液体菌种栽培蛹虫草的技术研究

通过菌种的选取、分离纯化、定期复壮得到性状稳定的优质菌种,采用单级液体发酵装置、摇瓶法、无菌水刮洗斜面菌种、稀疏大米培养基原种等方法制备蛹虫草液体菌种。以大米、玉米等复合培养基和蚕蛹为培养基或寄主,采用液体菌种接种,经过菌丝培养、转色催蕾、除草管理等程序栽培蚕蛹虫草。     

极端嗜盐古菌的分离与纯化方法初探

从一平浪盐矿采集到的一块盐矿石样品中分离到2株极端嗜盐古菌(命名为CY1和CY2).方法是用嗜盐培养基培养,采用连续传代法和NaCl浓度(m/V)梯度法分离该样品中的极端嗜盐古菌,结合平板划线纯化得到两株菌种.对分离得到的菌落进行观察,结果表明已分离纯化得到的这两株菌种为极端嗜盐古菌.由此,建立了分离纯化极端嗜盐古菌的一套可行的实验方法.     

食用菌液体菌种生产技术规程

食用菌液体菌种具有活力强、纯度高、发菌快、发菌时间短和节约成本等特点,经多年在生产中应用,效果显著。为提高食用菌液体菌种生产技术,结合我们多年的生产实践经验,将食用菌液体菌种生产技术规程做一些介绍,以飨广大食用菌液体菌种生产者。     

鸡腿菇液体菌种的制备及应用

食用菌液体菌种具有生产周期短、菌龄一致、生命力旺盛、接种方便、用种量少、染菌率低、接种后生长迅速等优点。试验采用固态专用菌种制备鸡腿菇液体菌种并进行栽培试验,结果表明,与固体菌种栽培鸡腿菇相比,制得的液体菌种栽培的鸡腿菇杂菌感染率可降低4百分点,生物转化率提高10百分点。     

大球盖菇的分离纯化及ITS序列鉴定

以吉林长白山地区的野生大球盖菇为材料,对其进行1~5 h不同时间的晾晒处理,采用组织分离法分别对其菌盖、菌盖与菌柄交接处、菌柄上端和菌柄基部的组织进行分离纯化,通过测定菌丝生长速度、生长势和污染率等,筛选出分离纯化的最适晾晒时间和最佳部位;设置5种液体培养基配方培养液体菌种,通过测定菌丝体生物量、菌丝球密度和形态,筛选出最佳的液体培养基配方;最后将分离物进行ITS序列分析,计算遗传距离,并采用邻接法构建NJ系统发育树。结果表明,分离纯化最适晾晒时间为2 h,最佳分离部位为菌盖与菌柄交接处,此种情况下菌丝生长速度最快,菌丝长势最好,污染率最低;最佳的液体培养基配方为A2,菌丝体生物量最高,菌丝球密度最大,形态最好;最后分离菌株经ITS序列测定,系统发育分析证实其为大球盖菇。     

如何检测液体菌种的质量

"液体菌种"与"固体菌种"是相对而言的,是指用液体培养基通过深层培养技术得到的食用菌菌种。与"固体菌种"相比较,"液体菌种"具有菌种制作周期短、菌种菌龄整齐一致、菌种纯度高、活力强、接种方便、降低生产成本、提高生产效率等显著优势。将推     

金针菇固体液化菌种研究

[目的]为探究新型菌种,推进食用菌工厂化生产的进程。[方法]首先对金针菇固体液化菌种的最佳培养基进行了筛选,之后,对金针菇固体液化菌种和常规液体菌种的菌丝形态、菌丝球浓度、还原糖含量、基质降解酶活力等指标的变化情况进行了比较与分析。[结果]金针菇固体液化菌种最佳原料为木屑粉。金针菇固体液化菌种菌球浓度在第6天达到最大值68个·mL~(-1),且菌球浓度远高于常规液体菌种。金针菇固体液化菌种还原糖含量在第4天达到最大值18.626g·L~(-1),比常规液体菌种提前1天;蛋白酶、纤维素酶和漆酶的活力均在第5天达到最大值后趋于平衡,且培养期间均高于常规液体菌种。[结论]固体液化菌种在菌球数量、基质降解活力和稳定性等方面明显优于对照常规液体菌种。     

金针菇工厂化生产的液体菌种开发与应用

[目的]开发金针菇工厂化生产所需的液体菌种。[方法]从工厂化生产的菌株与二级液体菌种培养基的筛选,液体菌种培养条件的优化及金针菇液体菌种在工厂化生产的应用试验等方面进行研究。[结果]在4个金针菇工厂化生产菌株中,金针菇工厂化生产的液体菌种开发宜以F白"18"为出发菌株;二级液体菌种的培养基宜为马铃薯15%、麸皮7%、蔗糖2%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%;培养条件为接种量10%,转速150 r/min,温度23℃,pH自然,发酵罐培养时间结束点和适宜的菌龄均为144 h;在工厂化生产应用中,液体菌种较固体菌种发菌速度快,生产周期缩短9 d,生物转化率提高了6.38百分点。[结论]该研究可为金针菇工厂化生产所需液体菌种的开发提供技术方法。     

香菇液体菌种固体栽培模式的研究

笔者筛选出利用香菇液体菌种生产“菌包”的各级配方和工艺流程,报道了这种液体菌种固体栽培模式的优越性和应用推广价值。     

黑木耳液体菌种生产技术研究及应用

对黑木耳液体菌种生产技术研究,并将液体菌种应用于生产中,结果表明黑木耳液体菌种具有一定的优势。生产工艺条件是：1000 ml三角摇瓶装液体量600 ml,转速150 r/min,培养周期96 h,经深层发酵罐培养96 h,所获得的黑木耳液体菌种活力强、菌龄一致,将其应用接入栽培袋,菌丝萌发、吃料快,生长整齐,较固体菌种增产16.7%。     

九里香内生细菌HBS-1的鉴定及其对芒果采后病害的防效

通过组织表面消毒法对九里香内生菌进行分离,以芒果炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides Penz)和芒果蒂腐病菌(Botryodiplodia theobromae Pat)为靶标菌对获得菌株进行皿内拮抗能力筛选,利用浸果法测定菌株发酵滤液对芒果采后病害的防治效果,结合菌株形态、生理生化特征及16S rDNA序列鉴定菌株。结果从九里香中分离到28株内生菌,其中有8株真菌、9株细菌对2种病原菌均有拮抗活性,以HBS-1抑菌活性最好,对芒果炭疽病菌及芒果蒂腐病菌抑制率分别为42.0%和50.0%;菌株HBS-1发酵滤液能明显降低芒果采后病害的发病率,10倍稀释液的防效优于化学药剂特克多800倍液,50倍稀释液的防效与化学药剂特克多800倍液相当;经鉴定,内生菌HBS-1为芽孢杆菌属枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。     

生防细菌对油茶炭疽病病原菌的抑制作用

  目的  从酸浆果实内分离筛选出对油茶炭疽病病原果生刺盘孢具有拮抗作用的内生细菌，并了解该菌对油茶炭疽病病原菌的抑菌机制，以期为油茶炭疽病的田间防治提供理论依据。  方法  本研究通过组织分离法从果实中分离出细菌14株, 通过平板对峙法筛选得到对油茶炭疽病病原菌具有显著抑制作用的细菌3株，菌株依次命名为DLSB-1、DLSB-4和DLSB-13。结合菌株形态学、生理生化特征以及16S rDNA序列比对分析，对菌株进行了鉴定。在上述试验基础上，判定生防菌株能否产生蛋白酶、纤维素酶和β-1,3-葡聚糖酶，通过显微镜观察3株细菌的无菌上清发酵液对病原菌丝的生长情况，并在室内测定了油茶盆栽苗的防治效果。  结果  3株细菌无菌发酵上清液均能抑制油茶炭疽病病原菌丝的正常生长，使其尖端膨大，畸变，扭曲。可产生蛋白酶和纤维素酶，不能产生β-1,3-葡聚糖酶；5个梯度的无菌发酵上清液（0.6 × 108、1.0 × 108、1.4 × 108、1.8 × 108、2.2 × 108 cfu/mL）与对照相比，对油茶炭疽病病原菌抑菌效果显著（P < 0.05），抑菌率最高达到81.14%。其中，菌株（DLSB-4）5个梯度的无菌发酵上清液对油茶盆栽苗的防治效果分别达到40.2%、43.9%、57.7%、68.7%和71.1%，差异显著（P < 0.05），且无菌发酵上清液的含量与防治效果呈正相关。  结论  3株细菌通过自身产生拮抗作用酶来抑制果生刺盘孢病原菌菌丝的生长，降低油茶炭疽病的发病率和病情指数。      

紫外诱变吸水链霉菌选育高产农用抗生素菌株

[目的]为抗生素产生菌在农业生产中的应用奠定基础。[方法]以小麦赤霉菌为指示菌,以从吸水链霉菌海南变种S101菌株分离到的S510菌株为出发菌株,经紫外诱变后分别采用琼脂块法和二级摇瓶复筛法对其进行初筛和复筛,以选育出高产菌株,分析发酵培养基pH值和培养时间对发酵液效价的影响。[结果]当发酵培养基的pH值为5.5~6.5时,发酵液效价较高,最适pH值为6.0。发酵液的效价在72 h后可维持在较稳定的范围内,最佳发酵时间为96 h。通过连续2次紫外诱变,菌株的产抗生素能力比初始菌株提高了30.06%。将获得菌株在斜面培养基上连续传代5次后,仍有稳定的遗传性状。[结论]采用紫外诱变法选育该链霉菌是有效的。     

菌种的细菌抑菌剂研究

[目的]为了研究采用抑菌剂以抑制菌种中的细菌污染。[方法]在PDA斜面培养基上,用抗生素和化学抑菌剂对食用菌与细菌的混合菌液进行抑菌试验。[结果]在药剂筛选中,双氧水各浓度无细菌萌发;青霉素钠、乙醇可抑制细菌萌发。在浓度筛选中,双氧水4%(实际2%)、5%(实际2.5%)浓度可完全抑制细菌,5%(实际2.5%)浓度则同时抑制真菌。在适宜菌种试验中,不同的真菌菌种对双氧水的耐受力不同,平菇耐受力较强,蛹虫草的耐受力也较强,而猴头的耐受力较弱。[结论]多数抗生素和化学抑菌剂对细菌的抑制能力很弱,而对真菌抑制能力很强,只有双氧水在浓度适宜时能有效抑制细菌而不影响真菌生长;双氧水的有效浓度与菌液浓度有关,菌液浓度越大,双氧水的有效浓度也越大;不同种类食用菌对双氧水的耐受力有差异,平菇耐受力较高,蛹虫草次之,猴头的耐受力较低;使用双氧水抑制细菌污染的食用菌菌种,扩接后菌丝生长情况与对照基本无差异。     

生活垃圾降解菌除臭效果比较研究

从土壤中采集微生物,分别用牛肉膏蛋白胨培养基、马铃薯蔗糖培养基和高氏一号合成培养基分离、纯化得到不同的菌种。培养接入菌种的臭液,测定其氨氮含量和硫化物含量。结果表明,放线菌、细菌、真菌对氨氮以及硫化物的降解能力明显不同;放线菌除臭能力较强,细菌和真菌不具有除臭能力。     

毒死蜱降解菌的筛选·鉴定·降解特性

[目的]筛选毒死蜱降解菌,了解其特性。[方法]从常年施用毒死蜱农药的水稻田土壤中筛选出1株能以毒死蜱为唯一碳源和能源的降解菌。[结果]降解菌DC1对浓度100 mg/L毒死蜱15 d的降解率可达到83.3%。通过16S r DNA序列同源性和系统发育分析,将该毒死蜱降解菌鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。系统发育表明,该菌和枯草芽孢杆菌的分支特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis)的亲缘关系最近。[结论]降解菌DC1来源于土壤,适应性强,对解决土壤中毒死蜱残留有一定的应用价值。     

假单胞菌HYS菌株对油菜种子发芽的影响

为了研究假单胞菌HYS菌株及其上清液对油菜种子发芽的作用,采用LB培养假单胞菌HYS菌株,分别用水(CK)、LB和HYS菌液浸种油菜种子或在油菜发芽过程中分别添加这3种液体。结果表明,HYS菌液浸种不影响油菜种子最终的露白和发芽,但显著抑制油菜种子的露白和发芽进程;在油菜发芽过程中添加HYS菌液也会抑制油菜种子的露白进程,同时还抑制油菜种子的发芽和芽苗生长,而LB抑制油菜根的生长。油菜在发芽过程中,头1~2 d感染HYS菌株则显著抑制油菜种子的发芽,且感染时间越早其抑制效果越强,连续感染HYS菌株对油菜种子发芽和芽苗生长的抑制作用更强,且这种抑制作用主要在发芽的头1~3 d发挥作用。将HYS菌液离心过滤除菌,用水倍比稀释LB和上清液后培养油菜种子,发现上清液经100和1 000倍稀释后促进油菜种子的发芽。上述结果表明假单胞菌HYS菌株在油菜种子发芽和早期生长过程中不适宜用其进行生物防治,但适当稀释HYS上清液可促进油菜种子发芽和生长。     

硅酸盐细菌对磷矿石风化作用机理的探讨

[目的]以1株硅酸盐细菌为例研究微生物对磷矿石的风化作用。[方法]在装有100目磷矿石粉的液体培养基中接种硅酸盐细菌,按不同时间取样处理后,用原子吸收光谱仪测定培养液上清液中Ca2+的质量浓度,磷钼比色法测定水溶性磷(DP)的质量浓度;细菌作用后的残留物用电子探针、透射电镜和能谱仪进行分析。[结果]结果表明,硅酸盐细菌对磷矿石粉风化后,培养液中Ca2+和DP的质量浓度随作用时间延长而增加,细菌作用后的矿粉颗粒浑圆,边缘模糊不清,菌体及有机物对矿物有较强的剥蚀作用。[结论]经分析认为细菌对磷矿石的风化作用源自细菌生长导致的机械破坏作用、胞外分泌物的生化降解作用以及多种因素之间的协同作用。     

猪源乳酸杆菌的分离鉴定及其发酵培养条件优化

微生态制剂是发展绿色养猪业的关键,乳酸杆菌是目前应用的微生态制剂中最重要的有益菌组成成分之一。分离、鉴定并筛选出1株耐酸和耐胆盐能力较强的乳酸杆菌,命名为乳酸杆菌L5株。采用单因素法和正交试验设计法对其发酵培养条件进行了优化,发酵培养菌落总数可达8.25×108 cfu/mL。     

碱性纤维素酶产生菌的筛选及产酶条件的研究

[目的]筛选碱性纤维素酶产生菌,并优化其产酶条件。[方法]对从土壤样品中分离到的100余株菌进行平板筛选,获得1株产碱性纤维素酶的菌株ZJJ-1,并对其进行液体培养基成分及发酵产酶条件优化。[结果]培养基最佳配方为：麸皮0.5%,大豆粉2%,KH2PO40.2%,NaCl 0.7%;最优产酶条件为：37℃、175 r/min培养48 h,初始pH值为7。在此条件下,最高酶活水平达51.20 U/ml。[结论]为碱性纤维素酶的后续研究提供了优良的菌种资源。