中国兰属植物菌根真菌的rDNA ITS分析

【目的】对30株中国兰属植物菌根真菌进行分子鉴定及遗传多样性分析,进一步探讨中国兰属植物与其菌根真菌的专一性。【方法】以真菌通用引物ITS1/ITS4,扩增分离自云南6种兰属植物的30株菌根真菌的rD-NA ITS序列,再与GenBank中的菌株rDNA ITS序列进行Blast比对,并采用非加权组平均法(UPGMA)进行聚类分析。【结果】rDNA ITS序列Blast比对结果显示,分离的30株菌根真菌分别隶属于镰刀菌属、毛壳菌属、柱孢霉属和瘤菌根菌属,与形态学鉴定结果一致;菌根真菌ITS1-5.8S-ITS2序列总长429～563bp,GC含量为41.67%～58.06%,其中ITS1长92～259bp,GC含量为47.66%～58.62%;5.8S长155～158bp,GC含量为40.81%～52.05%;ITS2长146～192bp,GC含量为38.78%～55.56%;聚类分析显示,30株菌根真菌可分为4组,其中,分离自送春、蕙兰、建兰的菌根真菌皆属于镰刀菌属,聚在Ⅰ组上;分离自春剑的菌根真菌除CJ7单独聚在Ⅳ组外,其他均聚在Ⅰ组上;分离自莲瓣兰、春兰的菌根真菌分别聚在Ⅱ和Ⅲ与Ⅰ和Ⅱ2个分支上,分离自莲瓣兰的菌根真菌聚在Ⅱ、Ⅲ2个分支上。【结论】在供试的6种兰属植物中,春剑、春兰、莲瓣兰和蕙兰菌根真菌的遗传多样性较送春、建兰丰富;蕙兰、送春、建兰与菌根真菌的专一性较强,而春剑、春兰、莲瓣兰与菌根真菌的专一性相对较弱。     

野生兰属植物菌根真菌的分离和表型鉴定

为鉴定野生兰属植物内生菌根真菌种类,以6种代表性兰属植物春剑、春兰、蕙兰、送春、建兰、莲瓣兰为材料,采用常规分离方法,从其内生菌根中分离得到30个菌株。通过菌落特征和光学显微特征观察,将30种内生菌根真菌初步鉴定为镰刀菌属、毛壳菌属、柱孢霉属和瘤菌根菌属4个种类。     

兰花炭疽病的发生与防治

兰花炭疽病是兰花栽培的主要病害之一,在国内发生范围相当广泛,几乎可以危害所有兰花品种,主要危害蕙兰、春兰、墨兰、虎头兰、大花蕙兰、多花兰、朵果香、双飞燕、豆瓣绿、寒兰、套叶兰、齿瓣兰、蝴蝶兰、石斛兰、文心兰、肾药兰、万代兰、卡特兰等品种。现将兰花炭疽病的危害症状、发生规律、发病因素和防治方法介绍如下：     

油杉属植物过氧化物同工酶研究

用D isc聚丙酰胺凝胶电泳分析了油杉属8个种的过氧化物同工酶.结果表明:属内种间具有明显的酶谱差异,每个种都有其特征酶谱.用数量分类中的系统聚类方法对油杉属8个种酶谱的相似程度进行了研究,结果把8个种分为3个类群,6个种,归并了2个种.其中:油杉、江南油杉为一类群,铁坚油杉、黄枝油杉为一类群,云南油杉、旱地油杉为一类群,铁坚油杉与青岩油杉归并为同一物种,云南油杉与蓑衣油杉归并为同一物种,推断旱地油杉为云南油杉的生态变种,从分子水平上论证了油杉属各种间的亲缘关系.     

基于ITS2序列探讨兰属的DNA条形码鉴定和系统发育关系

兰属中许多类型具有极高的观赏和经济价值,并在兰花产业中占据重要地位。由于兰属植物复杂的演化、遗传历史,一直以来分类鉴定困难,存在诸多分类学争议。近年来,快速发展的DNA条形码技术为兰属植物的分类鉴定提供了新的思路。该研究利用12个兰属本地样品和250条GenBank下载的兰科ITS2序列(其中81条属于兰属),通过BLAST1、遗传变异、建树法等分析评估了ITS2序列用于兰属植物分子鉴定的可行性,并基于建树结果探讨了兰属的系统发育关系。BLAST1结果显示,ITS2序列可以准确鉴定12个本地兰属样品的属、亚属划分,鉴定成功率达到100%;在组水平也具有较好的鉴定能力,鉴定成功率为92%,但在物种水平上的鉴别能力较差,鉴定成功率仅17%。参考库(GenBank下载的250条兰科ITS2序列)遗传变异分析结果显示,兰属ITS2序列具有很高的遗传多样性(变异率为74.9%),在属、亚属水平上能较好地区分,但在组或组下的物种水平,由于组内和组间变异、种内和种间变异存在较大重叠,鉴别能力较差。建树结果显示,ITS2序列可以将兰属中的建兰亚属、兰亚属和大花亚属明显区分开,建兰亚属与兰亚属亲缘较近,两者与大花亚属亲缘较远,同时还发现莲瓣兰与春兰在系统发育树中关系紧密,结果支持Du Puy & Cribb的3亚属划分,并暗示莲瓣兰可能是春兰下的一个变种或品种(支持率为69%)。综上所述,ITS2序列在兰属植物的分子鉴定上具有一定的应用价值,可作为兰属植物DNA条形码鉴定的辅助条形码。     

中国兰花的特性及分布

中国兰花通常是指兰属（cymbidium）植物中的一部分地生种如春剑（C．goeringii var·iongi-bracteatum）、莲瓣兰（Cymbidium Lianpan）、春兰（C．goeringiiRchb．f）、寒兰（C.kanran Makino）、墨兰（C．Sinensewilld．）、建兰（C．ensifoliumSw．）、蕙兰（C．faberiRolfe）等,这些品种又称为国兰。     

油杉属植物黄酮类化合物薄层层析研究

利用油杉属植物10种2变种的叶,开展了黄酮类化合物的薄层层析研究.结果表明:属内种间具有明显的层析图谱差异,每个种都有其特征图谱.依据层析结果把油杉属10种2变种分为4个类群,9个种1生态变种,归并了2个种.其中:油杉、江南油杉、矩鳞油杉为一类群,柔毛油杉为一类群,铁坚油杉、黄枝油杉、台湾油杉为一类群,云南油杉、旱地油杉、海南油杉为一类群,铁坚油杉与青岩油杉归并为同一物种,云南油杉与蓑衣油杉归并为同一物种,推断旱地油杉为云南油杉的生态变种.     

豆瓣兰的栽培管理技术

豆瓣兰又叫线叶春兰、豆瓣绿、鹦哥绿。因生长地区狭窄，资源十分有限。与其他兰花品种相比较。是开发较晚的品系之一。基本没有形成自己的品牌。豆瓣兰这个优秀的兰种。神韵十分美。从花姿、花色和瓣型看，别具特色，是兰花品种百花园中值得开发，并具有极高观赏价值的兰种品系。     

兰花基因组DNA多态性RAPD分析

利用随机扩增多态DNA技术(RAPD)对兰属的3个品种春兰、春剑、蕙兰进行了分析与研究,建立了它们之间的DNA指纹图谱,找到了参试样品的特征谱带,并探讨它们之间的亲缘关系.结果从20条BA系列引物中筛选出能稳定扩增的10个引物,且对3个品种的植株进行扩增,共扩增出257条,其中243条具有多态性,分析结果表明春剑与春兰的相似系数较之与蕙兰的相似系数要高.     

兰属品种的RAPD鉴定和亲缘关系分析

用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,对兰属7个种的9个品种进行遗传多样性和亲缘关系分析。从60个随机引物中,筛选出6个对9个供试兰花品种均能产生多态性谱带的引物。在这6个引物所检测的64个位点中,61个位点为多态性位点,占总位点数的95.3%。聚类分析结果表明,不同兰花品种之间存在明显的遗传差异,而且根据RAPD标记进行的兰花品种聚类结果与传统的形态学分类结果基本一致,只是莲瓣兰与建兰组的分类地位有一些差异。     

与邱北冬蕙兰相关的3个新天然杂种

对兰属Cymbidium邱北冬蕙兰C. qiubeiense与寒兰C.kanran、兔耳兰C. lancifolium、豆瓣兰C.serratum的新天然杂交种:紫纹冬蕙兰C.×purpuratum、兔耳冬蕙兰C.×latifolium及独花冬蕙兰C.×uniflorum作了描述和绘图.在天然产地发现了邱北冬蕙兰与寒兰、兔耳兰和豆瓣兰生长在一起.新杂种紫纹冬蕙兰叶片形态、叶片数量、萼片与寒兰相似,花苞片、花瓣、唇瓣与邱北冬蕙兰相似;兔耳冬蕙兰叶片和花序柄与兔耳兰相似,花与邱北冬蕙兰相似;独花冬蕙兰叶片形态、花序柄与邱北冬蕙兰相似,花形态、叶柄无关节,与豆瓣兰相似.提供了它们的检索表.     

海南逸生辣椒遗传多样性的ISSR分析

为了探明海南7个逸生辣椒品种的亲缘关系,为地方辣椒种质资源的合理利用与科学保护提供依据,采用ISSR分子标记技术对采自海南农村的7个逸生辣椒品种进行多态性和聚类分析。结果表明:1)从19对ISSR引物中筛选出12对进行PCR扩增,共扩增出50条DNA条带,多态性条带45条,多态率达87.22%。2)聚类分析将海南7个逸生辣椒品种分为2大类,簇生椒归为一类,其余6个品种的遗传距离相近,归为小米椒+朝天椒类。3)按海拔进行聚类分析发现,低海拔对辣椒的遗传多样性表现出规律性的变化。     

南通地区国兰生长发育动态研究初报

[目的]研究南通地区国兰的生长发育动态,为国兰的栽培管理提供理论基础。[方法]以春兰和蕙兰主栽品种为试材,定期观测叶芽、花芽的生长发育情况。[结果]春兰春芽（叶芽）快速生长期在4月中旬至6月下旬,蕙兰春芽（叶芽）旺盛生长期在4月中旬至7月中旬;春兰秋芽（叶芽）快速生长期在10月初至12月中旬;蕙兰秋芽（叶芽）旺盛生长期在10月初至12月下旬。春兰、蕙兰的花葶均在10月底出土,但春兰的花葶在1月底进入缓慢生长期,而蕙兰的花葶则在2月底才进入缓慢生长期。[结论]南通地区春兰和蕙兰的主要施肥期宜为：春季3月下旬至4月初,以氮肥为主;秋季9月中下旬,宜多施磷、钾肥。     

部分茶竿竹亚属竹种亲缘关系的ITS序列分析

为了探讨怀集县铁厘茶竿竹和白水茶竿竹与其他茶竿竹亚属竹种之间在分子水平上的差异以及它们的分类地位,对包括铁厘茶竿竹和白水茶竿竹在内的9个茶竿竹亚属竹种的核糖体基因（nrDNA）的内转录间隔区（ITS）序列进行分析,并构建系统进化树。结果表明,所有供试材料ITS全长在559～648 bp,(G+C)含量变化范围为46.02%～57.65%,其中铁厘茶竿竹和白水茶竿竹ITS全长分别为559 bp和614 bp,(G+C)含量分别为55.64%和57.65%。ITS序列构建的系统进化树显示：正种茶竿竹及其变种聚为一个大支,其中铁厘茶竿竹和白水茶竿竹聚在一起。以上结果佐证了铁厘茶竿竹和白水茶竿竹是正种茶竿竹的2个变种。     

基于GBS测序的全基因组SNP揭示贵州地方茶组植物资源的亲缘关系

【目的】分析贵州地方茶组植物资源的亲缘关系,为明确贵州地方茶组植物资源的遗传关系及其保护、利用提供科学依据。【方法】以从贵州省内不同区域收集的41份茶组植物资源及贵州省茶叶研究所茶树种质资源圃保存的18份省内外育成茶树品种为材料,利用基于GBS（Genotyping by sequencing）的简化基因组测序技术对其基因组SNP位点进行检测,基于获得的高质量SNP位点对这些材料进行遗传特征分析。【结果】从59份茶组植物材料获得45.84 Gb高质量序列（Clean reads）数据,平均每个材料为795.6 Mb,约占改良版茶树基因组大小（2.93 Gb）的26.5%,平均比对率为72.62%,经过滤后得到248772个高质量SNP位点,其中83.98%的高质量SNP位点分布在基因间区,16.02%分布于基因区;有22614个SNP位点分布在内含子,15038个SNP位点分布在外显子区,2203个SNP位点分布在非翻译区（UTR）。59份茶组植物材料的观察杂合度（Ho）为0.016~0.081,期望杂合度（He）为0.006~0.064,F为-0.331~0.737。主成分分析结果、系统发育进化树构建情况及遗传结构分析结果均显示59份茶组植物材料可分为3个类群,其中全部茶种（Camellia sinensis）材料归在一个类群、疏齿茶（C. remotiserrata）和大厂茶（C. tachangensis）归在一个类群、9份突肋茶（C. costata）单独归在一个类群,但疏齿茶与大厂茶及两个区域的大厂茶均处于独立的亚类群,此外茶种中的阿萨姆变种（C. sinensis var. assamica,CSA）和中国变种（C. sinensis var. sinensis,CSS）也处于不同的进化分支;突肋茶与疏齿茶和大厂茶的亲缘关系较其与茶种的亲缘关系更近。茶种、疏齿茶、大厂茶和突肋茶4类茶组植物存在互相融合的遗传背景。根据地理来源和种质类型可将59份茶组植物材料分为11个种群,不同种群间具有较低的基因流,但种群内部具有较高的基因流。【结论】不同茶组植物在基因组水平上存在明显差异,经典形态学分类上合二为一的大厂茶和疏齿茶在遗传结构上也存在差异,即分为2个变种更合适;茶组植物种内亲缘关系与其地理来源直接相关,在育种实践中应尽量避免相同地理来源材料间的杂交应用。     

送春与多花兰杂种ISSR-PCR反应体系的建立与优化

[目的]建立与优化送春与多花兰杂种ISSR-PCR的反应体系。[方法]用CTAB法提取送眷、多花兰和送春×多花兰杂种的基因组DNA,针对ISSR-PCR扩增的体系中的Taq酶浓度、Mg^2＋浓度、dNTP浓度和引物的用量4个因素,进行L9（4^3）正交试验,用引物UBC827扩增两亲本的混合DNA,所得PCR产物在琼脂糖凝胶上检测,同时针对去离子甲酰胺对反应的影响进行初步对照试验。[结果]根据PCR产物的琼脂糖凝胶检测结果,由试验得到的最佳反应体系为：1×buffer、2．5mmol／L Mg^2＋、0．6μmol／L引物、0．25mmol／L dNTP、1U Taq酶、0．4μl去离子甲酰胺、50ng;模板DNA,总体积为加μl。[结论]该反应体系的建立为利用ISSR技术进行兰花遗传连锁图谱构建、基因定位、种质资源鉴定与分类等提供参考。     

粳稻品种(系)抗稻瘟病特性分类的研究

用日本７个粳型单基因鉴别菌系将黑龙江省的一些粳稻品种（系）初步划分为８个抗性基因型：砦１号型、ＰｉＮｏ．４、Ｚｅｎｉｔｈ型、福锦型、杜稻型、下北型、关东５１号型、爱知旭型;根据供试品种（系）对黑龙江省四个优势小种的反应,将其划分为８个抗性类群,用日本鉴别菌系鉴定属于同一类群的品种,而用黑龙江省优势小种鉴定又被划分为不同类群,这说明同一抗性类型的品种可能含有相同的抗性基因,也可能含有不同的抗性基因。此外,在供试的粳稻品种（系）中没有发现对黑龙江省优势小种呈全抗反应类型的品种（系）。     

虎雪兰与朱砂兰、蕙兰正反交育种及种子无菌萌发与增殖研究

[目的]研究虎雪兰与朱砂兰、蕙兰正反交育种及种子无菌萌发与增殖.[方法]以虎雪兰、朱砂兰、蕙兰‘绿春兰’为亲本,采用正反交杂交法进行育种试验得到果实,对成熟的种子进行无菌萌发试验,并对种子萌发获得的小苗进行增殖研究.[结果]朱砂兰为母本获得杂交种子无菌萌发最适培养基为：1/2MS ＋0.5 mg/L BA ＋0.2 mg/L NAA ＋3％花宝1号＋0.05％碳粉;最佳增殖及生长培养基为：1/2MS＋1.0 mg/L 6-BA ＋0.5 mg/L NAA ＋0.5 mg/L KT ＋3％花宝4号＋0.05％碳粉.蕙兰‘绿春兰’为母本获得种子萌发最适培养基为：1/2MS＋ 1.0 mg/L 6-BA ＋0.5 mg/L NAA＋ 3％花宝1号＋0.05％碳粉;最佳增殖及生长培养基为1/2MS＋ 1.5 mg/L 6-BA ＋0.5 mg/LNAA ＋0.5 mg/L KT＋3％花宝4号＋0.05％碳粉.[结论]该方法为虎雪兰的种质资源栽培提供了理论依据.     

碱茅属5个种的同工酶研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对碱茅属的５个种进行过氧化物酶同工酶及酯酶同工酶的研究结果表明，５个种的过氧化物酶同工酶的酶谱差异很小，但酯酶同工酶的酶谱差异较大，５个种中的碱茅与微药碱茅酶谱相同，朝鲜碱茅与热河碱茅酶谱极为相近，而星星草酶谱介于两类之间，为过渡类型。