72 h的LC50值分别为228.28和136.67 m g/L,对菜青虫5龄幼虫48和72 h的LC50值分别为307.61和238.18 m g/L;1.0%雷公藤生物碱乳油对小菜蛾的毒杀作用较强,其48和72 h的LC50值分别为69.62和20.35 m g/L,对菜青虫48和72 h的LC50值分别为93.18和44.62 m g/L。250倍稀释的雷公藤生物碱乳油(有效含量为40 m g/L)田间喷雾处理对小菜蛾和菜青虫均具有较好的防治效果,施药后7 d的防治效果分别为82.93%和82.71%,在本试验剂量范围内对作物安全。可见,雷公藤生物碱制品对两种蔬菜害虫控制效果显著。     

辛硫磷及毒死蜱对中华稻蝗的毒力研究

本文采用点滴法分别测定了辛硫磷和毒死蜱对中华稻蝗5龄若虫的毒力,做出了毒力回归曲线并得到毒力回归方程及LD50值。辛硫磷的毒力回归方程为Y=2.79X-6.07,LD50=1.96μg/g虫重,毒死蜱的毒力回归方程为Y=2.86X-7.01,LD50=3.69μg/g虫重。比较两种农药的毒力回归方程、LD50值和95%置信区间,结果表明辛硫磷对中华稻蝗5龄若虫的药效较毒死蜱强。     

银杏提取物对3种农业害虫的触杀活性

测定了银杏叶及外种皮提取物对褐飞虱、桃蚜和菜粉蝶幼虫的触杀毒力.结果表明,它们埘褐飞虱和桃蚜有很高的触杀活性,对菜粉蝶幼虫也有一定的触杀活性.4种提取物对褐飞虱的毒力顺序为:叶乙醇提取物>叶石油醚提取物>外种皮甲醇提取物>外种皮乙醚提取物;对桃蚜的毒力顺序为:外种皮甲醇提取物>外种皮乙醚提取物>叶乙醇提取物>叶石油醚提取物.对菜粉蝶幼虫,银杏外种皮的甲醇、乙醚提取物对3龄菜粉蝶幼虫的活性明显高于对5龄幼虫的活性,以外种皮乙醚提取物对3龄幼虫的触杀毒力最高,LD50值为16.80μg/头.     

高毒力苏云金杆菌YN1-1的蛋白质特性及田间防效

[目的]为了调查对鳞翅目害虫具有高毒力苏云金杆菌YN1-1菌株的生物学特性.[方法]分析YN1-1菌株晶体蛋白的SDS-PAGE电泳图谱,调查YN1-1菌株对几种鳞翅目害虫的室内药效及田间防效.[结果]YN1-1菌株的伴孢晶体具菱形结构;其原毒素蛋白分子量为136 kDa,经胰蛋白酶处理后水解为63 kDa的活性毒素蛋白.室内药效试验结果,用YN1-1菌株处理小菜蛾与菜青虫时,其药效比商品苏云金杆菌(WP)更好;在田间防效上,YN1-1菌株的虫口减退率也比商品苏云金杆菌(WP)更高.[结论] YN1-1菌株具有优良的开发潜力.     

柚皮粗提物对松梢螟幼虫生物活性影响研究

通过测定柚皮粗提物对松梢螟幼虫的拒食活性、生长发育影响和毒杀活性,研究其对松梢螟幼虫的室内毒力作用.结果显示:100 mg/mL的柚皮粗提物生物毒性最强,处理24、48 h后的松梢螟幼虫的拒食率分别达到了99.28％ 、94.23％,拒食中浓度AFC50分别为7.61、9.28 mg/mL;对松梢螟四龄幼虫的生长抑制率在处理后24、48、96 h分别为96.32％ 、95.44％和93.19％,LC50分别为9.56、13.52、8.38 mg/mL;三龄幼虫、五龄幼虫的校正死亡率分别为90.00％和80.00％,与对照药剂噻虫啉的效果处于同一显著水平.柚皮粗提物对三龄幼虫毒杀作用效果优于五龄幼虫,LD50分别为18.46、25.99 mg/mL.说明柚皮粗提物对松梢螟幼虫生物活性有一定影响.     

高毒力苏云金杆菌YN1-1的蛋白质特性及田间防效（英文）

[目的]为了调查对鳞翅目害虫具有高毒力苏云金杆菌YN1-1菌株的生物学特性。[方法]分析YN1-1菌株晶体蛋白的SDS-PAGE电泳图谱,调查YN1-1菌株对几种鳞翅目害虫的室内药效及田间防效。[结果]YN1-1菌株的伴孢晶体具菱形结构;其原毒素蛋白分子量为136 kDa,经胰蛋白酶处理后水解为63 kDa的活性毒素蛋白。室内药效试验结果,用YN1-1菌株处理小菜蛾与菜青虫时,其药效比商品苏云金杆菌(WP)更好;在田间防效上,YN1-1菌株的虫口减退率也比商品苏云金杆菌(WP)更高。[结论]YN1-1菌株具有优良的开发潜力。     

砂地柏中脱氧鬼臼毒素含量与杀虫活性测试

对不同地区砂地柏各部位中脱氧鬼臼毒素的含量进行了测试 ,并以菜青虫为试虫测试了各样品的生物活性 ,初步探讨了脱氧鬼臼毒素含量与生物活性的关系。结果表明 ,各测试样品中都含有脱氧鬼臼毒素 0 .2 5～ 1 .40 mg/g。脱氧鬼臼毒素的含量与菜青虫的拒食率、死亡率之间无明显相关性 ,说明砂地柏组织中还含有其他具杀虫活性的成分。     

雷公藤总生物碱分离及杀虫活性研究

提取、分离了雷公藤 (Tripterygium wilfordii Hook)根皮中总生物碱 ,并对其杀虫活性和作用方式进行了系统的生物测定。结果表明 ,雷公藤总生物碱对 5龄菜青虫有很强的麻醉、拒食和毒杀作用 ;拒食中浓度AFC5 0 为 2 75 .5 3m g/L,毒杀中浓度 L C5 0 为 77.86 m g/L,麻醉中量 ND5 0 为 2 .2 9μg/g;雷公藤总生物碱无触杀和熏蒸作用。试虫中毒症状主要为幼虫表皮出现黑斑 ,形成黑斑部分不能脱去旧表皮 ,最终死亡     

25 g/L高效氯氟氰菊酯EC防治菜青虫田间药效试验

采用不同剂量的25 g/L高效氯氟氰菊酯EC进行甘蓝菜青虫防治试验,验证其防治效果,确定最佳剂量。结果表明,25 g/L高效氯氟氰菊酯EC防治菜青虫低龄期的最佳用药量为有效成分9.4 g/hm2,平均防效在94.6%以上。     

柞蚕微粒子虫侵染菜青虫的研究

[目的]探明柞蚕微粒子虫能否侵染非天然性宿主菜青虫.[方法]通过对纯化的柞蚕微粒子虫进行添食菜青虫,分析了不同浓度下柞蚕微孢子虫对菜青虫的侵染力差异,并采用SYBR Green Ⅰ染液对菜青虫体液内的柞蚕微孢子虫进行染色,观察其形态.[结果]柞蚕微粒子虫在转宿主情况下能够感染菜青虫,并且在特定浓度下能够在菜青虫体内大量增殖.[结论]为进一步开展柞蚕微粒子虫的非天然性寄生宿主范围以及转宿主后的分子机制研究奠定了基础.     

香菜挥发性次生物质对菜青虫的拒食作用研究

采用水蒸气蒸馏法从香菜(Coriandrum sativum L.)茎叶中提取其挥发性次生物质,测定了香菜提取物在室内对菜青虫的拒食作用。结果表明,香菜提取物对菜青虫3龄幼虫具有较强的拒食活性,且随着提取物浓度的增加,拒食作用增加,药后72 h,香菜提取物对3龄菜青虫拒食作用在稀释倍数为50、100、200、400倍时,拒食率均达到100.0%,稀释800倍时对菜青虫拒食作用相对较弱,拒食率为66.7%。     

甲氧滴滴涕乳油防治菜青虫试验

本文针对菜青虫(Pieris rapae Linne)在蔬菜上为害的严重性,做了防治此虫的毒力测定与药效试验.结果表明:甲氧滴滴涕乳油对菜青虫的触杀LD_(50)值为9.6720微克/克;在田间,用25%甲氧滴滴涕乳油200×稀释液可基本控制其为害,并残效期在半个月以上.用该药防治此虫使用方法简单,防治费用低,可以在田间推广使用.     

2种生物农药对菜青虫的控制作用及对天敌的影响

[目的]研究Bt和阿维菌素对甘蓝田菜青虫种群动态、捕食性天敌群落主要特征指数及天敌一菜青虫益害比的影响。[方法]采用药剂处理和系统调查的方法。[结果]阿维菌素对菜青虫种群有明显的控制作用,但Bt对菜青虫的防治效果不明显。Bt和阿维菌素处理对甘蓝田捕食性天敌群落的物种丰富度和个体数量有明显的影响,但对菜青虫发生高峰期的天敌一菜青虫益害比无明显影响。[结论]Bt和阿维菌素处理可以保护天敌对菜音虫的自然控制作用。     

盐酸黄连素对菜青虫和小菜蛾的拒食活性试验

采用浸渍叶碟法分别测定了盐酸黄连素对菜青虫和小菜蛾幼虫的选择性和非选择性拒食活性。结果表明,盐酸黄连素对菜青虫和小菜蛾幼虫均具有较好的拒食效果,选择性拒食作用毒力回归方程分别为Y=2.58X-3.73和Y=3.08X-5.64,拒食中浓度AFC50分别为2.41和2.88 mg/mL;非选择性拒食作用毒力回归方程分别为Y=1.95X-1.54和Y=1.93X-1.21,拒食中浓度AFC50分别为2.27和1.64 mg/mL;其中盐酸黄连素对菜青虫幼虫的选择性拒食效果好于对小菜蛾幼虫的效果,而对小菜蛾幼虫的非选择性拒食效果好于对菜青虫幼虫的效果。     

紫茉莉茎提取物的生物活性研究

利用紫茉莉茎提取物对小菜蛾(Plutella xylostellaL.)、菜粉蝶(Pieris rapaeL.)、斜纹夜蛾(Prodenia lituraFabr.)的生物活性进行了测定。结果表明,用茎氯仿提取物处理菜粉蝶卵5 d后,对其具有较强的杀卵作用,校正死亡率达82.76%;氯仿提取物对小菜蛾具有较强的产卵驱避作用,3 d后的驱避率为87.40%;紫茉莉茎石油醚提取物对4龄菜粉蝶幼虫具有较强的触杀活性,在取食3 d后的校正死亡率达85%,取食5 d后的校正死亡率达100%;在取食第3 d与第5 d后,茎氯仿提取物对4龄菜粉蝶幼虫均表现出较强的拒食活性,拒食率分别为96.80%与99.67%。4龄菜粉蝶幼虫在取食氯仿提取物处理的甘蓝叶碟7 d后的毒杀效果为87.50%。     

异小杆线虫对菜青虫体内保护酶活力的影响

测定了菜青虫(Pieris rapae)被异小杆线虫(Heterorhabditis megidis)侵染后体内主要保护酶活力的变化.结果表明:菜青虫感染昆虫病原线虫后,为抵御线虫对组织的破坏,菜青虫体内过氧化物酶(POD)活力在接虫初期迅速下降,之后不同接虫剂量处理的菜青虫体内的POD酶活力均有不同程度的上升,24h后逐渐降低;超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活力在接虫初期迅速上升,但在接虫后期均出现不同程度的下降,其中CAT酶活力在16h后达到最大,而POD的活力在8h达到最大之后逐渐减小.说明在菜青虫抵御病原线虫侵染的过程中,SOD和CAT是首先发生作用的保护酶,POD是继SOD和CAT之后发生作用的酶系,且反映出菜青虫在异小杆线虫侵染的初期防御能力增强,16～32h以后防御能力显著下降.