铁皮石斛试管苗快繁体系

铁皮石斛Dendrobium officinale是一种名贵药用植物,野生资源亟待保护,必须通过试管苗快繁技术研究,才能满足人们对它的需要。通过不同基本培养基对铁皮石斛进行种子发芽试验,不同消毒方法对茎尖进行存活率试验,不同植物生长调节物质组合对不定芽、原球茎和壮苗及根系的诱导试验的结果表明:铁皮石斛胚培养最佳培养基为1/2 MS(Murashigeand Skoog) 添加物A 25 g.L-1蔗糖;4种消毒方法中最佳消毒方法为B,外植物茎尖存活率可达76.2%。不定芽诱导最佳培养基为1/2 MS 1.5 mg.L-16-苄基腺嘌呤(BA) 0.25 mg.L-1萘乙酸(NAA),诱导倍数4.7。原球茎诱导最佳培养基为1/2 MS 1.0 mg.L-1BA 0.5mg.L-1NAA,诱导率为58%。不定芽最佳生根培养基为1/2 MS 0.5 mg.L-1NAA,生根率为100%,平均生根数为7.1条。建立了铁皮石斛试管苗快繁体系,为其广泛应用提供了依据。图1表5参11     

铁皮石斛抗寒品种的快速繁殖

以铁皮石斛抗寒品种茎段为外植体,运用组织培养技术建立铁皮石斛无性快繁体系,筛选出铁皮石斛快繁的最佳培养基。结果显示,以铁皮石斛茎段为外植体诱导原球茎,最佳诱导培养基为MS+6-BA 2 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)+IBA 0.2 mg·L~(-1),诱导率为66.67%。原球茎最佳分化培养基为MS+6-BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)+IBA 0.1 mg·L~(-1),苗整齐健壮,叶片大而浓绿。试管苗生根的最佳培养基为1/2 MS+IBA 0.2 mg·L~(-1)+NAA 0.3 mg·L~(-1),生根率为100%。驯化移栽基质为碎砖瓦15%+松树皮50%+刨花25%+羊屎10%。     

黑节铁皮石斛组织培养技术研究

对黑节铁皮石斛茎尖原球茎诱导和茎尖增殖以及小苗生根进行了初步研究。采用黑节铁皮石斛无菌苗茎尖,经过75%乙醇消毒30 s后,去除表皮,黑节铁皮石斛带节茎尖原球茎诱导与茎尖增殖最佳培养基为1/2MS+5.5 g/L琼脂+0.55 mg/L 6-BA+0.55 mg/L NAA+0.1 mg/L AgNO_3+100 g/L土豆泥+20 g/L白砂糖+0.45 g/L活性炭。黑节铁皮石斛生根最佳培养基为1/2MS+5.5g/L琼脂+0.15 mg/L 6-BA+0.55 mg/L NAA+0.1 mg/L AgNO_3+100 g/L香蕉泥+20 g/L白砂糖+0.25 g/L活性炭。     

光叶石楠组培快速繁殖

以光叶石楠Photinia glabra 当年生枝的茎段为材料, 进行植物生长调节物质对光叶石楠腋芽诱导、增殖、分化、生长及生根的对比试验。结果表明:MS +0.5 mgL-1BA +1.0 mgL-1KT +0.1 mgL-1NAA 为腋芽诱导的最适培养基, 腋芽诱导率达93.3 %;MS +1.0mgL-1BA +0.1 mgL-1NAA 为芽增殖最适培养基。1/2 MS +0.1 mgL-1 IBA 和1/2 MS +0.1 mgL-1NAA 为光叶石楠试管苗生根较为合适的培养基, 生根率分别为83.3 %和93.0 %, 试管苗移栽成活率达90 %以上。表3 参5     

铁皮石斛组培快繁技术

以铁皮石斛茎段为外植体,探究最佳的外植体消毒方法和最适的诱导、增殖、生根培养基,进而优化铁皮石斛组培快繁体系。结果表明,最佳外植体消毒方法为30%次氯酸钠消毒10 min,外植体污染率6%,死亡率0;最适诱导培养基为基础培养基(MS)+2 mg·L^-1细胞分裂素(BA)+0.5 mg·L^-1萘乙酸(NAA),在此培养基中再生芽生长快速且健壮,诱导率为5.6;最适增殖培养基为MS+0.5 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 BA,在此培养基中丛生芽芽势健壮,生长快,增殖率为3.8;最适生根培养基为MS+0.5 mg·L^-1 NAA,在此培养条件下组培苗的平均根数达7.3条,平均根长5.8 cm,根系正常且生长快速。本研究优化了铁皮石斛组培快繁体系,可为组培快繁工厂化生产流程的进一步优化提供依据。     

铁皮石斛茎段原球茎的诱导、分化与植株再生

为建立铁皮石斛Dendrobium officinale茎段原球茎途径的快繁技术体系,以带腋芽的无菌茎段为材料,利用正交试验的方法,研究基本培养基、植物生长调节剂、蔗糖质量浓度和添加物对原球茎的诱导、增殖与分化和生根的影响。结果表明,原球茎诱导的最佳培养基为1/2MS+6-BA4mg·L~(-1)+NAA0.1mg·L~(-1);原球茎增殖与分化的最佳培养基分别为MS+蔗糖30g·L~(-1)和1/2MS+蔗糖10g·L~(-1)+马铃薯泥10%;生根的最佳培养基为1/2MS+NAA1mg·L~(-1)+马铃薯泥10%+香蕉泥10%,成功建立了铁皮石斛茎段从原球茎诱导到植株再生的组培技术体系。     

乳白石蒜组织培养

以乳白石蒜Lycoris albiflora 的鳞茎作为外植体, MS 为基本培养基, 比较9 种不同配方对乳白石蒜不定芽诱导和增殖的作用。结果表明:MS +1.0mgL-1BA +0.1mgL-1NAA 是最佳的不定芽诱导培养基, 最高诱导率达到100 %;通过切割诱导得到的小鳞茎, 在MS +5.0mgL-1BA +2.0 mgL-1NAA 培养基上得到了最好的增殖效果, 最高增殖倍数达到15 ;MS +1.0 mgL-1BA +2.0 mgL-1NAA 是较好的生根培养基。表5 参11     

铁皮石斛的组培技术研究

为了研究铁皮石斛最佳的组织培养方法,本试验以铁皮石斛带节茎段作为外植体,探寻铁皮石斛的最佳基本培养基,最优消毒时间,以及不同浓度的NAA和6-BA对腋芽诱导、丛芽增殖、生根壮苗的影响.结果表明:以铁皮石斛带节茎段作外植体时,最佳的基本培养基是1/2MS培养基,在1‰HgCl2中浸泡消毒的最优时间为10 min;诱导腋芽时以1/2MS+10 g·L-1蔗糖+0.6 mg·L-1 NAA+1.5 mg·L-16-BA为最佳培养基;诱导丛芽增殖的最佳培养基为1/2MS+0.6 mg·L-1 NAA+1.5 mg·L-16-BA;诱导生根的最佳培养基为1/2MS+0.5 mg·L-1 IBA+0.9 mg·L-1 NAA.     

德国鸢尾的组织培养试验

取德国鸢尾驯化种的茎尖外植体块,接种于不同激素配比的基本培养基上.结果表明,不定芽诱导最佳培养基为MS BA 0.5mg·L-1 NAA 0.2;不定芽增殖最佳培养基为MS BA 1.0 NAA 0.1;不定根诱导最佳培养基为1/2MS NAA 1.0;试管苗炼苗最佳基质配比为泥炭:珍珠岩=7:3,成活率达85%以上.     

添加物和植物生长调节剂对铁皮石斛离体快速繁殖的影响

以铁皮石斛未成熟种子为外植体,在离体条件下进行原球茎诱导,类原球茎增殖、分化、生根试验研究。结果表明,以种子萌发直接诱导原球茎的适宜培养基为MS+1.0mg/L BA+0.5mg/L NAA+0.5g/L活性炭(AC)+1.0g/L水解酪蛋白(CH),诱导率达95%以上。在MS+1.0mg/L BA+0.5mg/L KT+0.5mg/L NAA+0.5g/L AC+0.6g/L CH条件下可获得类原球茎最大增殖系数(达18.7),该培养基也适宜于维持类原球茎的增殖保存。类原球茎的最大分化率为93.7%,所需的培养基成分为MS+0.5mg/L BA+0.5mg/L KT+0.2mg/L NAA+0.5g/L AC+0.6g/L CH。试管苗在1/2 MS+0.5mg/L NAA+0.5g/L AC培养基上生根率达100%,且根系健壮发达,移栽后全部成活,长势良好。     

花叶络石的组织培养

通过对植物生长调节物质种类、质量浓度及配比对花叶络石Trachelospermum jasminoides `Variegatum' 茎段和腋芽诱导、增殖、腋芽增殖、最佳继代时间和生根的影响进行探讨, 旨在建立花叶络石组织培养的再生体系, 为其产业化生产提供技术平台。结果表明:花叶络石较理想的腋芽诱导培养基为MS +BA 3.0 mgL-1 +NAA 0.1 mgL-1 , 其诱导率为88 %;最佳的腋芽增殖培养基为MS +BA1.5 mgL-1 +NAA 0.1mgL-1 , 增殖系数为6 , 继代周期以25 d 为佳, 最佳的生根培养基为1/2MS 或1/2 MS +BA 0.1 mgL-1 +NAA 0.1 mgL-1 , 生根率均达到90 %以上。表4 参6     

黄花白芨组培快繁技术

用不同的基本培养基、不同的植物生长调节剂及其配比、不同的原球茎切割方式系统地研究了黄花白芨(Bleti lla ochracea)组织培养技术。试验结果表明:1/2 MS +1.0 mgL-1 BA +0.1 mgL-1 NAA 培养基有利于原球茎增殖, 培养60 d 增殖到4.21 倍;Kyoto +1.0 mgL-1 BA +0.1 mgL-1 NAA 的培养基有利于诱导原球茎增殖、分化及幼苗的生长, 培养60 d 分化形成的芽数为接种原球茎数的4.79 倍;Kyoto +2.0 mgL-1 BA +0.1 mgL-1 NAA 的培养基对球茎切块诱导芽的效果最好。在继代培养中, 应采用纵切法切割球茎或用自然掰开法来分割原球茎。同时, 对进一步的研究提出了建议。表5 参4     

铁皮石斛以芽繁芽离体培养技术体系的建立

【目的】建立铁皮石斛以芽繁芽离体培养技术体系,为广西铁皮石斛良种选育及种苗繁殖提供技术支持。【方法】以广西桂平种、容县种和西林种3种野生铁皮石斛后代材料茎段为外植体,进行丛生芽诱导、增殖和壮苗生根培养,探讨不同消毒时间和不同激素配比对丛生芽诱导培养等过程的影响。【结果】3种材料外植体的最佳消毒时间为10min,污染率仅10．0％-20．0％;桂平种丛生芽最佳诱导培养基为MS＋2．0mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA＋10％椰子汁,丛生芽诱导率7．8％;容县种和西林种丛生芽诱导最佳培养基为MS＋1．5mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA＋10％椰子汁,丛生芽诱导率分别为23．1％和30．8％。3种材料丛生芽继代增殖最佳培养基为MS＋0．5mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA＋10％椰子汁,平均增殖倍数为3～5倍;壮苗生根最佳培养基为1／2MS＋0．5mg／LNAA＋0．2mg／LIBA＋10％香蕉泥,生根率在95．0％以上;以松树皮为移栽基质,移栽成活率在90．0％以上。【结论】以桂平种、容县种和西林种3种野生铁皮石斛后代材料茎段为外植体均可建立以芽繁芽离体培养技术体系;在诱导培养基和继代培养基中增加继代次数,可提高铁皮石斛的诱导率和增殖倍数。     

黄花白芨组培快繁技术

用不同的基本培养基,不同的植物生长调节剂及其配比,不同的原球茎切割方式系统地研究了黄花白芨组织培养技术,试验结果表明：１／２ＭＳ＋１．０ｍｇ．Ｌ＾－１ＢＡ＋０．１ｍｇ．Ｌ＾－１ＮＡＡ培养基有利于原球茎增殖,培养６０ｄ增殖到４．２１倍;     

垂花百合鳞片离体培养研究

以垂花百合鳞片为外植体进行离体培养研究。结果表明,垂花百合鳞片外植体的最佳消毒方法是用70%酒精处理30 s再用0.1%升汞浸泡12 min,污染率为13.3%,成活率为92.6%;鳞片不同部位诱导不定芽的能力依次为下部>中部>上部,下部、中部、上部鳞片诱导率分别为75.0%、68.3%、38.3%,平均每个外植体诱导不定芽数分别为2.7个、2.3个、1.5个,下部鳞片的诱导率和平均每鳞片诱导不定芽数均最高,显著高于上部鳞片;鳞片外植体最佳诱导培养基为MS+BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1和MS+BA 1.0 mg·L-1+NAA 1.0 mg·L-1,诱导率分别为67.5%和72.5%,平均每个外植体诱导不定芽分别为2.4个和2.2个;最佳增殖培养基为MS+BA 0.5 mg·L-1+NAA1.0 mg·L-1,增殖系数为2.9;最佳生根培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg·L-1,生根率99.4%,平均单株生根数9.6条;最适扦插基质为河沙,成活率可达94.0%。     

不同添加物及浓度对铁皮石斛组织培养的影响 x

以无菌播种取得的铁皮石斛无菌苗作为试验材料,研究1/2 MS 培养基中添加不同浓度的添加物对铁皮 石斛的增殖、生根的影响。结果表明;马铃薯汁和木瓜乳有利于诱导芽的增殖,其中又以1/2 MS+NAA 0.2 mg/L +蔗糖 30 g/L+马铃薯200 g/L 培养基最有利于诱导芽的增殖;香蕉乳有利于诱导生根,其中又以1/2 MS +NAA 0.5 mg/L+蔗 糖30 g/L +香蕉100 g/L 培养基最有利于诱导芽生根。     

金雀花组织培养与快繁

以金雀花Caragana sinica茎段为材料,通过不同植物生长调节物质种类和质量浓度进行单因素设计,建立金雀花的组织培养再生体系,为金雀花的组织快繁提供技术指导。结果表明:用1.0 gL－1的氯化汞（HgCl2）浸泡灭菌10 min为宜;初代培养宜选用培养基MS（Murashige and Skoog）+2.0 mgL－1 6-苄基腺嘌呤（6-BA）+0.2 mgL-1萘乙酸（NAA）;最佳增殖培养基为MS中添加0.5 mgL-1苯基噻二唑基脲（TDZ）,诱导形成5～6个丛生芽,将嫩茎接种在添加0.5 mgL-1NAA的MS培养基中,生根率为86.7%。图1表3参11     

新铁炮百合和金百合的组织培养与快速繁殖技术

以新铁炮百合和金百合的鳞片为外植体成功获得再生植株,并建立快速无性繁殖系．新铁炮百合鳞片的最佳芽诱导培养基是MS BA1．5-2．0mg／L NAA0．05mg／L;芽增殖培养基是MS BA0．5～1．0mg/L NAA0．05～0．1mg/L;最适蔗糖质量分数为5％;结球培养基为MS BA0．2mg／L NAA0．05mg／L．金百合鳞片的最佳芽诱导培养基是MS BA3．0mg／L NAA0．05mg／L;芽增殖培养基足MS BA1．0-2．0mg/L NAA0．05-0．1mg／L,蔗糖质量分数变化对芽的生长没有明显影响;结球培养丛为MS BA0．2-0．5mg／L NAA0．05mg／L．两种百合均较易生根,采用1／2MS NAA0.2-0．5mg/L培养基可长出健壮的根系,移栽成活率达90％以上。