玻璃化保护液处理下高粱离体花粉的活力解析

为了确立可显著提高高粱花粉体外存活的水性环境条件,设计了离体高粱花粉所处的干燥(CK)、磷酸盐溶液(PBS)、玻璃化保护液1(PVS1)、玻璃化保护液2(PVS2)、玻璃化保护液3(PVS3)等5种环境;采用TTC法,对4种水性溶液体系中浸渍处理15 min后的高粱花粉和干花粉的存活率进行了比较分析。结果显示,各状态下离体高粱花粉存活率大小依次为PBSPVS3PVS2PVS1CK;与PBS中的花粉存活率相比,PVS3对花粉存活率提高不显著,PVS1和PVS2可显著提高花粉存活率。表明水性环境对离体花粉的活力有显著的损伤效果;3种保护液中的甘油、乙二醇、二甲基亚砜、蔗糖等对高粱离体花粉活力有保护作用,其中,含有这4种成分的PVS1对水性环境高粱离体花粉的活力保护效果最好。研究结果有望为水性环境下高粱花粉生殖细胞基因的诱变提供技术支撑。     

茶树花粉的离体萌发研究

选用无性系茶树品种龙井长叶花粉为材料,通过离体条件下花粉的萌发来探讨茶树离体花粉萌发的最适条件及最适保存方法.取蕾白期茶树花苞,干燥15 h后取花粉,以30 mmol/L的MES缓冲液(pH值5.5)为母液配制0.01% H3BO4+0.03% Ca(NO3)2+10% 蔗糖+15% 聚乙二醇4000(PEG-4000)溶液(pH值6.5),作为基本培养基,统计不同组分的浓度、不同pH值和不同碳源对25 ℃处理1 h的花粉萌发率的影响.结果表明,茶树花粉萌发和花粉管生长的最适液体培养基是:0.01% H3BO4+0.05% Ca(NO3)2+5% PEG-4000+5%麦芽糖,pH值在5.0~6.0之间(30 mmol/L MES).在此条件下的萌发率为82.24%,花粉管生长长度为492 μm.     

系列水性环境体系中玉米离体花粉的活力解析

为了解决玉米离体花粉在水性环境中迅速胀破死亡的问题,研究设计了包括磷酸盐缓冲液(PBS)与3种保护液体系(PSS1,PSS2,PSS3)的系列水性环境,将定量提取的自交系成熟玉米花粉分别浸没在上述水性环境中进行常温处理,经TTC染色后解析受处理花粉的存活率,使用光学显微镜观察受处理玉米花粉的存活状态,最终确定保持受处理花粉活力的最优PSS。结果显示,各水性环境体系保持受处理玉米花粉活力的能力大小顺序为PSS1PSS2PSS3PBS;与PBS相比,PSS3对受处理花粉存活率的提高不显著,而PSS1可显著提高受处理花粉的存活率。结果表明,玉米离体花粉的活力在水性环境中显著降低、损伤严重,PSS中的二甲基亚砜、甘油、乙二醇、蔗糖对受处理玉米花粉有不同的保护效果,经PSS1处理后保持活力的玉米花粉具备正常的受精结籽能力。研究可为水性环境下玉米离体花粉生殖细胞化学诱变处理技术的开发奠定基础。     

金太阳杏花粉量及花粉活力测定研究

[目的]比较金太阳杏花粉量及花粉活力的测定方法。[方法]采摘金太阳杏各单株已达气球期、饱满、正常、未开裂的花蕾,收集花粉,通过染色法、离体萌发法测定花粉活力,研究不同浓度的蔗糖、硼酸对花粉萌发花粉管的影响,并测定每枚花药花粉量。[结果]通过2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定花粉活力为11.50%。对于离体萌发法,当培养温度为25℃、培养基p H为6.5、蔗糖浓度为10%、硼酸浓度为25μg/m L时花粉萌发花粉管效果最好,此时花粉活力为27.00%。金太阳杏花粉量测定用单枚花药花粉量来衡量,测得单枚花药花粉量平均为1 303。[结论]试验结果为提高育种效率提供了理论依据。     

水杨酸对花粉管伸长和花器官衰老的影响

[目的]研究水杨酸对花粉管伸长和花器官衰老的影响。[方法]以鸭梨花粉和花序为试材,研究水杨酸对花粉萌发、花粉管伸长和对鸭梨离体花序花期的影响。[结果]0.002、0.02 mmol/LSA对花粉萌发有促进作用,而0.2 mmol/LSA处理的花粉萌发率明显低于对照;0.002 mmol/LSA处理其花粉管显著高于对照,起到了促进花粉管伸长的作用,0.2 mmol/L SA则抑制了花粉管伸长;0.002mmol/LSA延长了鸭梨离体花序的花期,而0.02、0.2 mmol/LSA处理促进花的衰老。[结论]不同浓度的水杨酸对花粉管伸长和花器官衰老存在不同影响。     

大红火龙果花粉离体萌发条件优化及花粉活力测定方法的筛选

为大红火龙果人工授粉及其丰产栽培、杂交育种及果实品质改良提供参考，采用单因素试验，研究不同培养基组分对花粉萌发的影响，并运用离体萌发法测定花粉萌发率；比较TTC染色法、醋酸洋红染色法、亚历山大红染色法和I2-KI染色法测定大红火龙果的花粉活力，筛选准确测定大红火龙果花粉活力的最佳方法。结果表明：大红火龙果花粉离体萌发最佳培养基组分为Ca(NO3)2﹒4H2O 0.3 g/L + MgSO4﹒7H2O 1.2 g/L + KNO3 0.1 g/L + 15% 蔗糖 + 700 mg/L硼酸 + 1% 琼脂，pH为6.7，此条件下花粉萌发率高，为（43.9 ± 6.27）%，且利于花粉管伸长。醋酸洋红法测定的大红火龙果花粉活力为（37.67 ± 4.18）%，与离体萌发法测定的萌发率无显著差异，为花粉活力的最佳测定方法。     

几种植物生长调节物质对桃花粉萌发效应的影响

采用花粉离体液体培养法研究了6种植物生长调节物质对毛桃(Amygdalus persica Linn.var.scleropersica(Reich.)YüetLu)花粉萌发的影响。结果表明,较低浓度的GA3能促进毛桃花粉的萌发,超过一定浓度时起抑制作用,并且随浓度的增大抑制作用增强,而其最适浓度是100 mg/L;NAA对毛桃花粉萌发呈现抑制作用,随着浓度的增大,抑制作用增强;ABA对毛桃花粉萌发的抑制作用也是随着浓度的增大而增强;6-BA促进花粉萌发的浓度范围是12.5～25 mg/L,而其最适浓度为12.5 mg/L,超过25mg/L时,抑制作用逐渐增强;TRIA促进毛桃花粉萌发的最适浓度为1 mg/L,超过该浓度花粉萌发率呈下降趋势;水杨酸促进萌发浓度为0.002～0.008 mmol/L,而最适浓度为0.002 mmol/L,当浓度超过该范围时,抑制作用增强。     

黄百香果花粉离体培养基筛选及贮藏试验

【目的】分析不同配方培养基及贮藏条件对大果型黄百香果花粉离体萌发效果的影响,为大果型黄百香果花粉活力鉴定、人工辅助授粉及杂交育种提供理论依据。【方法】采集花瓣刚好完全展开大果型黄百香果花朵的花粉,采用L_(25)(5~4)正交试验设计,筛选适宜其离体培养的蔗糖、硼酸、硝酸钙浓度及pH;利用最适宜花粉离体培养基,开展花朵不同采样时间、花粉离体贮藏湿度和温度对花粉活力影响试验,确定适宜大果型黄百香果花粉的离体贮藏条件。【结果】正交试验分析结果表明,影响大果型黄百香果花粉萌发率的因素排序为硝酸钙蔗糖硼酸pH,确定花粉离体萌发的最适培养基为100.00 g/L蔗糖+0.02 g/L硼酸+0.40 g/L硝酸钙,培养基pH 5.0。在最适培养基中,大果型黄百香果花粉的萌发率为85.55%;于11:30—17:30采集大果型黄百香果花粉的萌发率均在80.00%以上,其中,开花后3 h(16:30)花粉的活力最强,显著高于除13:30和15:30外的其他时间采集花粉的萌发率(P0.05,下同)。花粉贮藏试验结果表明,平铺在硫磺纸上自然风干处理3～48 h的花粉萌发率均显著高于同时间段密封于离心管中常温贮藏和平铺在硫磺纸上置于干燥器中贮藏处理,其中在硫磺纸上自然风干贮藏48 h的花粉萌发率仍达34.28%;自然风干5 h后密封于离心管中4℃贮藏24 h的花粉萌发率为61.49%,显著高于自然风干5 h后密封于离心管中-20℃贮藏24 h的花粉萌发率(55.22%)。【结论】大果型黄百香果花粉离体萌发最适培养基为100.00 g/L蔗糖+0.02 g/L硼酸+0.40 g/L硝酸钙及pH 5.0;当天采集花朵的花粉自然风干5 h后密封于离心管4℃贮藏其萌发效果最佳。     

西葫芦花粉生活力测定方法及最佳授粉时间的研究

研究了西葫芦新鲜花粉的生活力测定方法、离体培养条件、短期贮藏方法以及不同时间的花粉生活力强度。结果显示:TTC染色法的测定值与离体培养法的测定结果相近且差异不显著,是一种快捷、准确测定西葫芦花粉生活力的染色方法。培养基15%蔗糖+100mg/L硼酸+300mg/LCa(NO3)2.4H2O+200mg/L MgSO4.7H2O+100mg/L KNO3,适宜西葫芦花粉离体萌发,花粉离体萌发率最高,为60.602%,0℃黑暗干燥或4℃黑暗干燥贮藏花粉,生活力保持最好,均在70.000%以上,且散粉情况较好;人工授粉最好在上午10:00之前完成,最佳授粉时间为6:00-8:00,此时种子的结实率最高。     

CaCl2和GA3对盐胁迫下紫藤花粉萌发的影响

[目的]为探明缓解盐胁迫抑制紫藤花粉萌发的方法.[方法]采用花粉人工培养法,研究了不同浓度的CaCl2和GA3对盐胁迫下紫藤（Wisteria sinensis （Sims） Sweet）花粉萌发的影响.[结果]20 mmol/L NaCl胁迫对紫藤花粉活力和花粉管长度均显著降低（P＜0.01）,且花粉管出现分枝.1.5～ 12.0 mmol/L CaCl2和25 ～ 150 mmol/L GA3对盐胁迫下紫藤花粉萌发率和花粉管长均有一定的促进作用,而且均表现出随浓度的增加先增后降的趋势.[结论] CaCl2和GA3的最适处理浓度分别为2.0和100 mmol/L.     

野罂粟和秃疮花花粉生活力的测定

为野罂粟和秃疮花的杂交育种研究提供参考依据,以野罂粟(Papaver nudicarule)花粉和秃疮花(Dicranostigma leptopodum)花粉为试验材料,采用离体萌发法测定2种花粉的生活力,从而研究不同浓度的蔗糖、硼酸、氯化钙培养液对野罂粟和秃疮花花粉萌发率的影响。结果表明:离体萌发法测定野罂粟花粉生活力的最佳观测时间为5h,最佳培养液组合为蔗糖80g/L+硼酸40mg/L+氯化钙40mg/L,该培养组合萌发率为33.7%;离体萌发法测定秃疮花花粉生活力的最佳观测时间为5h,最佳培养液组合为蔗糖70g/L+硼酸30mg/L+氯化钙30mg/L,该培养组合萌发率为33.1%。     

高温胁迫后的棉花花粉活力测定方法

以杂交棉南抗3号的父本南农R101为材料,利用人工气候室,设置日温/夜温分别为40℃/34℃(高温胁迫处理)和30℃/24℃(对照),连续3 d处理初花期的棉花植株,分别利用花粉原位萌发法、离体萌发法、联苯胺-甲萘酚染色法、I2-KI染色法等4种方法检测高温胁迫处理后的棉花花粉活力。结果表明,花粉原位萌发法、离体萌发法、联苯胺-甲萘酚染色法、I2-KI染色法等4种方法均能有效测定30℃/24℃处理的花粉活力,测定的花粉活力均在80%以上。与离体萌发法相比,联苯胺-甲萘酚染色法、I2-KI染色法测定经过高温胁迫处理后的花粉活力值偏高。花粉原位萌发法能最真实、自然反映花粉在柱头上的萌发情况,但是不能统计花粉萌发率。花粉离体萌发法简便、有效,最适用于检测经过高温胁迫处理后的花粉活力。     

外源多胺对不同苹果品种自花授粉花粉管生长的影响

[目的]研究外源多胺处理苹果花柱后自花授粉花粉管生长情况,获得能提高不同苹果品种自交坐果率的外源多胺适宜浓度,为提高苹果自交亲和率提供科学依据.[方法]以红奥、早红香、嘎拉、斗南、富士、金冠和夏光7个苹果品种的花柱和花粉为试验材料,用花柱半离体方法研究外源多胺对苹果自花授粉花粉管生长的影响.[结果]适宜浓度的外源Spm、Spd和Put处理自交不亲和苹果花柱后,均能提高花柱伸出花粉管比率和每根花柱管伸出花粉管数,其中红奥苹果花柱最适宜的Spm浓度为0.100 mmol/L,其他自交不亲和品种均为0.005 mmol/L;除金冠和夏光苹果适宜的Put浓度为0.25 mmol/L外,其他自交不亲和品种为0.01 mmol/L;适宜红奥和富士苹果的Spd浓度为0.01 mmol/L,适宜斗南、金冠和嘎拉苹果的Spd浓度为0.50 mmol/L,适宜夏光苹果的Spd浓度为0.25 mmol/L.[结论]一定浓度的外源多胺能够提高自交不亲和苹果品种的自交坐果率.     

盐胁迫下高粱幼苗生长及其对耐盐性评价的影响

以糖度及其它农艺性状差异较大的6个高粱株系为材料,研究不同浓度盐胁迫处理7天和14天后高粱幼苗的苗高、鲜重、饱和鲜重及干重的变化以及对苗期耐盐性鉴定评价的影响。结果表明:随着盐浓度的升高以及胁迫时间的延长幼苗生长受到的抑制增大,苗高、鲜重、饱和鲜重和干重均随盐浓度的升高而降低。在0、50、100 mmol/L NaCl浓度下,处理7天和14天的苗高差异显著;当NaCl浓度大于150 mmol/L时,各浓度间苗高均没有显著差异。处理14天后,50 mmol/L和100 mmol/L,150 mmol/L和200 mmol/L两个浓度间的苗鲜重、饱和鲜重及干重无显著差异,其它各浓度间差异显著。在4个盐浓度中,苗高、鲜重、饱和鲜重和干重的相关性均达显著性水平,但是仅在100 mmol/L和150 mmol/L浓度下,耐盐级别与盐害指数呈显著正相关。     

培养条件对早酥梨花粉萌发和生长的影响

运用正交设计法研究了蔗糖浓度(A)、硼酸浓度(B)、硝酸钙浓度(C)、温度(D)对早酥梨花粉离体萌发和生长的影响。结果表明,影响早酥梨花粉萌发率和花粉管生长的主次顺序均为:BADC。最适宜早酥梨花粉离体萌发和生长的培养条件为:蔗糖1.5 g/L、硼酸0.2 g/L、硝酸钙0.2 g/L、温度20℃。     

芍药花粉活力测定方法的研究

鉴定花粉活力是杂交育种的重要环节,本试验研究了芍药花粉离体萌发的条件,并利用8个芍药品种,建立了新鲜花粉活力快速测定方法.试验表明,芍药花粉离体萌发的适宜条件为50mg/L硼酸、100g/L蔗糖、pH值7.0～7.5、25℃下培养6h,在此条件下可获得较高的萌发率.与TTC法和醋酸洋红法相比,I2-KI染色法的测定结果与离体培养萌发法的测定结果相近,并相关性显著,I2-K(I染色法适于芍药新鲜花粉活力较快捷、简便、准确的测定.     

Ca-（2＋）和水杨酸对华北落叶松种子萌发的影响

通过CaCl2和SA浸种,研究Ca2＋和SA对华北落叶松种子萌发的影响。结果表明当Ca^2＋浓度为10mmol/L时,提高了华北落叶松种子的发芽率和发芽势;浓度为5mmol/L、50mmol/L和100mmol/L时,抑制了发芽率和发芽势;不同浓度的Ca^2＋处理后,种子发芽指数和活力指数均比对照降低。浓度为0.5mmol/L的SA处理后,提高了种子的发芽率和发芽势;当SA浓度增至2mmol/L和5mmol/L时发芽率、发芽势比对照降低。不同浓度SA处理下均降低了种子的发芽指数和活力指数。10mmol/L的Ca^2＋和0.5mmol/L的SA促进了华北落叶松种子的萌发。     

糖、硼、钙对思茅松花粉离体萌发及花粉管生长的影响

【目的】开展思茅松花粉活力研究,为思茅松杂交育种提供技术保障。【方法】以思茅松花粉为研究对象,研究了蔗糖、硼酸和氯化钙单因子及正交试验对思茅松花粉萌发和花粉管生长的影响。【结果】培养基内蔗糖、硼酸和氯化钙在一定质量浓度范围内,对花粉萌发及花粉管生长起促进作用,花粉生活力测定最适蔗糖、硼酸和氯化钙用量分别为10%、100 mg/L和100 mg/L;正交试验中蔗糖对思茅松花粉萌发和花粉管生长有显著影响,最佳配方组合为10%蔗糖+30 mg/L硼酸+100 mg/L氯化钙。【结论】获得了适宜思茅松花粉活力检测的离体培养基。     

Na+、K+、葡萄糖及甘油对高体雅罗鱼精子活力的影响

[目的]明确水体介质参数与高体雅罗鱼精子活力的关系,解决高体雅罗鱼人工繁殖受精率低及鱼苗鱼种生产效率低的技术难题.[方法]以快速运动时间(FT)、寿命时间(LT)和精子激活率为评价指标,探究Na+、K+、葡萄糖及甘油对高体雅罗鱼精子活力的影响.[结果]Na+浓度为135 mmol/L时高体雅罗鱼精子活力最强,FT为71 s,LT为1020 s,精子激活率为95%;K+浓度为5 mmol/L时高体雅罗鱼精子活力最强,FT为52 s,LT为280 s,精子激活率为80%;葡萄糖浓度为180 mmol/L时高体雅罗鱼精子活力最强,FT为78 s,LT为1200 s,精子激活率为95%;甘油浓度为180 mmol/L时高体雅罗鱼精子活力最强,FT为79 s,LT为1380 s,精子激活率为90%.[结论]适宜浓度的Na+、K+、葡萄糖及甘油具有单独提高高体雅罗鱼精子活力的作用,但高浓度Na+、K+、葡萄糖及甘油对高体雅罗鱼精子的激活率呈明显抑制作用.实际生产中,可选择135 mmol/L Na+、5 mmol/L K+、180 mmol/L葡萄糖或180 mmol/L甘油作为高体雅罗鱼精子的激活液,提高其人工繁殖生产效率.     

两种黑牡丹花粉萌发特性研究

研究对比了不同蔗糖浓度、硼酸浓度对黑牡丹"黑花魁"、"夜光杯"花粉离体萌发的影响,筛选出各自较为理想的花粉萌发培养基配方。牡丹不同品种花粉离体萌发所需的理想培养基配方并不一致,"黑花魁"的合适培养基为硼酸0.04 g/L+蔗糖50 g/L,"夜光杯"较为理想的培养基为硼酸0.08 g/L+蔗糖50 g/L。