烘烤过程中烟叶苹果酸含量及相关代谢酶活性的变化

【目的】分析烘烤过程中烟叶苹果酸及相关代谢酶活性的变化, 为进一步探明烘烤过程中烟叶内在化学成分的变化及调控机制提供理论依据。【方法】以K326、云烟87和豫烟6号为试验材料,研究不同品种烤烟烟叶在烘烤前、烘烤过程中关键温度点（38,42,48,54 ℃）及烘烤结束后苹果酸、总有机酸含量及苹果酸脱氢酶(MDH)、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)及琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的变化,并对总有机酸、苹果酸含量与代谢酶活性的相关性进行分析。【结果】不同品种烤烟的MDH、PEPC和SDH酶活性变化均表现出一定的规律性。烘烤过程中,MDH活性先升高后降低,并在48 ℃达到最大值;PEPC活性呈先升高后下降再上升的走势变化,但整体呈上升趋势;38 ℃之后SDH活性持续下降,54 ℃降至最低;烘烤过程中,丙二酸含量呈上升趋势,且在54 ℃时达到最大值。K326、云烟87和豫烟6号的苹果酸和总有机酸含量在烘烤过程中均呈先升高后降低的趋势,且分别在54,48和42 ℃达到最大值。相关分析表明,不同品种烤烟MDH活性与苹果酸含量相关性不显著;K326和豫烟6号的PEPC活性与苹果酸、总有机酸含量呈正相关,云烟87的PEPC活性与苹果酸、总有机酸含量呈负相关,相关性均不显著;K326和豫烟6号的SDH活性与苹果酸含量呈显著性负相关,云烟87的SDH活性与苹果酸含量相关性不显著。【结论】不同品种烤烟间苹果酸含量差异较大。SDH对苹果酸积累的作用大于MDH和PEPC,相对较高的MDH和PEPC活性与相对较低的SDH活性均能够促进苹果酸的积累。     

烟叶主脉水分及烤房内相对湿度对主脉化学成分的影响

为明确不同部位烟叶主脉水分和烤房相对湿度对主脉化学成分的影响，以烤烟中烟100为材料，采用相关性分析和回归分析方法对数据进行分析。结果发现，除中部叶外，在烟叶烘烤过程中上部叶和下部叶主脉内的总糖含量在36℃末至47℃末上升，并在47℃末到达最大值，在47℃末至68℃末下降；还原糖含量变化趋势整体呈M形，上部叶和中部叶在42℃末有最大值；淀粉含量呈现逐渐下降的趋势；总氮含量变化幅度小，鲜样和烤后样总氮含量无明显变化；烟碱含量总体呈缓慢下降的趋势，在36℃末至42℃末变化幅度较大；蛋白质含量总体呈下降的趋势，脉内的蛋白质降解速度较快；烘烤过程中主脉变黄期失水少，失水速度慢，定色期失水速度加快，大量失水；相关性分析表明，主脉内的烟碱、蛋白质和淀粉含量均与主脉水分和烤房内相对湿度存在显著或极显著相关关系；回归分析表明，主脉内各种化学成分的回归模型具有良好的线性关系。     

烤前晾置时间对烟叶淀粉和总糖含量及 烤后烟叶化学成分的影响

采用小型密集电烤房,研究了烤前晾置时间(0、24、48、72 h)对粤北烟区烤烟中、上部烟叶淀粉和总糖含量及烤后烟叶化学成分的影响。结果表明:与常规烘烤相比,烟叶淀粉含量随晾置时间延长呈减少趋势,而总糖则呈上升趋势;各晾置处理进入烘烤阶段后,中部烟叶的淀粉降解和总糖积累速度加快,上部烟叶淀粉降解和总糖积累呈减少趋势;初烤烟,中部烟叶淀粉含量有随晾置时间延长分解增多的趋势,但各处理间差异不显著,烟叶晾置时间超过48 h,总糖含量明显增加,烟碱含量下降,糖碱比增高,上部烟叶晾置超过48 h,碳化物的变化呈相反趋势。综合上述结果,在粤北烟区气候条件下,中上部烟叶最好收获当天上烤,烤前晾置时间超过48 h不利于糖类转化分解。     

烤烟烘烤过程中淀粉酶及淀粉含量的变化

 通过对烤烟品种红花大金元和K326的3个施氮量的烟叶烘烤过程中α－淀粉酶、β－淀粉酶活性的变化和烟叶淀粉含量的研究得出如下结论。2个品种3个施氮量处理烟叶α－淀粉酶变化曲线都呈现双峰曲线,两个高峰出现在烘烤过程的36 h和60 h. β－淀粉酶变化的曲线也呈现双峰曲线,两个高峰值出现在烘烤后36 h和72 h. 2个品种3种施氮量处理烟叶淀粉含量都是从烘烤开始至48 h均迅速下降,烘烤48 h至烘烤结束烟叶淀粉含量下降趋势趋于平稳。     

密集烘烤中烤烟颜色变化及其与主要成分的关系研究

研究密集烘烤中不同成熟度烟叶的颜色值和主要化学成分含量的变化以及它们之间的关系.结果表明:不同成熟度烟叶的L*、a*值在烘烤过程中均呈现升高的趋势;b*、C值在48℃之前升高,48～54%有所下降,之后稍有回升;H值在烘烤中呈现降低的趋势,且在48～54℃下降幅度较大.4种成熟度处理间颜色各参数差异极显著;不同成熟度烟叶颜色参数L*与淀粉、总氮均呈极显著负相关,a*与总酚呈显著正相关,H 与总酚显著负相关.     

烘烤过程中烟叶苹果酸含量及相关代谢酶活性的变化

【目的】分析烘烤过程中烟叶苹果酸及相关代谢酶活性的变化,为进一步探明烘烤过程中烟叶内在化学成分的变化及调控机制提供理论依据。【方法】以K326、云烟87和豫烟6号为试验材料,研究不同品种烤烟烟叶在烘烤前、烘烤过程中关键温度点(38,42,48,54℃)及烘烤结束后苹果酸、总有机酸含量及苹果酸脱氢酶(MDH)、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)及琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的变化,并对总有机酸、苹果酸含量与代谢酶活性的相关性进行分析。【结果】不同品种烤烟的MDH、PEPC和SDH酶活性变化均表现出一定的规律性。烘烤过程中,MDH活性先升高后降低,并在48℃达到最大值;PEPC活性呈先升高后下降再上升的走势变化,但整体呈上升趋势;38℃之后SDH活性持续下降,54℃降至最低;烘烤过程中,丙二酸含量呈上升趋势,且在54℃时达到最大值。K326、云烟87和豫烟6号的苹果酸和总有机酸含量在烘烤过程中均呈先升高后降低的趋势,且分别在54,48和42℃达到最大值。相关分析表明,不同品种烤烟MDH活性与苹果酸含量相关性不显著;K326和豫烟6号的PEPC活性与苹果酸、总有机酸含量呈正相关,云烟87的PEPC活性与苹果酸、总有机酸含量呈负相关,相关性均不显著;K326和豫烟6号的SDH活性与苹果酸含量呈显著性负相关,云烟87的SDH活性与苹果酸含量相关性不显著。【结论】不同品种烤烟间苹果酸含量差异较大。SDH对苹果酸积累的作用大于MDH和PEPC,相对较高的MDH和PEPC活性与相对较低的SDH活性均能够促进苹果酸的积累。     

烘烤过程中红花大金元烟叶色素和总酚含量的变化

研究了烘烤过程中红花大金元不同成熟度烟叶色素含量及总酚含量的动态变化。结果表明,在不同的烘烤阶段,烟叶色素含量在不同成熟度间存在不同的差异。鲜烟叶的叶绿素和类胡萝卜素含量随成熟度的提高而明显降低,成熟度低的烟叶叶绿素和类胡萝卜素降解量也明显高于成熟度高的烟叶。在烘烤过程中,烟叶叶绿素和类胡萝卜素含量逐渐降低,降解速度均以变黄期较快。烟叶总酚含量在开烤后到变黄期之间呈增加趋势,42～48℃则降低,之后升高直到烘烤结束;总酚的变化幅度以适熟烟叶较小。     

豫西烟叶烘烤过程中中性香气物质组分的变化

对豫西烤烟叶片烘烤过程中中性香气成分进行了对比分析。结果表明:豫西烟叶中性香气成分中苯丙氨酸类中性香气物质随烘烤进程的推进总体呈下降趋势;棕色化产物类中性香气物质均为烘烤前96h含量积累较小,96h——烘烤结束积累幅度较大;类西柏烷类中性香气成分含量总体上下部叶片随烘烤的推进呈下降趋势,中部叶片呈横"S"型,上部叶片呈倒"V"型变化;类胡萝卜素类香气物质均为烘烤前期积累较少,48h后迅速积累,烘烤结束达最大值;新植二烯含量变化总体上呈倒"V"型变化,各部位含量均烘烤前期较低,烘烤过程中前期积累,后期减少;中性香气物质总量变化呈前期较低,烘烤过程中先积累,后降解,最后各部位叶片含量均多于烤前,初烤烟叶样品中,中部叶片含量最大为744.5μg/g,分别为上部、下部叶片含量的134.9%和119.8%。     

聚肌胞苷酸刺激对鳜免疫因子活性及干扰素基因表达的影响

【目的】比较聚肌胞苷酸（Poly I:C）刺激对鳜（Siniperca chuatsi）免疫因子活性及干扰素系统相关基因表达的影响,为判断和指导鳜养殖过程中病原刺激后免疫应答和病毒监测提供参考依据。【方法】采用Poly I:C模拟病毒刺激,比较注射后不同时序（0、3、6、12、24、36、48和72 h）鳜白细胞组成百分比,以双抗体夹心酶联免疫法检测补体蛋白水平变化,荧光PCR相对定量检测免疫相关基因表达变化。【结果】血液白细胞百分比中,血栓细胞>单核细胞>淋巴细胞>嗜中性粒细胞,其中,与对照组比较,处理组6~72 h单核细胞百分比极显著提高（P<0.01,下同）,且于48 h达峰值后恢复至初始水平,嗜中性粒细胞占比均有明显提升,淋巴细胞、血栓细胞占比均呈下降趋势。处理组血清补体C3含量在3 h高于初始,6 h低于初始,与对照组差异显著（P<0.05,下同）;补体C4含量处理组3 h显著高于对照组,6、24、48 h显著低于对照组。与初始0 h相比,处理组肾脏、胸腺、脾脏和肝脏IRF7基因表达量分别从3和6 h开始极显著上调,且胸腺表达量最高;处理组肾脏和肝脏IFNh基因表达量3~12 h极显著上调,胸腺IFNh基因表达量于6 h达峰值,12 h后恢复下降,脾脏IFNh基因表达在各时段均低于初始;处理组肾脏、胸腺、肝脏、脾脏IFNc基因表达量于12 h极显著上调,然后逐渐下降,分别于72、72、48和72 h达最低水平。【结论】鳜受Poly I:C模拟病毒刺激后,血细胞中各类白细胞、血清酶补体C3和C4含量有不同变化,干扰素在不同时序显著影响各组织中的表达变化。     

斑马鱼不同发育时期血管内皮生长因子受体2（VEGFR-2）基因表达的实时定量PCR分析（摘要）

[目的]探讨血管内皮生长因子受体2（VEGFR-2）基因在斑马鱼不同发育时期的表达。[方法]采用Trizol法分别提取12、24、48、72和96h斑马鱼胚胎和仔鱼总RNA;再使用MMLV反转录酶将其反转录为cDNA;合成的cDNA用实时定量RT-PCR方法检测VEGFR-2基因的表达。实时定量RT-PCR扩增反应结束后,利用熔解曲线对扩增产物进行特异性分析。采用2^-△△Ct法进行数据分析。[结果]VEGFR-2基因表达量在12～72h呈上升趋势,在96h时有所下降。12h相对表达量最低,与其他发育期差异极显著（P〈0.01）,72h相对表达量最高,与12、24和96h差异极显著（P〈0.01）,与48h差异显著（P〈0.05）。[结论]斑马鱼血管发育至72h达成熟阶段,血管发育成熟前,VEGFR-2基因表达水平逐步增长;血管发育成熟后,VEGFR-2基因表达水平下降。     

Changes of Polyphenols in Tobacco Leaves During the Flue-Curing Process and Correlation Analysis on Some Chemical Components

The changes of polyphenols in tobacco leaves during the flue-curing process and correlation analysis on some chemical components were studied. Leaf samples were taken from different tobacco-producing regions in Henan Province, China. The results indicated that the content of total phenols increased during the first 24 h of curing, and then decreased. It reached the lowest value at 72 h of curing and increased rapidly after that. The content of chlorogenic acid also increased during 0-24 h of curing. But the lowest point occurred at 60 or 72 h of curing and then it increased till the end of the curing process. The content of mtin generally increased with curing, and showed little fluctuations. The changes of PPO and POD activity were the opposite. Rutin was found to have a highly significant positive correlation with total sugar （r=0.822^＊＊）, but a highly significant negative correlation with starch, nicotine, and protein.     

烟叶在烘烤过程中氮代谢的研究

研究了烤烟烟叶在烘烤过程中氮代谢规律。结果表明,蛋白质含量随烘烤进程发展逐渐减少,氨基酸含量逐渐增加,且均在变黄中期和定色期有一个快速变化阶段;烤后烟叶中氨基酸和可溶性蛋白含量与鲜叶中可溶性蛋白含量成高度正相关;蛋白酶活性在烘烤开始后24h和60h分别有一个高峰。鲜叶中NO#+-#-3含量与其硝酸还原酶活性显著相关,但不是唯一影响因素;硝酸还原酶活性从烘烤开始就逐渐升高,24h达到最大值,之后迅速失活。NO#+-#-3和NO#+-#-2含量在烘烤初期迅速上升,变黄末达到最大值,在定色阶段快速下降,但烤后含量仍比鲜叶高得多。     

烘烤过程中烟叶蛋白质与硝态氮代谢规律研究

对烘烤过程中烤烟烟叶蛋白质与硝酸盐代谢规律的研究表明,蛋白质含量随烘烤进程发展逐渐减少,氨基酸含量逐渐增加,且均在变黄中期和定色其有一定个快速变化阶段,烤后烟叶中氨基酸和可溶性蛋白与鲜叶中可溶性蛋白的呈呈高度正相关;蛋白酶活性在烤烤开始后２４ｈ有一个高峰,硝酸的酶活性从烘烤开始就逐渐升高,２４ｈ达到最大值,之后迅速失活,ＮＯ３和ＮＯ２的含量均在烘烤上升,变黄期达到 最大值,在定色阶段快速下降,但烤     

晒红烟晒制过程中主要化学成分含量变化

对晒红烟晒制过程中的主要化学成分含量变化进行了研究.结果表明,晒制过程中烟叶失水速率呈现前期慢后期快的变化趋势,总氮和烟碱变化不大,淀粉在晒制前2 d大量降解,之后基本无变化,总糖持续下降,硝酸盐含量逐渐下降,亚硝酸盐含量晒制前期升高,后期降低.     

乙烯利对烘烤过程中烟叶淀粉代谢关键酶的影响

为探寻降低烤后烟叶淀粉含量的技术方法,以烤烟品种K326为试验材料,采用自制电热式烟叶烤箱(80cm×60cm×100cm),初步研究了不同乙烯利用量〔0(CK)、10.4、20.8、41.7mL/m3〕对烘烤过程中烟叶淀粉代谢关键酶的影响。结果表明,CK的烟叶淀粉酶活性有2个活性高峰,分别出现在烘烤36h和72h,淀粉酶活性均为2.2U;而乙烯利处理的烟叶淀粉酶活性则呈单峰曲线,活性高峰出现在烘烤12～24h,淀粉酶活性为3.8～4.1U,乙烯利显著提高了烘烤前期烟叶淀粉酶活性。乙烯利处理的淀粉磷酸化酶活性峰值出现在烘烤0h和36h,2个峰值均比CK提前24h出现。乙烯利处理的烤后烟叶淀粉含量为2.8%～3.2%,显著低于CK(4.4%),因此,在烟叶烘烤过程中使用乙烯利可以显著降低烤后烟叶淀粉含量,但乙烯利的最佳用量尚需进一步研究确定。     

白肋烟调制过程中叶片膜脂过氧化特性的研究

对白肋烟调制过程中叶片膜脂过氧化及内源保护酶活性的变化进行了研究，结果表明，随着白肋烟调制过程的进展，超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性明显下降直至消失，膜脂过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）含量显著增加，过氧化物酶（ＰＯＤ）和过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性在调制２ｄ后上升到最大值，而后下降直到活性丧失，多酚氧化酶则在调制４８ｈ内上升到最大值之后下降。不同处理以高温变黄处理烟叶膜脂过氧化水平最高，低温处理最低。     

不同湿度条件下白肋烟晾制期间烟叶水分的变化

研究了自然条件和人工调控条件下,不同湿度处理的晾房中白肋烟叶片晾制期间总水含量和自由水含量的变化趋势,以探讨人工调控的条件下白肋烟晾制的合适湿度。结果表明：人工调控条件下,3个不同湿度处理的晾房中叶片总水含量在晾制开始的前2周有一个快速下降的过程,然后维持在较低的水平,并维持到晾制结束。晾制前期的湿度对总水含量变化的影响显著,高湿对叶片失水有缓冲作用,在第1周内含水量下降不明显,低湿则加速叶片脱水。晾制开始时,烟株上部叶片含水量最高,中部叶片次之,下部叶片最低,但晾制结束时各部位叶片含水量相近。与人工调控的晾房相比,自然条件下各湿度处理叶片总水含量的变化相对缓慢。对于白肋烟叶片自由水含量,不同条件下晾制期间均呈明显的下降趋势。低湿处理的晾房中下降速度最快,中湿处理次之,高湿处理的晾房中下降速度最慢。中湿晾制条件有利于优质白肋烟的形成。     

不同调制措施对晒黄烟调制过程中主要含氮化合物变化规律的影响

为提高晒黄烟的品质和安全性,全面系统地把握氮代谢在调制过程中的变化规律,研究了不同调制措施对晒黄烟调制期间主要含氮化合物变化规律的影响。结果表明：总氮含量在晒制的前9 d呈下降趋势,9 d之后稍有上升,总体上变化不大;可溶性蛋白主要在晒制前期和中期发生降解;游离氨基酸含量呈先增加后降低的“单峰曲线”,积累速度表现为“快-慢-快”的变化规律;晒制期间生物碱含量变化不大,硝酸盐最终含量低于开始晒制时。不同调制措施相比,划筋处理水分散失较快,有助于可溶性蛋白的充分降解,游离氨基酸的积累和硝酸盐的合理转化。     

烟草种子萌发过程中总糖及还原糖动态变化研究

 以烤烟品种K326和白肋烟品种TN86种子为实验材料,从种子吸水前0 h和吸水后的2 h,6 h,12 h,18 h,24 h,30 h,36 h,42 h,48 h,60 h,72 h,84 h,96 h,168 h和336 h分16个时期分析了烟草种子萌发时碳水化合物的动态变化。结果表明:种子萌发至168 h时,种子内可溶性总糖和还原糖含量达最大值。此时,烤烟K326和白肋烟TN86种子,可溶性总糖分别是干种子的2.07倍和1.28倍,还原糖含量分别是干种子的15.27倍和10.61倍。随后可溶性总糖和还原糖含量均开始下降,至萌发结束时（336 h）二者均降至最低。