盆花文心兰丛生芽组培快繁技术研究

以文心兰‘豹斑宝石’花梗为外植体,采用丛生芽诱导途径,利用正交设计法,探讨基本培养基(MS、花宝1号、改良1号、改良2号、改良3号)、植物生长调节剂(6-BA、NAA、IBA)、水解酪蛋白(CH)等对其丛生芽诱导、增殖、生根等关键环节的影响,以期建立文心兰‘豹斑宝石’丛生芽组培快繁技术。结果表明:各试验因素对文心兰丛生芽增殖影响的主次关系为6-BA基本培养基NAACH;筛选出丛生芽适宜的增殖培养基配方为改良1号+6-BA 3.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+CH 0.5g·L~(-1)+白糖30g·L~(-1)+琼脂粉5.0g·L~(-1),50d平均增殖系数达5.8;筛选出适宜生根的培养基配方为改良3号+IBA 0.5mg·L~(-1)+活性碳0.5g·L~(-1)+白糖20g·L~(-1)+琼脂粉3.6g·L~(-1)+卡拉胶3.6g·L~(-1),生根率为100.0%;试管苗移栽6个月成活率达96.8%。     

花叶金线莲茎段诱导植株再生培养技术研究

以花叶金线莲茎段为外植体,采用正交设计,探讨基本培养基(MS、B_5、改良MS)、植物生长调节剂(TDZ、6-BA、KT、IBA)等对其茎段诱导、增殖及生根等关键环节的影响,以期建立花叶金线莲茎段诱导植株再生培养技术。结果表明:各试验因素对花叶金线莲茎段诱导丛生芽影响的主次关系为基本培养基KT6-BATDZ;筛选出适宜的增殖培养基配方为改良MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+KT 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+白糖30.0g·L~(-1)+琼脂粉3.0g·L~(-1)+卡拉胶3.0g·L~(-1),60d平均增殖系数达4.58;筛选出适宜生根的培养基配方为改良MS+IBA 0.3mg·L~(-1)+活性炭0.5g·L~(-1)+白糖20g·L~(-1)+琼脂粉3.6g·L~(-1)+卡拉胶3.6g·L~(-1),培养60d,生根率为100.0%。     

秋石斛离体快速繁殖技术研究

以秋石斛‘三亚阳光’幼芽为外植体,采用丛生芽诱导途径,并利用正交设计法,探讨基本培养基(花宝1号、改良1#、改良2#、改良3#)、植物生长调节剂(6-BA、NAA、IBA)、白糖等对其丛生芽诱导、增殖、生根等关键环节的影响,以期建立秋石斛‘三亚阳光’丛生芽组培快繁技术。结果表明:各试验因素对秋石斛丛生芽增殖影响的主次关系为基本培养基6-BANAA白糖;筛选出丛生芽适宜的增殖培养基配方为改良2#+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.2mg·L~(-1)+白糖30.0g·L~(-1)+琼脂粉3.0g·L~(-1)+卡拉胶3.0g·L~(-1),50d平均增殖系数达6.25;筛选出适宜生根的培养基配方为改良3#+NAA 0.3mg·L~(-1)+IBA 0.5mg·L~(-1)+活性炭0.5g·L~(-1)+香蕉泥100.0g·L~(-1)+白糖20g·L~(-1)+琼脂粉3.6g·L~(-1)+卡拉胶3.6g·L~(-1),生根率为100.0%;试管苗移栽60d成活率达96.5%。     

枣幼胚体细胞胚的发生及植株再生

以小梨枣胚龄30~40d的幼胚为外植体,研究不同质量浓度6-苄基腺嘌呤(6-BA)、噻苯隆(TDZ)、吲哚丁酸(IBA)、萘乙酸(NAA)、脱落酸(ABA)及其组合对幼胚胚乳看护培养效果、体细胞胚发生、成熟及萌发的影响。结果表明,适宜小梨枣幼胚(30~40d)胚乳看护培养的培养基为MS+IBA0.2mg·L~(-1)+BA0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1),成胚率达62.07%;诱导胚性愈伤组织较适宜的培养基为MS+TDZ 0.6mg·L~(-1)+IBA1.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1),诱导率为53.32%;在MS+6-BA 0.3mg·L~(-1)+NAA0.02mg·L~(-1)组合下有利于体细胞胚的发生,发生率可达71.43%;ABA可促进体胚的正常发育,质量浓度为0.5mg·L~(-1)时,体细胞胚结构完整,体胚成熟率为21.83%;将成熟的体胚转接到含有IBA 0.03mg·L~(-1)+GA30.03mg·L~(-1)的培养基中,体细胞胚萌发形成完整植株。     

小果型西瓜快速繁殖技术研究

为建立小果型西瓜组织培养快速繁殖方法,对小果型西瓜重要种质材料的保存扩繁提供技术支持。以小果型西瓜为材料、MS培养基为基本培养基,通过不同种类和浓度的植物生长调节剂配比试验,筛选小果型西瓜快速繁殖与生根的最佳培养基组成。结果表明:子叶苗茎尖丛生芽诱导培养基MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)效果较好,试管苗继代增殖最适培养基为MS+6-BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1),诱导试管苗生根的最适培养基为1/2 MS+IBA 0.3mg·L~(-1)。     

过山蕨组织培养技术研究

为建立过山蕨组培工厂化育苗技术体系,本试验以其可育叶为外植体,以GGB途径进行增殖扩繁,开展了组织培养的深入研究。结果表明:过山蕨可育叶诱导形成GGB的最佳培养基为1/2MS+琼脂6g·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1)+BA 0.1g·L~(-1)+NAA 0.5g·L~(-1)+AC 0.5g·L~(-1);GGB增殖的最佳培养基为1/2MS+琼脂6g·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1)+BA 0.1g·L~(-1)+NAA 0.3g·L~(-1)+AC 0.3g·L~(-1);GGB形成孢子体及完整植株的最佳培养基为1/2MS+琼脂6g·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1)+IBA 0.05g·L~(-1)+AC 0.3g·L~(-1);试管苗移栽28d后,成活率在98%以上。     

东方百合遗传转化组培体系的建立

为建立高效稳定的基因转化受体系统,以东方百合"西伯利亚"(Lilium orienta l"Siberia")无菌苗叶片和鳞片叶为外植体,使用不同种类和浓度的生长素与细胞分裂素、蔗糖、抗生素筛选等方法进行了不定芽的诱导分化、试管苗小鳞茎诱导及生根等研究。结果表明:鳞片诱导最佳分化培养基为MS+KT2.0+NAA0.2mg·L~(-1),试管苗小鳞茎诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+KT2.0 mg·L~(-1)+NAA0.2 mg·L~(-1)+75g·L~(-1)蔗糖,试管苗叶片分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA0.1 mg·L~(-1),试管苗鳞片叶分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+2,4-D 0.2 mg·L~(-1)。生根培养基为1/2MS+NAA0.2 mg·L~(-1)。抗生素敏感性试验表明,百合叶片的卡那霉素选择压为100 mg·L~(-1),鳞片叶为120 mg·L~(-1)。     

东亚唐棣增殖培养条件的优化

以东亚唐棣(Amelanchier asiatica)无菌试管苗为材料,研究了不同基本培养基、激素组合、蔗糖浓度以及琼脂浓度对东亚唐棣增殖的影响。结果表明:最为适合东亚唐棣增殖的培养基组合为MS+6-BA 1.00mg·L~(-1)+NAA 0.05mg·L~(-1)+IBA 0.10mg·L~(-1)+40g·L~(-1)蔗糖+8g·L~(-1)琼脂,增殖系数可达6.83,幼苗叶片生长舒展,苗高和茎的生长量也有了很大提高。试验结果将为东亚唐棣工厂化育苗提供技术指导。     

杂交兰的组织培养与快繁技术

以杂交兰的茎尖为外植体进行离体培养,探讨杂交兰的原球茎的诱导、增殖、分化、生根培养,以及练苗移栽等一系列技术措施。结果表明,原球茎诱导的适宜培养基为Hyponex No.1(花宝1号)+6-BA2.0 mg·L~(-1)+IBA 0.5 mg·L~(-1)+AC 2.0 g·L~(-1)+香蕉泥20 g·L~(-1)+土豆泥10 g·L~(-1);原球茎增殖的适宜培养基为花宝1号+6-BA 3.0 mg·L~(-1)+NAA0.1 mg·L~(-1)+AC 2.0 g·L~(-1)+香蕉泥20 g·L~(-1)+土豆泥10 g·L~(-1);原球茎分化的适宜培养基为1/2MS+6-BA 1.5 mg·L~(-1)+NAA0.5 mg·L~(-1)+AC 2.0 g·L~(-1)+香蕉泥20 g·L~(-1)+土豆泥10 g·L~(-1);生根培养基以1/2MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA1.5 mg·L~(-1)+AC 2.0 g·L~(-1)+香蕉泥20 g·L~(-1)+土豆泥10 g·L~(-1)为佳,移栽基质选用泥炭土∶珍珠岩3∶1成活率高。     

二次回归正交设计在灰楸离体培养中的应用

为建立灰楸离体繁殖体系,应用二次回归正交设计与SPSS软件分析,建立灰楸组培继代培养增殖系数、增殖芽长度、增殖芽数、愈伤组织横向膨大、愈伤组织纵向膨大、叶数,生根培养生根率、根长、发根数、发芽数、芽长等回归方程,通过对各方程进行模拟寻求,确定6-BA、IBA、NAA在继代与生根培养中的用量范围。结果表明:灰楸组培继代培养6-BA用量的最佳范围为1.343~1.356 mg·L~(-1),IBA用量在0.11~0.294 mg·L~(-1);一定质量浓度的6-BA在继代培养中起主要的诱导分化作用;IBA对诱导分化芽数有显著的回归关系,与其它指标无显著关系;分化芽叶数的多少与6-BA与IBA无显著关系。灰楸组培生根培养IBA用量的最佳范围为0.272~0.329 mg·L~(-1),NAA为0.027~0.033 mg·L~(-1);一定质量浓度的IBA主要促使根系与芽长生长,对生根率与发芽数无显著作用,NAA起着主要的诱导根系发生作用,与生根率、发芽数有显著的回归关系;生根苗叶数的多少与6-BA与IBA无显著关系;IBA用量在0.272~0.329 mg·L~(-1)、NAA在0.027~0.033 mg·L~(-1)范围内,灰楸组培生根率可达96%以上,可靠性为95%。灰楸离体培养适宜的继代培养基为DKW+6-BA 1.343~1.356 mg·L~(-1)+IBA 0.11~0.294 mg·L~(-1)+琼脂4.5 g·L~(-1)+蔗糖25 g·L~(-1)(p H=5.8);生根培养基为1/2MS+IBA 0.272~0.329 mg·L~(-1)+NAA 0.027~0.033mg·L~(-1)+琼脂5.0 g·L~(-1)+蔗糖10 g·L~(-1)(p H=5.8)。     

淡水砂梨离体快繁技术研究

为建立淡水砂梨离体培养体系,以淡水砂梨品系香水梨为试验材料,以MS为基本培养基,研究生长调节剂不同组合和浓度对腋芽诱导、增殖培养的影响,以及不同生长调节剂的种类和浓度对生根培养的影响。结果表明,香水梨腋芽诱导的最佳培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1),诱导率为71.7%;增殖最适宜的培养基配方为MS+6-BA 3.0mg·L~(-1)+NAA 0.20mg·L~(-1),增殖系数为3.2;生根培养基配方为1/2MS+IBA 0.3mg·L~(-1),香水梨生根率为63.3%。研究表明MS为基本培养基添加生长调节剂适于淡水砂梨的离体快繁。     

瓦松快繁体系的构建研究

以瓦松为研究材料, 系统地研究了丛生芽的诱导、增殖及生根培养等,探索瓦松快繁的最佳途径并构建其快繁体系,结果表明: 茎段接种于MS+10 mg·L-16\|BA+02 mg·L-1IBA+20 g·L-1蔗糖培养基上,茎段增殖倍数可达1169,叶片接种于MS+15 mg·L-16\|BA+01 mg·L-1IBA+30 g·L-1蔗糖培养基上,能产生很好的不定芽,其再生芽数达971。在1/2 MS+02 mg·L-1IBA+005 mg·L-1NAA培养基中,生根率达100%,平均每株能产生123条根,植株生长健壮。     

鲜食山楂新品种蒙山红组织培养初探

为获得适宜山楂蒙山红快速繁殖的最佳培养基组合,以山楂新品种蒙山红和大金星的当年生带芽茎段为外植体,设置8种培养基组合进行愈伤组织诱导和芽增殖培养,分析两个山楂品种的组织培养的最适培养条件。结果表明:蒙山红诱导愈伤组织的最适培养基是MS+KT 1.0mg·L-1+IBA 0.1mg·L-1,最适宜的芽诱导培养基是MS+KT 1.0mg·L-1+IBA 0.5mg·L-1。大金星诱导愈伤组织的最适培养基是MS+KT0.5mg·L-1+IBA 0.5mg·L-1,最适宜的芽诱导培养基是MS+KT 1.5mg·L-1+IBA 0.5mg·L-1。全部培养基均附加蔗糖30g·L-1,琼脂7g·L-1,pH5.8。     

火焰南天竹茎段离体培养再生体系的优化

  目的  进行离体培养关键因子优化，以满足火焰南天竹Nandina domestica ‘Firepower’的规模化生产。  方法  以火焰南天竹茎段为外植体，通过对影响不定芽诱导、增殖生长和生根的基本培养基、6-苄基腺嘌呤（6-BA）和萘乙酸（NAA）不同质量浓度配比、白砂糖质量浓度及pH值等关键因子的研究，优化火焰南天竹茎段离体培养再生体系。  结果  WPM+0.50 mg·L-1 6-BA+0.10 mg·L-1 NAA为火焰南天竹不定芽诱导的理想培养基，不定芽诱导率为93.8%，且生长健壮；WPM+0.75 mg·L-1 6-BA+0.10 mg·L-1 NAA为不定芽增殖培养基，增殖倍数3.3，新芽鲜绿色、生长良好；1/2WPM+0.50 mg·L-1 NAA+白砂糖30.0 g·L-1（pH 6.0）为生根培养基，生根率达95.0%。  结论  本研究建立的火焰南天竹的离体培养再生体系可为其大规模生产提供技术支撑。     

春石斛试管花芽分化与开花的影响因素

以春石斛(Dendrobium nobile‘Huoniao’)试管苗为试验材料,研究了植物生长调节剂种类、无机盐质量分数、培养条件及芽体营养生长状态对诱导试管内花芽分化的影响。结果表明:以MS为基本培养基,附加有1.0 mg·L-1PP333(多效唑)时,添加0.2 mg·L-1TDZ(噻苯隆)与0.1 mg·L-1NAA(萘乙酸),诱导试管开花较为有效;将基本培养基中P、K质量分数加倍,花芽分化率显著提高;低温恒温10℃或23℃/10℃(昼/夜)处理较常温恒温23℃条件下培养提前30 d开花,且花芽分化率有所增加;植株茎节数为2是其从营养生长向生殖生长转化的临界条件;植株茎粗对试管内成花数量影响显著,花芽数量随茎粗度增加而呈上升趋势。试验以茎节数为3个、茎粗为7 mm的试管苗,接种在改良1/2MS+TDZ0.2 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+PP3331.0 mg·L-1培养基上,恒温10℃条件下培养30 d后,转为恒温23℃条件下培养60 d花芽分化率最高,达56.92%,成花数量最多。     

文冠果成熟胚离体培养及细胞学研究

以文冠果成熟胚为外植体,进行了初代培养、继代培养和生根培养研究,结果表明:初代培养诱导文冠果成熟胚形成不定芽的适宜培养基是MS+2.0mg.L-16-BA+0.1mg.L-1NAA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,分化率可达94.7%;继代高生长的适宜培养基是MS+0.5mg.L-16-BA+0.5mg.L-1NAA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,培养50d后,苗高大于0.5cm芽数量平均达11.67株;生根培养的适宜培养基是WPM+1.0mg.L-1IBA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,生根率为70.30%,平均根数为3.57条。并通过石蜡切片技术,观察愈伤组织诱导、愈伤组织分化不定芽以及不定芽发育过程。     

恶霉灵在合欢离体快速繁殖中的应用

以合欢的子叶、下胚轴、根为外植体，接种于不同浓度恶霉灵（HMI）及其它不同激素配比的改良培养基上，观察恶霉灵对合欢离体快速繁殖的影响。研究结果表明，恶霉灵对以上三种外殖体无诱导愈伤组织的作用。在单独加有3mg/L HMI和加有3mg/L HMI BA(0.5mg/L） NAA（0.01mg/L）的MS培养基上能诱导愈伤组织芽的分化，并对离体单株有增殖壮苗作用，效果优于单加BA和KT。恶霉灵浓度为0.3mg/L时能诱导再生苗生根，且具有促进根毛产生的作用，NAA和IBA不能诱导根毛的产生。     

鳄梨组织培养繁殖体系优化研究

为满足市场需求,以鳄梨饱满茎段为外植体采用组织培养方法进行优质种苗繁育,对于该种的产业发展和应有具有重要意义。试验筛选了无菌株体系建立、诱导潜伏芽萌发、丛生芽继代增殖和生根培养较适培养基配方。结果表明：诱导鳄梨无菌株系建立较适培养基为WPM＋1.0 mg?L－16￣BA＋0.3 mg?L－1NAA＋0.5 mg?L－1ZT＋2％蔗糖＋0.2％活性炭＋0.65％琼脂;诱导潜伏芽萌发较适培养基为WPM＋2.0mg?L－16￣BA＋0.5mg?L－1NAA＋1.0 mg?L－1ZT＋2％蔗糖＋0.2％活性炭＋0.65％琼脂,诱导出芽率达到54％;丛生芽继代增殖培养较适培养基为WPM＋3.0 mg?L－16￣BA＋0.3 mg?L－1NAA＋1.0 mg?L－1ZT＋2％蔗糖＋0.2％活性炭＋0.65％琼脂,增殖率达到3.70;幼苗生根较适培养基为1/2WPM＋0.5 mg?L－1 IBA＋0.5 mg?L－1 NAA＋2％蔗糖＋0.2％活性炭＋0.65％琼脂,生根率达到90％。炼苗移栽60 d后成活率为96％。该试验获得的培养基配方,可培养出完整植株,短期内获得大量优质种苗。     

葡萄未成熟胚诱导体细胞胚发生和植株再生与遗传鉴定

以二倍体和四倍体葡萄杂交获得的未成熟合子胚为材料,诱导体细胞胚发生。采用的初生胚诱导培养基(SE培养基)为:NN69+1.80 mg.L-1NAA+0.4 mg.L-1水解酪蛋白+2 g.L-1活性炭+30 g.L-1蔗糖+6 g.L-1琼脂;次生胚诱导培养基分别为:3/4MS+0.35 mg.L-1IBA+30 g.L-1蔗糖+6 g.L-1琼脂(扩繁培养基)和MS+1.5 g.L-16-BA+0.2 g.L-1IBA+30 g.L-1蔗糖+6 g.L-1琼脂(胚状体萌发培养基)。结果表明:初生胚诱导率为11.11%和16.67%,体细胞胚在扩繁培养基上再生植株。利用流式细胞仪和SSR标记检测源自同一未成熟合子胚(胚珠)的不同株系的遗传稳定性,结果显示,所测植株均为三倍体,且都来自杂交所得的未成熟合子胚。本研究所建立的体细胞胚诱导方法及遗传稳定性检测技术,能够为植物材料保存、扩繁,转基因应用和研究植物发育及极性建成等提供途径。