黄连生物碱对TGEV诱导的ST细胞炎症反应的调节作用

分别用质量浓度为100、50、25μg/m L的黄连生物碱(ACC)处理猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)感染的猪睾丸细胞(ST),采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞的活力;采用硝酸还原酶法检测NO含量;采用比色法检测总一氧化氮合成酶(TNOS)和诱导型一氧化氮合成酶(i NOS)活性;采用荧光定量PCR检测TNF–α、IL–1β、IL–6、IL–10等炎症基因的表达。结果表明：100、50μg/mL的ACC可极显著提高TGEV感染的ST细胞的存活率,25μg/mL的ACC可显著提高TGEV感染的ST细胞存活率;TGEV感染后ST细胞NO含量急剧升高,100、50μg/mL的ACC可极显著降低ST细胞TNOS和i NOS活性,25μg/mL ACC可显著降低TNOS和i NOS活性;ACC可极显著下调ST细胞TNF–α、IL–1β、IL–6、IL–10m RNA的表达水平。表明黄连生物碱可以降低TGEV诱导的ST细胞的炎症反应,缓解病毒对细胞的损伤。     

紫草素可抑制在RAW264.7巨噬细胞和斑马鱼幼虫中由脂多糖诱导的炎症反应

【目的】通过巨噬细胞和斑马鱼这2种模型来评价紫草素的抗炎作用。【方法】首先使用细胞计数试剂盒检测紫草素对细胞活性的影响，然后将巨噬细胞分为空白对照组、脂多糖组（（LPS 1μg/mL）、LPS(1μg/mL)+紫草素（0.3、1.5、3μg/mL））组和紫草素（3μg/mL）组。采用一氧化氮产生法和酶联免疫吸附法检测促炎因子和促炎细胞介质的含量。在斑马鱼试验中，检测紫草素对斑马鱼胚胎的毒性，并通过存活率、体型、心率和体长等结果，选择合适的紫草素浓度（0.001、0.01、0.1μg/mL）进行后续试验。在转基因斑马鱼卵黄囊中注射2 nL LPS(2 mg/mL)建立炎症模型，测定紫草素处理后卵黄囊中2种细胞（巨噬细胞和中性粒细胞）的募集情况、测定紫草素对脂多糖诱导的斑马鱼心跳的影响。【结果】在细胞研究中，与仅经LPS处理的细胞相比，紫草素的加入可以减少促炎细胞因子如肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的积累。同时，紫草素还能抑制一氧化氮的分泌量，抑制率可达50%。斑马鱼的研究表明，紫草素有效地减少了卵黄囊中两种细胞的大量聚集，最高抑制率为73.3%，也减轻了LPS引起...     

30个灵芝菌株的抗炎活性筛选评价

利用炎症细胞模型,对30个灵芝菌株进行抗炎活性评价,筛选获得抗炎活性良好的菌株。采用热回流提取法制备灵芝子实体的乙醇、水提取物,分别获得30个灵芝子实体的总三萜和总多糖,利用脂多糖(LPS)诱导RAW246.7细胞产生NO的炎症模型,以梯度灵芝提取物(0,12.5,25,50,100μg/mL)作用于细胞炎症模型,以gress法测定NO释放量,MTT比色法测定细胞活力,综合NO释放量和细胞活力,评估灵芝有效成分提取物的抗炎活性。结果表明,30个灵芝总三萜提取物对Raw264.7细胞活力有不同程度的抑制作用,25个灵芝总三萜提取物均具有较好的抑制NO生成的作用,抑制率>60%。30个灵芝总多糖提取物具有促进Raw264.7炎症模型生成NO的作用,不具有抗炎活性。筛选获得编号GL219、GL 167灵芝菌株的总三萜提取物在浓度为12.5μg/mL下,抗炎活性良好(NO抑制率>60%)且无细胞毒性。     

早籼米辛烯基琥珀酸淀粉酯的制备及其理化性质的研究

以早籼米淀粉为原料,采用响应面法设计试验,对辛烯基琥珀酸淀粉酯的制备工艺进行研究,并探讨产品的理化性质.结果表明,早籼米辛烯基琥珀酸淀粉酯的最佳制备工艺为:反应时间4 h,温度33.4℃,pH值8.4,淀粉乳液浓度36.8%(质量分数,g.g-1).该工艺所制备辛烯基琥珀酸淀粉酯的取代度为0.018 9,反应效率为81.5%.水相体系中制备辛烯基琥珀酸淀粉酯使淀粉颗粒表面产生了一些孔洞,酯化反应可能主要发生在淀粉颗粒的表面;辛烯基琥珀酸淀粉酯具有较原淀粉低的糊化温度,当取代度由0增加至0.025时,糊化温度由71.54℃降低至69.31℃.     

梨小食心虫性信息素微胶囊的制备、缓释及野外迷向效果

【目的】探索梨小食心虫Grapholitha molesta性信息素微胶囊最佳制备方法,并在室内条件下对微胶囊的缓释作用进行评估。【方法】采用梨小食心虫性信息素（反-8-十二碳烯基乙酸酯）作为芯材,辛烯基琥珀酸淀粉钠、乳化变性淀粉-809、麦芽糊精、β-环糊精和明胶作为壁材,制备梨小食心虫性信息素微胶囊乳液,研究芯材和壁材不同比例等条件对微胶囊乳液粒径分布及包封率的影响,并进行室内缓释和野外迷向试验研究。【结果】制备微胶囊乳液的最佳壁材配方（质量比）为:辛烯基琥珀酸淀粉钠:乳化变性淀粉-809:明胶:麦芽糊精:β-环糊精=5:15:0:3:2,最佳制备条件为:壁材与芯材质量比10:1,剪切速度10 000 r/min,剪切时间2 min,高压均质压力20 MPa,均质时间2 min;二次均质加入10 g液体石蜡,均质压力20 MPa,均质时间4 min。在30、40和50℃条件下进行室内缓释试验,91 d时仍可检测到性信息素残留,而室温下未微胶囊化的性信息素稀释液5 h后完全释放。野外迷向试验中,微胶囊乳液药效可以持续约80 d,用药量（性信息素）为45、75、120和75 g/hm<...     

响应面法优化超声波提取槟榔多糖工艺及其抗炎活性

采用响应面组合设计优化超声波提取未成熟的槟榔籽多糖的工艺。结果表明,提取功率、提取液料比和提取时间均能显著影响槟榔多糖的得率,且在预测的最佳工艺参数(提取功率630 W,提取液料比20.76mL/g,提取时间501s)条件下,槟榔多糖的实际提取率为(3.3206±0.0099)%。另外,槟榔多糖可以抑制脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞(RAW 264.7)内一氧化氮的生成,其IC50为85.64μg/mL,说明槟榔多糖具有一定的抗炎潜力。     

铁皮石斛叶多糖的提取及其免疫活性测定

应用响应面法对铁皮石斛叶多糖的提取进行优化,并对多糖初步纯化。将铁皮石斛叶多糖作用于脂多糖(LPS)诱导的人体单核细胞(THP-1),测定对THP-1细胞活性及活性氧(ROS)形成的影响,以研究其免疫活性。结果表明:铁皮石斛叶多糖的最佳提取工艺为温度70.61℃、时间1.96 h、料液比20:1,此时多糖得率可达13.56%,与理论预测值基本吻合。利用透析袋除去多糖中小分子杂质,经凝胶柱Sephadex G-100初步纯化,获得一种纯化多糖,即命名为DLP。将DLP作用于THP-1,随着浓度增大(0.5～100μg/mL),DLP能剂量依赖性地抵抗LPS诱导的细胞毒;5μg/mL时,THP-1细胞活性基本完全接近对照组。此外,5μg/mL铁皮石斛叶多糖可有效抑制LPS诱导的细胞内ROS产生。因此,采用响应面法提取并经凝胶柱纯化得到的铁皮石斛叶多糖具有良好免疫活性。     

微胶囊南瓜黄色素的稳定性研究

用辛烯基琥珀酸淀粉酯钠和乳清分离蛋白对天然南瓜黄色素进行包埋,制备成微胶囊南瓜黄色素,并对其稳定性进行了研究,旨在为其在食品工业中的生产提供理论依据。结果表明,在芯壁比为1∶20(质量比)、壁材比(辛烯基琥珀酸淀粉酯钠∶乳清分离蛋白)为1∶0.5(质量比)的条件下对南瓜黄色素进行微胶囊化,包埋率可达95.16%。与南瓜黄色素相比,微胶囊南瓜黄色素的水溶性增强,并且对光照、温度和pH值的稳定性均有较大提高。在100℃加热40min的条件下,南瓜黄色素的吸光度下降30.3%,而微胶囊南瓜黄色素的吸光度仅下降8.9%;当pH值从6下降到1时,南瓜黄色素的吸光度下降13.3%,而微胶囊南瓜黄色素的吸光度仅下降5.0%;光照15d后,南瓜黄色素的吸光度下降6.2%,而微胶囊南瓜黄色素的吸光度仅下降2.3%。由此可见,南瓜黄色素经微胶囊化后,其稳定性明显提高。     

红茂草异紫堇碱对LPS诱导小鼠RAW 264.7细胞炎症因子的影响

[目的]研究红茂草异紫堇碱对细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导RAW 264.7细胞释放炎性因子的影响。[方法]用CCK-8试剂盒方法检测不同剂量红茂草异紫堇碱(1、5、15、25、50、100、200、300和400μg/mL)对RAW 264.7细胞的毒性作用;用硝酸酶还原法测定不同浓度红茂草异紫堇碱(50、100、200和400μg/mL)条件下细胞培养液中NO的浓度;用ELISA法测定添加不同浓度红茂草异紫堇碱(100、200和400μg/mL)干预4 h,再加入LPS(0.1μg/mL)孵育20 h后细胞培养液中IL-1β、IL-6、IL-10、PEG-2和TNF-α的含量,通过上述方法测定的结果来评价红茂草异紫堇碱的抗炎作用。[结果]红茂草异紫堇碱浓度在15、25μg/mL时,可显著促进RAW 264.7细胞增殖(P≤0.05);并且在红茂草异紫堇碱存在条件下,促炎因子IL-1β、IL-6、PEG-2和TNF-α释放量都有不程度的降低,而抗炎因子IL-10和NO的释放量有不同程度的升高。[结论]红茂草异紫堇碱能够抑制促炎因子IL-1β、IL-6、PEG-2和TNF-α的释放;另一方面能够促进抗炎因子IL-10和NO的释放来抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞炎症反应。     

小檗碱对LPS诱导白细胞跨内皮迁移的影响

为探明小檗碱对脂多糖（LPS）诱导外周血多形核白细胞（polymorphonuclear leukocytes,PMN）跨内皮细胞迁移（transendothelial migration,TEM）的影响。通过体外培养大鼠肠黏膜微血管内皮细胞,利用Tran-swell培养系统模拟内皮屏障,观察1μg/mL LPS刺激及5μg/mL小檗碱干预时,6 h后穿越内皮屏障PMN数量的变化。结果显示,LPS致炎诱导了PMN的TEM增加,小檗碱干预则能显著抑制LPS的诱导作用。试验表明,抑制PMN的TEM是小檗碱治疗LPS性炎症的机制之一。     

变性淀粉对大蒜精油微胶囊化工艺条件的优化

为得到成本低、包埋率高的大蒜精油微胶囊化产品,以辛烯基琥珀酸酯化淀粉HI-CAP100与麦芽糊精为壁材,采用冷冻干燥法对大蒜精油微胶囊化工艺条件进行了优化,得出的最佳工艺条件为壁材MHI-CAP100∶M麦芽糊精=5∶1,M精油∶M壁材=1∶4,加水量为40%,在此条件下大蒜精油微胶囊包埋率高达93.45%。     

西藏酥油微囊化粉末油脂乳化体系及壁材研究

【目的】针对西藏酥油中功能性脂肪酸含量较高,不饱和脂肪酸和蛋白质共为一体,脂肪易水解变质的现状,对西藏酥油进行微胶囊化制备粉末油脂,为提高其保质期提供支持。【方法】以西藏酥油为芯材,制备微胶囊粉末油脂,研究不同的乳化体系及壁材对西藏酥油微胶囊乳化液稳定性的影响,并对制备的西藏酥油微胶囊粉末油脂保藏期间的表面油质量分数及颗粒表面的变化进行考察。【结果】确定了西藏酥油粉末油脂的乳化体系和壁材,制备产品的表面油质量分数为2.0%,包埋率为95.4%,乳状液稳定。【结论】西藏酥油微胶囊化的较佳乳化体系为聚甘油酯-辛烯基琥珀酸淀粉酯,糊精较麦芽糖浆能够更好地充当填充物,添加阿拉伯胶能够明显提高乳状液的稳定性。西藏酥油微囊化的较佳配方为:西藏酥油质量分数45%、聚甘油脂质量分数1.7%、糊精质量分数47.8%、辛烯基琥珀酸淀粉酯质量分数5%、阿拉伯胶质量分数0.5%。     

苦参碱对奶牛子宫内膜上皮细胞抗炎作用及其机制

为探究苦参碱在抗炎方面的作用,本试验用LPS建立奶牛子宫内膜上皮细胞炎症损伤模型,通过MTT法测得LPS最佳刺激浓度为30μg/mL,作用12h;苦参碱的低中高浓度分别为5、10、20μg/mL。RT-PCR分别检测3、6、12h各组细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8)mRNA的表达变化,结果表明,苦参碱显著(P0.05)降低TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8的表达,具有较强的抗炎作用。     

山苍子油抗炎抗癌活性及保鲜效果研究

以山苍子果实精油为材料,采用小鼠巨噬细胞Raw264.7和小鼠肝癌细胞Hepa 1c1c7为模型,以一氧化氮抑制率为抗炎指标、醌还原酶活性为抗癌指标研究山苍子油及其硅胶柱层析分离产物的抗炎抗癌活性,并将山苍子油与Vc、VE制成复合型保鲜剂涂膜到冷却猪肉表面进行肉类保鲜试验.结果表明,山苍子果实精油具有一定的抗炎抗癌活性,其一氧化氮抑制率≥50％的浓度为31.25～62.50 μg/mL,诱导醌还原酶活性倍增的浓度为15.63～31.25μg/mL.3个层析物中即包括精油A、B、C,只有精油B同时具有抗炎抗癌活性,其浓度分别为25.00～50.00 μg/mL与2.50～5.00 μg/mL;而精油C仅表现抗癌活性,其浓度为5.00～10.00 μg/mL;精油A在该浓度范围内未表现抗炎抗癌活性.同时,山苍子油对冷却猪肉具有较好的保鲜效果,复合保鲜剂最佳配比为山苍子油0.25％、VC0.20％、VE0.25％.上述研究将为山苍子油的开发应用提供理论依据.     

紫锥菊多糖对LPS损伤后IEC-6分泌TNF-αmRNA的影响

[目的]研究紫锥菊多糖(EPS)在内毒素(LPS)损伤小肠上皮细胞(IEC-6)时对肿瘤坏死因子(TNF)表达的影响,以探讨 EPS对损伤细胞的作用机制。[方法]采用 TRIzon试剂提取总RNA,RT-PCR扩增 TNF-α mRNA,琼脂糖凝胶电泳,并进行电泳及图像分析。[结果]50μg/ml EPS 可以部分抑制 LPS 刺激 IEC-6产生的TNF-α mRNA水平,而200、500μg/ml EPS随着浓度的增加,其抑制 TNF-α mRNA的水平逐渐增加;将 IEC-6分别用50、100、200及500μg/ml EPS预处理24 h,然后用10μg/ml LPS刺激达1、4 h,采用 RT-PCR方法分析得, LPS诱导 TNF-α mRNA表达被 EPS有效地抑制,4 h的抑制率高于1 h的抑制率。[结论]EPS通过抑制 LPS刺激细胞分泌 TNF-α mRNA的产生而起到肠道粘膜的保护作用,且 EPS对这种抑制作用具有浓度及时间依赖性。     

缬沙坦对脂多糖诱导的单核细胞白细胞介素6合成的影响

目的:通过研究缬沙坦对脂多糖(LPS)诱导的正常人外周血单核细胞合成白细胞介素6(IL-6)的影响,观察缬沙坦的抗炎作用.方法:采用密度梯度离心法分离人外周血单核细胞,应用酶联免疫吸附试验分别观察LPS刺激单核细胞产生IL-6的时间及剂量效应.结果:LPS刺激单核细胞IL-6合成呈时间依赖性和剂量依赖性,10μg·L-1LPS诱导IL-6合成开始的时间是2h,在24h达高峰,其峰值是1654±765ng·L-1.缬沙坦(10-6mol·L-1～10-3mol·L-1)不能抑制10μg·L-1LPS诱导的单核细胞IL-6合成.结论:缬沙坦并不适用于抗细胞因子治疗,缬沙坦主要不是通过抗炎效应发挥抗动脉粥样硬化作用.     

交联辛烯基琥珀酸淀粉酯微球对阿司匹林的吸附性能研究

采用反相微乳法制备交联辛烯基琥珀酸淀粉酯微球,利用红外光谱、粒度分析仪、扫描电镜和X射线衍射仪对微球进行表征,研究微球对阿司匹林的吸附性能,采用单因素固定变量法探讨投药量、交联剂用量、反应时间对吸附量的影响。结果表明:原淀粉已成功酯化交联合成变性淀粉微球,微球平均粒径为42.61μm,粒径在80μm以下占93.7%;微球表面粗糙多孔,外观圆整,由原淀粉颗粒的晶体形态变为无定性态;在交联剂用量1.5 g,反应时间3.5 h,投药量22 mg的最佳制备条件下,微球的载药量达到21.48%,包封率达到97.63%,可以作为一种优良的阿司匹林吸附载体。     

中药复方提取物对IBDV感染SPF鸡抗氧化和抗炎能力的影响

将150羽SPF雏鸡随机分为5组,即对照组(CK)、病毒感染模型组(MC)、中药提取物高、中、低剂量组(T1、T2、T3),T1、T2、T3组试验鸡分别按照10.0、5.0、2.5 g/L的剂量在饮水中添加中药提取物(由2∶2∶1∶1质量比的女贞子、黄芪、枸杞子、菟丝子组成),连续添加7 d,CK和MC不添加任何药物,给药完成后,对照组滴鼻生理盐水,其他各组雏鸡分别通过滴鼻接种IBDV,攻毒后连续观察7 d,检测抗氧化指标(T–SOD、GSH–Px、T–AOC、MDA)和炎性因子(NO、TNF–ɑ、IL–1β、IL–6)的分泌量,检测脾淋巴细胞iNOS、NF–κB、MCP–1基因mRNA表达量。结果显示：T1和T2试验鸡抗氧化能力均提高,血清中GSH–Px活力和T–AOC极显著高于MC的(P<0.01),MDA含量显著低于MC的(P<0.05),T2试验鸡血清中T–SOD活力显著高于MC的(P<0.05);T1和T2试验鸡炎症反应明显减少,血清中NO、TNF–ɑ、IL–1β含量均极显著低于MC的(P<0.01),NO和TNF–ɑ含量显著低于T3的(P<0.05),IL–1β含量显著或极显著低于T3的,IL–6含量显著高于T3和MC的(P<0.05);T1和T2试验鸡脾淋巴细胞中iNOS mRNA表达量显著低于MC的(P<0.05),NF–κB和MCP–1 mRNA表达量极显著低于MC的(P<0.01)。表明中药提取物可能通过增强雏鸡的抗氧化能力,促进炎性相关因子的分泌和调节基因表达实现抗炎效果来抵抗IBDV。     

二甲基苯蒽诱导山羊乳腺上皮细胞体外转化研究

分别用5,10和15μg／mL二甲基苯蒽(DMBA)的完全培养液处理体外培养的山羊乳腺上皮细胞36, 24和12 h,再以25 ng／mL佛波酯(TPA)作用2周,研究DMBA和TPA对山羊乳腺上皮细胞的诱导转化作用,确定最佳诱导转化条件,探讨二甲基亚砜(DMSO)对细胞增殖的影响。结果表明,用含15μg／mL DMBA的完全培养液培养12 h,再用TPA连续作用4 d,几乎无山羊乳腺上皮细胞存活,10μg／mL DMBA培养24 h转化效果较差,5μg／mL DMBA培养36 h转化效果最佳;转化的山羊乳腺上皮细胞体积增大、核浓缩、生长排列紊乱、无规则并出现转化灶; DMSO对细胞生长有抑制作用．随培养时间延长抑制作用减弱。试验初步建立了乳腺上皮细胞的体外转化系统。     

紫锥菊多糖对LPS损伤后IEC-6分泌TNF-α mRNA的影响（英文）

[目的]研究紫锥菊多糖(EPS)在内毒素(LPS)损伤小肠上皮细胞(IEC-6)时对肿瘤坏死因子(TNF)表达的影响,以探讨EPS对损伤细胞的作用机制。[方法]采用TRIzon试剂提取总RNA,RT-PCR扩增TNF-αm RNA,琼脂糖凝胶电泳,并进行电泳及图像分析。[结果]50μg/ml EPS可以部分抑制LPS刺激IEC-6产生的TNF-αm RNA水平,而200、500μg/ml EPS随着浓度的增加,其抑制TNF-αm RNA的水平逐渐增加;将IEC-6分别用50、100、200及500μg/ml EPS预处理24 h,然后用10μg/ml LPS刺激达1、4 h,采用RT-PCR方法分析得,LPS诱导TNF-αm RNA表达被EPS有效地抑制,4h的抑制率高于1 h的抑制率。[结论]EPS通过抑制LPS刺激细胞分泌TNF-αm RNA的产生而起到肠道粘膜的保护作用,且EPS对这种抑制作用具有浓度及时间依赖性。