红掌组织培养再生体系的建立研究

[目的]建立红掌的组织培养再生体系。[方法]以红掌幼嫩叶柄为材料,筛选红掌愈伤组织诱导、不定芽分化、生根时的最佳激素配比。[结果]红掌叶柄愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D,此时愈伤组织诱导率可达80.0%;不定芽分化的最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L KT,此时分化率可达96.7%;生根的最佳培养基为MS+1.0mg/L IBA,此时生根率可达86.7%。[结论]为红掌的快速繁殖提供了技术依据。     

农杆菌介导抗草甘膦基因(EPSPS)的玉米转化及相关因子的影响研究

对影响农杆菌转化效率的一些因素进行了研究优化,结果表明,诱导培养基中添加200 mg/L的头孢霉素既能抑制农杆菌的生长又不影响幼胚的愈伤诱导;诱导和筛选培养基中添加5 mg/L硝酸银能有效抑制玉米愈伤组织褐变,显著改善愈伤组织及胚性愈伤组织的诱导率;分化培养基中添加2μmol/L的嘧啶醇能延缓试管苗的生长速度,使苗更健壮。利用优化的根癌农杆菌介导转化体系将抗草甘膦基因(EPSPS)转入玉米杂交材料HiⅡ中,获得了PCR阳性植株。     

红掌初代培养诱导愈伤组织的品种间差异分析（英文）

[目的]不断优化红掌组培高效再生体系。[方法]以4个红掌盆栽品种的叶柄、叶片为外植体,研究红掌初代培养诱导愈伤组织的品种差异性。[结果]品种SAM、SST的愈伤组织形成能力强于SDM、SHG,其中品种SAM、SDM、SHG的叶片再生能力强于叶柄,而品种SST的叶柄再生能力较强。品种SST叶柄愈伤组织诱导的适宜培养基为1/2 MS+TDZ 4.0 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L,出愈率可达87.5%;品种SAM叶片愈伤组织诱导的适宜培养基为1/2 MS+TDZ 2.0 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L,出愈率高达90%;品种SDM、SHG叶片愈伤组织诱导适宜的培养基为1/2 MS+ZT 2.0 mg/L+2,4-D 0.2mg/L,出愈率分别可达59.34%和79.63%。[结论]在构建及优化红掌组培快繁技术体系时,除了品种因素以外,还需考虑不同外植体类型的分化能力差异。     

红掌组培快繁技术优化研究

[目的]对红掌组培快繁技术体系进行优化。[方法]以红掌红粉佳人品种为材料,通过设置不同的基本培养基和激素配比,研究红掌的不定芽诱导、增殖和生根等情况,以筛选出最佳的培养配方和方法。[结果]最佳愈伤组织诱导和不定芽分化培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L,其愈伤组织诱导率为73.3%,不定芽分化率为90.9%;在增殖培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L上诱导出的芽数量与大小最适宜;生根培养以1/2MS+NAA 0.2 mg/L+活性炭1.0 g/L培养基表现最好;移栽基质以珍珠岩+草炭土(1∶1)混合栽培基质成活率最高,达95.6%。[结论]为红掌种苗的工厂化生产提供了参考。     

抗生素对细枝木麻黄愈伤组织再生及农杆菌生长的影响

以细枝木麻黄3个无性系水培苗作为材料,研究了硫酸卡那霉素(kanamycin sulfate,Km)对细枝木麻黄愈伤组织诱导、增殖和芽分化的影响,以及头孢霉素(cefotaxime,Cef)、羧苄青霉素(carbenicillin,Cab)和氨苄青霉素(ampicillin,Amp)对农杆菌的抑制效果。结果表明,Km对细枝木麻黄愈伤组织诱导适宜的选择压力是20mg/L,Km选择性筛选愈伤组织增殖的适宜质量浓度为40mg/L,愈伤组织芽分化的选择压力是40～50mg/L。在抗生素抑菌效果方面,Cef质量浓度为200mg/L、Cab300mg/L和Amp500mg/L能完全抑制农杆菌的生长。综合比较,对细枝木麻黄遗传转化研究最理想的抑菌剂是Cef,使用质量浓度低且能有效抑制根癌农杆菌的生长。     

红掌工厂化育苗关键技术研究

[目的]研究红掌工厂化育苗的关键技术。[方法]以红掌盆花和切花品种的叶片、叶柄、花苞片和花苞柱头为外植体,进行组培快速繁殖技术研究,探讨外植体的选择和消毒条件以及不同培养基对红掌愈伤组织的诱导、增殖和生根影响。[结果]叶柄为最佳外植体,愈伤诱导率最高,达78.3%;外植体采用0.1%HgCl2消毒8min的效果最好;粉冠军和MIDORI的最佳愈伤组织诱导培养基为1/2MS＋6-BA1.50mg/L＋KT1.00mg/L＋2,4-D0.10mg/L;最佳愈伤组织继代培养基为MS＋6-BA0.50mg/L＋KT0.50mg/L＋NAA0.10mg/L,添加10%的椰子汁或香蕉浆有利于增殖和丛芽生长,增殖率最高达2.83倍;最佳生根培养基为1/2MS＋NAA0.10mg/L＋IAA0.10mg/L,生根率达100%。[结论]该结果为红掌工厂化育苗体系的建立奠定了基础,对确保红掌产业的发展具有重要意义。     

3种抗生素对尾巨桉愈伤组织诱导及植株再生的影响

【目的】研究潮霉素、卡那霉素和头孢霉素对尾巨桉愈伤组织诱导、不定芽分化及生根的影响,确立抑制农杆菌生长的头孢霉素质量浓度。【方法】以尾巨桉无菌苗茎段为外植体,先后接种于添加不同质量浓度抗生素的愈伤组织诱导培养基、不定芽诱导培养基以及生根培养基上,统计愈伤组织诱导率、不定芽诱导率和不定芽生根率,观察头孢霉素对农杆菌生长的影响。【结果】(1)培养基中的潮霉素、卡那霉素、头孢霉素的质量浓度分别为15,25,200 mg/L时,尾巨桉外植体的愈伤组织诱导率分别为6.7%,12.1%和26.7%;(2)潮霉素、卡那霉素、头孢霉素的质量浓度分别为15,25,250 mg/L时,不定芽分化受到明显抑制,不定芽诱导率分别仅有2.6%,10.2%和7.6%;(3)潮霉素、卡那霉素、头孢霉素的质量浓度分别为15,25,250 mg/L时,不定芽生根困难,生根率分别为10.2%,16.2%和10.1%;当头孢霉素质量浓度≥200 mg/L时,农杆菌生长被完全抑制。【结论】尾巨桉对不同抗生素的敏感性存在差异,在尾巨桉遗传转化过程中,抗性愈伤组织与不定芽诱导的潮霉素适宜质量浓度为10 mg/L,卡那霉素为20 mg/L;生根诱导适宜的潮霉素和卡那霉素的质量浓度分别为15 和25 mg/L;抑制农杆菌生长的头孢霉素较适宜的质量浓度为200 mg/L。     

烟草叶片愈伤组织诱导及分化培养的验证

[目的] 研究烟草愈伤组织的发育情况及其丛生芽或分化点的形态建成。[方法] 在无菌条件下,把烟草叶片切块培养在含有2mg/L NAA和1mg/L6-BA的MS培养基上诱导愈伤组织的形成;而后,转移愈伤组织到含有NAA 0.1mg/L＋BA2.0mg/L的分化培养基上使其产生丛生芽或分化点。[结果] 诱导培养20d后,愈伤组织基本形成且没有发生污染,烟草叶片愈伤组织的诱导培养是成功的。愈伤组织的整体分化率比较高,愈伤组织上形成的丛生芽或分化点比较多,且分布比较均匀;编号为4的分化培养基上愈伤组织的分化不理想,且其丛生芽或分化点分布极不均匀。在烟草叶片愈伤组织的分化培养中NAA和6-BA的添加量分别为0.1和2.0mg/L。[结论] 该研究为植株繁育提供了良好的技术支持。     

刺梨花药愈伤组织的增殖培养

[目的]建立最佳的刺梨花药愈伤组织增殖培养体系。[方法]以刺梨花药愈伤组织为材料,研究其生长周期及基本培养基和生长素对刺梨花药愈伤组织增殖的影响。[结果]刺梨花药愈伤组织增殖过程中,其干重的变化明显呈"S"型,生长周期为25 d。B5培养基有利于刺梨花药愈伤组织的生长,而MS培养基影响刺梨花药愈伤组织叶绿素的形成。NAA1.0 mg/L是刺梨花药愈伤组织增殖培养的最佳生长素和浓度。[结论]刺梨花药愈伤组织增殖的最佳培养基是B5+1.0 mg/L6-BA+1.0 mg/LNAA。     

红掌初代培养诱导愈伤组织的品种间差异分析

[目的]不断优化红掌组培高效再生体系.[方法]以4个红掌盆栽品种的叶柄、叶片为外植体,研究红掌初代培养诱导愈伤组织的品种差异性.[结果]品种SAM、SST的愈伤组织形成能力强于SDM、SHG,其中品种SAM、SDM、SHG的叶片再生能力强于叶柄,而品种SST的叶柄再生能力较强.品种SST叶柄愈伤组织诱导的适宜培养基为1/2 MS+TDZ 4.0 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L,出愈率可达87.5％;品种SAM叶片愈伤组织诱导的适宜培养基为1/2 MS+TDZ 2.0 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L,出愈率高达90％;品种SDM、SHG叶片愈伤组织诱导适宜的培养基为1/2 MS+ZT 2.0 mg/L+2,4-D 0.2mg/L,出愈率分别可达59.34％和79.63％.[结论]在构建及优化红掌组培快繁技术体系时,除了品种因素以外,还需考虑不同外植体类型的分化能力差异.     

红掌愈伤组织分化培养相关影响因素的研究

研究了品种、基本培养基、激素处理、愈伤组织切块大小对红掌愈伤组织分化培养的影响。结果表明：相同条件下,不同品种红掌愈伤组织的芽诱导率、生长速度、生长状况相差较大; 1/2MS基本培养基中芽诱导效果最好,分化苗粗壮、较高、叶绿;激素配比以BA 2.0 mg／L、NAA 0.1 mg／L最佳,不定芽分化数量最多,平均每块愈伤组织产生14.8个不定芽;愈伤组织切块为10×8×5mm3时,愈伤块膨大倍数高、不定芽分化数多,且分化苗长势较好。     

红掌组织培养再生体系建立的研究

以红掌"骄阳"幼嫩叶片为材料,筛选出红掌愈伤组织诱导、不定芽分化、生根的最佳培养基及激素配比。结果表明:红掌愈伤组织诱导的最佳培养基为改良MS+6-BA 1.0 mg/L+2.4-D0.5 mg/L,不定芽分化培养基为改良MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,生根培养基为改良MS+IBA 0.6 mg/L+IBA 0.3 mg/L,生根率达到100%。     

藜麦愈伤组织诱导和分化条件初探

[目的]探索藜麦愈伤组织诱导和分化条件,为建立其遗传转化体系提供参考。[方法]以下胚轴为外植体进行根癌农杆菌侵染,在诱导阶段分别比较品种、光照、培养基碳源和外源基因对藜麦愈伤组织诱导的影响;在分化阶段分别比较培养基中KNO_3和6-BA浓度对愈伤组织分化的影响。[结果]从18个藜麦品种中筛选出9个较易诱导出愈伤组织的品种;光照较黑暗有利于诱导愈伤组织;以(20 g麦芽糖+10 g葡萄糖)为碳源时,愈伤组织形态最好;愈伤组织过表达SERK基因时,生长较快,体积较大。愈伤组织在含3 800 mg·L~(-1) KNO_3、不含6-BA或1.00 mg·L~(-1) 6-BA的再生培养基中形态不佳,难以分化。[结论]品种、光照、碳源、外源基因均影响藜麦愈伤组织诱导,KNO_3、6-BA浓度过高不利于其愈伤组织分化。     

红掌工厂化育苗关键技术研究

[目的]研究红掌工厂化育苗的关键技术。[方法]以红掌盆花和切花品种的叶片、叶柄、花苞片和花苞柱头为外植体,进行组培养快速繁殖技术研究,探讨外植体的选择和消毒条件以及不同培养基对红掌愈伤组织的诱导、增殖和生根影响。[结果]叶柄为最佳外植体,愈伤诱导率最高,达78.3%;外植体采用0.1%HgCl2消毒8 min的效果最好;粉冠军和MIDORI的最佳愈伤组织诱导培养基分别为1/2MS＋6-BA1.50 mg/L＋2,4-D0.50 mg/L＋NAA0.10 mg/L和1/2 MS＋6-BA1.50 mg/L＋KT1.00 mg/L＋2,4-D0.10 mg/L;最佳愈伤组织继代培养基分别为MS＋6-BA1.00 mg/L＋NAA0.50 mg/L＋2,4-D0.30 mg/L和MS＋6-BA0.50 mg/L＋KT0.50 mg/L＋NAA0.10 mg/L,添加10%的椰子汁或香蕉浆有利于增殖和丛芽生长,增殖率最高达2.83倍;最佳生根培养基为1/2 MS＋NAA0.10 mg/L＋IAA0.10 mg/L,生根率达100%。[结论]该结果为红掌工厂化育苗体系的建立奠定了基础,对确保红掌产业的发展具有重要意义。     

延龄草愈伤组织的诱导及植株再生

[目的]建立延龄草愈伤组织诱导、增殖和分化再生体系。[方法]以延龄草块根、根尖为外植体,应用正交试验方法设计植物生长调节剂组合和质量浓度配比,研究植物生长调节剂对延龄草愈伤组织形成、增殖和分化的影响。[结果]1/2MS是最适合延龄草块根、根尖诱导愈伤的培养基,添加6-BA 1.2 mg/L和IAA 0.6 mg/L的1/2MS培养基最适合于愈伤组织的诱导,其中以根尖愈伤组织的诱导效果最好,在添加6-BA 0.5 mg/L、IAA 0.6 mg/L的培养基中,愈伤组织的分化率最高,附加6-BA 1.2 mg/L、IAA 1.0 mg/L的1/2MS培养基为生根适宜培养基。[结论]延龄草的块茎和根尖外植体在适宜的激素组合中均可通过愈伤组织途径分化出不定芽,继而得到正常生长、发育的再生植株。     

茅膏菜组织培养研究初报

[目的]探讨培养基组合对茅膏菜愈伤组织形成、分化和生长的影响。[方法]以好望角茅膏菜为试验材料,在10种培养基上进行繁殖,研究不同的培养基组合对茅膏菜愈伤组织形成、分化和生长的影响。[结果]茅膏菜幼叶在MS培养基上能形成愈伤组织,但在花宝一号＋BA 0.1~1.0 mg/L＋NAA 0.1~0.5 mg/L＋琼脂6.5 g/L＋蔗糖10~30 g/L培养基上有利于愈伤组织形成,特别是花宝一号＋BA 1.0 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋琼脂6.5 g/L＋蔗糖20 g/L时更有利于愈伤组织形成 在MS＋活性炭＋BA 0.1~1.0 mg/L＋NAA0.1~0.5 mg/L＋琼脂6.5 g/L＋蔗糖10~30 g/L培养基有利于茅膏菜愈伤组织的分化,特别是MS＋活性炭＋BA 1.0 mg/L＋NAA 0.2mg/L＋琼脂6.5 g/L＋蔗糖30 g/L培养基既有利于愈伤组织分化出芽,又有利于幼苗分化出根。[结论]该研究为茅膏菜的快速繁殖奠定了基础。     

红掌愈伤组织培养及不定芽分化影响因素的研究

[目的]构建红掌愈伤组织培养再生植株的技术体系。[方法]以红掌叶片和叶柄愈伤组织为继代培养的外植体材料,探讨红掌品种、外植体大小、激素条件对愈伤组织不定芽分化的影响。[结果]红掌品种YNG1叶片愈伤组织的不定芽分化率最高,叶柄愈伤组织的不定芽分化率则以品种YNG2最高,而品种YNG3和YNG5仅叶片愈伤组织能分化不定芽,叶柄愈伤组织均无分化;与细胞分裂素6-BA相比,向分化培养基中添加ZT与TDZ可促进叶片愈伤组织的增殖及不定芽分化;选取直径约1.0~1.5 cm的愈伤组织块进行继代培养,不定芽分化较多,同时可缩短不定芽分化时间。[结论]该研究为构建稳定高效的红掌组培快繁技术体系提供了新的试验依据。     

亳菊叶片组织培养技术优化的研究

[目的]研究不同植物生长物质对诱导亳菊叶片愈伤组织诱导和不定芽分化的影响。[方法]以亳菊组培苗的叶片作为外植体,使用正接和背接2种方式接种于正交设计的培养基中,诱导叶片形成愈伤组织;再将愈伤组织接种于新配制的培养基中,对愈伤组织诱导率和芽分化率进行方差和极差分析。[结果]诱导亳菊叶片形成愈伤组织最佳的培养基组合为MS＋2.0 mg/L 2,4-D＋2.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA;诱导愈伤组织分化成不定芽的最佳培养基是MS＋2.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/LNAA。[结论]为亳菊的遗传转化体系构建和诱变育种提供了高效的操作系统。     

卡那霉素对紫花苜蓿愈伤组织诱导和分化的影响

[目的]研究紫花苜蓿叶片在诱导愈伤组织阶段、愈伤组织分化阶段对卡那霉素的敏感程度。[方法]确定卡那霉素对紫花苜蓿叶片愈伤组织形成的影响,并在形成愈伤组织的基础上,进一步确定卡那霉素对愈伤组织分化的影响。[结果]不同浓度的卡那霉素对紫花苜蓿叶片诱导愈伤与分化均有一定的抑制作用,而且随浓度升高,抑制作用增强;卡那霉素对愈伤组织分化阶段的敏感程度比诱导愈伤阶段高;分化阶段选择压力要控制在25 mg/L以下;延迟加入卡那霉素或在分化阶段降低卡那霉素浓度是对筛选转化苗的可取办法。[结论]该研究为利用农杆菌介导法转化紫花苜蓿奠定了基础。     

白子菜快速繁殖研究

[目的]探究白子菜组织培养最佳培养基配方实现其快速繁殖。[方法]研究不同培养基配方对白子菜组织培养过程中愈伤组织的产生、芽和根分化效果的影响。[结果]④MS＋BA 1.5 mg/L＋NAA 1.2 mg/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂粉6 g/L为白子菜形成愈伤组织的最佳培养基;⑤花宝一号＋BA 0.1 mg/L＋NAA 0.4 mg/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂粉6 g/L为诱导愈伤组织形成芽的最佳培养基;瑏瑢MS＋BA 1.5 mg/L＋NAA 1.2 mg/L＋蔗糖20 g/L＋活性炭1 g/L＋琼脂粉6 g/L为最佳生根培养基。[结论]活性炭对白子菜组织培养有影响,具有抑制愈伤组织形成和促进生根的作用。