应用放射免疫分析法进行奶牛早期妊娠诊断的研究

本试验应用放射免疫分析法测定了11头奶牛在配种当日至配种后31日乳汁孕酮含量,之后对123头配种后17、19、21、23和25天的乳汁孕酮含量进行测定。结果表明空怀牛和妊娠牛在配种后17—25天乳汁中孕酮含量有极明显差异(P<0.01),此差异可作为奶牛早期妊娠诊断的依据。根据123头奶牛分别于配种后17、19、21、23和25天5次采样测定孕酮含量的结果,确定以小于8ng/ml乳汁为不孕,大于11ng/ml乳汁为妊娠,其间为可疑。以此标准来判断奶牛妊娠与否,诊断妊娠的为74头,不孕为47头,可疑为2头。经配种后奶牛又出现发情及不再发情的母牛则在配种后4个月摸胎核实,总确诊率为91.8％,其中诊断为不孕牛的确诊率为100％,诊断妊娠的确诊率为89.2％。按配种后单次奶样测定结果诊断,配种后第23天诊断的准确性为最高,总确诊率为89.8％,其中诊断妊娠的确诊率为86.5％,诊断不孕的确诊率为100％。     

奶牛生殖激素的分析 .妊娠期间外周血浆和乳汁孕酮含量变化的比较及其在早期妊娠诊断上的应用

应用放射免疫分析法(RIA)测定了21头黑白花奶牛怀孕期间外周血浆和乳汁孕酮水平的变化和193头奶牛输精后21、24、28及56天奶桶混合乳的孕酮含量。结果表明,在妊娠期间,血浆和乳汁孕酮水平的变化呈高度正相关。分析193头母牛输精后21、24,28及56天的奶样查出。已孕和未孕母牛孕酮含量的临界值为6ng/ml;用这一数值作为诊断妊娠的标准。并以193头母牛的乳汁孕酮含量验证,其结果是输精后21、24及28天采样检查三次,诊断为妊娠的准确率为90.0％,未孕的准确率为95.0％.     

牛奶孕酮的酶免疫分析法及其临床应用

本试验用混合酸酐法合成孕酮-11-半琥珀酸-辣根过氧化物酶结合物(酶标物),以3,3′,5,5′-四甲基联苯胺作为酶底物,建立了一种快速简便的牛奶孕酮的固相微滴板酶免疫分析法。该法经方法学鉴定证明灵敏、可靠,适合于任何实验室和牧场应用。 采用这种方法测定101头奶牛配种期0～2天和配种后18～24天的乳汁孕酮含量,建立了牧场进行奶牛的发情检查和早期妊娠诊断的可行方案。有11头配种期乳汁孕酮含量皆大于3ng/ml,判未受孕,经配种后有无出现转发情及两个月摸胎核实,确诊率为100％。配种后第20～22天,乳汁孕酮含量皆大于3ng/ml者,为妊娠;连续两次小于3ng/ml者,为空怀;间或有一次小于3ng/ml者,为可疑;以这些为标准并结合配种期的结果进行判定,则诊断为妊娠和空怀的确诊率分别为92％和97％,可疑率为4％,总确诊率为90％。     

双峰驼妊娠早期外周血浆中孕酮和雌二醇含量的变化及妊娠诊断

本试验用放射免疫分析测定了妊娠早期母驼外周血浆中孕酮、17β—雌二醇的含量,并根据本试验的资料对应用血浆孕酮浓度进行早期妊娠诊断的方法作了分析.结果表明,母驼妊娠早期孕酮水平在配种后第4天开始升高,怀孕头一个月内的峰值为10.59±8.43ng/ml;配种当天17β—雌二醇的水平为12.11±4.44pg/ml,第2天降为8.39±8.92 pg/ml(n=8),但第4天又回升到配种当天的水平,这种现象在其它动物少见。根据配种后第16天的血浆孕酮水平进行妊娠诊断,检出妊娠的准确率达100%。判定标准为1.0ng/ml,即≤1.0ng/ml 者为未孕。>1.0ng/ml 者为怀孕。     

放射免疫分析法比较奶牛粪便和乳汁中的孕酮含量

利用放射免疫分析方法，以奶样为对照，测定了奶牛粪便中的孕酮，用９０％乙醇抽提粪便孕酮，回收率为（９５．２±０．５０）％，通过测定正常发情奶牛。配种后怀孕奶牛和卵巢机能性疾病奶牛粪样和奶样孕酮含量的变化，发现两趋势一致，有较好的相关性，而且通过粪样测得的发情周期天数与奶样完全一致（２０．０±１．４１）ｄ。     

放射免疫通信诊断奶牛子宫内膜炎的研究

应用放射免疫分析法对３０头正常奶牛和临床确诊有子宫内膜炎的５４头奶牛奶中孕酮含量变化的周期模式进行对比测定，发现正常奶牛奶中孕酮含量变化周期有规律，而患子宫内膜炎的奶牛奶中孕酮含量变化无规律，波动大，脉冲式或发情后孕酮跳跃式上升到最大值。根据这一特点，对５９７头奶牛测定奶中孕酮含量变化的周期模式，诊断出１４２头奶牛有子宫内膜炎。经临床复核，准确率达９８．６％。     

测定摩杂一代水牛毛中孕酮含量作早孕诊断的研究

以毛为样品,应用竞争性蛋白质结合分析法测定孕酮含量,进行摩杂一代水牛早孕诊断试验,结果表明:人工授精后14天以前,孕与未孕牛的毛孕酮含量差异不显著(P>0.05),16—18天差异显著(P<0.05),20—24天差异极显著(P<0.01)。据此,确定配种后24天的毛样判断妊娠与未妊娠的孕酮标准是:大于4.5毫微克/100毫克毛为妊酮,小于3.5毫微克/100毫克毛为未妊娠,介于两者之间为可疑。孕与未孕的诊断准确率分别为88.9％和100％。     

广西地区食蟹猴配种后主要生殖激素的变化

[目的]探讨广西地区笼养雌性食蟹猴配种后生殖激素的变化水平。[方法]采用放射免疫分析法（RIA）测定食蟹猴配种后血清雌二醇（E1）、孕酮（P）和催乳素（PRL）的水平变化。[结果]结果表明,在配种后1～60d孕酮的含量缓慢降低,第60天降到最低水平（0．22±0．06）ng／ml,其后缓慢上升。第105天出现一个大的峰值,为（1．15±0．12）ng／ml,峰值过后浓度呈下降趋势,整个测定时期的平均值为（0．66±0．08）ng／ml。雌二醇的含量除了在第75天有一个较大的峰值[（86．92±18．54）pg/ml]外一直处于一个稳定的水平,在第120天后呈逐渐上升的趋势,整个测定时期的平均值为（35．16±5．12）pg／ml。催乳素的含量在配种后1～90d稳步上升,第90天出现一个小的峰值,为（99．62±44．56）IU／ml。第105天后含量上升较快,催乳素在整个测定时期的平均值为（103．64±37．36）IU／ml。[结论]该研究为采用食蟹猴作为动物模型探讨不孕不育的病因和发病机理提供参考依据。     

特定电磁波对激发产后奶牛发情、配种效果及有关性腺激素变化的观察

 特定电磁波（TDP）辐射器，通过电热激发，可产生2-25μm红外光谱，其峰值为9μm，具有对生物体有益的特异生物效应，目前在中国已广泛地应用。奶牛产后乏情达3个月以上且无卵泡发育者，用特定电磁波（TDP）居髎穴区照射，照射组（30头）在照射的21天内16头发情，对照组（30头）在此期间仅1头发情，两者比较，差异极显著；经3个情期配种，照射组16头发情牛中15头妊娠（第一情期配种8头妊娠），对照组1头发情牛经3个情期配种没有妊娠，两者比较，差异极显著。用放射免疫方法测定经照射发情16头奶样中雌二醇（E#-2）和孕酮（P#-4）含量变化曲线与正常发情牛周期中两种性腺激素含量变化规律一致，对照组牛奶样中雌二醇（E#-2）和孕酮（P#-4）没有规律性变化。     

放射免疫分析法比较奶牛粪便和乳汁中的孕酮含量

利用放射免疫分析方法（ＲＩＡ）,以奶样为对照,测定了奶牛粪便中的孕酮（Ｐ４）．用９０％乙醇抽提粪便孕酮,回收率为（９５．２±０．５０）％．通过测定正常发情奶牛、配种后怀孕奶牛和卵巢机能性疾病奶牛粪样和奶样孕酮含量的变化,发现两者趋势一致,有较好的相关性（ｒ＝０．７９８４）,而且通过粪样测得的发情周期天数与奶样完全一致（２０．０±１．４１）ｄ．     

人工诱导泌乳后血浆及乳汁中孕酮含量的动态变化

用放射免疫分析方法测定了６头激素诱导泌乳的黑白花奶牛血浆和乳汁中孕酮的含量，结果表明，诱导泌乳后乳汁中孕酮含量较高，第１ｄ时平均为７．１５±２．７９ｎｇ／ｍＬ，第２ｄ迅速升高到１６．２１±３．４５ｎｇ／ｍＬ，以后随着用药次数的增多，孕酮含量略有升高，第３ｄ及第４ｄ时分别达到１７．６６±４．１３ｎｇ／ｍＬ和１７．７７±２．３１ｎｇ／ｍＬ，随后孕酮含量逐渐下降，第５ｄ及第７ｄ时分别为１４．８４±６．２７ｎｇ／ｍＬ和１０．７６±５．５０ｎｇ／ｍＬ，第９ｄ时为１０．５０±５．０９ｎｇ／ｍＬ，此后孕酮含量急剧下降，第１５ｄ时达到３．４８±１．７５ｎｇ／ｍＬ，之后波动于１～４ｎｇ／ｍＬ之间，在整个实验期间乳汁中孕酮的浓度平均为６．３６５±２．６４９ｎｇ／ｍＬ，且呈明显的下降趋势。血浆与乳汁中孕酮含量呈明显的正相     

Effects of Rumen Protected Methionine on Milk Yield and Milk Composition in Earlier Lactating Cow

A total of 12 mature healthy Holstein dairy cows of the nearly body weight （580±30） kg, milk yield （22.5±2.8） kg in the early stages of lactation were selected in this experiment. The cows were randomly divided into 2 groups, every group had 6 cows, every group had 6 repeats, and every repeat had 1 cow. Added 20 g protected methionine in earlier lactating cow food every day. The results showed that protected methionine increased milk yield by 10.83%, testing group milk yield was significantly different than that of control （P〈0.05）; protected methionine increased milk fat by 5.98%, testing group milk fat was significantly different than that of control （P〈0.05）; Milk protein increased by 2.15%, but bad insignificantly different （P〉0.05）; dry matter of milk had the tendency of decrease, but had insignificant difference （P〉0.05）.     

维生素AD3E针剂对围产期奶牛乳蛋白表达的影响

采用蛋白质组学方法,检测了产前注射维生素AD3E(V-AD3E)对围产期奶牛乳蛋白表达的影响.二维凝胶电泳分离了产后第1天和第21天乳蛋白组分,凝胶经染色、酶切、图像采集和斑点比对,与对照(不注射V-AD3E)组第1天乳蛋白图谱相比,注射组第1天乳蛋白图谱上有5个区域的蛋白表达上调,经高效液相色谱串联离子阱质谱对差异表达蛋白进行鉴定,主要为免疫球蛋白G(IgG)和白蛋白.产前注射V-AD3E上调了初乳中的IgG和白蛋白,不仅为饲喂初乳的犊牛提供了更好的免疫保护,而且提高了处于免疫抑制阶段母牛的抗病力.     

奶牛生殖激素分析 Ⅲ.发情周期外周血浆和乳汁中孕酮含量的变化

采用乳汁孕酮直接放射免疫分析法测定了10头黑白花奶牛外周血浆和乳汁孕酮在一个发情周期中的变化。奶牛在发情时,外周血浆孕酮值为0.21±0.03ng/ml,奶桶混合乳中的孕酮值为1.28±0.22ng/ml;在发情周期的第14天,血浆孕酮值升至6.51±0.74ng/ml,奶桶混合乳中的孕酮值升至14.19±1.29ng/ml。奶桶混合乳孕酮的含量为外周血浆孕酮含量的二倍,二者之间相关性和回归关系极显著(P<0.001)。     

奶牛初乳与常乳乳蛋白变化的比较蛋白质组学研究

为分析初乳与常乳乳蛋白的表达变化,揭示乳蛋白分泌及乳腺易感疾病的机理,采用二维凝胶电泳结合液相色谱串联质谱的方法分析了产后第1天、第7天和第21天牛乳中蛋白表达变化。结果发现,相对于第7天和第21天牛乳蛋白的表达丰度,第1天牛乳蛋白中有5个蛋白表达量增加;而第7天与第21天牛乳蛋白表达无变化。且第1天牛乳蛋白表达量增加的是具有免疫活性的免疫球蛋白M和G以及运输功能的白蛋白和转铁蛋白等。结果表明由初乳向常乳转换过程中,这些乳蛋白表达量的降低可能与乳腺易感乳房炎等疾病相关。     

奶牛泌乳性能与乳中尿素氮的相关性分析

选择90头中国荷斯坦奶牛作为试验对象,按照产奶量分为3组,研究奶牛泌乳性能与乳中尿素氮的关系。结果表明:高产奶牛乳中尿素氮含量高于中产奶牛与低产奶牛,但差异不显著,奶牛泌乳性能与乳中尿素氮存在弱正相关。     

蛋氨酸羟基类似物异丙酯对奶牛产奶性能和血清生化指标的影响

选择24头健康荷斯坦奶牛进行配对,随机分为两组,每组12头.对照组仅饲喂基础日粮,试验组在饲喂基础日粮的同时,从产前21 d开始在日粮中添加20 g·d-1蛋氨酸羟基类似物异丙酯(HMBi),产后添加量根据配方设定为30 g·d-1.结果表明:与对照组相比,试验组奶牛每天的产奶量提高了6.83 kg(P0.05),牛奶中的乳蛋白率升高了0.14个百分点(P0.05),体细胞数下降了26.80万个·m L-1(P0.01).产前14 d时,试验组奶牛血清中的球蛋白含量和尿素氮浓度升高,免疫球蛋白G(IgG)含量降低(P0.05);产后14 d时,试验组血清中的总胆固醇浓度降低(P0.01);产后70 d时,试验组奶牛血清中的总胆固醇浓度也降低(P0.05).结论:在日粮中添加HMBi可以提高奶牛的产奶量,改善血清生化指标,促进机体的脂代谢;同时提高牛奶的乳蛋白含量,有效降低体细胞数.     

奶水牛乳汁体细胞数与抗氧化指标的相关性分析

[目的]了解奶水牛乳汁体细胞计数（SCC）与抗氧化指标之间的相关性,为乳汁质量监控和奶水牛健康养殖提供科学依据.[方法]随机选取南宁某牛场奶水牛139头,同步采集乳样与血样,乳汁SCC采用FOSS体细胞仪测定,血浆和乳清的总抗氧化能力（TAC）采用FRAP法（血浆铁还原力法）测定,丙二醛（MDA）含量采用TBA法（硫酸巴比妥法）测定.[结果]被检的139头奶水牛中,乳汁SCC≥50.00万/mL（隐性乳房炎诊断标准）的样本占被检总数的12.23％,乳汁SCC＜50.00万/mL的样本占被检总数的87.77％;奶水牛血浆和乳清的TAC分别为2.44±1.04和3.78±1.68 U/mL,MDA含量分别为2.07±0.48和1.55±0.52 nmol/mL,其差异均达极显著水平（P＜0.01）.乳清TAC随乳汁SCC的升高而呈下降趋势,二者间呈显著负相关（r=-0.168,P＜0.05）;血浆MDA与乳清MDA间呈显著正相关（r=0.189,P＜0.05）,而血浆MDA与血浆TAC（r=0.391）、乳清MDA与血浆TAC（r=0.315）间呈极显著正相关（P＜0.01）.[结论]乳清TAC可作为检测奶水牛乳房健康及其乳汁质量的备选指标.     

不同水平DDGS对奶牛乳产量和乳成分的影响

选择18头荷斯坦奶牛,设置3个处理,每个处理6个重复,每个重复1头奶牛。分别在饲料中添加15％（Ⅰ组）、25％（Ⅱ组）和35％（Ⅲ组）的DDGS,研究不同添加水平的DDGS对奶牛产奶量和乳成分的影响。试验结果表明：①试验Ⅱ组平均产奶量为10．99kg·d^-1,比Ⅰ组提高了4．67％,差异不显著（P〉0．05）;比Ⅲ组提高了9．03％,差异显著（P〈0．05）;②不同处理间的乳脂率差异不显著（P〉0．05）;对于乳糖和乳蛋白含量,Ⅱ组与Ⅰ组和Ⅲ组差异不显著（P〉0．05）;对于乳干物质,试验第15天时,Ⅱ组比Ⅰ组提高了4．39％（P〈0．05）,比Ⅲ组提高了1．19％（P〉0．05）。根据上述生产性能指标综合评定,建议奶牛配合饲料中DDGS适宜添加量为25％。