胚挽救技术在我国无核葡萄育种中的应用及展望

在对我国无核葡萄胚挽救育种相关文献进行综合分析的基础上,阐述了胚挽救技术在无核葡萄育种中的应用、取得的成果以及胚挽救技术的主要影响因素(包括亲本基因型、接种时间、培养基、培养条件和胚挽救苗的驯化移栽),并对胚挽救技术在无核葡萄育种上的应用进行了展望。     

胚挽救技术应用于无核葡萄育种的研究进展

植物的胚挽救技术在无核葡萄的育种研究中发展迅速．通过对胚挽救技术及其在无核葡萄育种上的应用以及影响胚挽救的因素进行综述,指出了葡萄胚挽救技术存在的不足。并对其今后研究方向提出展望。     

胚挽救技术在葡萄上的应用

对胚挽救技术在葡萄育种中的应用及取得的成绩作了综述,并对胚挽救中应注意的几个问题:适宜的培养时期、营养及环境条件作了简介,同时初步提出了葡萄胚挽救技术存在的不足及今后的研究方向。     

无核葡萄胚挽救苗的驯化及移栽技术

胚挽救技术是无核葡萄种质创新的重要途径之一,胚挽救苗从实验室移栽至大田的最终成活率直接影响无核葡萄的育种效率。试验以种子败育型(stenospermocarpy)无核葡萄品种为试材,从葡萄种类、胚挽救苗质量、移栽方法、基质种类和组成4个方面对葡萄胚挽救苗移栽成活率的影响进行了系统研究。结果表明,不同无核葡萄品种移栽成活率存在显著差异;选取健壮苗(根数≥3个,根长≥10cm,叶数≥6个,叶色深绿,茎高≥10cm,茎秆粗壮)进行炼苗移栽,可以显著提高无核葡萄胚挽救苗的成活率;蘸取浓度为200mg·kg-1的生根粉(ABT10)30s+培养室炼苗15d+温室炼苗15d的移栽方式较好;珍珠岩∶草炭∶园土=4∶1∶1作为移栽基质较好。初步探索出一套简单易行、实用高效的葡萄胚挽救苗优化配套移栽技术。     

无核葡萄胚挽救技术研究

[目的]研究无核葡萄胚挽救过程中的一些主要影响因素,为今后开展无核葡萄胚挽救育种提供参考。[方法]以6个无核葡萄杂交及自交组合未成熟胚珠为试材,研究了接种时期、培养基及激素浓度对无核葡萄胚挽救效果的影响。[结果]各组合适宜的胚珠接种时期为：火星无核×无核白鸡心在花后40d,金星无核×康能无核在花后55d,优无核×布朗无核在花后45d;采用ER为基本培养基更有利于胚珠的发育和萌发;不同品种的胚珠对培养基中IBA浓度要求不同,幼胚发育程度较高,败育时期较晚的胚珠,适合较低的IBA浓度,胚发育程度较低,败育较早的胚珠则需要较高的IBA浓度。[结论]接种时期、培养基种类和培养条件对无核葡萄胚挽救的成功都非常重要,且各条件的确立要视具体品种而定。     

葡萄三倍体育种初报

用二倍体无核葡萄作母本与四倍体有核葡萄作父本进行杂交,用常规育种法去雄授粉,授粉后３５ｄ至５５ｄ期间,采用胚挽救技术,将各杂交组合的幼胚接种在不同培养基上进行离体培养。在设置的７个不同处理的杂交组合中,经系列培养后获５个杂交组合的胚培养苗１９株。经根尖染色体鉴定,有一杂交组合的两组试管苗为三倍体。经３年继代培养,目前已形成两个葡萄三倍体新品系。     

木纳格葡萄胚挽救苗的获得及其无核性状分子鉴定

以木纳格葡萄败育型胚珠为材料进行胚挽救,按照已建立的适合白木纳格葡萄败育型胚珠培养体系进行实验,获得了大量木纳格葡萄胚挽救幼苗,炼苗后移栽到大田中种植。并结合已有分子标记技术,对胚挽救幼苗进行鉴定,结果显示45株胚挽救幼苗中,有21株扩增获得了目的片段,初步确定为具有无核性状的葡萄苗。     

提高无核葡萄胚挽救中幼胚成苗率的研究

 【目的】提高无核葡萄胚挽救中幼胚的成苗率。【方法】以7个杂交组合的胚珠为试材,研究不同基因型、不同胚珠发育培养基、添加不同氨基酸及低温处理采后幼果对无核葡萄胚成苗率的影响。【结果】在无核葡萄胚离体发育中,母本和父本对胚的成苗均有影响;在二倍体无核葡萄作母本的杂交组合中,以二倍体无核葡萄作父本比以四倍体有核葡萄作父本更有利于胚的成苗。在3种不同配方的培养基中,适宜于无核葡萄离体幼胚发育和成苗的培养基是MM4。ER添加4 mmol?L-1脯氨酸培养基最有利于无核葡萄胚的发育。低温处理3 d对红宝石无核×森田尼无核和红宝石无核×黑奥林胚的成苗促进最大。【结论】无核葡萄胚挽救的适宜培养基是ER+4 mmol?L-1脯氨酸或MM4培养基,低温处理幼果3 d能有效提高二倍体无核葡萄×二倍体无核葡萄胚挽救中胚的成苗率。     

葡萄胚挽救苗绿枝嫁接试验

为摸索胚挽救苗提早结果,缩短胚挽救育种周期的方法,用葡萄胚挽救苗移栽当年的绿枝,直接嫁接到露地的砧木上,分不同时间段安排嫁接,在嫁接前调查其在株高、主干粗度、接穗粗度,嫁接后1个月调查其成活情况。结果表明:胚挽救苗嫁接成活率与嫁接时间相关性很大,在鄯善地区,一般嫁接时间在5月上、中旬比较适宜;接穗的粗度与嫁接成活率关系不大,接穗粗度较小时,嫁接操作难度较大,一般选取3 mm以上的接穗比较合适;嫁接时温度与嫁接成活率相关性也很大,一般在早上和下午温度30℃以下的时段嫁接为宜。     

无核葡萄胚挽救杂交F_1倍性鉴定

为鉴定无核葡萄胚挽救杂交F_1早期幼苗倍性,试验以早黑宝×河津-1、丽红宝×山河1号、红宝石无核×北冰红、户太8号×山河3号的4个杂交组合胚挽救F_1的早期幼苗为试材,通过无核分子标记进行早期鉴定,采用根尖染色体计数法和组织形态学观察法进行葡萄胚挽救杂交F_1的倍性鉴定。结果表明,使用无核分子标记SCC8-1018结合根尖染色体观察对3个杂交组合(早黑宝×河津-1、丽红宝×山河1号和红宝石无核×北冰红)的16个杂交F_1进行鉴定,初步确定4个无核株系,1个三倍体株系。