IGF-Ⅰ和hCG对山羊睾丸间质细胞分泌睾酮的影响

采用体外培养山羊睾丸间质细胞的方法,应用ＩＧＦ－Ⅰ和ｈＣＧ进行不同处理,利用放射免疫分析法（ＲＩＡ）测定睾酮含量。结果表明：①３０～４０日龄山羊睾丸间质细胞适宜作为体外培养的材料;②山羊睾丸间质细胞的敏感性随ｈＣＧ的重复刺激而下降;③ＩＧＦ－Ⅰ能够促进睾酮的分泌（Ｐ＜０．０５～Ｐ＜０．０１）;④ＩＧＦ－Ⅰ和ｈＣＧ对睾酮的分泌具有协同促进作用（Ｐ＜０．０５～Ｐ＜０．０１）。     

T-2毒素对小鼠睾丸间质细胞活力和功能的影响

目的研究T-2毒素对睾丸间质细胞活力和功能影响。方法对分离出的4~5周龄BABL/c小鼠睾丸间质细胞进行体外培养,将培养的细胞分别接种于96孔培养板和24孔培养板里,T-2毒素药物处理后培养24 h,弃去96孔培养板里的培养液,添加MTT溶液,继续培养4h后检测睾丸间质细胞的活力情况;收集24孔培养板里的培养液用于睾酮水平的测定。结果贴壁细胞继续培养24 h后,当T-2毒素浓度10ng·m L-1h CG+10-9mol·L-1时,MTT吸光度值(P0.01)和睾丸间质细胞分泌睾酮的浓度(P0.05)与对照组相比差异显著;而10ng·m L-1h CG+10-10mol·L-1T-2毒素试验组睾酮分泌量与对照组相比差异不显著(P0.05)。结论 T-2毒素浓度10-9mol·L-1时对体外原代培养的小鼠睾丸间质细胞活力和功能均有显著毒性作用,且随T-2毒素浓度增加,毒性作用增强。     

lncRNA-NAS对湖羊睾丸间质细胞睾酮分泌的影响及其靶基因鉴定

[目的]本文旨在探究lncRNA-NAS对湖羊睾丸间质细胞(LC)睾酮分泌的影响。[方法]利用RT-qPCR对湖羊lncRNA-NAS进行组织表达谱分析,针对lncRNA-NAS设计siRNA并将其转染睾丸间质细胞;利用ELISA、Western blot、细胞计数(CCK-8)、RT-qPCR等技术分析干扰lncRNA-NAS对睾丸间质细胞睾酮分泌、细胞增殖和凋亡的影响;在高通量测序基础上对lncRNA-NAS可能作用的靶基因进行分析。[结果]lncRNA-NAS在湖羊心脏、肝、脾、肾、空肠、睾丸组织中均有表达,但其在睾丸中的表达量显著高于其他组织(P0.05);lncRNA-NAS在睾丸中的表达量随着湖羊年龄增长而呈上升趋势,2周岁(2 Y)表达量显著高于5日龄(5 D)、3月龄(3 M)和9月龄(9 M)(P0.05),9 M表达量显著高于5 D和3 M(P0.05),5 D和3 M表达量差异不显著(P0.05);相比对照组,干扰lncRNA-NAS后,睾丸间质细胞中睾酮分泌水平显著升高(P0.05),睾酮分泌相关基因和蛋白表达量显著升高(P0.05),细胞增殖活力增强(P0.05),细胞凋亡相关基因Bax/Bcl-2 mRNA表达量和蛋白比值均显著降低(P0.05);分析lncRNA-NAS潜在的9个靶基因,2个为未知基因,针对7个已知基因进行研究,当lncRNA-NAS干扰后,发现只有生殖细胞发育相关基因Nanos3表达水平发生变化,表现为显著升高(P0.05),提示Nanos3可能为lncRNA-NAS作用的靶基因。[结论]lncRNA-NAS可能通过调控靶基因Nanos3影响湖羊睾丸间质细胞睾酮的分泌。     

IGF—I和hCG对山羊睾丸间质细胞分泌睾酮的影响

采用体外培养山羊睾丸间质细胞的方法,应用ＩＧＦ－１和ｈＣＧ进行不同处理,利用放射免疫分析法（ＲＩＡ）测定睾酮含量,结果表明：（１）３０～４０日龄山羊睾丸间质细胞适宜作为体外培养的材料;（２）山羊睾丸间质细胞的敏感性随ｈＣＧ的重复刺激而下降;（３）ＩＧＦ－１能够促进睾酮的分泌（Ｐ〈０．０５～Ｐ〈０．０１）（４）ＩＧＦ－Ｉ和ｈＣＧ对睾酮的分泌具有协同促进作用（Ｐ〈０．０５～Ｐ〈０．０１）。     

橙皮素对铅致大鼠睾丸损伤的保护作用

为研究橙皮素对铅致大鼠睾丸损伤的保护作用,将24只健康雄性SD大鼠随机分为4组(对照组、铅组、橙皮素组、铅+橙皮素组),各组每日分别灌服生理盐水(0.9%)、醋酸铅(500mg/L)、橙皮素(50mg/kg)、醋酸铅(500mg/L)+橙皮素(50mg/kg),连续8周后,处死大鼠并收集睾丸。检测大鼠睾丸组织中丙二醛(MDA)含量、还原型谷胱甘肽(GSH)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性和过氧化氢酶(CAT)活性。结果表明,铅可显著提高MDA含量和GPx活性(P<0.05),增幅分别为62.74%和65.67%,显著降低GSH含量和CAT活性(P<0.05),降幅分别为33.08%和45.88%;橙皮素能显著降低铅处理组MDA含量和GPx活性(P<0.05),显著提高GSH含量和CAT活性(P<0.05)。说明铅可导致大鼠睾丸组织脂质过氧化损伤,橙皮素对铅导致的损伤具有一定保护作用。     

肿瘤坏死因子（TNF─α）对培养大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的作用

通过肿瘤坏死因子（ＴＮＦ─α）对培养大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的作用及机理的研究结果表明：ＴＮＦ─α可抑制培养２４ｈ的睾丸间质细胞的睾酮分泌，对培养４８ｈ和７２ｈ的间质细胞睾酮分泌表现出双相作用，低浓度的ＴＮＦ─α可刺激睾酮分泌，高浓度的ＴＮＦ─α抑制睾酮分沁．ＴＮＦ—α与ＬＨ同时处理时，对培养２４ｈ的睾丸间质细胞，ＴＮＦ─α抑制ＬＨ刺激的睾酮分泌，对培养４８ｈ和７２ｈ的睾丸间质的细胞低浓度的ＴＨＦ—α与ＬＨ协同促进睾酮分泌，而高浓度的ＴＮＦ—α则可抑制ＬＨ刺激的睾酮分泌。高浓度的ＴＮＦ─α对睾酮的抑制作用可能是通过抑制由孕酮向睾酮的转化过程实现的。     

促黄体素、肾上腺素对体外家兔赖氏细胞睾酮分泌的影响

采用胰蛋白酶消化法离解家免睾丸细胞,研究赖氏细胞在体外短期培养条件下的内分泌学特性。结果表明,LH/HCG 能够特异性地促进赖氏细胞分泌睾酮(T),而肾上腺素(E)却显著地拮抗 LH/HCG 所致的赖氏细胞 T 生成作用,LRH 对赖氏细胞 T 分泌似无直接作用,茶碱能够有效地提高赖氏细胞对LH 反应的灵敏度。     

VE对犬卵母细胞体外成熟的影响

在基础培养液中分别添加浓度为0,50,100,200μmol/L的VE,研究不同浓度VE对成熟情况的影响。结果表明,体外培养48h后VE浓度为50μmol/L组GV期的比率显著高于100和200μmol/L组(P<0.05);100μmol/L组GVBD期的比率显著低于其它组(P<0.05);达到MI-MII期的比率各组之间差异不显著(P>0.05),但100μmol/L组MI-MII期的比率相对较高。体外培养72h后,VE浓度为200μmol/L组的GV期的比率显著高于对照组和100μmol/L组(P<0.05),与50μmol/L组之间差异不显著(P>0.05);达到GVBD和MI-MII期的比率各组之间均差异不显著(P>0.05)。因此,VE对犬卵母细胞的核成熟没有明显促进作用。     

IGF-Ⅰ对山羊睾丸间质细胞分泌cAMP和睾酮的影响

利用山羊睾丸间质细胞体外培养的方法,研究ＩＧＦ－Ⅰ对ｃＡＭＰ和睾酮的影响。结果表明：①ＩＧＦ－Ⅰ可使间质细胞外ｃＡＭＰ积聚能力的显著增强（Ｐ＜０．０５～Ｐ＜０．００５）。②ＩＧＦ－Ⅰ可使间质细胞分泌睾酮的能力显著增加（Ｐ＜０．０５～Ｐ＜０．０１）。③ＩＧＦ－Ⅰ可刺激山羊间质细胞经ｈＣＧ诱导睾酮分泌的显著增多（Ｐ＜０．０５～Ｐ＜０．０１）。以上结果与催乳素和白细胞介素－ｌα这些含氮激素（因子）调节睾酮分泌的机理不同。     

IGF-I对山羊睾丸间质细胞分泌cAMP和睾酮的影响

本实验利用山羊睾丸间质细胞体外培养的方法，研究ＩＧＦ－Ｉ对ｃＡＭＰ和睾酮的影响。结果表明：（１）ＩＧＦ－Ｉ可使间质细胞外ｃＡＭＰ积聚能力显著增强（ Ｐ＜０． ０５～ Ｐ ＜０． ００５）。（２）ＩＧＦ－Ｉ可使间质细胞分泌睾酮的能力显著增加（Ｐ＜０．０５～Ｐ＜０．０１）。（３）ＩＧＦ－Ｉ可刺激山羊间质细胞经 ｈＣＧ诱导睾酮分泌显著增多（ Ｐ＜０． ０５～ Ｐ＜０． ０１）。以上结果与催乳素和白细胞介素－１α这些含氮激素（因子）调节睾酮分泌的机理不同。     

牛磺酸对雄性大鼠生殖激素分泌水平的影响

通过给Wistar雄性大鼠饮用添加不同水平牛磺酸和B-丙氨酸(牛磺酸转运抑制荆)的自来水,研究了牛磺酸时雄性大鼠促卵泡生成素、促黄体生成素、雌二醇和睾酮4种生殖激素分泌水平的影响.结果表明:牛磺酸可明显促进雄性大鼠促卵泡生成素、促黄体生成素和睾酮的分泌(P＜0.05).而对雌二醇的分泌则没有明显影响(P＞0.05).     

牛磺酸对断奶小鼠小肠发育的影响

为研究牛磺酸对断奶小鼠小肠结构和功能的影响,采用单因子设计,48只体重为(12±2)g的昆明小鼠随机分为6组,每组8只,雌雄各半,分为对照组和试验组,对照组饮用普通自来水,试验组在饮水中添加2.5、5.0、10.0、20.0和40.0g/L牛磺酸,试验期31d。观察牛磺酸对小肠和肝脏重量,空肠绒毛形态、细胞凋亡、小肠核酸和蛋白质含量,以及血清指标的影响。结果表明:1)饮水中添加牛磺酸可显著提高小鼠小肠绝对重量和相对重量(P0.05),且呈现二次曲线关系(PQ0.05);可线性提高小肠绝对长度、肝脏绝对重量和相对重量(PL0.05)。2)2.5、5.0和10.0g/L组与对照组相比,显著降低空肠肠腺(肠隐窝)深度(P0.05);回肠Prot/DNA随牛磺酸添加量提高而线性提高(PL0.05)。3)与对照组比较,5.0g/L添加组的细胞凋亡指数显著降低(P0.05),但40g/L添加组有升高的趋势。4)随着牛磺酸添加量的提高,回肠MDA含量有降低的趋势(P=0.07),空肠GSHPx呈现先升高再降低的二次曲线关系(PQ0.05),但不影响血清IGF-I水平。研究结果表明,饮水添加中低浓度的牛磺酸可提高小鼠小肠长度和重量,降低肠隐窝深度,减少细胞凋亡。     

牛磺酸对黄河鲤鱼血清T3、T4含量的影响

为了研究饲料中添加牛磺酸对黄河鲤鱼生长性能和血清T3、T4含量的影响。选用体重121 g左右的黄河鲤鱼450尾,随机分为5组,每组3个重复。在饲料中添加04、008、001、200和1 600 mg/kg牛磺酸,试验期56 d。结果表明:牛磺酸促进黄河鲤鱼的生长,添加量为800 mg/kg时生物学综合评价最高、饲料系数最低(P<0.05);添加8001、200 mg/kg牛磺酸,能够显著提高血清T3含量(P<0.05);添加1 200 mg/kg牛磺酸,能够显著提高血清T4含量(P<0.05)。综合考虑,黄河鲤鱼饲料中牛磺酸的最适添加量为800 mg/kg。该研究为牛磺酸在饲料中的应用提供了理论依据。     

FSH对体外培养间质细胞睾酮生物合成的影响

以酶解法结合差速离心分离仔猪睾丸间质细胞为实验材料,研究了FSH对间质细胞睾酮合成的影响。实验结果表明:(1)随着培养时间的延长,间质细胞的分泌功能逐渐开始下降;(2)FSH(20ng/ml)对于d2和d4的间质细胞hCG的结合率,细胞内cAMP浓度均无明显影响;(3)FSH(20ng/ml)对于d2期细胞胆固醇和羟胆固醇的转化也不没有明显的影响。这表明,无论间质细胞处于何种时期,FSH不能通过调节细胞膜上的受体数量调节睾酮的合成,也不能通过影响胆固醇的转运调节间质细胞的功能。     

Expression of beta-nerve growth factor receptor mRNA in Sertoli cells downregulated by testosterone

Nerve growth factor (NGF) is synthesized in male germ cells. The NGF receptor (NGFR) mRNA was found in the Sertoli cells of rat testis. Hypophysectomy increased both NGFR mRNA in testis and the number of NGFR hybridizing cells in seminiferous tubules. This was suppressed by treatment with chorionic gonadotropin or testosterone, but not with follicle-stimulating hormone. The NGFR mRNA also increased after destruction of Leydig cells or blocking of the androgen receptor. This suggests that NGF produced by male germ cells regulates testicular function in an androgen-modulated fashion by mediating an interaction germ and Sertoli cells.     

雄激素和氢化可的松对山羊附睾头上皮细胞增殖的影响

为研究雄激素和氢化可的松对山羊附睾上皮细胞生长的作用模式,本研究利用酶标仪检测附睾头部上皮细胞增殖情况,实时荧光定量PCR及ELISA检测雄激素受体(AR)的表达,检测睾酮与氢化可的松对山羊附睾上皮细胞体外增殖的作用以及对AR表达的影响。结果表明:100nmol/L睾酮对附睾头上皮细胞增殖的促进效应最高且与对照组差异极显著(P0.01),200nmol/L氢化可的松促进附睾头上皮细胞增殖效应最佳并与对照组差异显著(P0.05),前者的效应明显且可以被AR阻断剂阻断;睾酮和氢化可的松对附睾头上皮细胞增殖表现为协同作用;100nmol/L睾酮与200nmol/L氢化可的松均使附睾头上皮细胞的AR mRNA和蛋白表达量上调,与对照组差异显著(P0.05),且二者共存时附睾头上皮细胞的AR mRNA和蛋白表达量极显著高于对照组(P0.01)。本研究表明睾酮和氢化可的松对附睾头上皮细胞体外增殖均有促进作用,呈明显的浓度依赖性,且二者之间存在协同作用,这为进一步研究附睾上皮细胞增殖及功能的调节机理提供了基础。     

氧化应激对离体大鼠小肠上皮细胞的损伤及抗氧化研究

为了探讨氧化应激对动物小肠上皮细胞内抗氧化酶活性、细胞通透性和细胞增值的影响,并进一步研究GSH对离体小肠上皮细胞诱导型氧化损伤的保护作用。通过建立大鼠小肠上皮细胞X/XO体外氧化损伤模型,培养细胞随机分为7组,18个重复:对照组A加入蒸馏水,氧化损伤B、C、D各组加入黄嘌呤X(10μmol/L),并分别加入黄嘌呤氧化酶XO,(10,40,70 U/L),抗氧化E、F、G各组加入X(10μmol/L)和谷胱甘肽GSH(1.5μmol/ml),并分别加入XO(10,40,70U/L),应激培养24 h。研究发现:不同剂量的X/XO均可导致离体大鼠小肠上皮细胞氧化应激的发生。与对照组比较,显著降低了IEC增殖和CAT的活性,明显提高细胞内Ca2+浓度(P<0.05)。低活性XO(10U/L)提高了SOD活性(P>0.05),然而高活性XO(40,70 U/L)显著降低了细胞内SOD的活性(P<0.05),添加谷胱甘肽提高了抗氧化酶的活性和细胞增殖,显著降低了细胞内的Ca2+浓度。     

日粮铜钼水平对绒山羊产绒性能和血液相关激素的影响

研究日粮铜(Cu)钼(Mo)添加水平对快速长绒期绒山羊产绒性能和血液相关激素的影响。采用2×3完全随机试验设计,选取36只1.5周岁辽宁绒山羊,随机分为6组,每组6只,分别在基础日粮中添加3个水平的Cu(0、19和38mg/kg,DM)和2个水平的Mo(0和5mg/kg,DM)进行饲喂。结果表明:基础日粮中添加Cu19mg/kg绒山羊绒毛长度和绒生长速率明显增加(P<0.05),而对绒纤维细度没有影响(P>0.05);添加38mg/kg的Cu有抑制羊绒生长的趋势(P>0.05),且显著降低了羊绒细度(P<0.05)。Cu与Mo的互作对细度的影响极显著(P<0.01)。日粮Cu、Mo水平对血液褪黑激素(MT)、甲状腺激素(T3和T4)水平均无影响(P>0.05);在日粮不加Mo和添加5mg/kg的条件下,添加Cu19mg/kg均明显提高血液类胰岛素生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)的水平(P<0.05);低Mo水平下,添加19mg/kg的Cu,提高血液MT的水平(P>0.05)。高Mo则抑制IGF-Ⅰ的分泌(P>0.05),且显著降低了催乳素(PRL)(P<0.05)。未观测到Cu、Mo的互作对血液相关激素的影响(P>...