翘鳞伞菌丝体生长培养研究

为了提高生产效率、缩短翘鳞伞的生长周期,对翘鳞伞菌丝体的生长培养条件进行优化。单因素试验以及Plackett-Burman试验结果表明:翘鳞伞菌丝体生长的最适碳源为麦芽糖,最适氮源为酵母粉,最适pH为5,最适温度为23℃;影响翘鳞伞生长的主要因素为麦芽糖、酵母粉和K2HPO4。通过最陡爬坡试验和正交试验确定翘鳞伞菌丝生长的最优培养基为:35g/L麦芽糖+1.5g/L酵母粉+0.5g/L K2HPO4+0.5g/L KH2PO4+0.5g/L MgSO4。在最佳培养条件下,菌丝体菌落直径由6.11cm增加到7.41cm。     

脂肪酸对大巴山多脂鳞伞菌丝体生长的影响

用平板培养法研究了不同饱和度脂肪酸及其复配液对大巴山多脂鳞伞菌丝体生长的影响。结果表明:不同饱和度脂肪酸及其复配对多脂鳞伞菌丝体生长的促进作用不同;单不饱和脂肪酸+多不饱和脂肪酸对菌丝体生长的促进作用最大,菌丝体浓密、淡黄色,轮纹明显;饱和脂肪酸的促进作用最小,菌丝体较浓密,乳白色,轮纹不明显。     

脂肪酸对大巴山多脂鳞伞菌丝体生长的影响

用平板培养法研究了不同饱和度脂肪酸及其复配液对大巴山多脂鳞伞菌丝体生长的影响。结果表明:不同饱和度脂肪酸及其复配对多脂鳞伞菌丝体生长的促进作用不同;单不饱和脂肪酸+多不饱和脂肪酸对菌丝体生长的促进作用最大,菌丝体浓密、淡黄色,轮纹明显;饱和脂肪酸的促进作用最小,菌丝体较浓密,乳白色,轮纹不明显。     

土生鳞伞液体发酵工艺条件的优化研究

为了提高土生鳞伞菌丝体的产量,在单因素试验基础上,考察培养温度、摇床转速、培养时间和培养基起始pH对菌丝体干质量的影响,并通过Box-Behnken试验设计和响应面分析法确定土生鳞伞液体发酵最佳工艺条件,对影响土生鳞伞(Native scale umbrella)菌丝生长的关键影响因子最佳水平范围进行研究和探讨。结果表明,土生鳞伞菌丝产量发酵培养条件的最佳组合是:温度25℃,摇床转速180r/min,培养时间9d,pH7,菌丝产量实测值为40.332g/100mL。此研究结果可为土生鳞伞液体发酵的试验生产提供理论依据。     

新疆多脂鳞伞对不同氮源物质的多样性利用特征

通过新疆阿瓦提野生多脂鳞伞(Pholiota adiposa)氮源物质的选择性利用能力评价,掌握新疆野生多脂鳞伞种质资源氮代谢特性,为资源保护和种质创新提供理论依据。通过在15种不同含氮处理培养基上的菌落形态特征、菌丝体显微观察、生长量、生长速率、生长高峰期、满皿时间、达到总生长量50%的天数的分析表明,当氮源为牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、硝酸铵、硝酸钾、硫酸铵、氯化铵、谷氨酰胺和天门冬氨酸时,多脂鳞伞LL-01菌丝体生长速度快、活力强、长势整齐、菌落形态结构完整、锁状联合发育正常。其中当有机氮为蛋白胨、无机氮为硝酸铵、氨基酸类物质为谷氨酰胺时,菌丝体总生长量分别达到77.70mm、79.90 mm和65.27 mm。阐明了多脂鳞伞对不同性质的氮源采用了不同的氮代谢途径,表现出对不同类型的含氮物质的利用速率和利用效率的差异,且具有氮源利用的多样性特征。     

大黄素对人肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响及机制探讨

研究大黄素对人肺癌A549细胞的药效及其诱导细胞凋亡的分子机制。通过MTT法检测大黄素对A549细胞的杀伤作用;通过Annexin V-FITC/PI双染和流式细胞术检测大黄素对A549细胞的凋亡作用;通过免疫印迹法检测细胞凋亡相关蛋白的表达量变化。大黄素对A549细胞具有良好的杀伤作用且呈浓度依赖性;荧光显微镜和流式细胞术检测发现大黄素能够诱导A549细胞的凋亡且呈时间依赖性;Western blot检测显示大黄素处理A549细胞后,p-AKT、Bcl-2的表达量明显减少,Bad和cleaved-caspase-3的表达水平明显增加。大黄素通过调控AKT信号传导途径诱导人肺癌A549细胞的凋亡。     

毛头鬼伞多糖抗烟草花叶病毒(TMV)活性研究初报

【目的】为探讨毛头鬼伞多糖(Coprinus comatus)的生物活性,对毛头鬼伞多糖抗烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)活性进行测定,明确活性部位,为进一步分离纯化提供理论依据。【方法】从毛头鬼伞子实体和菌丝体提取多糖,并初步纯化,采用半叶法和叶碟法对抗病毒活性进行测定。【结果】毛头鬼伞多糖对TMV具有较强的体外抑制和抗病毒侵染作用,对TMV具有明显的体内抑制复制效果;在TMV接种前施用可以显著降低TMV侵染能力。【结论】毛头鬼伞多糖具有较好的抗TMV活性,为其进一步开发利用提供理论依据。     

金毛鳞伞液体培养工艺优化研究

以金毛鳞伞菌丝体干重为指标,以温度、转速、培养基pH、三角瓶装液量进行单因素试验,在单因素试验基础上设计正交试验,得出最适合金毛鳞伞液体培养的参数组合为：温度26℃、转速160r/min、培养基pH6.0、装液量为100mL。     

款冬花多糖对肺腺癌A549细胞生长及凋亡的影响

目的观察款冬花多糖对人非小细胞肺癌A549生长及凋亡的影响,探讨其体外的抗肿瘤效应。方法体外培养A549细胞,以不同浓度的款冬花多糖为实验组,并设对照组,CCK8法测细胞增殖抑制效应、荧光倒置显微镜观察药物对细胞凋亡的影响,流式细胞术检测A549细胞中P53和Bcl-2蛋白表达情况。结果不同浓度款冬花多糖作用A549细胞24h增殖抑制明显(P<0.05),其抑制效应具有剂量依赖的特点并可诱导A549细胞凋亡,同时上调p53基因表达、下调bcl-2基因表达(P<0.05)。结论款冬花多糖可抑制A549细胞的生长且增殖抑制效应具有剂量依赖性,并可诱导肿瘤细胞凋亡,其抗肿瘤效应可能与细胞凋亡相关基因表达的调控有关。     

新疆黄伞LL-01对12种碳源物质利用能力评价

为了掌握新疆野生黄伞驯化培育过程中碳源的利用能力,开展碳源优化研究,为种质资源的保护、菌株保存和驯化提供基础数据。通过黄伞LL-01在不同处理培养基上的菌落形态特征、显微观察、生长量、生长速率、生长高峰期、满皿时间、达到总生长量50%的天数的分析,发现黄伞LL-01对12种碳源均能利用,当碳源为葡萄糖、麦芽糖、红糖和甘露醇时,菌丝体生长速度快、活力强、长势整齐、菌落完整、菌丝体形态结构完整、锁状联合发育正常,菌丝体总生长量分别是74.86,76.31,77.18,76.19mm。为保证菌丝体生长,黄伞LL-01对单糖、双糖、多糖、醇类有不同碳代谢途径,具有广泛碳源适应性。     

细辛对番茄早疫病菌的抑制作用及其活性成分的分离

以番茄早疫病菌为供试植物病原菌,采用生物活性追踪法和活体盆栽试验法评价了细辛提取物的抑菌活性,并探索了细辛的杀菌活性成分。结果表明:细辛氯仿粗提取物在96和48 h对供试菌的菌丝生长和孢子萌发都有较强的抑制作用。其中对菌丝生长和孢子萌发的半效应浓度EC50分别为1.69和0.41 mg/mL。细辛氯仿粗提取物经萃取分离得到的石油醚、氯仿和甲醇组分中,石油醚组分对供试菌孢子萌发具有强抑制作用,处理48 h后抑制率达到100%;但处理96 h后对菌丝生长的抑制率仅有40%。氯仿组分对供试菌的菌丝生长和孢子萌发均具有较好的抑制作用,分别为72.27%和83.42%。对氯仿组分进行硅胶柱层析分离,得到4个高活性流分,在96 h对供试菌菌丝生长的抑制率达到85%以上。在盆栽试验中,4 mg/mL细辛氯仿提取物对番茄早疫病的保护和治疗作用达70%以上,与化学农药处理无显著差异。试验显示细辛对番茄早疫病菌具有较好的防治效果。     

苍耳提取液与植物内生真菌抗菌活性研究(英文)

[Objective] The study was aimed to provide theoretical foundation for developing a new fungicide with high activity,low toxicity and low residua.[Method] Based on the plant growth rate and inhibition zone methods,the antifungal activity of extracts of every organ of Xanthium sibiricum,the fermentation liquid of endophytic fungi MC4-23,and the extract of mycelium were tested with six kinds of pathogenic fungi and three kinds of pathogenic bacteria respectively.[Result] The extract of every organ of Xanthium sibiricum,the fermentation liquid of endophyic fungi MC4-23,and the extract of mycelium all had antifungal activities.The acetone extracts of Xanthium sibiricum had stronger antifungal activities than the ethanol extracts of Xanthium sibiricum.The extracts of leaf have the strongest antifungal activities against fungi and bacteria.The inhibition rates of the six pathogenic fungi were all above 47.8%,and the inhibition diameters of the three pathogenic bacteria were all above 0.5 centimeter.The fermentation liquid of endophytic fungi also had strong activities against the fungi and bacteria.The inhibition rates of the six pathogenic fungi were all above 68.1%.The extracts of root of Xanthium sibiricum and the mycelium of endophytic fungi were all had antifungal activities.[Conclusion] Xanthium sibiricum and endophyic fungi MC4-23 had great value of development and utilization.     

Preliminary Studies on Antifungal Activity of Xanthium sibiricum and the Endophytic Fungi

[Objective] The study was aimed to provide theoretical foundation for developing a new fungicide with high activity,low toxicity and low residua.[Method] Based on the plant growth rate and inhibition zone methods,the antifungal activity of extracts of every organ of Xanthium sibiricum,the fermentation liquid of endophytic fungi MC4-23,and the extract of mycelium were tested with six kinds of pathogenic fungi and three kinds of pathogenic bacteria respectively.[Result] The extract of every organ of Xanthium sibiricum,the fermentation liquid of endophyic fungi MC4-23,and the extract of mycelium all had antifungal activities.The acetone extracts of Xanthium sibiricum had stronger antifungal activities than the ethanol extracts of Xanthium sibiricum.The extracts of leaf have the strongest antifungal activities against fungi and bacteria.The inhibition rates of the six pathogenic fungi were all above 47.8%,and the inhibition diameters of the three pathogenic bacteria were all above 0.5 centimeter.The fermentation liquid of endophytic fungi also had strong activities against the fungi and bacteria.The inhibition rates of the six pathogenic fungi were all above 68.1%.The extracts of root of Xanthium sibiricum and the mycelium of endophytic fungi were all had antifungal activities.[Conclusion] Xanthium sibiricum and endophyic fungi MC4-23 had great value of development and utilization.     

苍耳提取液与植物内生真菌抗菌活性研究(英文)

[Objective] The study was aimed to provide theoretical foundation for developing a new fungicide with high activity,low toxicity and low residua.[Method] Based on the plant growth rate and inhibition zone methods,the antifungal activity of extracts of every organ of Xanthium sibiricum,the fermentation liquid of endophytic fungi MC4-23,and the extract of mycelium were tested with six kinds of pathogenic fungi and three kinds of pathogenic bacteria respectively.[Result] The extract of every organ of Xanthium sibiricum,the fermentation liquid of endophyic fungi MC4-23,and the extract of mycelium all had antifungal activities.The acetone extracts of Xanthium sibiricum had stronger antifungal activities than the ethanol extracts of Xanthium sibiricum.The extracts of leaf have the strongest antifungal activities against fungi and bacteria.The inhibition rates of the six pathogenic fungi were all above 47.8%,and the inhibition diameters of the three pathogenic bacteria were all above 0.5 centimeter.The fermentation liquid of endophytic fungi also had strong activities against the fungi and bacteria.The inhibition rates of the six pathogenic fungi were all above 68.1%.The extracts of root of Xanthium sibiricum and the mycelium of endophytic fungi were all had antifungal activities.[Conclusion] Xanthium sibiricum and endophyic fungi MC4-23 had great value of development and utilization.     

苍耳提取液与植物内生真菌抗菌活性研究

[目的]为研制高效、低毒、低残留的新型杀菌剂提供理论依据。[方法]采用生长速率法和抑菌圈法,分别以水稻纹枯病菌等6种植物病原真菌和大肠杆菌等3种病原细菌为供试菌种,对苍耳各器官(根、茎、叶、果)提取液、植物内生真菌MG4-23的发酵液及菌丝体提取液进行抑菌活性测定。[结果]苍耳各器官提取液、植物内生真菌发酵液及菌丝体提取液均有抑菌作用。苍耳的丙酮提取液抑菌活性要好于乙醇提取液。苍耳中抑菌活性最高的器官是叶,对6种供试病原真菌的抑制率均在47.8%以上,对3种病原细菌的抑制直径均在0.5 cm以上。植物内生真菌发酵液的抑菌活性也很明显,对6种供试病原真菌的抑制率均在68.1%以上,对3种病原细菌也具有抑制性。苍耳根和植物内生真菌菌丝体提取液的抑菌活性也较明显。[结论]苍耳和植物内生真菌MG4-23均具有较大的开发利用价值。     

20种有毒植物的不同提取物对玉米弯孢叶斑病菌的抑菌活性测定

用生长速率测定法，测试了长白山20种有毒植物的不同溶剂提取物对玉米弯孢叶斑病菌（Curvularia lunata Boed．）的离体抑制活性．结果表明，供试20种有毒植物的不同溶剂提取物在稀释1000倍的情况下，艾蒿正丁醇提取物对供试病原菌的菌丝生长抑制率最高（81．01％），藜芦生物碱提取物与延胡索氯仿提取物也表现出较高的活性。     

风信子内生菌代谢产物的活性检测

对风信子内生菌代谢产物抑菌活性的检测结果表明：风信子内生菌的代谢产物对细菌和真菌均有一定的抑菌活性。其中发酵液提取物对枯草芽孢杆菌有一定的抑菌活性,对苹果干腐和烟草赤星的抑菌率分别是94．8％和93．8％,而菌体提取物对蜡状芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌都有较高的活性,对苹果干腐、烟草赤星和苹果轮纹的抑菌率均在80％以上。     

山竹果皮提取物农药活性研究

探索山竹果皮提取物在农业中的杀虫抗菌活性,为新型植物源农药的开发提供理论依据。采用浸叶法测定山竹果皮乙醇、石油醚、氯仿、乙酸乙酯及正丁醇等5种提取物对斜纹夜蛾3龄幼虫拒食和毒杀活性;以生长速率法测定这5种提取物对12种植物病原真菌的抗菌活性。结果显示:山竹果皮提取物对斜纹夜蛾3龄幼虫均具有一定的拒食及毒杀作用,以氯仿提取物的拒食活性最高,其24和48 h拒食率分别为72.51%和65.75%;而毒杀作用以石油醚提取物最强,其处理5 d后,斜纹夜蛾的校正死亡率为53.70%。抑菌试验显示山竹氯仿提取物对芒果炭疽病菌、水稻纹枯病菌、番茄灰霉病菌和芒果蒂腐病菌等4种植物病原真菌具有明显抑制菌丝生长作用,其EC50值分别为0.230 5、0.429 3、0.265 2和0.390 1 mg/m L。由此说明,山竹果皮提取物具有良好的杀虫抗菌活性,基于山竹产物开发新型植物源农药具有潜在的利用价值。     

2种中药提取物对番茄灰霉病菌和番茄早疫病菌的抑制活性研究

[目的]研究白术和白头翁2种中药提取物的杀菌活性,为其在植物源农药上的开发利用奠定基础。[方法]采用菌丝生长速率法,研究了白术和白头翁2种植物提取物对番茄灰霉病菌和番茄早疫病菌的抗菌活性。[结果]供试2种中药提取物对番茄灰霉病菌和番茄早疫病菌均具有较好的抗菌活性,其中白头翁提取物的抗菌活性最好,在供试提取物质量吸度为10 mg/ml时,72 h白头翁正丁醇提取物对番茄灰霉病菌的抑制率达80.25%,白术石油醚提取物对番茄灰霉病菌的抗菌活性较好,抑制率为71.36%,且提取物的抗菌活性随着吸度的增大而增强,白头翁正丁醇提取物对番茄灰霉病菌的EC50为2.93 mg/ml,白术石油醚提取物对番茄灰霉病菌的EC50为5.31 mg/ml。[结论]白头翁提取物对番茄灰霉病菌和番茄早疫病菌的抑制活性较好,值得进一步研究。     

枯草芽孢杆菌Bs-916胞外抗菌蛋白质的生物功能分析

采用AKTA-epxlore层析系统,利用DEAE sepharose fast flow、Phenyl sepharose 6 F.F.和羟基磷石灰石柱层析后,分离纯化获得枯草芽孢杆菌Bs-916抗菌蛋白质Bacisubin.该蛋白质对水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)、水稻稻瘟病菌(Magnaporthe grisease)、油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)、白菜黑斑病菌(Alternaria oleracea)、甘蓝黑斑病菌(A. Brassicae)、灰霉病菌(Botrytis cinerea)、辣椒炭疽病菌(Colletotrichum capsici (syd.) Butl.)和水稻恶苗病菌(Fusarium moniliforme Sheld)均有抑菌活性,尤其对Alternaria属的病原菌具有较高的毒力.枯草芽孢杆菌Bs-916胞外抗菌蛋白质的抑菌机制是造成病原菌菌丝营养吸收困难,致使菌丝顶端膨大,分支增加,胞壁加厚、断裂,从而抑制了病原菌的生长.研究发现抗菌蛋白具有凝集素活性和核糖核酸酶活性,无蛋白酶活性和蛋白酶抑制活性.