柑橘属2n花粉自然发生与沙田柚2n花粉诱导研究

果树2n配子育种较其他植物起步晚,尤其是利用2n花粉进行育种的研究在柑橘上还无先例。试验中初步观察了柑橘属部分品种的2n花粉自然发生情况,证实了柑橘属内未减数花粉的存在。同时通过秋水仙碱不同浓度与作用时间处理促进了柑橘2n花粉的发生,将长寿沙田柚2n花粉发生比例由当年的自然发生率0.87%提高到9.76%。初步观察了2n花粉离体萌发状况,其萌发率与花粉管伸长速度较为正常,但萌发启动比单倍性花粉慢。     

柑橘属2n花粉自然发生与沙田柚2n花粉诱导研究

果树2n配子育种较其他植物起步晚,尤其是利用2n花粉进行育种的研究在柑橘上还无先例.试验中初步观察了柑橘属部分品种的2n花粉自然发生情况,证实了柑橘属内未减数花粉的存在.同时通过秋水仙碱不同浓度与作用时间处理促进了柑橘2n花粉的发生,将长寿沙田柚2n花粉发生比例由当年的自然发生率0.87%提高到9.76%.初步观察了2n花粉离体萌发状况,其萌发率与花粉管伸长速度较为正常,但萌发启动比单倍性花粉慢.     

甘薯近缘三倍体杂种2n花粉发生和利用的研究

将甘薯的近缘野生种Ipomoea trifida(2x)与I.littoralis(4x)杂交，得到三倍体杂种。在三倍体杂种无性系中观察到可被醋酸洋红染色的可育大粒花粉（2n花粉），该花粉频率与花粉母细胞四分体时期的二分体频率呈显著正相关。以三倍体2n花粉系为父本与甘薯杂交，观察到花粉萌发、受精、胚发育和结实，但结实率很低，且种子大多没有生活力。本研究表明，其主要原因有：柱头花粉附着量和花柱中花粉管较少，受精后合子停止发育和胚未能发育成熟。用植物生长调节剂处理对克服子房水平的上述不亲和性有效。     

柑橘种间体细胞杂种花器官特性及花粉育性

柑橘异源四倍体体细胞杂种“哈姆林甜橙Citrus sinensis cv．Hamlin Sweet Orange 粗柠檬Citrus jambhiri cv．Rough Lemon)”是我国最早一例开花的柑橘体细胞杂种。为探讨其在柑橘育种与生产中的价值,对其花器官特性、花粉形态及大小进行了观察,并对花粉育性进行了检测。结果表明,花器官有3种类型：完全花、雌蕊败育花和畸形花。其中95％的花为雌蕊败育花,但其花药饱满,花粉量大(每花药19229粒),萌发率高(15．31％)。以异源四倍体体细胞杂种为父本与晚白柚杂交,座果率为49．50％,远远高于晚白柚自然授粉和白花结实的座果率,这说明柑橘种间体细胞杂种的花粉可促进晚白柚的授粉受精,在杂交育种中可作为亲本利用。     

甜柿2n花粉形成的细胞学机理研究

 研究了甜柿品种‘禅寺丸’2n花粉形成的细胞学机理 ,检测到导致 2n花粉形成的异常减数分裂现象 :(1)中期Ⅱ和后期Ⅱ的小孢子母细胞中发生异常的纺锤体定位 ,表现为平行 (ps)、融合 (fs)和三极纺锤体 (tps) ;(2 )末期Ⅱ4个子核呈两极分布 ,每极 2核 ,或呈三极分布 ,其中一极 2核 ,另两极单核 ;(3)四分体时期观察到二分体和三分体。二分体最终发育成 2个 2n配子 ,三分体则形成 1个 2n配子和 2个n配子。经二分体和三分体的发生频率估算出的2n花粉频率与当年以花粉直径为指标测得的 2n花粉的实际发生频率基本一致。因纺锤体定位异常而产生的 2n配子遗传上等同于FDR(第 1次分裂重组 )型 ,因而在有性多倍化中具有重要的利用价值。     

秋水仙碱处理诱导银灰杨2n花粉与杂种三倍体创制

目的为创制银灰杨杂种三倍体新种质，研究完善银灰杨三倍体育种技术体系，筛选生长迅速、抗逆性强的银灰杨新品种。方法本研究以银灰杨、河北杨以及银腺杨为试验材料，在优化秋水仙碱诱导银灰杨花粉染色体加倍技术条件的基础上，开展了秋水仙碱注射处理对2n花粉粒表面结构的影响以及杂交创制杂种三倍体的研究。结果减数分裂时期、注射次数、减数分裂时期与注射次数的交互效应均对2n花粉诱导率具有极显著影响。利用0.5%的秋水仙碱溶液对发育至粗线期的花粉母细胞进行11次注射处理是秋水仙碱诱导银灰杨花粉染色体加倍的最佳处理组合，2n花粉平均诱导率最高可达（30.27 ± 8.69）%。与天然2n花粉粒相比，秋水仙碱诱导型2n花粉粒表面结构出现了明显的裂沟，说明秋水仙碱注射处理对2n花粉花粉壁形成具有一定的影响。选取含有一定2n花粉比例的花粉，分别与河北杨、银腺杨雌配子进行授粉杂交，共收获杂种苗木4 955株，检测出三倍体5株，其中，2株三倍体来源于河北杨 × 银灰杨的杂交组合；另3株三倍体来源于银腺杨 × 银灰杨的杂交组合。结论秋水仙碱能高效诱导银灰杨花粉染色体加倍并获得2n花粉，但是注射会影响2n花粉花粉壁的形成，使得2n花粉粒表面结构产生裂沟。秋水仙碱诱导的2n花粉可以用于授粉杂交，成功获得杂种多倍体植株。      

氟乐灵诱导百合2n花粉的研究

为恢复F1育性以及进行倍性和基因渗入育种奠定基础,以LA系列百合Bonsior(2n=3x=36)为材料,对不同长度花蕾减数分裂的进程进行显微镜观察,并采用注射法对不同体积分数和剂量的氟乐灵诱导2n花粉进行研究。结果表明,小孢子母细胞减数分裂时期与花蕾的长度有一定的相关性。以粗线期至中期Ⅰ的花蕾作为处理对象,2n花粉的诱导率随着氟乐灵体积分数和剂量的增加而增加,但对花蕾的伤害也在加深。综合分析表明,氟乐灵体积分数为2.5%、剂量为60μL时诱导效果较好,诱导率为51.6%。因此,氟乐灵可以作为一种"纺锤体抑制剂",能有效地诱导2n配子。     

毛白杨未减数2n花粉发生机制的研究

在我国首次发现毛白杨可自然产生未减数2n花粉,其发生比率因无性系和年度不同而表现出一定的差异,介于 0～14.3%之间.花粉母细胞减数分裂和花粉观察显示,在毛白杨配子形成过程中,前减数分裂正常,第Ⅰ、Ⅱ次减数分裂亦未见到核复原现象;只是在中期Ⅱ的纺锤体定向有异常表现,即除了相互垂直和成约60°角之外,还有12.9%～33.7%平行纺锤体的出现,此外在所产生的花粉中还偶见与胞质分裂异常有关的连体花粉存在.这些异常现象表明,毛白杨未减数2n花粉的形成是由于平行纺锤体合并,以及因平行纺锤体的存在而引起细胞板组建发生紊乱,进而导致胞质分裂发生异常这两条途径造成的.     

杨树2n花粉形态判别方法的比较

采用醋酸洋红染色法,在研究胡杨和毛白杨不同无性系间花粉粒形态差异的基础上,研究不同形态判别标准条件下2n花粉发生频率调查的准确性。研究结果表明,胡杨花粉粒的平均直径为29.7μm,比毛白杨花粉粒的平均直径32.4μm略小。胡杨或毛白杨无性系对花粉粒直径影响显著。通过调查四分体时期四分体、三分体以及二分体的比例,可估算2n花粉的理论频率。胡杨和毛白杨各无性系2n花粉的理论频率与以2n花粉粒直径大于花粉粒平均直径的1.28倍为标准时统计的2n花粉实际频率差异不显著,而与以2n花粉粒直径大于37.0μm为标准时统计的2n花粉实际频率差异极显著。这说明以37.0μm作为判别胡杨或毛白杨2n花粉形态判别标准会导致较大的误差。而以各无性系花粉粒平均直径的1.28倍作为2n花粉形态判别标准更加科学合理。     

赤霉素喷洒处理诱导新疆杨2n花粉产生及其对微管骨架的影响

【目的】探究赤霉素喷洒处理诱导新疆杨产生2n花粉的可行性及其对花粉母细胞微管骨架的影响，旨在开发诱导效果好且价格低廉的新型化学诱变剂，构建高效的林木多倍体育种技术体系。【方法】以新疆杨雄花枝为试验材料，利用醋酸洋红染色法、免疫荧光法等方法，在观察新疆杨花粉母细胞减数分裂进程的基础上，开展了赤霉素喷洒处理诱导新疆杨2n花粉产生及其对花粉母细胞减数分裂微管骨架动态变化的影响研究。【结果】新疆杨花粉母细胞减数分裂历时约4 d，且存在明显的不同步性。减数分裂时期、喷洒次数、减数分裂时期和喷洒次数的交互作用、以及喷洒次数和赤霉素浓度的交互作用均对2n花粉诱导率具有显著影响。利用50μmol/L的赤霉素溶液于第二次减数分裂时期对新疆杨花粉母细胞进行7次喷洒处理是诱导新疆杨花粉染色体加倍的最佳处理组合，2n花粉诱导率达到（8.83±3.10）%。与对照组相比，在最佳处理条件下，新疆杨花粉母细胞末期Ⅱ相邻子核之间的辐射状微管部分缺失，导致2个相邻子核间胞质分裂失败，从而产生核复原现象，形成三分体，进而发育成一个单倍性配子和一个2n配子。【结论】赤霉素喷洒处理可诱导新疆杨花粉染色体加倍，获得一定比例的2...     

柑桔花粉植株的诱导(摘要)

<正> 目前在国内外已有数十种植物利用花药培养获得单倍体植株,但在木本果树花药培养方面的研究,至今尚未见到诱导出花粉单倍体植株的报道。我们于1979年春,采用四季桔(Citrus microcarpa Bunge)进行试验,将花蕾经5℃低温处理,在无菌条件下取出花药,接种于N6等基本培养基,附加激动素(2mg/l)和2,4—D(0.5—2mg/l)进行培养。经过十周培养之后,从开裂的花药内直接产生绿色胚状体。将胚状体转移于改良的MS基本培养基,附加BA0.25毫克/升,IAA0.1毫克/升和LH500毫克/升的培养基上,进一步分化出具有根、茎、叶的完整植株。目前有大量胚状体正在发育成苗。小苗根尖(或胚状体)细     

柑桔若干品种类型花粉母细胞减数分裂的观察

关于柑桔类果树的染色体数量和减数分裂行为的研究,对了解其性状的遗传和变异,指导育种实践,以及阐明柑桔种属进化的关系上,具有很大的价值。本文就当地六个柑桔品种类型(雪柑、芦柑、本地早、温州蜜柑、苏柑、嵌合桔)的花粉母细胞减数分裂行为的观察结果进行讨论。试验表明,柑桔减数分裂高峰期,因品种、栽培地区的气候条件等不同而有所差异,而且分裂的持续时间较长,比较不易准确掌握,但在初花期一周内采样,能获得良好的效果;柑桔的不同花序类型、花蕾发育的迟早以及同一花蕾中花药发育的状况等是影响分裂的一致性的主要因素;根据对六个品种类型的观察,表明均为正常的二倍体,2n=18。其分裂行为以雪柑、芦柑两个古老品种表现比较正常,自然杂交种苏柑以及一个变异类型嵌合桔亦未发现有明显的异常现象,而本地早、温州蜜柑则较常见异常的分裂行为。本文还就这些品种类型的减数分裂行为与某些性状表现的关系,以及一些变异类型的起源问题展开初步讨论。     

湖南省柑桔良种的脱毒与检测研究

1989～1992年经高温预热处理——微芽茎尖嫁接获得30个柑桔优良单株的79株茎尖嫁接试管苗.有10个单株的18株茎尖苗经指示植物、电镜及双向聚丙烯酰胺凝胶电泳检测证明不带裂皮病、碎叶病、衰退病和黄龙病,确定为无毒茎尖苗.另有10个单株的23株茎尖苗已初步检测不带上述各种病害.电镜检测20个单株母本树中,有10个观察到衰退病毒,4个观察到碎叶病毒,分别为供检单株的50%和20%.在双向聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测的25个单株母本树中,有8个带有裂皮类病毒,占供检单株的32%.指示植物嫩枝嫁接或边劈可提高检测效率.     

柑橘叶片细胞膜热稳定性的研究

应用电导法研究了不同抗热性的柑橘品种在高温条件下其细胞膜的稳定性。结果表明,高温处理时间相同时,随着处理温度的增高,柑橘叶片细胞膜的热稳定性降低,其伤害率的变化符合Ｌｏｇｉｓｔｉｃ方程所描述的曲线,该曲线的拐点温度与柑橘的抗热性相一致,在相同的温度条件下,叶片细胞膜的伤害率随热处理时间的延长逐渐增大,其热稳定性逐渐降低。从而证明柑橘叶片细胞膜的热稳定性与其抗热性密切相关,可以用电导法来鉴定柑橘的抗