抗病南瓜种质482-2离体再生体系研究

以抗病南瓜种质482-2的种子为材料,通过组织培养,研究并建立了离体再生体系,结果表明:南瓜种子无菌萌发后,分别以子叶、下胚轴和胚根为外植体进行诱导培养,子叶可直接分化出不定芽,下胚轴和胚根可产生愈伤组织、但很难进一步分化出不定芽,子叶分化出的不定芽经生根培养能获得完整植株;南瓜种子无菌萌发的适宜培养基为琼脂胨,子叶诱导不定芽的适宜培养基为MS 6-BA1.0 mg/L,不定芽生根的适宜培养基为MS IBA0.2 mg/L.     

茶树组织培养的研究——Ⅰ. 胚状体和胚性细胞团的形成及植株再生

本文报道了茶树组织培养中,采用种子子叶柄为材料,分化形成大量胚状体。胚性细胞团和植株再生的方法和结果。并筛选出了加速小苗生长和发根培养的较理想的培养基。     

沙棘胚状体诱导分化技术研究

[目的]探究不同基因型、基本培养基、激素种类及激素浓度对沙棘胚性愈伤组织诱导和胚状体分化的影响,为体胚发生体系的建立提供科学依据。[方法]将中国沙棘和蒙古沙棘种子经5d暗培养后在(14L∶10D)h·d-1的光周期下培养15d,获得的无菌试验材料,并将种胚的各个结构为外植体进行胚性愈伤组织诱导,用子叶和下胚轴以L9(34)正交设计进行胚性愈伤组织培养条件优化以及胚状体分化诱导。[结果]试验范围内,中国沙棘种子培养的最佳培养基是1/2 MS;由中国沙棘和蒙古沙棘种子培养20d所得的无菌子叶连带0.2cm下胚轴是胚性愈伤组织和胚状体诱导分化的良好材料。[结论]最适合中国沙棘和蒙古沙棘胚性愈伤组织诱导的培养基为:1/3 MS+6-BA0.5mg·L-1+IBA 1.0mg·L-1,诱导率可达75.9%;诱导胚状体分化的最佳培养基为:1/3 MS+IBA 0.05mg·L-1+KT 0.1mg·L-1+6-BA 1.0mg·L-1,分化率可达66%。     

黄瓜胚状体高频再生体系的建立及优化

【目的】筛选适宜于黄瓜体细胞胚发生的培养条件,为完善黄瓜胚状体再生途径及建立黄瓜优良的遗传转化受体系统奠定基础。【方法】以8份不同基因型黄瓜种质Q24、Q16、9930、No.26、Gy14、No.14、S63和16F7-2-8为材料,研究基因型对黄瓜胚状体诱导的影响。以胚状体诱导率及成苗率为考察指标,以Gy14和9930为材料,探讨苗态（子叶未展开,子叶即将展开,子叶展开）对黄瓜胚状体诱导的影响;以Gy14为材料,从子叶切割方式（不保留下胚轴及保留约1,2 mm下胚轴）、无菌苗培养阶段光照与否、愈伤组织诱导培养基中2,4-D的质量浓度（0.75,1.00,1.50,2.00 mg/L）以及胚性愈伤的诱导时长（20,30和60 d）等方面,对黄瓜胚状体再生体系进行优化。【结果】基因型选择结果显示,Gy14和9930比其他基因型黄瓜种质更易诱导出较明显的胚状体。与子叶即将展开和子叶已展开2种苗态相比,子叶未展开时,Gy14和9930的胚状体诱导率较高,分别可达39.3%和38.7%。子叶节保留约1 mm下胚轴处理的胚状体诱导率最高,可达85.2%。无菌苗培养阶段每天进行16 h光照和全天暗处理2种方式,对于胚状体诱导率的影响不显著。适宜胚状体诱导的2,4-D质量浓度为1.00 mg/L,胚状体诱导率为31.6%。与诱导20和60 d相比,外植体在诱导培养基上诱导30 d的愈伤组织胚状体诱导率和成苗率较高,分别为39.6%和65.6%。【结论】黄瓜Gy14的无菌苗处于子叶未展开、仍呈抱合状态时,对其采取保留约1 mm下胚轴的切割方式,置于含1.00 mg/L 2,4-D的培养基上培养30 d后,可较为高效地产生胚状体,并获得完整的植株。     

黄瓜离体器官再生植株研究进展

概述了黄瓜离体器官再生植株的途径,从离体器官(子叶、下胚轴、真叶、叶柄、幼胚、根等)获得原生质体、胚状体,然后形成植株和离体器官(子叶、真叶、茎尖)直接分化出芽或花的研究。     

木薯组织培养研究进展

从器官发生途径和体细胞胚胎发生途径，综述木薯(Manihot esculenta Crantz)组织培养研究进展。木薯器官建成可从顶端分生组织、单芽茎段、叶片、胚轴和子叶等外植体诱导发生。初级体细胞胚可从胚轴、子叶、叶片和花诱导发生，以初级体胚为材料还可进行体胚的循环培养。     

苦瓜愈伤组织再生植株研究

将3种苦瓜的上胚轴、下胚轴、子叶、真叶和茎尖等外植体接种于脱分化诱导培养基上,均可诱导形成愈伤组织。将结构致密,乳白色或淡绿色,表面呈球状或瘤状突起的愈伤组织转移到再分化培养基上,45 d后,部分愈伤组织陆续分化形成胚状体。将胚状体转移到生根培养基上,可形成根系完整的再生植株。     

茶树体细胞植株再生的光照效应

为了探寻光照对茶树体细胞植株再生的影响效果,以茶树全胚,具有子叶柄的子叶为材料,研究５００,１５００ｌｘ,黑暗３种光照条件对植株再生的影响。结果表明,胚状体主要发生在子叶柄了子叶片的隆起处,子叶片隆起发生率随光照度增加而降低,子叶发生隆起的子叶培养物在５００ｌｘ光照度下培养,子叶片的胚状体分化率较高,子叶柄的胚状体,不定芽分化随光照度下降而下降;连续在黑暗下培养,子叶片的畸形胚发生率高,且数量多。     

黄瓜胚状体途径再生体系的建立

【目的】建立黄瓜高频胚状体再生体系,为黄瓜遗传转化体系的完善奠定基础。【方法】以黄瓜品种津研四号、长春密刺、Q8和14-1为材料,研究不同基因型材料愈伤组织的诱导情况;分别取14-1的子叶、子叶节、下胚轴和成熟胚为外植体,研究不同外植体类型的愈伤组织和胚状体产生情况;以14-1子叶节为外植体,研究不同激素及其质量浓度配比对黄瓜胚状体诱导的影响。【结果】4个不同基因型中,欧洲温室型黄瓜种质14-1可诱导出胚状体。在4种外植体类型中,14-1的子叶节可以高效诱导出愈伤组织和胚状体,其诱导率分别为100.0%和34.1%。激素及其质量浓度组合也会影响胚状体的诱导,在愈伤组织诱导阶段,以MS+1.5mg/L 2,4-D为培养基对胚性愈伤组织的诱导效果最好,其对14-1子叶节的诱导率为100%;在分化培养阶段,MS+0.1mg/L 2,4-D+0.5mg/L KT+0.2mg/L IAA有利于体细胞胚的发生,14-1的出胚率为62.5%。显微形态观察发现,黄瓜体细胞胚发育过程包括球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶期胚等时期,这些胚可以发育成正常小植株。【结论】14-1的子叶节经诱导培养基MS+1.5mg/L 2,4-D和分化培养基MS+0.1mg/L 2,4-D+0.5mg/L KT+0.2mg/L IAA培养后,可高效产生胚状体,并可萌发成正常植株。     

我国近年大豆组织培养研究进展

<正>大豆是我国重要的油料作物.近年来,我国大豆的组织培养工作取得了很大进展,已经从叶片、上胚轴、下胚轴、子叶等器官的离体培养中成功地获得了大豆植株,花药、游离花粉培养也得到了花粉植株,子叶原生质体培养也得到了植株.下面概述我国近年大豆组织培养研究工作的情况.     

棉花优良新品种泗棉3号高频体细胞胚发生和植株再生的研究

选择我国棉花优良品种泗棉３号进行组织培养，获得了具有高频胚胎发生的愈伤组织、胚状体和小植株。在附加ＺＴ的ＭＳ培养基上，泗棉３号的下胚轴、子叶、根均诱导获得了愈伤组织，但其形成率和形成量不同，其中下胚较易诱导获得愈伤组织，根和子叶较差。ＺＴ对愈伤组织形成和生长影响较大，其在愈伤组织诱导中较适的使用浓度为３．０或５．０ｍｇ／Ｌ。     

国槐植株再生技术研究

[目的]筛选国槐组织培养的最佳培养基,建立国槐植株再生体系。[方法]将灭过菌的国槐种子分别接种到4种无菌苗诱导培养基上,待苗长出2～4片真叶时,将叶、下胚轴、子叶分别接种于4种愈伤组织诱导培养基上,然后将子叶产生的愈伤组织分别接种在2种芽分化培养基中,再将继代培养获得的有效苗转入生根培养基,对国槐种子进行无菌苗萌发和植株再生的研究。[结果]培养基的激素配比对种子萌发的影响不大;6-BA能促进愈伤组织的产生;最适宜的胚状体诱导培养基为MS+2.0mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+0.5mg/LKT;芽诱导培养基MS+6-1.0mg/LBA+0.1mg/LNAA;生根培养基为1/2MS+0.3mg/LNAA,活性炭不利于国槐的生根培养。[结论]种子的萌发率与国槐的种子质量有关,与培养基的种类关系不大。子叶最适合诱导愈伤组织。     

黄瓜胚状体途径再生体系的建立

【目的】建立黄瓜高频胚状体再生体系，为黄瓜遗传转化体系的完善奠定基础。【方法】以黄瓜品种津研四号、长春密刺、Q8和14-1为材料，研究不同基因型材料愈伤组织的诱导情况；取14-1品种的子叶、子叶节、下胚轴和成熟胚为外植体，研究不同外植体类型的愈伤组织和胚状体产生情况；以14-1子叶节为外植体，研究不同激素及其质量浓度配比对黄瓜胚状体诱导的影响。【结果】4个不同基因型中，欧洲温室型黄瓜种质14-1可诱导出胚状体。在4种外植体类型中，14-1的子叶节可以高效诱导出愈伤组织和胚状体，其诱导率分别为100.0%和34.1%。激素及其质量浓度组合也会影响胚状体的诱导，在愈伤组织诱导阶段，以MS+1.5 mg/L 2,4-D为培养基对胚性愈伤组织的诱导效果最好，其对14-1子叶节的诱导率为100%；在分化培养阶段，MS+0.1 mg/L 2,4 D+0.5 mg/L KT+0.2 mg/L IAA有利于体细胞胚的发生，14-1的出胚率为62.5%。显微形态观察发现，黄瓜体细胞胚发育过程包括球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶期胚等时期，这些胚可以发育成正常小植株。【结论】14-1的子叶节经诱导培养基MS+1.5 mg/L 2,4-D和分化培养基MS+0.1 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L KT+0.2 mg/L IAA培养后，可高效产生胚状体，并可萌发成正常植株。     

黄秋葵愈伤组织的产生及其切片观察

以黄秋葵(Abelmoschus manihot)植株的叶片、顶芽及无菌苗的子叶、胚轴和胚根为外植体进行离体培养,诱导产生了2种不同形态结构的愈伤组织:非胚性愈伤组织和胚性愈伤组织。通过观察,2种不同愈伤组织在细胞结构上有明显的差异。非胚性愈伤组织结构松软、灰褐色,生长缓慢且容易死亡;组织切片观察细胞大、排列无规律且间隔大。胚性愈伤组织结构紧密、呈黄白色或者淡绿色;组织切片观察细胞小且排列紧密;容易形成胚状体,从而进一步发展成为完整植株。     

豇豆愈伤组织诱导的初步研究

研究了不同浓度的生长素(NAA、2,4-D)和细胞分裂素(6-BA、KT)对豇豆[Vigna unguiculata(Linn.)Walp.]花荣下胚轴和子叶愈伤组织诱导的影响。结果表明,子叶较下胚轴更容易诱导出愈伤组织;子叶切片在MS+3.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L KT中愈伤诱导率最高,为95.83%,下胚轴茎段在MS+3.0 mg/L2,4-D+0.1 mg/L 6-BA中愈伤诱导率最高,为88.89%。此外,2,4-D与KT组合可诱导子叶产生胚状体。     

紫花苜蓿的组织培养与快繁技术研究

以紫花苜蓿为材料,研究了不同外植体和不同激素处理对苜蓿愈伤和胚状体分化的影响。结果表明,子叶和下胚轴作外植体,在MS+2,4-D 2.0mg/L+NAA 1.0mg/L+BA 0.5mg/L培养基上愈伤组织诱导率较高,下胚轴的诱导率要高于子叶;下胚轴在MS+BA 3.0mg/L培养基中胚状体分化率最高。     

苜蓿组织培养及不定根芽分化蛋白质的研究

利用苜蓿无菌苗的子叶、下胚轴作为外植体,在附加2.0 mg·L~(-1)KT 和0.5 mg·L~(-1)2,4-D 的 LS 培养基上诱导愈伤组织的发生,经悬浮培养产生胚状体,在含有活性炭的分化培养基上诱导根芽分化并再生植株。以根芽分化及胚状体形成的不同时期培养物为材料,分别提取可溶性蛋白,进行 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及电泳扫描,初步得到分子量为110 kD 和88 kD 的蛋白质,它们可能分别与不定芽和不定根分化有关。     

甘蓝型油菜小孢子培养子叶形胚发育成苗研究

甘蓝型油菜小孢子细胞诱导胚状体以子叶胚和非子叶胚如球形胚、心型胚和类似于胚的结构形态存在。子叶胚在成苗培养基上能够快速生长成植株,但是非子叶胚难以一次成苗,容易褐化死亡,因此减少非子叶状胚、培育高质量子叶胚是提高油菜小孢子再生成植株效率的关键步骤。为了提高甘蓝型油菜小孢子培养过程中诱导子叶胚的数目,对3个甘蓝型油菜品系分离得到的小孢子细胞在25℃下暗培养2周,之后转移到固液双层培养基上培养。通过对摇床的振荡周期、培养温度、固液双层培养基中活性炭的浓度以及6-BA不同梯度的处理,分析诱导子叶胚和非子叶胚发生的数目。结果显示,3个品系小孢子细胞在固液双层培养基上诱导得到的子叶胚数目显著高于液体培养基上诱导发生的数目。小孢子细胞在固液双层培养基上振荡培养1周所得子叶胚数目显著增加。降低小孢子培养温度至23℃,出胚总数和对照差异不显著,但子叶胚的数目显著增加。在固液双层培养基中的下层固体培养基中加入0.1%活性炭和0.25 mg/L 6-BA能够有效提高子叶胚的数目。此外,相比前人只用液体培养基培养的方法,本试验建立了两步培养方法(先液体培养后固-液双层培养)能有效获得子叶胚,从而快速生成植株,提高了甘蓝型油菜小孢子培养技术创制育种资源的效率。     

甜(辣)椒花药培养胚状体诱导与植株再生

以10份不同基因型甜(辣)椒为试材进行花药培养,通过对基因型、取蕾时期、低温预处理、热激处理、碳源及外源激素浓度配比等因素的研究,建立有效的甜(辣)椒花药培养胚状体发生体系.结果表明:基因型是限制甜(辣)椒花药培养胚状体诱导的关键因素,不同品种间出胚率差异显著,其中品种003出胚率最高,为10.8%;处于盛花期的花蕾最适于甜(辣)椒花药培养;4℃低温预处理1-3 d有利于胚状体的诱导,以处理2 d的胚状体产率最高;以2%的麦芽糖代替3%的蔗糖能显著提高出胚率和子叶形胚的比率,筛选出适于甜(辣)椒花药培养胚状体诱导的最佳培养基为Ms+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L KT+2%麦芽糖,能有效地提高出胚率并促进植株冉牛;获得了6个基因型的子叶形胚和再生植株.     

花生再生体系的建立

取4 d龄花生(鲁花14)的胚轴、小叶和成熟子叶为外植体,对其进行离体组织培养研究。结果表明:在培养1个月后,胚轴在MS+8.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/LNAA培养基上可以诱导产生丛生芽,诱导率达到80%,平均每个外植体可以产生10~20个芽点;小叶在MS+5.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/LNAA培养基上能诱导出胚性愈伤组织,进一步诱导分化形成芽点并伸长;诱导出的丛生芽接种在MS+5mg/L6-BA+1.0 mg/LNAA+50.0 mg/LAD的培养基上可以扩繁和伸长;花生成熟种子的子叶在MS+20 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L KT+1.0mg/LAgNO3培养基上可直接诱导形成颗粒状、表面光滑、干燥的体细胞胚,每个外植体可以诱导出8个左右的体细胞胚。