水产品肌肉组织中氯霉素残留量检测方法的对比分析

初步比较了酶联免疫法(ELISA)中2种氯霉素试剂盒(荷兰EURO-DIAGNOSTICA试剂盒和德国r-Biopharm试剂盒)检测水产品氯霉素残留量的效果,并对测定水产品氯霉素残留量的气相色谱法(GC-ECD)和液相色谱-质谱法(LC-MS/MS)的技术参数进行了比较分析。结果表明,荷兰EURO-DIAGNOSTICA试剂盒和德国r-Biopharm试剂盒的检测范围分别为0.025~2.0μg.L-1和0.05~4.05μg.L-1,其板内相对标准偏差均小于10%,2种试剂盒检测25个鱼或虾样品的假阳性率分别为12%和20%。LC-MS/MS和GC-ECD的最低检测浓度分别为0.1μg.kg-1和0.27μg.kg-1,当氯霉素添加量为2μg.kg-1时其平均回收率分别为95.2%和70.4%;LC-MS/MS样品前处理较简单,GC-ECD较繁琐。     

酶联免疫技术在快速检测牛肉、蜂蜜中氯霉素残留的应用

采用酶联免疫试剂盒及绘制以氯霉素浓度为半对数坐标的标准曲线图对牛肉和蜂蜜中的氯霉素残留量进行测定,变异系数为3.1%~8.6%,精确度比较高,重复性比较好;加标回收率牛肉分别为60%、90%,蜂蜜分别为87%、90%。     

牛奶中氯霉素残留检测及四种前处理方法效果的比较

检测市售六种牛奶产品的氯霉素残留量,并比较四种不同前处理方法对检测效果的影响.采用胶体金免疫层析法检测牛奶产品中氯霉素的残留量;通过加标和ELISA试验,对比四种牛奶前处理方法对检测效果的影响.胶体金免疫层析法检测结果显示,六种牛奶的氯霉素含量均未超标,达到国家标准.准确度测定结果显示方法三的平均回收率最高;精密度分析...     

水产品中氯霉素药物残留检测方法

作为一种高效广谱的抗生素,氯霉素(CAP)已经广泛运用于生物疾病治疗。但最近的研究表明:氯霉素具有较强的毒理副作用,将氯霉素用于水产品中,对人的健康构成了巨大威胁,因此需要通过各种检测技术,严格控制水产品中氯霉素残留量。基于此简单综述了水产品中氯霉素的几种检测技术,并以液质联用法为例,较为详细的介绍了氯霉素残留量检测技术。     

酶联免疫法测定水产品中氯霉素的残留量

[目的]探索水产品中氯霉素残留量的快速检测方法。[方法]采用酶联免疫法(ELISA)测定鱼、虾类水产品中氯霉素的残留量。[结果]检测的20个水产品中有1个阳性样品,其他样品均为阴性。ELISA方法的检出限为0.01μg/kg,平均回收率为76.1%~90.7%,相对标准偏差(RSD)≤3.21%,在0.025~1.600 ng/ml范围内有良好的线性关系,相关系数为0.997 5。[结论]该检测方法灵敏度、准确度和精密度均符合残留分析质量控制的要求,适用于大批量水产品中氯霉素残留的快速检测。     

液相色谱-串联四级杆质谱测定猪肉中氯霉素残留量

建立了一种液相色谱-串联四级杆质谱测定猪肉中氯霉素残留量的实验方法。液相分离色谱柱采用AgilentSB-C18柱(2.1×50mm,5μm),以乙腈和0.1%甲酸水溶液体积比70:30作为流动相,样品经过提取净化柱洗脱浓缩后,采用液相色谱-串联四级杆质谱检测器测定猪肉中氯霉素残留量,测得本次实验氯霉素线性范围10～100ng/mL,氯霉素最低定量限为0.1μg/kg,平均加标回收率82.3%-90.2%,RSD为2.95%-6.52%。该方法适用于猪肉中氯霉素残留量的分析。     

土壤中克百威残留检测直接竞争ELISA试剂盒的研制

研制了一种用于检测土壤中克百威残留量的直接竞争ELISA(酶联免疫分析技术)试剂盒,研究结果表明:该试剂盒的最低检测限为0.01 mg/L,线性检测范围为0.01～10 mg/L,4种水样的批内、批间、整体变异系数均低于7.72%,回收率的范围在93.97%～97.92%.试剂盒在4 ℃或-20 ℃下至少可保存6个月以上.     

两种口蹄疫O型抗体阻断ELISA检测试剂盒应用比较

为评估两种常用口蹄疫O型抗体检测试剂盒的性能差异,本实验室对2020年春季随机抽检的三家规模养殖场提供的60份猪血清分别用液相阻断ELISA和固相阻断ELISA两种试剂盒进行了检测,并比较了两种试剂盒检测结果的阳性检出率和符合率。结果表明,两种方法检测结果总符合率为91.67%,符合率高。在基层畜牧兽医部门日常定性检测中,推荐使用固相阻断ELISA检测试剂盒。     

科技简讯

五种兽药残留检测试剂盒成功研制 由中国农业大学、北京望尔生物技术有限公司和中国兽医药品监察所，共同开发的5种兽药残留检测试剂盒，已经通过成果鉴定。鉴定结果表明，该试剂盒灵敏度高、准确度好、特异性强，各项指标均达到国外同类试剂盒的水平，填补了国内空白。这5种兽药为玉米赤霉醇、氯霉素、恩诺沙星、链霉素和四环素类。     

苹果中克百威残留快检测定及方法评估

【目的】提高苹果中克百威残留快速检测方法的灵敏度与准确度,确保苹果产品中克百威农药残留抽查的高效和准确性。【方法】以新疆阿克苏当地6个点位市售苹果为检测样品,采用行业标准NY/T 761-2008第3部分的液相色谱法为参比方法,分别选择3家快检试剂盒,根据《食品快速检测方法评价技术规范》对其快检适应性进行评估。【结果】利用参比方法和快检试剂盒均未从苹果样品中检出克百威残留。3家快检试剂盒可在0.01 mg/kg以上呈阳性显色反应,低于GB/T 2763-2019《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》中的限量要求;试剂盒灵敏度均为100%、特异性均为50%、假阴性率均为0、假阳性率均为50%、相对准确度均为90%。【结论】所测试剂盒适用于苹果中克百威残留量的快速筛查。     

信息

动物及其产品安全检测技术项目承担单位:中国农业大学本研究项目利用重组表达抗原、单克隆抗体和分子生物学等生物工程技术,在国内率先研制出具有自主知识产权的氯霉素等7种兽药残留检测及猪瘟单抗强弱毒鉴别等10种重大疫病诊断ELISA试剂盒,解决了产业化中试剂盒保存、常温运输     

高效液相色谱法检测牛奶中氯霉素残留

建立了高效液相色谱检测牛奶中氯霉素残留的方法。用乙腈提取氯霉素,提取液浓缩后用甲醇溶液溶解,在波长278 nm处用高效液相色谱仪测定氯霉素。该方法氯霉素浓度为1~30 mg/L时,样品平均回收率为85.33%~97.20%,相对标准偏差(RSD)为5.18%~10.63%。该方法适于牛奶中氯霉素残留的检测。     

鱼塘沉积物中氯霉素的超声萃取、净化与测定

通过对鱼塘沉积物中氯霉素的提取、净化洗脱和测定方法研究，尝试了以甲醇为萃取剂，利用超声萃取鱼塘沉积物中的氯霉素，然后再以层析柱净化，甲醇作洗脱液洗脱，用高效液相色谱法（HPLC）分析氯霉素含量。结果表明，当用甲醇超声萃取3次（30、10和10min），并用甲醇作层析柱净化洗脱液时，提取效果比较理想。利用HPLC分析氯霉素含量的色谱条件为：Hpersil ODS色谱柱4.6mm×250mm，进样量10μL，流速1.0mL·min^-1，柱温30℃，检测波长275nm，流动相为乙腈：水=60：40（V/V）。此方法的检测限为7μg·kg^-1，平均回收率为82.74%～88.38%，精密度RSD为0.4%～3.3%。应用该方法检测得到食用鱼塘和金鱼鱼塘沉积物中氯霉素的残留量分别为0.1716和0.1224mg·kg^-1。     

氯霉素残留检测竞争ELISA试剂盒的研制及其性能测定

应用抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞株建立竞争ELISA(ciELISA)分析方法,研制出CAP残留快速检测试剂盒(CAP-Kit),并对其性能进行了测定。结果表明,CAP-Kit标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,相关系数R2=0.9955,检测范围为0.1~128.0μg.L-1,半数抑制浓度(IC50)为2.4μg.L-1,灵敏度为0.053μg.L-1,检测限为0.1μg.L-1;奶样、肉样的平均添加回收率为88.5%、82.7%,平均批内和批间变异系数均<15%;CAP-Kit与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应(CR%)为150%,与其他酰胺醇类和抗菌药物无CR;基质对CAP-Kit的检测结果影响不大;CAP-Kit在4℃可保存6个月以上。     

新孢子虫病rELISA抗体检测试剂盒的应用

[目的]研发一种成熟稳定的新孢子虫病rELISA抗体检测试剂盒.[方法]在新孢子虫病rELISA检测方法建立的基础上,组装检测新孢子虫病的rELISA抗体检测试剂盒,对试剂盒的敏感性、保存期、特异性和重复性进行评价,并与两种商品化试剂盒进行对比试验,应用自制的试剂盒检测来自新疆各地州新孢子虫疑似病例区血清,共1329份.[结果]成功组装了新孢子虫病rELISA抗体检测试剂盒,且该试剂盒敏感性高、保存期长、特异性强、重复性较好.与两种进口商品化诊断试剂盒比较,其符合率均在90;以上.在1 329样品血清中157份是阳性,其平均阳性率为11.8;.[结论]该试剂盒可以取代商品化试剂盒进行新孢子虫病诊断,为新孢子虫病的防治工作提供技术和产品支撑.     

基于UPLC-MS/MS方法的家禽水产品中氯霉素残留检测

为家禽水产品中的氯霉素残留快速检测提供参考,以氯霉素-D5为内标,用乙酸乙酯提取样品氯霉素残留、正己烷进行脱脂净化、UPLC-MS/MS方法进行氯霉素残留含量检测。结果表明:在氯霉素浓度为0.2~10ng/mL时,基质标准曲线的方程为Y=0.816 397 X-0.038 239,R2=0.998 2,氯霉素与峰面积的线性关系良好,最低检出浓度为0.1μg/kg,样品的添加回收率为80%~110%,RSD5%。该方法可用于家禽及水产品中氯霉素残留定性和定量检测,且其精密度和准确度良好,操作简单快速。     

水产品中氯霉素检测方法的比较与分析

对胶体金免疫层析法、酶联免疫法、气相色谱法和气质联用法4种水产品氯霉素检测方法进行比较和分析。酶联免疫法因灵敏度高、特异性强、高通量、成本低,适合于水产品中氯霉素日常检测;气相色谱法和气质联用法结果可靠,但分析速度慢、成本高,可作为确证方法使用;而胶体金免疫层析法因分析速度快,但灵敏度低,可用作粗筛快速检测。根据多年的ELISA检测经验：r—Biopharm、ED、C．E．R试剂盒质量稳定,检测结果较理想,适合于氯霉素日常检测。     

农产品中玉米赤霉醇ELISA检测试剂盒的研制与应用

[目的]建立快速、有效检测农产品中玉米赤霉醇(ZER)残留量的方法。[方法]试验以人工合成的ZER为包被原,ZER为竞争半抗原,两者与一定量的抗玉米赤霉醇单克隆抗体反应,应用间接竞争ELISA法建立玉米赤霉醇单克隆抗体快速检测农产品中ZER含量的半定量检测,同时对该ELISA试剂盒进行了调试。[结果]试验建立检测ZER的ELISA方法,其最适包被浓度为1∶5 000,抗体最适工作浓度为1∶2 500,酶标二抗的最适工作浓度为1∶5 000。试剂盒检测限为0.5 ng/ml,添加回收率在70.0%~116.0%,变异系数小于20%,在2~8℃条件下可保存90 d。[结论]该试验建立的方法可应用于玉米、小麦、高粱等中的玉米赤霉醇的检测,应用前景广阔。     

ELISA检测蜂王浆氯霉素残留的快速前处理方法

为获得一种能快速检测蜂王浆中氯霉素残留的前处理方法,采用改良的0.1mol/L Tris-TBE(pH=8.0)溶液处理蜂王浆,结合乙酸乙酯提取氯霉素(CAP),处理时间约25min。ELISA检测样品的OD450值明显低于试剂盒法,通过添加标准CAP溶液对改良法进行验证。结果表明,改良法提取的样品对不同CAP质量浓度表现出明显的OD450值变化,与添加前比较差异显著(P<0.05),排除处理过程存在干扰显色的因素。改良法检测相同样品的平均相对标准偏差为1.29%,完全符合目前国际上氯霉素残留检测的要求。     

三甲氧苄氨嘧啶单克隆抗体制备以及酶联免疫试剂盒的研究（英文）

[目的]探讨系统地检测水质中三甲氧苄氨嘧啶残留量的方法。[方法]通过三甲氧苄氨嘧啶与马来酸酐反应,得到三甲氧苄氨嘧啶半抗原,再通过免疫动物得到抗三甲氧苄氨嘧啶的单克隆抗体,并将其应用于能够检测水质中三甲氧苄氨嘧啶残留量的ELISA试剂盒。[结果]该试剂盒对水质中三甲氧苄氨嘧啶的检测限为2.34μg/kg,IC50(50%抑制浓度)为4.8μg/L,回收率为60.5%~79.7%,试剂盒的标准曲线范围为0~80μg/L,批内、批间的相对标准偏差均小于10%。三甲氧苄氨嘧啶单克隆抗体与二甲氧苄氨嘧啶的交叉反应率小于1%。4℃下能够保存12个月,稳定性较好。[结论]研究结果为监管三甲氧苄氨嘧啶的滥用提供参考依据。