不同温度和外源添加物对辣椒花药的培养效果

[目的]探讨不同温度和外源添加物对辣椒花药培养的效果,为辣椒高效育种提供参考依据.[方法]以杂6、辛香8号和20114等3个品种辣椒花药为试材,分别在4℃低温和35℃高温下进行不同时间预处理,诱导其花药胚状体和愈伤组织,并在前期温度处理的基础上,分析不同外源添加物对杂6、辛香8号和8024花药胚状体和愈伤诱导效果的影响.[结果]4℃低温预处理3个品种辣椒花蕾对其花药愈伤组织和胚状体的诱导无促进作用;35℃高温预处理花药7～8 d,可大幅度提高其愈伤和胚状体的诱导率;MS+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L KT+1.0％ AC是诱导辣椒花药愈伤组织和胚状体的最佳培养基组合.[结论]将辣椒花药直接接种于MS+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L KT+1.0％ AC培养基中,经35 ℃高温处理7～8 d可极大提高其胚状体诱导率和愈伤诱导率,诱导出的胚状体可进一步分化出再生植株.     

枸杞花药离体培养技术体系的建立

以宁杞1号为试验材料,探讨枸杞花药离体培养中不同激素组合、不同活性炭及蔗糖浓度、低温预处理或热激处理、不同光照培养条件对花药培养效果的影响.试验结果表明:最佳激素组合为2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,花药愈伤组织诱导率达11.7%;4 ℃低温预处理5 d和32 ℃高温预培养2 d,均可显著提高愈伤组织诱导率;添加活性炭能提高胚状体的诱导率;培养基中适宜的蔗糖浓度为3%;暗培养优于光照培养和弱光培养.愈伤组织转入分化培养基(MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L)分化出大量绿色小芽,分化芽转入生根培养基(MS+NAA 0.1 mg/L)中,20 d后得到完整植株.     

不同基因型大麦离体培养的花药及小孢子对低温和NaCl预处理的反应

以探讨大麦单倍体细胞水平的耐冷、耐NaCl性与植株水平抗病、耐盐性的相关性为目的,用赤霉病抗性、耐盐性不同的大麦为供试材料,比较了它们的离体培养花药及小孢子对低温、NaCl预处理的培养反应。结果表明:感病材料低温(5℃)预处理17d的花药培养愈伤组织诱导率比未经低温预处理的低,抗病材料则有一定的升幅。用NaCl溶液直接处理游离小孢子,所有供试材料的小孢子存活率随处理浓度升高不断下降,耐盐材料的存活率下降幅度比盐敏材料的小,且抗病材料的降幅比感病材料的小。说明:供体植株水平的抗病、耐盐性在花药、小孢子水平上也能有所表现。     

低温预处理对刺梨花药培养小孢子发育的影响

为明确低温预处理对刺梨花药离体培养过程中小孢子发育及愈伤组织诱导率的影响,进行低温预处理试验,结果表明:离体培养条件下,刺梨雄核存在3条发育途径,即A-V途径、A-G途径和B途径,以A途径为主;随着培养时间的增加,小孢子逐渐退化,低温预处理3d可在一定程度上延缓刺梨小孢子退化,提早雄核发育,并增加参与雄核发育小孢子数量,提高花药愈伤组织诱导率。     

茄子栽培种与水茄杂种无性系花粉发育及其对愈伤组织诱导的效应

【目的】研究不同花粉发育时期及不同外植体接种前处理方法对愈伤组织诱导的效应,为茄子栽培种与水茄杂种无性系再生体系的建立奠定实践基础。【方法】以杂种无性系的花药为外植体,研究花蕾的外部形态与花粉发育时期的相关性;使用不同浓度的NaClO和 HgCl2对花蕾进行消毒,分别将外植体置于4 ℃和36 ℃下0、2、4、6、8 d,筛选最佳的花药发育时期、消毒方法及预处理方法。【结果】当花药长度在5.6-7.3 mm时,花药愈伤组织的诱导率最高,达32.5%,此时的小孢处于单核中晚期;70%酒精消毒30 s后,再用5% NaClO＋两滴吐温-20消毒15 min,污染率为4.0%,死亡率为4.0%;高温预处理6 d可显著提高花药愈伤组织诱导率。【结论】花蕾长度8.3-10.5 mm,花药长度5.6-7.3 mm,使用70%酒精处理30 s后用5% NaClO＋两滴吐温-20消毒15 min的消毒方法及36 ℃处理6 d的愈伤诱导效应最好。     

低温和激素处理对枣花药离体培养效果的影响

利用金丝小枣花药进行离体培养,诱导出愈伤组织及再生小植株。研究结果表明,花药的采接时期、低温处理及不同激素浓度对愈伤组织诱导率有直接影响,6-BA是愈伤组织分化成绿色生长点及绿芽再生小植株的重要因素。     

不同因素对西瓜花药愈伤组织诱导的影响

研究不同因素对西瓜花药愈伤组织诱导的影响,探讨适宜西瓜花药愈伤组织诱导的最佳方法。以HJ001(杂交种)、西农8号、大果黑美人为试验材料,分别研究取材时期、低温预处理时间、高温预培养时间、植物生长调节剂、附加物、基因型对西瓜花药愈伤组织诱导率的影响。结果表明:HJ001经4℃低温处理2、3 d,有效愈伤组织诱导率分别达到18.33%、15.67%,差异不显著。HJ001经高温预培养1、2、3 d,有效愈伤组织诱导率最高达到14.33%,且3个处理间无显著差异,其余2个品种有效愈伤组织诱导率较低,但表现相同趋势。HJ001和西农8号2个品种,NAA的诱导效果均较2,4-D好。在培养基上添加谷氨酰胺(Gln)70 mg/L和酸水解酪蛋白(CH)500 mg/L,HJ001有效愈伤组织诱导率较高,分别达到20.33%和19.00%。露地种植,晴天6:00—8:00采集的花蕾花粉活力较高,其中HJ001花蕾纵径2~4 mm、横径3~4 mm,萼片紧贴花瓣,花瓣闭合,呈深绿色,花药颜色呈淡黄色至黄绿色,且此时多为小孢子单核靠边期,不同品种间稍有差异。因此,在露地栽培条件下,晴天6:00—8:00,取单核靠边期花蕾,低温处理2~3 d,接种在MS+NAA1.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+KT 1.0 mg/L+CH 500 mg/L(Gln 70 mg/L)培养基上高温预培养1~3 d,有效愈伤组织诱导率最高,此种方法为西瓜品种HJ001花药愈伤组织诱导的最佳方法,而西农8号、大果黑美人花药愈伤组织诱导的最佳方法还要进一步探讨。     

小型西瓜花药愈伤组织诱导条件

以2种基因型小型西瓜为试材进行花药离体培养,研究西瓜花蕾横径、不同激素配比、低温预处理、热激处理对愈伤组织诱导的影响。结果表明,西瓜花蕾横径为4.6~5.0 mm时,诱导率最高,平均诱导率达到32.67%;2个西瓜品种的花药在MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L上诱导率均最高,分别为45.52%、30.50%;花蕾在4℃条件下低温预处理48 h可以提高西瓜花药愈伤组织的诱导率,诱导率达40.67%;将接种的花药在33℃条件下进行1 h的热激处理后,愈伤组织褐化率较高,不易长出绿色致密的愈伤组织。     

小麦小孢子培养愈伤组织的高频诱导及其绿苗再生

以小麦品种‘Alondra’为材料,用不同预处理(热激、低温、激素等)方法处理离体穗、游离小孢子、小花等,比较不同处理对小麦小孢子离体培养条件下愈伤组织产量的影响。结果表明:5℃低温处理小花3 d、33℃热激处理小孢子2 d后,小麦小孢子愈伤组织的产量明显提高。通过愈伤组织的分化,最终形成小麦小孢子绿色再生植株。     

丹参花药愈伤组织诱导因素的研究

研究了不同激素处理、不同花粉发育时期、不同低温预处理和高温预培养对丹参花药愈伤组织诱导的影响。结果表明：最佳的培养基激素组合为MS＋2.0 mg/L6-BA＋0.2 mg/L NAA;单核靠边期的花药愈伤组织诱导率最高;4℃低温预处理2 d最有助于愈伤组织发生;高温预培养不利于愈伤组织诱导率的提高。     

低温预处理在水稻亚种间花药培养中的效应

连续4年就低温预处理对水稻亚种间杂种花粉植株诱导的效应进行了系统研究。结果表明,多数组合给予6～8℃4天的预处理后,出愈率及绿苗分化率都可显著提高;但组合间要求的适宜低温预处理时间不同,其原因是不同组合的小孢子对低温的耐忍力不一样,同时正常小孢子在低温预处理过程中仍会以不同速率缓慢地发育;不同组合6～8℃预处理的适宜天数在0～20天之间,可用取出接种时花药中仍可见清晰的细胞核且处于单核后期的大多数小孢子作指标。     

茄子游离小孢子培养获得愈伤组织的研究

应用游离小孢子培养技术,以茄子杂交种为试材,进行游离小孢子培养,旨在获得茄子愈伤组织。结果表明:单核靠边期小孢子是诱导愈伤组织发生的最佳时期;不同基因型之间小孢子愈伤组织诱导率差异显著;对花药进行变温预处理,其小孢子膨大率较对照高出6倍多;小孢子培养的适宜培养基为KM附加0.2 mg/L 2,4-D、0.5 mg/L ZT、1.0 mg/L NAA和7.5%的葡萄糖。     

Preliminary Study on Anther in vitro Culture of Lily＂Prato＂

The effects of the microspore developmental stage,hormones and culture condition on anther in vitro culture of lily(Lilium spp.) were discussed.The results showed that when the flower buds were about 23-26 mm long,the microspores were at the uninucleate stage which was suitable for culture and the culture under the darkness would promote the callus induction of anther.The induction frequency could reach 42.5% in the optimized medium which was MS+[6-BA(0.5)+KT(2.0)+2,4-D(1.0)] mg·L-1.The rate of callus diffe...     

石刁柏花药培养愈伤组织诱导影响因素的研究

以石刁柏10个品种的花药为外植体进行组织培养,经预冷处理后对石刁柏的花药接种,采用不同诱导培养基,并相应添加氨基酸及有机附加物。结果表明:有5个品种的花药诱导出愈伤组织,其适宜的诱导培养基均不同,表现出较大的品种基因型差异;同时,不同的预处理方法和培养条件对花药愈伤组织的诱导也产生较大的影响,花药在4℃预冷处理4 d后经1 mol/L的高糖溶液中浸泡30 min接种于培养基,黑暗培养10 d后愈伤组织诱导率最高。     

黄瓜花药培养中若干影响因素的研究

利用津春3号黄瓜(Cucumis sativus L.cv Jinchun 3)花药为外植体材料,调查了适于其培养的花药发育时期与外部形态的关系,研究了预处理方式、不同基本培养基类型以及添加植物生长物质2,4-D、NAA、BAP和KT对黄瓜花药培养的愈伤组织诱导和生长的影响等。试验结果表明:津春3号花药最佳培养时期单核中后期的取材标准是花蕾长度为0.6￣1.8cm,花药0.2￣0.3cm,瓣萼等长或者瓣稍长,花瓣淡绿,花药浅绿至白绿;2,4-D是影响黄瓜花药愈伤组织形成的最主要因素,其最适浓度为2￣4mg.L-1;基本培养基类型对花药愈伤组织诱导效果影响显著,以N6培养基适应性最广。     

洋桔梗小孢子培养初步研究

[目的]探索预处理和培养基类型对小孢子离体培养的影响。[方法]以洋桔梗为材料进行小孢子培养,研究预处理和培养基类型对小孢子离体培养的影响,并筛选胚性愈伤组织适宜诱导培养基、不定芽植株培养基以及最佳生根培养基。[结果]利用4℃低温预处理24 h有利于小孢子愈伤组织的形成。愈伤组织适宜诱导培养基为:MS+3 mg/L KT+2.5 mg/L 2,4-D;不定芽植株培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;最佳生根培养基为:MS+0.2 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+1.5 mg/L IBA+0.3 g/L活性炭。经过染色体倍性鉴定,显示小孢子培养后染色体数目减半。[结论]该方法研究了预处理和培养基类型对小孢子离体培养的影响,为洋桔梗游离小孢子培养体系的建立以及单倍体育种奠定基础。     

小麦花药培养效率的影响因素研究

【目的】研究影响小麦花药培养特性的因素,优化小麦花药培养条件,提高小麦花药培养效率。【方法】以10个普通小麦品种(系)及其16个杂交F₁代花药为材料,研究了普通小麦基因型、基本培养基种类及低温预处理时间、诱导培养基附加脯氨酸和硝酸铈对小麦花药培养特性的影响。【结果】不同基因型小麦花药培养特性差异较大,供试基因型的花药反应率与愈伤组织诱导率相关性高,而两者与绿苗分化率无相关性。荔高6号×置丰0502 F₁、周麦16×BI0452 F₁、烟农19×开麦18 F₁、豫麦69×新麦208 F₁、煤生0308和皖麦41×烟农19 F₁有较高的绿苗产率;基本培养基种类对供试小麦花药愈伤组织诱导率、反应率、绿苗产率有显著影响,对绿苗分化率影响不显著,癸培养基小麦花药培养特性总体优于C₁₇培养基;小麦花药低温预处理时间以0.5 d最佳;在诱导培养基中加入3.0～4.5 mg/L硝酸铈后,小麦花药愈伤组织诱导率提高83%～430%,绿苗产率提高82%～557%;600 mg/L的脯氨酸可以使小麦花药的愈伤组织诱导率提高118%,绿苗产率提高222%。【结论】选择花药培养特性好的基因型、对花药低温预处理0.5 d、在癸诱导培养基中添加4.5 mg/L硝酸铈和600 mg/L脯氨酸,可大幅度提高小麦花药的培养效率。     

茶树花药愈伤组织诱导及增殖研究

以茶树花药为外植体,以MS培养基为基本培养基,探究适合花药愈伤组织诱导的花药发育时期,不同光照时间对花药愈伤组织诱导的影响,不同植物生长调节物质对花药愈伤组织诱导及增殖的影响,为建立茶树组织培养体系提供依据。研究结果表明：利于花药愈伤组织的形成的处于单核中期的花蕾直径在0.7～0.8 cm,黑暗条件下较12 h/d光照条件下茶树愈伤组织的诱导率高,茶树花药经过低温预处理24 h后,在培养基MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.4 mg/L+2,4-D1.0 mg/L上愈伤组织诱导率最高,诱导率为84.6%,茶树花药愈伤组织增殖率最高的培养基为MS+NAA1.0 mg/L+6-BA0.5 mg/L+2,4-D0.2 mg/L。