HPLC-MS/MS法检测三七茎叶总皂苷中人参皂苷Rb1的含量

利用HPLC-MS/MS法,建立测定三七茎叶总皂苷中人参皂苷Rb1含量的分析方法.方法:色谱柱为BDS HYPERSUL C18(150 mm×2.1 mm,5 μm)柱;流动相:乙腈-水(梯度洗脱);柱温:30 ℃;质谱条件:采用负离子多反应监测方法(MRM)测试;用于定量分析的对照品离子对为:人参皂苷Rb1 m/z 1107.9→783.7,内标物紫杉醇m/z 852.5→525.3.结果:人参皂苷Rb1标准曲线的线性范围为0.159～16.0 μg/mL,精密度和准确度等均符合样品分析的要求.结论:该法准确、灵敏、特异性强,适用于三七茎叶总皂苷及其制剂中人参皂苷Rb1浓度的检测.     

UPLC法测定三七总皂苷含量

〔目的〕建立超高效液相色谱法测定三七总皂苷提取物中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd的含量。〔方法〕采用Ultimate XB-C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm);以水(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0~4min,19%B;4~8 min,19%~35%B;8~10 min,35%~95%B;10~11 min,95%B):检测波长为203 nm,柱温25℃,流速0.6 m L/min,进样量2μL。结果:三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd分别在0.006 9~0.552 0、0.028 0~2.240 0、0.003 8~0.304 0、0.297 0~2.376 0、0.007 3~0.584 0mg/m L范围内呈良好的线性关系。平均回收率分别为98.18%、99.43%、97.26%、98.54%、99.02%。RSD分别为1.03%、0.64%、0.98%、1.37%、0.78%。〔结论〕该方法分析时间短,洗脱溶剂消耗小,方法准确,重现性好,可用于三七总皂苷提取物的质量控制。     

HPLC-ELSD法测定三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量

采用高效液相-蒸发光散射检测器法(HPLC-ELSD)测定免疫佐剂——三七总皂苷中三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1的含量,色谱柱Discovery C18(250 mm ×4.6 mm,5μm),采用梯度洗脱,流动相为水-乙腈,流速为1.0 mL/min,柱温30℃.结果显示,三七皂苷R1含量5.19％,人参皂苷Rb1含量32.19％,人参皂苷Rg1含量41.28％,3种皂苷含量之和为78.66％.说明该方法简便、快速、重现性好,可用于控制三七总皂苷的质量.     

HPLC法测定颈康胶囊中人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1的含量

建立测定颈康胶囊中人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1含量的HPLC方法。色谱柱Alltima C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相乙腈-水溶液,流速1.0mL/min;梯度洗脱;检测波长203nm;人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1的线性范围0.921～6.103μg、0.634～4.387μg和0.315～2.014μg,相关系数(r)均大于0.999 0。3种皂苷的平均加样回收率在98.9%～100.9%之间,RSD均小于1.32%。本方法简便、快捷、准确,可以用于颈康胶囊的质量控制。     

HPLC同时测定三七不同部位4种皂苷含量

建立同时测定三七地上和地下部分人参皂苷Rb1、 Rb3、 Rc和三七皂苷Fc含量的高效液相色谱方法。采用Agilent Zorbax EC-C18(4.6 mm×100 mm, 2.7μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速1 mL/min,检测波长203 nm,柱温40℃。结果表明:人参皂苷Rb1、 Rb3、 Rc和三七皂苷Fc分别在0.062~18.479、 0.060~17.870、 0.063~18.556、 0.064~19.169μg,呈良好线性关系(r0.999 95);三七中4种皂苷的平均回收率(n=6)分别为99.53%、 100.56%、 99.90%、 99.60%, RSD分别为0.54%、 0.60%、 0.49%、 0.55%。在三七地上部分和地下部分各组织中,人参皂苷Rb1在芦头部位的含量最高,人参皂苷Rb3、人参皂苷Rc和三七皂苷Fc的含量均在叶片中最高。该方法简便、准确,分离效果好,适用于三七人参皂苷Rb1、 Rb3、 Rc和三七皂苷Fc的测定。     

知母中知母皂苷BⅡ的含量测定

建立知母中知母皂苷BⅡ的含量测定方法。采用TLC法鉴定了知母中知母皂苷BⅡ;用高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)方法测定知母中知母皂苷BⅡ的含量。色谱柱:Alltima C18(4.6mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-水(25∶75);流速:1.0m L/min;ELSD检测器漂移管温度:100℃;载气流速:3.0m L/min。知母皂苷BⅡ在2.0μg~80.0μg范围内线性关系良好,R为0.9996。平均回收率为99.5%,RSD为1.89%。本方法操作简单、快速灵敏,可作为知母中知母皂苷BⅡ含量的测定方法。     

人参、西洋参不同部位中齐墩果酸型皂苷含量的对比分析

通过对比分析人参和西洋参根、茎、叶中齐墩果酸型皂苷种类及人参皂苷Ro含量的差异,观察齐墩果酸型皂苷的分布特征。采用高效液相色谱质谱联用技术对齐墩果酸型皂苷进行鉴定及Ro含量测定。色谱柱:Agilent TC-C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈、2.5mmol/L乙酸铵(w/v)及0.05‰氨水(v/v)水溶液;梯度洗脱;流速:1m L/min;检测波长:203nm。共鉴定了6种齐墩果酸型皂苷,分别为人参皂苷Ro(1)、竹节参皂苷Iva(2)、姜状三七皂苷R1(3)、Stipulenaoside R2(4)、Armatoside(5)和Elatoside K(6)。人参根、茎和叶中均含有化合物1、2和3;西洋参茎中含有化合物1、3和4,叶中含有化合物1和4,根中含有上述6种化合物。对含量较高的人参皂苷Ro进行分析发现,根部为人参皂苷Ro的主要积累部位,且西洋参根部含量(0.576%)高于人参根部(0.214%);两者不同部位人参皂苷Ro含量差异较一致,皆为根茎叶。人参和西洋参不同部位齐墩果酸型皂苷的种类存在差异,人参皂苷Ro在二者不同部位的分布特征较为相似,根部为齐墩果酸型皂苷的主要积累部位。     

HPLC法测定复方乌骨藤胶囊中三七皂苷R_1、人参皂苷Rg_1和人参皂苷Rb_1的含量

建立HPLC法测定复方乌骨藤胶囊中三七皂苷R_1、人参皂苷Rg_1和人参皂苷Rb_1的含量。采用Kromasil C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)—水(B)为流动相进行梯度洗脱;流速1.0mL·mL~(-1),柱温40℃。结果表明:三七皂苷R_1在0.229-2.29μg范围内线性关系良好(r=0.9996),平均加样回收率(n=6)为98.7%;人参皂苷Rg_1在0.814-8.14μg范围内线性关系良好(r=1.0000),平均加样回收率(n=6)为99.2%;人参皂苷Rb_1在0.771-7.71μg范围内线性关系良好(r=0.9996),平均加样回收率(n=6)为99.3%。本方法操作简便,结果准确,灵敏度高,重现性好,可作为复方乌骨藤胶囊中所含三七的质量控制方法。     

抗氧化软胶囊中的人参皂苷Rg_1、三七皂苷R_1、丹酚酸B的含量测定

建立抗氧化软胶囊含量的测定方法。采用反相高效液相色谱法测定抗氧化软胶囊中人参皂苷Rg_1、三七皂苷R_1、丹酚酸B的含量,色谱柱:Agilent 5 TC-C18(2)(4.6mm×250mm,5μm);洗脱:二元梯度;流动相:0.05%磷酸溶液-乙腈;流速:1.0m L/min;检测波长:203nm;柱温:20℃;进样量:10μL,同时采用薄层色谱法对丹参酮IIA进行鉴别。3种有效成分线性关系良好,方法重复性以及回收率均符合要求。本方法简便、准确、重现性好,可用于抗氧化软胶囊的质量控制。     

HPLC法同时测定8种三七样品中5种皂苷成分的含量

[目的]建立同时测定8种不同三七样品中三七皂苷R_1、人参皂苷R_(g1)、R_e、R_(b1)、R_d这5种单体皂苷的HPLC方法。[方法]采用Welchrom C_(18)色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm),乙腈-水梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长203 nm。[结果]三七皂苷R_1、人参皂苷R_(g1)、R_e、R_(b1)、R_d线性关系良好(R~20.999 1),方法重复性及回收率均符合要求。[结论]不同三七样品的皂苷含量具有差异显著性,此法可为三七药材质量优劣的判断提供一定的理论依据。     

小豆皂苷提取和液质联用检测方法的优化

【目的】优化小豆皂苷提取方法和适用于超高效液相色谱-电喷雾质谱联用的小豆皂苷检测方法。【方法】以小豆品种‘京农6号’为材料,采用索氏提取法和超声波辅助浸泡法两种提取方法提取小豆皂苷,利用超高效液相色谱-电喷雾质谱联用检测小豆籽粒中6种小豆皂苷的相对含量。【结果】使用80%乙醇作为提取液、物料比1∶20、40℃、40 KHz超声提取90 min,提取效率较索氏提取法平均效率约高10%。采用C18柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm),流动相0.1%甲酸/水(A)和乙腈(B),简化洗脱条件为10%乙腈至100%乙腈5 min线性梯度洗脱,柱温25℃,流速0.4 mL/min;电离电压3 500 V、源温度350℃电喷雾电离、氮气35 psi、气体流速10 L/min,在5 min中内可快速完成6种小豆皂苷检测。【结论】超声波辅助浸泡法可提高小豆皂苷提取率,缩短提取时间,减少溶剂用量;对超高效液相色谱-电喷雾质谱联用检测小豆皂苷的洗脱梯度进行优化,快速检测小豆皂苷。     

参乌健脑胶囊中5种人参皂苷的定量分析

为考察参乌健脑胶囊中人参皂苷Rg1、Rb1、Re、Rd和Rf含量,以三氯甲烷为溶剂回流提取法提取人参中的干扰物质,进一步用水饱和正丁醇超声提取人参总皂苷,甲醇定容后采用高效液相色谱法分析人参皂苷Rb1、Rg1、Re、Rf和Rd的含量。其中,色谱条件为Krm asil C18柱(4.6 mm×250.0 mm,5μm),以乙腈(A)和水(B)系统作为流动相,进行梯度洗脱(0~35 min,19%A;35~55 min,19%A→29%A;55~70 min,29%A;70~100 min,29%A→40%A),流速为1.0 m L/min,检测波长203 nm,柱温30℃。结果显示:参乌健脑胶囊中人参皂苷Re、Rg1、Rf、Rd和Rb1的含量分别为(2.43×10-3)%、(3.98×10-3)%、(4.04×10-3)%、(7.54×10-4)%和(1.78×10-4)%。由此表明,该方法可靠、简洁、快速、灵敏度高,具有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点,可用于参乌健脑胶囊中人参皂苷的定量分析。     

复方三七片质量标准研究

目的研究成方制剂复方三七片的质量标准。方法采用TLC对白芷、三七进行定性鉴别;采用HPLC进行主成分含量测定,色谱柱为Aglient ZORBAX C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为203 nm。结果 TLC可鉴别三七和白芷,HPLC测定人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1,三者分别在0.048～0.384 mg、0.052 5～0.420 mg、0.011 8～0.094 4 mg范围内线性、精密度、稳定性均良好,阴性无干扰,平均加样回收率分别为100.91%(RSD=1.04%)、100.36%(RSD=1.04%)、100.29%(RSD=0.99%)。结论所建立的质量标准简便可行、重复性好,可以用来评价复方三七片的质量。     

UPLC法测定整参·须根和芦头中人参皂苷的含量

[目的]建立适用于整参、须根、芦头中人参皂苷的超高效液相色谱(UPLC)检测方法,同时测定人参皂苷Rg_1、Re、Rf、Rg_2、Rb_1、Rc、Rb_2、Rd的含量。[方法]采用ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(1.7μm,2.1 mm×50 mm)分离,流动相为乙腈-0.1 mol/L磷酸溶液,梯度洗脱,检测波长为203 nm,柱温35℃,流速0.3 m L/min。[结果]人参皂苷Rg_1、Re、Rf、Rg_2、Rb_1、RC、Rb_2、Rd线性关系良好,回收率在87.3%~98.6%。[结论]该方法准确、重复性好,适用于整参、须根、芦头中人参皂苷的定量分析。     

UPLC-PDA法动态测定白花延龄草中二种化学成分

采用UPLC-PDA法测定不同采收期白花延龄草根茎及茎叶中重楼皂苷Ⅵ及偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷的含量。色谱柱:Waters acquity UPLC BEH C18(2.1mm×100mm,1.7μm);检测器:PDA;流动相:乙腈(A)-水(B);流速:0.4m L/min;线性梯度洗脱:0min~5min,40%A~47%A;柱温:35℃;检测波长:203nm;进样量:2μL。3个时期白花延龄草根茎中重楼皂苷Ⅵ含量分别为1.06%、1.19%和1.35%,茎叶中含量分别为0.019%、0.010%和0.002%;根茎中偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷含量分别为0.91%、0.97%和1.12%,茎叶中含量分别为0.064%、0.049%和0.012%。     

全自动固相萃取-气质联用测定酒中氨基甲酸乙酯

建立了1种用于测定酒中氨基甲酸乙酯含量的全自动固相萃取-气质联用的检测方法,并对测定方法进行了研究。结果表明:选用DB-225MS(60 m×0.250 mm×0.25μm)毛细管色谱柱,在SIM模式下选择定性离子为m/z62、m/z 74、m/z 89,定量离子为m/z 62可以较好地对酒中的氨基甲酸乙酯进行分析。试验所得检测方法在含量10～100μg/L内的线性关系良好,相关系数为0.999 1,加标回收率为81.2%,重复进样6次的RSD为0.36%,检出限为1μg/L,因此可被应用于测定市售的几种酒类中的氨基甲酸乙酯。     

高效液相色谱法测定不同年限三七根中皂苷含量

[目的]测定不同年限三七根中皂苷的含量。[方法]利用高效液相色谱法,对云南文山产区的三七主根中皂苷含量进行了测定,并探索了不同种植年限样品中皂苷含量的变化情况。色谱条件:色谱柱为Kromasil ODS C18(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,紫外检测器检测波长为203 nm,柱温25℃。[结果]随着种植年限的增加,皂苷含量也相对增加,最佳种植的年限为3～4年。[结论]该方法简单易行,可用于不同年限三七根中皂苷的含量测定。     

UPLC-ESI-MS/MS法测定人参、红参和西洋参中多种皂苷含量

建立了人参、红参和西洋参中32种皂苷的超高效液相色谱-电喷雾-串联四极杆质谱检测方法。电离模式:负离子(ES-);检测方式:多反应监测(MRM);洗脱液:乙腈-水(均含2.5 mmol/L甲酸);洗脱方式:梯度;色谱柱:ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7 m);柱温:45℃。分析用时29 min。各皂苷的定量限为0.001～0.013 g/kg,线性校准曲线回归方程的回归系数均在0.995以上。该方法简便、可靠,适合人参、红参、西洋参中多种皂苷的同时快速测定。     

MCI前处理-UPLC法测定西洋参茎叶中7种人参皂苷含量

建立同时测定西洋参茎、叶中7种人参皂苷含量的快速检测方法。采用超高效液相色谱法,ACQUITY UPLC BEHC18色谱柱(2.1mm×50mm,1.7μm),以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速:0.5mL/min,柱温35℃,进样量2μL,检测波长203nm。人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc、Rb2、Rb3、Rd均达到基线分离,线性良好,平均回收率分别为97.32%、99.34%、97.42%、100.21%、98.98%、99.15%、98.43%。该方法准确、重现性好,可用于西洋参茎、叶中人参皂苷含量测定。     

UPLC-PDA法测定白花延龄草根茎及果实提取物中薯蓣皂苷元含量

采用石油醚-硫酸溶液两相溶剂水解,UPLC-PDA法测定白花延龄草根茎和果实甲醇提取物中薯蓣皂苷元含量。色谱柱Waters BEH C18(2.1mm×100mm,1.7μm);检测器PDA。流动相乙腈(A)-水(B),线性梯度洗脱:0min~8.0min,50%~90%A;8.0min~8.1min,90%~100%A;8.1min~11.0min,100%A;11.1min,100%~50%A。流速0.4m L/min;柱温50℃;检测波长192nm;进样量5μL。结果表明,白花延龄草根茎甲醇提取物中薯蓣皂苷元含量为0.03%,果实甲醇提取物中薯蓣皂苷元含量为0.16%。