冬小麦‘东农冬麦1号’成熟胚组织培养及再生体系建立

‘东农冬麦1号’是目前黑龙江省高寒地区首个可越冬冬小麦品种,建立高效稳定组织培养再生体系,对品种改良和功能基因组学研究具有重要意义。研究以‘东农冬麦1号’成熟胚为外植体,探讨培养基类型、接种方式、添加物组合浓度、2,4-D、6-BA和KT浓度等因素对愈伤组织诱导、分化及植株再生影响。结果表明,不同培养基类型对冬小麦成熟胚诱导率影响无显著差异。接种方式对成熟胚愈伤组织分化率影响极显著,胚切伤略带胚乳法成熟胚刮碎法完整胚法。诱导培养基附加适量添加物有利于愈伤组织分化,正交试验获得添加物最佳配比为100 mg·L-1谷氨酰胺+0.1 mg·L-1NAA+0.3 g·L-1肌醇+1 g·L-1脯氨酸+0.5 mg·L-1ABA。2,4-D浓度显著影响成熟胚愈伤组织分化率和成苗率,随2,4-D浓度升高,诱导率呈先升高后降低趋势,而分化率和成苗率均下降。分化培养基中6-BA对成苗率影响差异极显著,4 mg·L-1时达到最大;KT对愈伤组织分化要高于6-BA,但对成苗率影响明显低于6-BA。该体系所获冬小麦愈伤组织分化率和成苗率分别可达93.33%和66.64%。     

籼稻高效再生体系建立及其影响因子的研究

以籼稻成熟胚为材料,研究了不同因子对水稻愈伤组织诱导和分化的影响,建立了籼稻高效再生体系。结果表明,2,4-D可诱导愈伤组织产生,但博B在仅含2,4-D的诱导培养基中,愈伤组织诱导率极低;6-BA和2,4-D共同作用显著提高出愈率,在2mg.L-12,4-D+0.5mg.L-16-BA的条件下,253的出愈率最高可达到92.9%,博B出愈率可达到84.8%,2,4-D的最适浓度是1.0-2.0=mg.L-1,6-BA的最适浓度0.5-1.0mg.L-1。不同比例的KT、6-BA、NAA和IAA配合使用有利愈伤组织分化,分化率均达到100%,成苗率最高达63.3%。在诱导培养基中添加6-BA不仅对愈伤组织形成和质量有较好促进作用,而且有利于愈伤组织的分化。     

不同基因型小麦成熟胚愈伤组织的诱导与分化

以小麦成熟胚为外植体,通过胚性愈伤组织诱导,建立一套有效的小麦诱导再生体系.以抗冻早-30、百麦4411和"06-4046"3个小麦基因型为材料,对影响小麦愈伤组织诱导和分化的因素进行了研究.结果表明,2,4-D浓度为2mg·L-1时更有利于诱导胚性愈伤组织;在抗冻早-30和百麦4411分化中加入KT 2 mg·L-1有助于提高分化率和再生率,在"06--4046"分化中加入KT 0.5 mg·L-1对小麦成熟胚的分化和再生苗生长是有利的:不同小麦品种加入400 mg·L-1水解酪蛋白更有利于诱导愈伤组织.因此,在MS基本培养基中附加2 mg·L-1 2,4-D、400 mg·L-1水解酪蛋白及一定量的KT,可促进小麦成熟胚愈伤组织的诱导和分化再生苗.     

不同植物生长调节物质对杂种落叶松胚性愈伤组织增殖的影响

以日本落叶松×长白落叶松的胚性愈伤组织为材料,研究不同植物生长调节物质对胚性愈伤组织增殖和体细胞胚形成能力的影响。结果表明:2,4-D质量浓度对胚性愈伤组织增殖有显著影响,胚性愈伤组织增殖率随2,4-D质量浓度的升高而下降。在添加2,4-D0.1mg·L-1 BA0.05mg·L-1 KT0.05mg·L-1与NAA0.5mg·L-1 BA0.05mg.L-1 KT0.05mg.L-1的培养基中,胚性愈伤组织可以长期维持与增殖;在添加IBA0.5mg·L-1 BA0.05mg·L-1 KT0.05mg·L-1的培养基中愈伤组织的增殖效果最好,增殖系数达到4.6倍,而且转到体细胞胚成熟培养基后形成的体细胞胚数也最多,达到88.6个·g-1。在添加2,4-D0.1mg·L-1 BA0.05mg·L-1 KT0.05mg·L-1的培养基增殖的胚性愈伤组织形成的体细胞胚的萌发率和植株再生率最高,分别为66.7%和50%。     

高秆野生稻愈伤组织诱导分化研究

获得品质优良的愈伤组织是野生稻资源离体保存和遗传转化的基础。以高秆野生稻为材料,通过采用N6D与NB为基础培养基,研究不同浓度激素组合对高秆野生稻愈伤诱导的影响,并分析比较优质胚性愈伤组织分化成苗的情况。结果表明,以N6D为基础培养基,2,4-D浓度为2.0 mg·L-1的培养基诱导高秆野生稻的出愈率最高,达到50.00%。以NB为基本培养基,最优激素组合为2.0 mg·L-12,4-D+3.0 mg·L-1NAA+3.0 mg·L-1IAA+1.5 mg·L-1KT,出愈率为35.0%,愈伤直径为0.43 cm,愈伤色泽淡黄,质地紧密。说明适宜的激素组合能够诱导高质量的高秆野生稻胚性愈伤,良好的胚性愈伤在MS分化培养基上的分化率为60.0%。通过培养基改良的方式可建立高秆野生稻脱分化与分化的离体研究体系。     

杉木不同器官愈伤组织和再生芽的诱导效率

以杉木未成熟胚、种子发芽的下胚轴、子叶以及组培苗茎段为外植体,研究基本培养基、不同激素组合及浓度对杉木愈伤组织的诱导及再生芽发生的影响。结果表明:不同激素组合及浓度对不同外植体的愈伤组织诱导率有显著影响,对未成熟胚愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+2,4-D 2 mg·L~(-1)+6-BA 1 mg·L~(-1)+KT 1 mg·L~(-1),诱导率为92.7%;对子叶、下胚轴愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+6-BA 2 mg·L~(-1)+NAA 2 mg·L~(-1)+TDZ 0.01 mg·L~(-1),诱导率分别为97.4%和95.2%;对组培苗茎段愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+2,4-D 1 mg·L~(-1)+NAA 2 mg·L~(-1)+TDZ 0.01 mg·L~(-1),诱导率为86.7%;MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+KT 1.5 mg·L~(-1)是愈伤组织诱导再生芽的最佳培养基,诱导率为80%。质地疏松的愈伤组织其再生芽率最高(65%),单个质地均匀的愈伤组织其再生芽数可达6个;基本培养基对愈伤组织质地形态有较大影响,1/2MS培养基诱导出愈伤组织质地较疏松,MS培养基诱导出的愈伤组织质地均匀且表面可见颗粒状细胞团,DCR培养基诱导出的愈伤组织质地较密。     

小麦成熟胚愈伤组织的诱导与分化

[目的]筛选再生能力强的基因型小麦品种,建立高效的小麦成熟胚高频植株再生系统。[方法]以小麦品种抗冻早-30、百麦4411和06-4046的成熟胚为外植体,以MS为基本培养基,添加不同激素,组配诱导、继代、分化和生根培养基,通过胚性愈伤组织诱导。探讨影响小麦愈伤组织诱导和分化的因素。[结果]2,4-D浓度为1—5mg／L时对3个小麦品种愈伤组织的诱导差异不大,诱导率均高于80％,但2,4-D浓度为2mg／L时更有利于诱导胚性愈伤组织,诱导率在90％以上;在抗冻早-30和百麦4411分化培养基中加入2mg／L KT有助于提高分化率和再生率,在06-4046分化培养基中加入0．5mg／L KT对小麦成熟胚的分化和再生苗比较有利。[结论]在MS培养基中添加2mg／L2,4-D和一定量的KT可促进小麦成熟胚愈伤组织的诱导和分化再生苗。     

薏苡愈伤组织的诱导与分化

为薏苡优良品种的脱毒快繁和基地化脱毒种苗的生产提供科学依据,以薏苡气生根、种子胚、嫩茎为材料,研究了2,4-D、KT、NAA不同浓度配比对愈伤组织的诱导、分化和成苗的影响。结果表明,KT是薏苡芽分化及脱毒种苗生成的主要影响因素,气生根是诱导胚性愈伤组织及胚状体最合适的外植体,其最佳分化培养条件为MS+2,4-D 0.4mg/L+KT 1.5mg/L+NAA 0.8mg/L,最佳成苗培养基为MS+2,4-D 0.4mg/L+KT 1.5mg/L+NAA 1.0mg/L。     

毛稔叶片离体培养及植株再生研究

以毛稔叶片作为外植体, MS为基本培养基,研究不同种类激素的浓度配比对毛稔叶片离体再生的影响。结果表明,黑暗条件与光照12 h·d-1有利于毛稔愈伤组织形成,毛稔叶片愈伤组织最佳诱导培养基为MS+0.5 mg·L-16-BA+2.0 mg·L-12,4-D+0.1 mg·L-1 NAA,光照12 h·d-1诱导40 d,愈伤诱导率为96%;叶片形成的愈伤组织分化率极低,分化率随6-BA浓度升高而升高,愈伤组织分化最适培养基为MS+0.1 mg·L-1 NAA+2.0 mg·L-16-BA,分化率为10%;最适生根培养基为1/2 MS+0.1 mg·L-1 NAA,生根率为88.89%。     

‘扎西玛’与‘南粳46’籼粳杂交F_1花药培养及再生体系的建立

为探索籼粳杂交水稻花药培养再生体系,以籼稻‘扎西玛’和粳稻‘南粳46’籼粳杂交F1花药为外植体,分别从低温预处理时间、基本诱导培养基种类、蔗糖质量浓度及不同激素配比方面研究花药愈伤组织诱导,并将诱导出的愈伤组织进行分化成苗,以期构建籼粳地理远源杂交水稻花药培养再生体系。结果表明,4℃处理2~5d的花药,其愈伤组织诱导率较高,与未处理和低温处理6~10d相比达到显著水平;添加蔗糖质量浓度为60g·L-1,以N6或M8为基本培养基均可以获得较高的诱导率;以M8为基本培养基,添加2,4-D 2mg·L-1和KT 0.3mg·L-1诱导水稻愈伤组织出愈率可高达32.14%;以MS为基本培养基,激素组合为KT 2mg·L-1和ABA 3mg·L-1分化培养基,其愈伤组织成苗率可达50%,其中绿苗分化率达4.55%。     

怀地黄花药培养与再生植株体系的建立

以怀地黄花药为外植体,通过器官发生途径建立怀地黄再生植株体系.结果表明,在4℃条件下预处理3d有利于愈伤组织的诱导;愈伤组织诱导的最佳培养基为2.0 mg·L-1MS +2,4 -D +0.5 mg·L-16 -BA +2.0 mg·L-1KT;愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为10 mg·L-1MS +IAA +10 ...     

抗松材线虫病黑松胚性愈伤组织诱导

以抗松材线虫病黑松(Pinus thunbergii)(以下简称抗性黑松)未成熟合子胚为外植体,诱导出胚性愈伤组织。对影响胚性愈伤组织诱导的因素进行研究发现,在南京地区,6月下旬至7月上旬是采集抗性黑松未成熟球果诱导胚性愈伤组织的最佳时期;抗性黑松未成熟球果在冰箱4℃冷藏7~14 d,能有效地提高胚性愈伤组织的诱导率;麦芽糖更适合抗性黑松胚性愈伤组织诱导;KT质量浓度变化对抗性黑松胚性愈伤组织诱导影响比6-BA显著,诱导抗性黑松胚性愈伤组织最佳激素组合为2,4-D 4 mg·L-1+6-BA 2 mg·L-1或2,4-D 4 mg·L-1+KT 1 mg·L-1。     

细叶百合组织培养植株再生

以细叶百合的鳞片和花丝为外植体,通过两种不同的发生方式,成功获得再生植株,并建立了细叶百合两种外植体的再生体系。结果表明:鳞片可以通过器官直接发生途径再生,其最适诱导培养基为MS+NAA0.5mg·L-1+6-BA1.5mg·L-1;花丝通过愈伤组织间接器官发生途径再生,诱导愈伤组织的最适培养基为MS+2,4-D2mg·L-1+KT2mg·L-1,诱导愈伤组织产生不定芽的最适培养基为MS+NAA0.5mg·L-1+6-BA2.0mg·L-1;最适继代增殖培养基均为MS+NAA0.2mg·L-1+6-BA1.0mg·L-1;最适生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg·L-1。     

不同激素配比对花生种胚的离体培养与植株再生的影响

以花生种胚作为外植体,以6-BA 2.0mg·L-1+NAA 0.5mg·L-1、6-BA 2.0mg·L-1+NAA 1.0mg·L-1和2,4-D 2.0mg·L-1+KT 0.5mg·L-1、2,4-D 2.0mg·L-1+KT 1.0mg·L-1为激素对花生种胚进行诱导,研究了不同激素配比对花生种胚的离体培养与植株再生的影响。结果表明:不同种类的外源激素对外植体的诱导作用不同,花生种胚愈伤组织诱导的最佳培养基为MS中加入6-BA 2.0mg·L-1+NAA 1.0mg·L-1。     

分蘖洋葱再生体系的建立与优化

采用鳞茎盘、花蕾、试管苗叶片和假茎为外植体材料,以MS为基本培养基,建立分蘖洋葱再生体系。结果表明,MS+0.5 mg·L-1KT+2.0 mg·L-12,4-D最适合愈伤组织诱导,4种外植体材料中鳞茎盘外植体诱导出的愈伤组织状态最优,出愈率最高达86.4%;愈伤分化丛生芽的最优培养基为MS+0.2 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1NAA,分化率为27.58%;在MS+1.5 mg·L-1IBA+0.01 mg·L-1NAA培养基上可诱导出白色健壮根,生根率可达100%。     

特色马铃薯品种红宝石再生系统的筛选

采用3因素3水平L9(34)正交试验设计,以特色马铃薯品种红宝石试管苗茎段为试材,分别选用3种植物激素(诱导愈伤用NAA,2,4-D,6-BA;诱导分化用NAA,GA3,6-BA)的3个水平对其茎段的离体再生进行研究,筛选适合红宝石的愈伤和芽分化诱导培养基。结果表明,不同培养基表现出不同的诱导效果,愈伤组织诱导的最佳培养基是MS+NAA 0.5 mg·L-1+2,4-D 1.0mg·L-1+6-BA 0.5 mg·L-1,愈伤率达100%;植株再生最佳培养基是MS+NAA 0.5 mg·L-1+GA31.0 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1,再生率为80.3%,分化后再生苗健壮。     

小麦不育材料幼胚培养植株再生性研究

本试验对小麦两类不育材料幼胚愈伤诱导及分化进行了研究,结果表明:①N6培养基愈伤组织诱导率最高95%～100%;不同材料平均出愈率由高到低依次为雄性不育1号、雄性不育2号、雌性不育1号;②接种18～30dMS培养基最早产生不定芽分化。最早可见不定芽分化的材料为雄性不育1号,分化进程较雌性不育幼胚提早7～10d;雄性不育1号和雌性不育1号幼胚愈伤组织分别培养45,52d分化率达峰值均为100%,雄性不育2号材料在培养112d分化率达峰值67.4%;③单独加入2,4 D并随2,4 D浓度降低不定芽分化率有增加的趋势。2,4 D与KT配合使用不定芽分化率最高,达100%,以低浓度2,4 D(0.25～0.50mg·L-1)与KT(0.1～0.2mg·L-1)配合为宜。④分化不定芽在不同培养基中生长增殖不同,以C17为最佳同时附加KT0.2mg·L-1 2,4 D0.1mg·L-1分化苗可增殖6倍;再生植株移栽成活率80%以上;接种至移栽历时4个月。     

结缕草成熟胚愈伤组织的诱导及再生体系的研究

以结缕草的成熟胚为外植体,通过胚性愈伤组织诱导进行植株再生。结果表明在MS+2,4-D(2.0mg/L)+VB1(4mg/L)的培养基中,成熟胚可较高频率的诱导产生愈伤组织,诱导率为43.20%,但愈伤组织质量较差。将其在降低2,4-D浓度和添加6-BA,ABA的继代培养基中继代培养,可明显改善愈伤组织质量,增加胚性愈伤。筛选继代的胚性愈伤组织置于分化培养基MS+6-BA(1.0mg/L)+KT(2.0mg/L)+NAA(0.1mg/L)中,分化率45.6%。本研究建立了一套有效的以成熟胚为外植体结缕草组织培养再生体系。     

燕麦成熟胚的组织培养及植株再生

以燕麦成熟胚为外植体,通过对不同基因型、培养基的激素种类和配比、盾片放置方式的研究,探索影响燕麦成熟胚愈伤组织诱导及分化的因素.结果表明:基因型对燕麦愈伤组织的诱导及分化有显著影响;不同基因型材料诱导愈伤及分化所需激素及其比例不同,‘白燕2号’和‘陇燕3号’的最佳诱导培养基为MS+4mg/L 2,4-D+1mg/L NAA,分化培养基分别为MS+0.4mg/L NAA+0.2mg/L KT+1.0mg/L 6-BA和0.8mg/L NAA+0.8mg/L KT+1.0mg/L 6-BA;‘丹麦444’的最佳诱导培养基为MS+2mg/L 2,4-D,分化培养基为0.2mg/LNAA+0.4mg/L KT;接种时将成熟胚盾片朝下直接接触培养基放置,可获得更高的诱导率;‘陇燕3号’的成熟胚有利于燕麦再生体系的建立.     

油木奈成熟胚愈伤组织的诱导与保持

以油木奈成熟胚为材料,对愈伤组织的诱导和保持进行了初步研究。结果表明:以WPM为基本培养基,当2,4-D浓度为2.0 mg.L-1时,成熟胚的诱导率最高,达73.54%;以MS为基本培养基,KT浓度一定时,2,4-D浓度为1.0 mg.L-1时,愈伤组织保持的效果较好。