大鼠皮肤成纤维细胞分离培养方法的研究

目的:对大鼠皮肤成纤维细胞进行分离培养并观察形态。方法:组织块培养法分离大鼠成纤维细胞并进行传代培养并通过细胞形态学观察和HE染色对其细胞进行鉴定。结果体外培养的成纤维细胞呈梭形或多角形,24小时贴壁,通过HE染色,细胞核被染成蓝紫色,胞浆被染成粉红色。结论:该方法成功培养了大鼠背部皮肤的成纤维细胞,所获得的大鼠背部皮肤成纤维细胞可在体外稳定培养,为一些组织来源较少的成纤维细胞培养提供一种有效且可行的实验方法。     

艾纳香总黄酮对大鼠皮肤创伤愈合的作用及机制研究

探讨艾纳香总黄酮对大鼠皮肤创伤愈合的影响及其作用机制。取大鼠150只,随机分为模型组、京万红组和艾纳香总黄酮高、中、低组,建立大鼠背部双侧圆形创伤模型,连续给药10 d,测定创面面积,计算愈合率;于术后的1、3、5、7、10 d检测创缘组织IL-1、TNF-α表达量并切取创伤边缘皮肤全层,制片,HE染色后镜下观察创面组织形态学的改变。结果表明:艾纳香总黄酮随药物剂量的增加而提高创面愈合百分率,缩短愈合时间,创伤早期增强创面IL-1、TNF-α的表达。艾纳香总黄酮促进大鼠皮肤创伤的愈合机制之一可能是增强创伤早期炎症因子的分泌,从而促进创面的修复愈合。     

林蛙皮多肽对大鼠皮肤激光损伤的修复作用

拟检测林蛙皮多肽对大鼠皮肤激光损伤的修复作用及初步探索其作用途径。用激光照射大鼠背部皮肤,采用不同浓度林蛙皮多肽处理创面,观察其形态学变化,统计创面愈合率;检测Flg(参与表皮屏障功能建立的重要蛋白质之一)和Krt-14 mRNA(参与形成上皮细胞的细胞骨架)的差异。结果表明:第3、6天,低浓度(10 mg/m L)林蛙皮多肽作用组大鼠激光损伤皮肤愈合率显著高于阴性对照组(P0.05),第6天,低浓度林蛙多肽作用组大鼠创伤皮肤中Flg的表达量是阴性对照组的1.908倍(P0.000 1),Krt-14的表达量是阴性对照组的1.453倍(P0.000 1)。这表明10 mg/m L林蛙皮多肽对大鼠激光损伤皮肤有修复作用,可能是通过促进损伤细胞中Flg和Krt-14 mRNA表达量的增加而发挥修复作用的。     

林蛙皮多肽凝胶制剂对兔皮肤损伤的修复作用

林蛙皮多肽是从林蛙皮中提取出的活性多肽,含有多种氨基酸和细胞因子,对皮肤修复具有重要作用,但其水溶液不利于临床使用。试验拟将提纯的林蛙皮多肽与其他皮肤调理剂制备成凝胶制剂并通过建立兔背部皮肤创伤模型来探究林蛙皮多肽凝胶制剂在兔皮肤创伤愈合中的作用。通过观察伤口红肿、出血、渗出和结痂,计算创面愈合,以及通过病理组织学变化评估林蛙皮多肽凝胶制剂的作用。结果表明:林蛙皮多肽凝胶制剂减少炎症反应,促进兔皮肤创伤愈合,提高肉芽组织中新生血管密度和成纤维细胞数量。     

大鲵皮肤药膏和大鲵黏液药膏烫伤药理试验研究

建立了SD大鼠背部深Ⅱ度烫伤模型,研究大鲵皮肤药膏和大鲵黏液药膏对大鼠皮肤烫伤的治疗作用.结果表明,大鲵皮肤药膏、大鲵黏液药膏能明显缩短烫伤后大鼠创面愈合时间;创面愈合速度较美宝湿润烧伤膏组快,并能使创面面积明显缩小;显微镜下观察真皮内皮肤附件结构完整,未见水肿及炎性细胞浸润.大鲵皮肤药膏、大鲵黏液药膏具有促进实验大鼠烫伤创面愈合的作用.     

重组人酸性成纤维细胞生长因子促进跟骨骨折术后创面愈合15例临床分析

目的探讨重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)促进跟骨骨折术后切口创面愈合的疗效。方法选取30例(33足)跟骨关节内骨折术后发生切口愈合不良患者,随机分为实验组和对照组,实验组清除创面内分泌物及坏死组织,采用rhaFGF喷涂和纱布覆盖;对照组清除创面内分泌物及坏死组织,采用生理盐水喷涂和纱布覆盖,观察两组创面愈合速度、质量。结果实验组与对照组比较,创面肉芽生长状况更佳,愈合时间更快,差异均有统计学意义(P0.05)。结论 rhaFGF能促进跟骨骨折术后创面皮肤生长,有效缩短愈合时间,提高愈合质量。     

有氧运动对大鼠创面愈合及血清TNF-a、IL-1β及TGF←β1的影响

目的:研究有氧运动干预对大鼠创面愈合的影响及免疫炎症方面的可能机制,为运动在创面愈合中的应用提供参考。方法:SPF级8周龄健康SD大鼠40只随机分为健康安静组(A组)、创伤安静组(B组)、伤后运动组(C组)、伤前长期运动及伤后运动组(D组),雌雄各半。切除背部皮肤进行创伤造模。D组伤前有氧运动锻炼4周,C、D组伤后给予有氧运动干预。伤后第3、10、17天断尾取血备血清,ELISA法测血清IL-1β、TNF-α、TGF-β1,同时观察创面愈合情况。结果:两种方式的运动干预使皮肤创面愈合加快2~3d;伤后大鼠血清TNF-a和IL-1β含量明显上升(P0.05),C、D组低于B组(P0.05),并随愈合进展逐步下调(P0.05),而C、D组血清TGF-β1整体低于B组(P0.05)。结论:有氧运动可能通过改善创伤机体免疫炎症反应及多个细胞因子的平衡来促进创面愈合。     

脱细胞羊膜与小肠黏膜下层对大鼠皮肤缺损修复中表皮干细胞的影响

目的 观察脱细胞羊膜(HAM)与小肠黏膜下层(SIS)促进大鼠皮肤缺损修复中表皮干细胞的作用.方法 SD大鼠24只,在两侧背部各做1个直径为1.8 cm圆形全层皮肤缺损.创面随机分为A组、B组和C组.A组HAM覆盖,B组SIS覆盖,C组纱布覆盖.在2周时处死动物取材,HE染色观察皮肤缺损修复情况.免疫组织化学染色检测角...     

复方ANBP对小鼠创面组织学变化的实验研究

目的 观察中药复方ANBP[由仙鹤草（Agrimonia Eupatoria,A）、藕节（Nelumbo Nucifera Gaertn,N）、乳香（Boswellia Carteri,B）和蒲黄（Pollen Typhae Angustifoliae,P）组成]对全层皮肤缺损小鼠创面愈合的影响,初步探讨复方ANBP对小鼠皮肤创面愈合的治疗机制。方法 将48只C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为空白对照组、ANBP组,每组24只。采用全层打孔器制备小鼠背部全层皮肤缺损模型,每组再随机分为6 h、3 d、7 d、14 d 4个时间点。造模后空白对照组不做任何处理,ANBP组创面被覆复方ANBP粉末。通过肉眼和HE染色观察创面愈合情况并计算创面愈合率,对数据进行统计学分析。结果 （1）造模后3 d、7 d和14 d,与空白对照组相比,ANBP组创伤愈合率明显增加,差异具有统计学意义（P<0.05）;（2）HE染色结果显示ANBP组表皮舌长度增加、均匀平整,肉芽组织丰富。结论 复方ANBP可以明显改善小鼠创面情况,加快小鼠背部皮肤创面愈合速度,提高愈合质量。     

成纤维细胞生长因子在烧伤治疗中的作用

成纤维细胞生长因子在烧伤治疗中的作用黄广恩，程怀正，黄宇伦，陈娟，王谨（湛江中心人民医院烧伤整形外科，湛江５２４０３７）生长因子与创面愈合的关系，已引起国内外学者的密切关注［１］。近年来，动物实验研究表明，成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）能促进大鼠烧伤...     

肤痔清软膏对糖尿病大鼠皮肤溃疡愈合速度的影响

目的观察苗药肤痔清软膏(STZ)对糖尿病大鼠皮肤溃疡愈合速度的影响。方法将SD大鼠右前肢皮下埋植磁片并腹腔注射STZ,后于右前肢添加外源磁片压迫血液循环,造成糖尿病皮肤溃疡模型。按随机数字表法将30只大鼠模型随机分成肤痔清软膏组、凡士林组、空白组。肤痔清软膏组外用肤痔清软膏;凡士林组外涂凡士林,每天换药1次,连续7 d;空白组不施加任何治疗措施,观测其创面愈合时间。结果肤痔清软膏组在糖尿病溃疡创面的愈合速度上与空白组、凡士林组在第3、5、7天比较均具有统计学意义(P<0.05)。结论肤痔清软膏明显缩短糖尿病皮肤溃疡的愈合时间。 更多还原     

玉米幼芽提取物对小鼠皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响

分离培养小鼠皮肤成纤维细胞,用2种富含腺嘌呤类衍生物的玉米幼芽提取物(20 mg/L)提前保护细胞后,体外构建H2O2急性氧化损伤细胞模型,应用RT-PCR对小鼠皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达进行半定量检测。结果表明,损伤对照组(Ⅱ组)小鼠皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达量分别为空白对照组(I组)的24%(P<0.01)和20%(P<0.01),而药物保护组(Ⅲ组、Ⅳ组)小鼠皮肤成纤维细胞Ⅰ型前胶原mRNA的表达量均高于损伤对照组,分别是损伤对照组的3.5倍(P<0.01)和1.8倍,Ⅲ型前胶原mRNA的表达量也均高于损伤对照组,分别是损伤对照组的4.6倍(P<0.01)和3倍(P<0.01)。说明在H2O2致小鼠皮肤成纤维细胞急性氧化损伤过程中,这2种玉米幼芽提取物能够保护Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达,且0501提取物对小鼠皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原表达的保护作用优于0502提取物。     

小鼠皮肤成纤维细胞与早期胚胎共生体系的构建

【目的】构建小鼠早期胚胎与皮肤成纤维细胞共生的微环境体系。【方法】分离培养EGFP纯合阳性成年ICR小鼠皮肤成纤维细胞。取激素超排合笼后2.5 d小鼠8-细胞胚胎,通过显微操作系统将4~6个EGFP阳性小鼠皮肤成纤维细胞注射到小鼠早期8-细胞胚胎中,转移发育到囊胚阶段的共生胚胎至小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上,在小鼠胚胎干细胞分离培养条件下进行培养。【结果】EGFP阳性小鼠成纤维细胞注射到小鼠胚胎后,荧光显微镜下显示,EGFP阳性小鼠成纤维细胞分布到小鼠囊胚组成细胞中,参与小鼠囊胚组成。在发育到囊胚的共生胚胎中,EGFP阳性小鼠成纤维细胞分布到小鼠囊胚细胞中的比例为93.73%(269/287)。在小鼠胚胎干细胞的分离培养条件下,2.60%(7/269)共生胚胎中EGFP阳性小鼠成纤维细胞参与小鼠胚胎内细胞团的组成。【结论】小鼠皮肤成纤维细胞与小鼠早期胚胎能够形成共生的微环境体系。     

羊膜移植在重度眼热灼伤及化学伤治疗中的应用

目的: 评价新鲜羊膜移植辅助治疗重度眼热灼伤及化学伤的临床效果.方法: 对45例54眼热灼伤及化学伤病例行羊膜移植覆盖伤眼角,结膜表面,观察术后创面生长,修复情况及出现睑球粘连等并发症情况.结果: 45例54眼角,结膜创面均修复,愈合良好,1例出现眼睑闭合不良,无1例出现角膜坏死穿孔,睑球粘连等并发症.结论: 羊膜移植术在眼热灼伤及化学伤的治疗中能明显促进创面修复愈合,减少角膜坏死穿孔,睑球粘连,眼睑畸形等并发症.     

罗非鱼皮多肽的制备及其对烫伤修复的应用

以罗非鱼皮为原料,通过酶的筛选和酶解正交试验,分别获得木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶酶解罗非鱼皮的最优酶解条件,在两种酶的最优酶解条件下进行分步复合酶解制备罗非鱼皮多肽,并探究罗非鱼皮多肽对新西兰兔皮肤烫伤创面的修复作用。结果表明,木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶的最优酶解条件分别为pH6.5、温度55℃、底物浓度30%、酶用量0.5%和pH9.5、温度45℃、底物浓度35%、酶用量0.4%,相应的蛋白质回收率为90.54(±1.72)%和89.22(±2.14)%,复合酶解所得的蛋白质回收率比最优酶解条件下的木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶分别提高了5.03%和6.58%。烫伤愈合实验结果表明:伤口处理后17 d,实验组与阳性对照组的创面愈合率均已达到95%以上,与模型对照组相比均有显著性差异;实验组与阳性对照组的创面愈合率未见明显差异,愈合效果相近。病理组织学结果显示,实验组烫伤创面恢复情况最好,表明罗非鱼皮多肽对皮肤烫伤创面有很好的修复效果。     

拟胚体对成体细胞参与胚胎嵌合的影响

试验尝试构建成体细胞同小鼠早期胚胎的嵌合共生胚胎.取成年人皮肤组织的成纤维细胞,慢病毒转染皮肤成纤维细胞标记EGFP荧光蛋白,同小鼠早期8-细胞胚胎进行嵌合.结果显示慢病毒高效标记人皮肤成纤维细胞表达EGFP荧光蛋白,通过皮肤成纤维细胞与小鼠胚胎干细胞形成的拟胚体环境作用后,皮肤成纤维细胞成功与小鼠胚胎形成嵌合胚,嵌合囊胚形成率为38.08%,表达EGFP荧光蛋白的皮肤成纤维细胞能够嵌合到小鼠胚胎的不同部位.嵌合胚在胚胎干细胞分离培养环境下进行培养,嵌合到小鼠内细胞团的皮肤成纤维细胞参与小鼠内细胞团的组成,参与小鼠内细胞团组成的胚胎占嵌合胚比率为1.74%.小鼠胚胎干细胞拟胚体环境作用可以成功介导人皮肤成纤维细胞同小鼠早期胚胎形成嵌合共生体系.     

复方银红膜剂制备及其口腔粘膜损伤防治作用的研究

探讨了制备复方银红膜剂的方法及其对大鼠口腔粘膜损伤的作用效果。将聚乙烯醇为成膜材料制备的复方银红膜剂作用于口腔粘膜损伤模型大鼠,从病理学角度比较其对粘膜损伤的防治作用。结果表明:每片复方银红膜剂中羟基红花黄色素A的平均含量为6.85 mg,适于粘膜、皮肤等组织给药。证明该制剂在不同程度上减轻了大鼠口腔粘膜损伤程度,并可使损伤修复提前,表明复方银红膜剂具有一定的粘膜保护作用。     

不同部位及创伤类型面部软组织损伤的整形修复效果分析

目的分析不同部位及创伤类型面部软组织损伤的整形修复方法及效果。方法回顾性分析133例面部软组织损伤患者为研究对象,分析其受伤部位、创伤类型等一般资料,分析整形修复方法及结果。结果所有患者均I期愈合,优42例,良58例,可18例,差15例,优良率为76.5%(101/133)。不同损伤部位愈合情况比较差异无统计学意义(P>0.05);不同损伤类型愈合效果不同(P<0.01),切割伤优良率最高(P<0.01),挫裂伤、撕裂伤、火器伤之间的优良率差异无统计学意义(均P>0.05)。结论面部软组织损伤的损伤类型对修复效果影响明显,在整形修复时应根据其类型及损伤的部位,遵循微创原则,按照相应解剖的要求修复创面,效果显著。     

猪皮肤成纤维细胞 PERV 体外和体内感染性分析

目的研究分析猪皮肤成纤维细胞猪内源性反转录病毒(PERV)的体外和体内感性.方法运用组织块培养法建立猪皮肤成纤维细胞系,使得该细胞系与人胚胎肝细胞混合共同体外培养,一段时间后将猪皮肤成纤维细胞系移植到具有免疫缺陷疾病的小鼠体内,观察 PERV 对人胚胎肝细胞和对小鼠的感染情况.结果猪皮肤成纤维细胞系在与人胚胎肝细胞共同培养的过程中使其感染 PERV;具有免疫缺陷的小鼠体内的猪皮肤成纤维细胞与小鼠体内的正常细胞发生了微嵌合,并且 PERV 也感染了移植小鼠的多种脏器和组织.结论猪皮肤成纤维细胞中的 PERV 具有体外和体内感染性,但能否继续在体内复制、转录等过程仍尚待进一步研究.该结果预示在猪异种器官移植过程中需要注意 PERV,以免发生感染     

成年绵羊皮肤成纤维细胞系的建立

本文研究了成年绵羊皮肤成纤维细胞的分离、培养、纯化、冷冻和生长特征。对比了组织块培养和消化培养两种培养方法。根据上皮细胞与成纤维细胞对酶消化敏感性不同及二者贴壁速度的差异,将成纤维细胞分离纯化,建立成年绵羊皮肤成纤维细胞系。